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細胞生物學(xué)實驗課程教學(xué)大綱課程編號:10021570課程名稱:細胞生物學(xué)/CellBiology課程式屬性:必修實驗屬性:非獨立設(shè)課開課學(xué)期:4學(xué)時:16適用專業(yè):生物工程學(xué)分:0.5開課部門:化學(xué)與生物工程學(xué)院考核要求:考查課程簡介:細胞生物學(xué)是一切生命科學(xué)的最為重要的基礎(chǔ)科學(xué)之一。同時又是生命科學(xué)的生長點,反映了生物科學(xué)發(fā)展的最新成就,所以細胞生物學(xué)的教學(xué)受到各方面的高度重視,是生命科學(xué)最重要的基礎(chǔ)課之一。本課程的教學(xué)以真核細胞結(jié)構(gòu)、功能為主要內(nèi)容,強調(diào)細胞是生命活動的基本單位,突出生物膜,細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo),細胞增殖調(diào)控,細胞分化、衰老與凋亡等熱點問題。一、實驗項目設(shè)置及學(xué)時分配細胞生物學(xué)實驗項目一覽表項目編號實驗項目名稱實驗類型開出要求學(xué)時分配細胞膜的通透性綜合性必做3細胞核與線粒體的分級分離驗證性必做4細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與幾種細胞器的觀察驗證性必做3細胞的無絲分裂與有絲分裂的觀察驗證性必做3雞血細胞的體外融合綜合性必做3學(xué)時總計16二、實驗內(nèi)容及教學(xué)要求實驗項目1:細胞膜的通透性觀察1、教學(xué)內(nèi)容由于各種溶質(zhì)進入細胞的速度不同,所以不同的溶質(zhì)誘導(dǎo)紅細胞融血的時間不同??梢酝ㄟ^測量溶血的時間來粗略比較細胞膜對相對分子質(zhì)量、脂溶性大小、電解質(zhì)和非電解質(zhì)溶液通透能力的強弱觀察紅細胞溶血現(xiàn)象以及發(fā)生的過程及其原理。2、教學(xué)目標(biāo)(1)了解紅細胞溶血現(xiàn)象發(fā)生的原理(2)熟悉紅細胞溶血現(xiàn)象發(fā)生的過程(3)掌握相對分子質(zhì)量的大小、脂溶性大小、電解質(zhì)和非電解質(zhì)等因素對細胞膜通透性影響的強弱,細胞膜通透性的實驗方法。實驗項目2:細胞核與線粒體的分級分離1、教學(xué)內(nèi)容通過頸椎脫位的方法處死小白鼠,取其肝組織并通過勻漿破碎細胞,使用差速離心法分離哺乳動物的細胞核與線粒體,進行甲苯胺蘭染色和詹納斯綠B染色后觀察。2、教學(xué)目標(biāo)(1)了解差速離心法分離細胞器的原理。(2)熟悉用頸椎脫位的方法處死小白鼠,使用差速離心法分離細胞器的過程。(3)掌握分離哺乳動物的細胞核與線粒體方法和對細胞器的染色方法。實驗項目3:細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與幾種細胞器的觀察1、教學(xué)內(nèi)容在普通光學(xué)顯微鏡下識別細胞和細胞器的形態(tài)結(jié)構(gòu),掌握生物繪圖的方法。2、教學(xué)目標(biāo)(1)了解在普通光學(xué)顯微鏡下找到細胞和細胞器。(2)熟悉細胞和細胞器的形態(tài)結(jié)構(gòu)。(3)掌握生物繪圖的方法。實驗項目4:細胞分裂的形態(tài)觀察1、教學(xué)內(nèi)容在普通光學(xué)顯微鏡下觀察草履蟲無絲分裂裝片、洋蔥根尖切片、馬蛔蟲裝片的有絲分裂的基本過程,掌握細胞有絲分裂前、中、后、末期的染色體形態(tài)變化特點。2、教學(xué)目標(biāo)(1)了解草履蟲無絲分裂基本過程。(2)熟悉有絲分裂的基本過程和無絲分裂和有絲分裂異同。(3)掌握細胞有絲分裂前、中、后、末期的染色體形態(tài)變化特點。實驗項目5:雞血細胞的體外融合1、教學(xué)內(nèi)容從家雞的翼根靜脈采血,制備雞血細胞懸液,用50%乙二醇(PEG)誘導(dǎo)雞血細胞體外細胞融合,觀察融合后細胞的形態(tài)變化,并計算細胞融合率。通過PEG誘導(dǎo)雞血細胞之間的融合實驗,初步掌握細胞融合的基本方法。2、教學(xué)目標(biāo)(1)了解乙二醇(PEG)誘導(dǎo)體外細胞融合的基本原理。(2)熟悉融合后細胞的形態(tài)變化和細胞融合率的計算。(3)掌握雞血細胞懸液的制備和細胞融合的基本方法。三、考核方式及要求實驗課成績滿分為100分,以20%記入細胞生物學(xué)總成績。由實驗操作、實驗報告及平時(出勤等)成績?nèi)糠纸M成,實驗操作占30%,實驗報告占50%,平時(出勤等)成績占20%。四、主要儀器設(shè)備及實驗材料項目編號實驗項目名稱主要儀器設(shè)備及臺(套)數(shù)實驗材料備注1細胞核與線粒體的分級分離顯微鏡30臺,勻漿器15套,移液器5套,冷凍離心機2臺小白鼠、冰塊,0.25mol/L蔗糖一0.003mol/L氯化鈣溶液、1%甲苯胺蘭染液、0.02%詹納斯綠B染液、0.9%NaCl溶液2細胞膜的通透性顯微鏡30臺,移液器5套含適量盰素的兔血或雞血、乙二醇水溶液、丙三醇水溶液、葡萄糖水溶液、甲醇、乙醇、丙醇、氯化鈉3細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與幾種細胞器的觀察顯微鏡30臺細胞器切片4細胞的無絲分裂與有絲分裂的觀察顯微鏡30臺洋蔥根尖切片、草履蟲切片5雞血細胞的體外融合顯微鏡30臺,移液器5套,冷凍離心機2臺雞紅細胞,50%PEG4000、Hanks液(pH7.4)五、教材及參考書1、王金發(fā)主編,《細胞生物學(xué)實驗教程》第二版,科學(xué)出版社,2013年;六、教改說明及其他通過本課程(實驗)的教學(xué),使學(xué)生掌握細胞生物學(xué)實驗的基本操作及實驗技術(shù),掌握和了解細胞生物學(xué)基本原理的驗證性實驗,本實驗課內(nèi)容包括驗證性實驗、綜合實驗兩個部分,驗證性實驗主要通過老師示教后有學(xué)生完成,綜合實驗在教師指導(dǎo)下由學(xué)生自己動手完成,同時,要求學(xué)生根據(jù)所掌握的理論基礎(chǔ)和實驗技能。并培養(yǎng)學(xué)生實事求是的科學(xué)態(tài)度,良

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