TLRPPARγ異常與潰瘍性結(jié)腸炎腸粘膜免疫紊亂的關(guān)系研究

TLRPPARγ異常與潰瘍性結(jié)腸炎腸粘膜免疫紊亂的關(guān)系研究第1頁(yè)/共38頁(yè)潰瘍性結(jié)腸炎（UC）慢性非特異性腸道炎癥性疾病。青、中年好發(fā)。部位：結(jié)腸粘膜和粘膜下層，以直腸和遠(yuǎn)端結(jié)腸為主。癥狀：腹瀉、粘液膿血便和腹痛。治療：5-AS、激素和免疫抑制劑。第2頁(yè)/共38頁(yè)UC流行病學(xué)歐美患病率200/105，發(fā)病率10-20/105。我國(guó)既往較少見(jiàn)，近年逐漸增多。第3頁(yè)/共38頁(yè)國(guó)內(nèi)期刊檢索結(jié)果取自

中國(guó)科技期刊數(shù)據(jù)庫(kù)

1989.1-2003.10包括中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志、中國(guó)實(shí)用外科雜志、中國(guó)影像學(xué)雜志、內(nèi)鏡、臨床內(nèi)科、臨床消化雜志、華人消化雜志（中、英文版）、胃腸病學(xué)、中國(guó)肛腸病雜志、各醫(yī)學(xué)院校學(xué)報(bào)、國(guó)外醫(yī)學(xué)系列等1260種醫(yī)學(xué)專業(yè)期刊，2500多種相關(guān)醫(yī)學(xué)期刊全文（文摘），累計(jì)超過(guò)1695841條。我國(guó)尚無(wú)流行病學(xué)報(bào)告第4頁(yè)/共38頁(yè)UC文章情況年度UC89-9321694-9870799-031830

小計(jì)2753 第5頁(yè)/共38頁(yè)近15年UC病例數(shù)年代UC89-931119594-983079699-0387693

小計(jì) 129684 第6頁(yè)/共38頁(yè)歷次學(xué)術(shù)會(huì)報(bào)告病例數(shù)

年代UC1978 337 1986 58119933065 1999 1507 第7頁(yè)/共38頁(yè)不同年代我院住院病例數(shù)50’60’70’80’90’______________________________________UC242831170165_______________________________________第8頁(yè)/共38頁(yè)與其他發(fā)達(dá)國(guó)家類似，21世紀(jì)我國(guó)UC將進(jìn)一步增加。深入研究該病發(fā)病機(jī)制可能對(duì)其治療和預(yù)后產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響。第9頁(yè)/共38頁(yè)UC病因、發(fā)病機(jī)制

遺傳感染

免疫第10頁(yè)/共38頁(yè)遺傳家族聚集現(xiàn)象。不同種族的發(fā)病率不同。與免疫遺傳疾病的關(guān)系。UC相關(guān)基因研究：

HLA-DR2,-DR9,DRB1*0103正相關(guān)。

HLA-DR4負(fù)相關(guān)。易感位點(diǎn)3、7、12條染色體。第11頁(yè)/共38頁(yè)

感染

無(wú)直接證據(jù)表明細(xì)菌感染是UC的病因，但微生物促進(jìn)UC發(fā)生的觀點(diǎn)正被接受。

對(duì)動(dòng)物模型的研究發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)動(dòng)物在無(wú)菌環(huán)境中不能誘導(dǎo)出結(jié)腸炎癥。針對(duì)細(xì)菌抗原的免疫反應(yīng)增強(qiáng)。抗生素和促生態(tài)制劑對(duì)UC病人有益。第12頁(yè)/共38頁(yè)

免疫反應(yīng)異常

腸粘膜免疫系統(tǒng)耐受性減弱，腸腔抗原容易使免疫細(xì)胞被激活。T細(xì)胞亞群比例失調(diào)、過(guò)量促炎細(xì)胞因子，引起和放大粘膜炎癥。第13頁(yè)/共38頁(yè)

T細(xì)胞亞群和細(xì)胞因子平衡

CD4＋/CD8＋T細(xì)胞，Th1/Th2細(xì)胞亞群。促炎與抗炎細(xì)胞因子、Th1和Th2樣細(xì)胞因子。第14頁(yè)/共38頁(yè)第15頁(yè)/共38頁(yè)第16頁(yè)/共38頁(yè)腸粘膜免疫耐受減弱的原因具體機(jī)制尚不明確，可能與腸粘膜TLR4(Tolllikereceptor4)表達(dá)增多PPAR（Peroxisomeproliferatoractivatedreceptor)-γ表達(dá)減少有關(guān)。第17頁(yè)/共38頁(yè)TLR4TLRs的一種亞型，為跨膜受體蛋白，含胞外亮氨酸重復(fù)序列和胞內(nèi)IL-1R同源結(jié)構(gòu)。分布于免疫活性細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞，介導(dǎo)對(duì)細(xì)菌和真菌感染的免疫反應(yīng)。連接先天性免疫和獲得性免疫的重要物質(zhì)。第18頁(yè)/共38頁(yè)TLR4主要識(shí)別革蘭氏陰性細(xì)菌的胞壁成分LPS并被激活。TLR4被激活后，向下傳信號(hào)激活核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB)。

TLR4過(guò)量表達(dá)將導(dǎo)致NF-κB過(guò)度活化。第19頁(yè)/共38頁(yè)TLR4信號(hào)傳導(dǎo)途徑第20頁(yè)/共38頁(yè)NF-κB兩個(gè)Rel家族亞單位組成，p50/p65異二聚體最常見(jiàn)。能與多種基因啟動(dòng)子或增強(qiáng)子結(jié)合并促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄。調(diào)節(jié)多種炎癥和免疫基因的表達(dá)，影響多種細(xì)胞因子（如IL-1、TNF-α等）基因轉(zhuǎn)錄。通過(guò)多種途徑對(duì)抗細(xì)胞凋亡。第21頁(yè)/共38頁(yè)凋亡一定生理或病理?xiàng)l件下，遵循自身的程序，自行結(jié)束生命的過(guò)程。在免疫系統(tǒng)中，調(diào)控免疫活性細(xì)胞的壽命，避免出現(xiàn)過(guò)高或無(wú)限制的免疫應(yīng)答。

凋亡也是維持腸粘膜免疫系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)和對(duì)腸腔抗原耐受的重要機(jī)制。第22頁(yè)/共38頁(yè)NF-κB過(guò)度活化將導(dǎo)致：大量IL-1、IL-6和TNF-α等促炎癥性細(xì)胞因子產(chǎn)生。細(xì)胞凋亡減少，包括免疫活性細(xì)胞的凋亡減少。這些均可能引起腸粘膜免疫紊亂。第23頁(yè)/共38頁(yè)TLR4還可直接促進(jìn)樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）成熟，增強(qiáng)其抗原遞呈和分泌促炎細(xì)胞因子分泌的能力。DC是一種抗原遞呈細(xì)胞，表達(dá)MHC-抗原肽復(fù)合物，并傳遞共刺激信號(hào)，促進(jìn)T細(xì)胞激活，啟動(dòng)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。因此，TLR4過(guò)度表達(dá)比將引起免疫紊亂和炎癥反應(yīng)級(jí)聯(lián)放大。第24頁(yè)/共38頁(yè)國(guó)外的研究已經(jīng)證明TLR4在UC結(jié)腸組織表達(dá)升高，我們的初步實(shí)驗(yàn)也證明了同樣的結(jié)果。國(guó)外和我們的研究均證明UC結(jié)腸粘膜組織存在大量活化的NF-κB

和促炎癥性細(xì)胞因子。第25頁(yè)/共38頁(yè)研究顯示UC腸粘膜的免疫活性細(xì)胞的凋亡較對(duì)照組明顯減少。

UC腸粘膜TLR4、NF-κB

活化、免疫活性細(xì)胞凋亡和促炎細(xì)胞因子之間的內(nèi)在聯(lián)系還需進(jìn)一步證明。第26頁(yè)/共38頁(yè)P(yáng)PAR-γ一種由配體激活的轉(zhuǎn)錄因子，屬Ⅱ型核受體超家族成員。PPAR-γ主要在脂肪、腸組織和造血干細(xì)胞中表達(dá)。在單核/巨噬細(xì)胞、泡沫細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等細(xì)胞中也表達(dá)。第27頁(yè)/共38頁(yè)P(yáng)PAR-γ信號(hào)傳導(dǎo)途徑第28頁(yè)/共38頁(yè)最初發(fā)現(xiàn)PPAR-γ與調(diào)控脂肪細(xì)胞的分化和脂肪代謝有關(guān)。后來(lái)發(fā)現(xiàn)它也參與炎癥的調(diào)節(jié)，其機(jī)制可能為抑制NF-κB活化。PPAR-γ可調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)周期，誘導(dǎo)DC凋亡，抑制DC活性。第29頁(yè)/共38頁(yè)

由此可見(jiàn)，PPAR-γ是一種對(duì)免疫和炎癥反應(yīng)具有負(fù)調(diào)控作用的重要信號(hào)物質(zhì)，其表達(dá)減弱很可能會(huì)引起過(guò)度的免疫和炎癥反應(yīng)。第30頁(yè)/共38頁(yè)國(guó)外和我們的研究均證明UC結(jié)腸粘膜PPAR-γ表達(dá)減少。PPAR-γ與NF-κB

活化、免疫活性細(xì)胞凋亡和促炎細(xì)胞因子之間的內(nèi)在聯(lián)系也需進(jìn)一步證明。第31頁(yè)/共38頁(yè)

綜上所述，TLR4和PPAR-γ分別介導(dǎo)促進(jìn)和抑制炎癥的信號(hào)，在調(diào)控免疫和炎癥反應(yīng)的過(guò)程中具有相反作用。

第32頁(yè)/共38頁(yè)TLR4和PPAR-γ信號(hào)可能作用機(jī)制

第33頁(yè)/共38頁(yè)TLR4、PPAR-γ將導(dǎo)致促進(jìn)與抑制免疫和炎癥反應(yīng)的信號(hào)失衡，引起了UC腸粘膜免疫紊亂和腸道炎癥。調(diào)節(jié)他們的水平是否有可能恢復(fù)促炎/抗炎信號(hào)的平衡，糾正UC腸粘膜免疫紊亂，控制過(guò)度的炎癥反應(yīng)呢？

第34頁(yè)/共38頁(yè)研究顯示：TLR4基因突變可明顯減輕STAT3敲除小鼠發(fā)生的結(jié)腸炎癥。利用表達(dá)PPAR-γ基因的腺病毒載體干預(yù)UC動(dòng)物模型，可明顯減輕腸道炎癥。PPAR-γ配體噻唑烷二酮