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流式細胞多色分析23-13536-00Rev.01第一頁，共十頁，2022年，8月28日MulticolorAnalysisStrategiesPlottypesHierarchicalgatingPopulationhierarchiesBackgating223-13536-00Rev.01第二頁，共十頁，2022年，8月28日UseDifferentPlotTypesHistograms—usinghistogramscanhelpdiscriminatebetweentwopopulations.DotPlot:hard

todiscriminatepopulationsDotPlot:displayingfewereventsimprovesdiscriminationHistogram:populationboundaryisevident323-13536-00Rev.01第三頁，共十頁，2022年，8月28日UseDifferentPlotTypesContourPlots—usingcontourplotscan:Helplocatepopulationmeans.Indicateaneedforbiexponentialscaling.DotPlot:hardtoseepopulationsbunchedonaxisContourPlot:

showsthatbiexponentialdisplaymightbeneededBiexponentialContourPlot:givesbestdisplayofpopulations423-13536-00Rev.01第四頁，共十頁，2022年，8月28日HierarchicalGating523-13536-00Rev.01第五頁，共十頁，2022年，8月28日HierarchicalGatingWhatwentwronghere?CorrectHierarchy623-13536-00Rev.01第六頁，共十頁，2022年，8月28日BackGatingResearcherwantstodiscriminateTregsbasedonCD25andCD127expression.NeedtoensureagateincludestheentireFOXP3+population.723-13536-00Rev.01第七頁，共十頁，2022年，8月28日AdditionalAnalysisStrategiesBiexponentialscalingEventstodisplayHingedandoffsetquadrantgatesDerived(boolean)gatesSnap-togatesStatisticsAnalysistemplates823-13536-00Rev.01第八頁，共十頁，2022年，8月28日ICSDataAnalysisResultsInformationthatcanberetrieved:Numberofcollectedevents,numberofliveCD3+cells%ofmainpopulations:%CD3+,CD4+,CD8+%ofna?ve(CD45RA+)andmemory(CD45RA–)

CD4+andCD8+cells%CD25+CD4+cells(Tregs)Forthecytokines:%ofCD4+andCD8+

making1or2cytokinesAnalysisExercise923-13536-0

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