動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作

2023/3/141實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心2

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本方法

一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的常用方法在生物醫(yī)學(xué)教學(xué)、科研工作中，都需要用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)。通過對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的觀察和分析，來研究和解決生物醫(yī)學(xué)上存在的許多問題，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法已成為生物醫(yī)學(xué)科學(xué)研究和教學(xué)工作中必不可少的重要手段。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心32023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心4動(dòng)物實(shí)驗(yàn)按機(jī)體水平不同，可分為整體實(shí)驗(yàn)和離體實(shí)驗(yàn)兩種，還可進(jìn)一步具體地分為亞細(xì)胞、細(xì)胞、組織、器官，整體動(dòng)物和無損傷動(dòng)物等水平的實(shí)驗(yàn)。按動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的時(shí)間長短可分為急性實(shí)驗(yàn)（2天以內(nèi)）、亞急性實(shí)驗(yàn)（1～4周）和慢性實(shí)驗(yàn)（2～6個(gè)月或更長時(shí)間甚至整個(gè)生命期）。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心5動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法很多，如有生理學(xué)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法；病理生理學(xué)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法；藥理學(xué)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法；病理解剖學(xué)、組織學(xué)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法；微生物學(xué)和免疫學(xué)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法等等。下面舉一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的常用方法：2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心61．復(fù)制動(dòng)物模型法此法是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)最基本的方法，是采用人工的方法使動(dòng)物在一定致病因素（機(jī)械、化學(xué)、生物和物理）作用下，造成動(dòng)物的組織，器官或全身的一定損傷，復(fù)制成與人類疾病相似的動(dòng)物疾病模型，來研究各種疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律及防治方法。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心72．切開、分離法此法是以整體活體動(dòng)物為對(duì)象的常用實(shí)驗(yàn)方法。習(xí)慣上把在麻醉情況下，制備一些實(shí)驗(yàn)條件（如活體解剖、分離暴露器官、組織或進(jìn)行一些手術(shù)制備等措施）進(jìn)行研究者稱“急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)”。其優(yōu)點(diǎn)是比較簡便，操作后即可以進(jìn)行觀察，實(shí)驗(yàn)條件相對(duì)地較易控制，對(duì)要研究的器官，可以直接觀察。但存在著麻醉、手術(shù)創(chuàng)造及存活時(shí)間較短等因素，也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來一定的影響。因此采用此法應(yīng)注意麻醉深度適中，手術(shù)要輕巧，少出血、減少創(chuàng)傷，并要熟悉手術(shù)部位的神經(jīng)、血管等解剖。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心83．切除和注入提取液法常用于研究內(nèi)分泌器官的生理和病理病變，如研究切除某一腺體后看輻射對(duì)機(jī)體的影響，切除某一腺體后看出現(xiàn)什么癥狀而推論這種腺體的功能；如蝌蚪無甲狀腺素，如注入甲狀腺素，蝌蚪很快變成了蛙。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心94．離體組織器官法離體實(shí)驗(yàn)是利用動(dòng)物的離體組織、器官或生物性致病因子（微生物、寄生蟲等），置于一定的存活條件下（如溫度、營養(yǎng)成分、氧氣、水、pH等）進(jìn)行觀察的一種實(shí)驗(yàn)方法。如可利用離體腸管觀察藥物對(duì)腸管蠕動(dòng)、吸收、通透性、血流情況等的影響，并進(jìn)行作用機(jī)理的分析；利用離體膽囊來篩選引起膽囊舒縮的藥物；利用大腸桿菌或其它細(xì)菌進(jìn)行藥物敏感性實(shí)驗(yàn)。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心105．瘺管法用無菌手術(shù)方法給動(dòng)物造成不同的人造瘺管，如胃腸道瘺管、膀胱瘺管、唾液腺瘺管、食道瘺管、膽囊瘺管等。這些瘺管可以收集內(nèi)臟液體，是生理學(xué)消化研究的主要方法。此種方法是慢性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所常用的方法。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心11慢性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)一般是先在無菌操作下制備好實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停ǒ浌芊ㄊ瞧渲幸环N），待動(dòng)物恢復(fù)健康后進(jìn)行研究。這類研究方法的優(yōu)點(diǎn)在于被研究的對(duì)象，其機(jī)體內(nèi)外環(huán)境已處于較自然的相對(duì)平衡狀態(tài)，條件比較穩(wěn)定，所得的結(jié)果接近生理情況。但需要事先制備，術(shù)后護(hù)理，等動(dòng)物恢復(fù)健康后才能從事實(shí)驗(yàn)，花費(fèi)時(shí)間較長，工作量較大，因而在選用上受到一定限制。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心126．移植法一般是將動(dòng)物的器官、組織或細(xì)胞進(jìn)行相互移植的一種方法。如骨髓移植時(shí)，將小鼠A（供體）的骨髓注入到小鼠B的血液中（受體），很快可見脾結(jié)節(jié)化（脾造血）。脾結(jié)節(jié)的數(shù)量反應(yīng)了造血干細(xì)胞的多少，由此可以觀察干細(xì)胞的變化。各小鼠之間的骨髓移植叫同種骨髓移植，同一品系小鼠內(nèi)各小鼠之間的骨髓移植叫同系骨髓，小鼠骨髓移植給大鼠則叫異種骨髓移植。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心137．生物電、活性觀察法對(duì)動(dòng)物體各種生物電用電生理記錄儀進(jìn)行觀察記錄，如心電、肌電、腦電等；對(duì)動(dòng)物組織中各種活動(dòng)物質(zhì)用生物化學(xué)法測定，如各種酶，激素等。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心148．病理解剖學(xué)、組織學(xué)觀察法采用肉眼觀察、光鏡和電鏡檢查，來觀察、分析動(dòng)物各種疾病時(shí)病理組織學(xué)改變?？蓮慕M織學(xué)的角度來探討疾病防治機(jī)理，近年來由于電子顯微技術(shù)的進(jìn)展，不僅可以觀察到病變時(shí)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化，而且也可以運(yùn)用電子掃描方法對(duì)動(dòng)物器官的微小結(jié)構(gòu)進(jìn)行完整的表層觀察。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心159．免疫學(xué)觀察法注入抗原使動(dòng)物致敏，制備各種抗血清，如常選用新西蘭或大白耳家兔制備病原體免疫血清、間接免疫血清、抗補(bǔ)體抗體血清、抗組織免疫血清等。采用免疫熒光技術(shù)、酶標(biāo)免疫技術(shù)、放射免疫測定技術(shù)、免疫電鏡技術(shù)等對(duì)動(dòng)物免疫后各種免疫變化進(jìn)行檢查。10．其它方法如聯(lián)體動(dòng)物法，條件反射法、生物遺傳法、放射生物法、藥物化學(xué)等。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心16二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取固定方法正確的抓取固定動(dòng)物，是為了不損害動(dòng)物健康，不影響觀察指標(biāo)，并防止被動(dòng)物咬傷，保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。抓取固定動(dòng)物的方法依實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和動(dòng)物種類而定。抓取固定動(dòng)物前，必須對(duì)各種動(dòng)物的一般習(xí)性有所了解，抓取固定時(shí)既要小心仔細(xì)，不能粗暴，又要大膽敏捷，確實(shí)達(dá)到正確抓取固定動(dòng)物的目的。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心17（一）小鼠抓取固定方法小鼠溫順，一般不會(huì)咬人，抓取時(shí)先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠籠或?qū)嶒?yàn)臺(tái)向后拉，在其向前爬行時(shí)，用左手拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頸部皮膚，將鼠體置于左手心中，把后肢拉直，以無名指按住鼠尾，小指按住后腿即可2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心18（二）大鼠的抓取固定方法大鼠的抓取斯基本同小鼠，只不過大鼠比小鼠牙尖性猛，不易用襲擊方式抓取，否則會(huì)被咬傷手指，抓取時(shí)為避免咬傷，可帶上帆布手套。如果進(jìn)行腹腔、肌肉皮下等注射和灌胃時(shí)，同樣可采用左手固定法，只是用拇指和食指捏住鼠耳，余下三指緊捏鼠背皮膚，置于左掌心中，這樣右手即可進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)操作。也可伸開左手之虎口，敏捷地從后，一把抓住。若做手術(shù)或解剖等，則需事先麻醉或處死，然后用細(xì)棉線繩活縛腿，背臥位綁在大鼠固定板上2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心19（三）蛙類的抓取固定方法蛙類抓取方法宜用左手將動(dòng)物背部貼緊手掌固定，以中指、無名指、小指壓住其左腹側(cè)和后肢，拇指和食指分別壓住左、右前肢、右手進(jìn)行操作2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心20在抓取蟾蜍時(shí)，注意勿擠壓其兩則耳部突起之毒腺，以免毒液射進(jìn)眼中。實(shí)驗(yàn)如需長時(shí)間觀察，可破壞其腦脊髓（觀察神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)時(shí)不應(yīng)破壞腦脊髓）或麻醉后用大頭針固定在蛙板上。依實(shí)驗(yàn)需要采取俯臥位或仰臥位固定。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心21（四）豚鼠的抓取固定方法豚鼠較為膽小易驚，不宜強(qiáng)烈刺激和受驚，所以在抓取時(shí)，必須穩(wěn)、準(zhǔn)和迅速。一般抓取方法是：先用手掌迅速扣住鼠背，抓住其肩胛上方，以拇指和食指環(huán)握頸部，另一只手托住臀部。固定的方式基本同大鼠。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心22（五）兔的抓取固定方法1．抓?。簩?shí)驗(yàn)家兔多數(shù)飼養(yǎng)在籠內(nèi)，所以抓取較為方便，一般以右手抓住兔頸部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，讓其體重重量的大部分集中在左手上，這樣就避免了抓取過程中的動(dòng)物損傷。不能采用抓雙耳或抓提腹部。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心23

1、2、3均為不正確的抓取方法（1．可損傷兩腎，2．可造成皮下出血，3．可傷兩耳），4、5為正確的抓取方法。頸后部的皮厚可以抓，并用手托兔體。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心242．固定：一般采用臺(tái)式和馬蹄形。四肢用粗棉繩活結(jié)綁住，拉直四肢，將繩綁在兔臺(tái)四周的固定木塊上，頭以固定夾固定或用一根粗棉繩挑過兔門齒綁在兔臺(tái)鐵柱上；2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心25馬蹄形固定多用于腰背部，尤其是顱腦部位的實(shí)驗(yàn)，固定時(shí)先剪去兩側(cè)眼眶下部的毛皮，暴露顴骨突起，調(diào)節(jié)固定器兩端釘形金屬棒。使其正好嵌在突起下方的凹處，然后在適當(dāng)?shù)母叨裙潭ń饘匍弧Ｓ民R蹄形固定器可使兔取用背臥位和腹臥位，所以是研究中常采用的固定方法。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心26（六）狗的抓取固定方法狗性兇惡，能咬人，因此進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)第一個(gè)步驟就是要綁住狗嘴。馴服的狗綁嘴時(shí)可從側(cè)面靠近輕輕撫摸其頸背部皮毛，然后迅速用布帶縛住其嘴。方法是用布帶迅速兜住狗的下頜，繞到上頜打一個(gè)結(jié)，再繞回下頜下打第二結(jié)，然后將布帶引至頭后頸項(xiàng)部打第三個(gè)結(jié)，并多系一個(gè)活結(jié)（以備麻醉后解脫）。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心27注意捆綁松緊度要適宜，倘若此舉不成，應(yīng)用狗頭鉗夾住其頸部，將狗按倒在地，再綁其嘴。如實(shí)驗(yàn)需要靜脈麻醉時(shí)，可先使動(dòng)物麻醉后再移去狗頭鉗，解去綁嘴帶，把動(dòng)物放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，然后先固定頭部，再固定四肢。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心281．頭部固定：固定狗頭需用一特制的狗頭固定器，狗頭固定器為一圓鐵圈，圈的中央有一弓形鐵，與棒螺絲相連，下面有一根平直鐵閂。操作時(shí)先將狗舌拉出，把狗嘴插入固定器的鐵圈內(nèi)，再用平直鐵閂橫貫于犬齒后部的上下頜之間，然后向下旋轉(zhuǎn)螺絲，使弓形鐵逐漸下壓在動(dòng)物的下頜骨上，把鐵柄固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)的鐵柱上即可。2.四肢固定：如采取仰臥位，四肢固定方法與家兔相同。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心29三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物編號(hào)標(biāo)記方法動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)前常常需要作適當(dāng)?shù)姆纸M，那么就要將其標(biāo)記使各組加以區(qū)別。標(biāo)記的方法很多，良好的標(biāo)記方法應(yīng)滿足標(biāo)號(hào)清晰、耐久、簡便、適用的要求。常用的標(biāo)記法有染色、耳緣剪孔、烙印、號(hào)牌等方法。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心30（一）顏料涂染這種標(biāo)記方法在實(shí)驗(yàn)室最常使用，也很方便。使用的顏料一般有3-5%苦味酸溶液（黃），2%硝酸銀（咖啡色）溶液和0.5%中性品紅（紅色）等。標(biāo)記時(shí)用毛筆或棉簽蘸取上述溶液，在動(dòng)物體的不同部位涂上斑點(diǎn)，以示不同號(hào)碼。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心31編號(hào)的原則是：先左后右，從上到下。一般把涂在左前腿上的計(jì)為1號(hào)，左側(cè)腹部計(jì)為2號(hào)，左后腿為3號(hào)，頭頂部計(jì)為4號(hào)，腰背部為5號(hào)，尾基部為6號(hào)，右前腿為7號(hào)，右側(cè)腰部為8號(hào)，右后腿計(jì)為9號(hào)。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心32若動(dòng)物編號(hào)超過10或更大數(shù)字時(shí)，可使用上述兩種不同顏色的溶液，即把一種顏色作為個(gè)倍數(shù)，另一種顏色作為十位數(shù)，這種交互使用可編到99號(hào)，假使把紅的記為十位數(shù)，黃色記為個(gè)位數(shù)，那么右后腿黃斑，頭頂紅斑，則表示是49號(hào)鼠，其余類推。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心33（二）烙印法用刺數(shù)鉗在動(dòng)物耳上刺上號(hào)碼，然后用棉簽蘸著溶在酒精中的黑墨在刺號(hào)上加以涂抹，烙印前最好對(duì)烙印部位預(yù)先用酒精消毒。（三）號(hào)牌法用金屬制的牌號(hào)固定于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳上，大動(dòng)物可系于頸上。對(duì)猴、狗、貓等大動(dòng)物有時(shí)可不做特別標(biāo)記，只記錄它們的外表和毛色即可。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心34五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛的去除方法動(dòng)物的被毛常能影響實(shí)驗(yàn)操作和結(jié)果的觀察，因此實(shí)驗(yàn)中常需去除或剪短動(dòng)物的被毛。除毛的方法有剪毛、拔毛和脫毛三種。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心35剪毛：固定動(dòng)物后，用粗剪刀剪去所需部位的被毛。剪毛時(shí)需注意以下幾點(diǎn)：⑴把剪刀貼緊皮膚剪，不可用手提起被毛，以免剪破皮膚；⑵依次剪毛，不要亂剪；⑶剪下的毛集中放在一個(gè)容器內(nèi)，勿遺留在手術(shù)桌和操作臺(tái)周圍，以保證手術(shù)桌的清潔。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心36拔毛：兔耳緣靜脈注射或取血時(shí)以及給大、小白鼠作尾靜脈注射時(shí)，需用拇指、食指將局部被毛拔去，以利操作。脫毛：脫毛系指用化學(xué)藥品脫去動(dòng)物的被毛，適用于無菌手術(shù)桌的準(zhǔn)備以及觀察動(dòng)物局部皮膚血液循環(huán)和病理變化。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心37常用脫毛劑的配方：⑴硫化鈉3g、肥皂粉1g，淀粉7g，加水適量調(diào)成糊狀。⑵硫化鈉8g、淀粉7g、糖4g、甘油5g、硼砂1g，加水75ml。⑶硫化鈉8g，溶于100ml水中。以上脫毛劑配方適用于家兔、大白鼠、小白鼠等小動(dòng)物的脫毛。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心38⑷硫化鈉10g、生石灰15g，溶于100ml水內(nèi)，此配方適用于狗等大動(dòng)物的脫毛。使用以上各種脫毛劑，都應(yīng)事先剪短被毛，以節(jié)省脫毛劑，并減少對(duì)皮膚的刺激反應(yīng)，應(yīng)用時(shí)用棉球蘸脫毛劑，在所需局部涂一薄層，2-3分鐘后，用溫水洗去脫落的被毛，以紗布擦干局部，涂一層油脂即可。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心39六、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥途徑和方法在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，為了觀察藥物對(duì)機(jī)能功能、代謝及形態(tài)引起的變化，常需將藥物注入動(dòng)物體內(nèi)。給藥的途徑和方法是多種多樣的，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)動(dòng)物種類和藥物劑型等情況確定。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心40（一）皮下注射注射時(shí)以左手拇指和食指提起皮膚，將連有5（1/2）號(hào)針頭的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、貓多在大腿外側(cè)，豚鼠在后大腿的內(nèi)側(cè)或小腹部；大白鼠可在側(cè)下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心41（二）皮內(nèi)注射皮內(nèi)注射時(shí)需將注射的局部脫去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮膚并使之繃緊，在兩指之間，用注射器連4(1/2)號(hào)細(xì)針頭，緊貼皮膚表層刺入皮內(nèi)，然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射藥液，此時(shí)可見皮膚表面鼓起一白色小皮丘。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心42（三）肌肉注射肌肉注射應(yīng)選肌肉發(fā)達(dá)，無大血管通過的部位，一般多選臀部。注射時(shí)垂直迅速刺入肌肉，回抽針?biāo)ㄈ鐭o回血，即可進(jìn)行注射。給小白鼠、大白鼠等小動(dòng)物作肌肉注射時(shí)，用左手抓住鼠兩耳和頭部皮膚，右手取連有5（1/2）號(hào)針頭的注射器，將針頭刺入大腿外側(cè)肌肉，將藥液注入。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心43（四）腹腔注射用大、小白鼠做實(shí)驗(yàn)時(shí)，以左手抓住動(dòng)物，使腹部向上，右手將注射針頭于左（或右）下腹部刺入皮下，使針頭向前推

0.5～1.0cm，再以45度角穿過腹肌，固定針頭，緩緩注入藥液，為避免傷及內(nèi)臟，可使動(dòng)物處于頭低位，使內(nèi)臟移向上腹。若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為家兔，進(jìn)針部位為下腹部的腹白線離開1cm處。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心44（五）靜脈注射1．兔：兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動(dòng)物，耳外緣為靜脈。內(nèi)緣靜脈較深不易固定，一般不用。外緣靜脈表淺易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指彈動(dòng)或輕揉兔耳，使靜脈充盈，左手食指和中指夾住靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠(yuǎn)端，無名指及小指墊在下面，右手持注射器連6號(hào)針頭盡量從靜脈的遠(yuǎn)端刺入，移動(dòng)拇指于針頭上以固定針頭，放開食指和中指，將藥液注入，然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心452．小白鼠和大白鼠：一般采用尾靜脈注射，鼠尾靜脈有三根，左右兩側(cè)及背側(cè)各一根，左右兩側(cè)尾靜脈比較容易固定，多采用;背側(cè)一根也可采用，但位置不易固定。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心463．狗：狗靜脈注射多選前肢內(nèi)側(cè)皮下靜脈或后肢小隱靜脈注射。注射前由助手將動(dòng)物側(cè)臥，剪去注射部位的被毛，用膠皮帶扎緊（或用手抓緊）靜脈近端，使血管充盈，從靜脈的遠(yuǎn)端將注射針頭平行刺入血管，待有回血后，松開綁帶（或兩手），緩緩注入藥液。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心474．蛙（或蟾蜍）：將蛙或蟾蜍腦脊髓破壞后，仰臥固定于蛙板上，沿腹中線稍左剪開腹肌，可見到腹靜脈貼著腹壁肌肉下行，將注射針頭沿血管平行方向刺入即可2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心48注射途徑小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.2-1.01-32-55-105-15肌肉0.1-0.20.2-0.50.2-0.50.5-1.02-5靜脈0.2-0.51-21-53-105-15皮下0.1-0.50.5-1.00.5-21.0-3.03-10藥物的注射途徑與注射劑量2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心49（七）經(jīng)口給藥在急性試驗(yàn)中，經(jīng)口給藥多用灌胃法，此法劑量準(zhǔn)確，適用于小白鼠、大白鼠、家兔等動(dòng)物。1．小鼠、大鼠（或豚鼠）用輸血針頭或小號(hào)腰穿針頭，將其尖端斜面磨平，用焊錫在針尖周圍焊一圓頭，注意勿堵塞針孔，即成灌胃針；亦可用燒成圓頭的硬質(zhì)玻璃毛細(xì)管或特制的塑料毛細(xì)管，作為導(dǎo)管。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心50灌胃時(shí)將針按在注射器上，吸入藥液。左手抓住鼠背部及頸部皮膚將動(dòng)物固定，右手持注射器，將灌胃針插入動(dòng)物口中，沿咽后壁徐徐插入食道。動(dòng)物應(yīng)固定成垂直體位，針插入時(shí)應(yīng)無阻力。若感到阻力或動(dòng)物掙扎時(shí)，應(yīng)立即停止進(jìn)針或?qū)⑨槹纬?，以免損傷或穿破食道以及誤入氣管。一般當(dāng)灌胃針插入小鼠3－4cm，大鼠或豚鼠4-6cm后可將藥物注入。常用的灌胃量小鼠為0.2-1ml，大鼠1-4ml，豚鼠為1-5ml。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心512．狗、兔、貓、猴

灌胃時(shí)，先將動(dòng)物固定，再將特制的擴(kuò)口器放入動(dòng)物口中，擴(kuò)口器之寬度可視動(dòng)物口腔大小而定，如狗的擴(kuò)口器可用木料制成長方形，長約10-15cm，粗細(xì)應(yīng)適合狗嘴，約2-3cm，中間鉆一小孔，孔的直途為5-10cm。灌胃時(shí)將擴(kuò)口器放于上述動(dòng)物上下門牙之后，并用繩將它固定于嘴部，將帶有彈性的橡皮導(dǎo)管（如導(dǎo)尿管），經(jīng)擴(kuò)口器上的小圓孔插入，沿咽后壁而進(jìn)入食道，此時(shí)應(yīng)檢查導(dǎo)管是否正確插入食道，可將導(dǎo)管外口置于一盛水的燒杯中，如不發(fā)生氣泡，即認(rèn)為此導(dǎo)管是在食道中，未誤入氣管，即可將藥液灌入。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心522023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心53（八）其它途徑給藥1．呼吸道給藥呈粉塵、氣體及蒸氣或霧等狀態(tài)存在藥物或毒氣，均需要通過動(dòng)物呼吸道給藥。如一般實(shí)驗(yàn)時(shí)給動(dòng)物乙醚作吸入麻醉，給動(dòng)物吸一定量的氨氣、二氧化碳等觀察呼吸、循環(huán)等變化；給動(dòng)物定期吸入一定量的SO2。鋸末、煙霧等可造成慢性氣管炎動(dòng)物模型等；特別在毒物學(xué)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用更為廣泛。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心542．皮膚給藥為了鑒定藥物或毒物經(jīng)皮膚的吸收作用、局部作用、致敏作用和光感作用等，均需采用經(jīng)皮膚給藥方法。如家兔和豚鼠常采用背部一定面積的皮膚脫毛后，將一定藥液涂在皮膚上，藥液經(jīng)皮膚吸收。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心55七、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用藥量的確定及計(jì)算方法（一）動(dòng)物給藥量的確定在觀察一個(gè)藥物的作用時(shí)，應(yīng)該給動(dòng)物多大的劑量是實(shí)驗(yàn)開始時(shí)應(yīng)確定的一個(gè)重要問題。劑量太小，作用不明顯，劑量太大，又可能引起動(dòng)物中毒致死，可以按下述方法確定劑量：2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心561．先用小鼠粗略地探索中毒劑量或致死劑量，然后用小于中毒量的劑量，或取致死量的若干分之一為應(yīng)用劑量，一般可取1/10-1/5。2．植物藥粗制劑的劑量多按生藥折算。3．化學(xué)藥品可參考化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的已知藥物，特別是化學(xué)結(jié)構(gòu)和作用都相似的藥物的劑量。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心574．確定劑量后，如第一次實(shí)驗(yàn)的作用不明顯，動(dòng)物也沒有中毒的表現(xiàn)（體重下降、精神不振、活動(dòng)減少或其他癥狀），可以加大劑量再次實(shí)驗(yàn)。如出現(xiàn)中毒現(xiàn)象，作用也明顯，則應(yīng)降低劑量再次實(shí)驗(yàn)。在一般情況下，在適宜的劑量范圍內(nèi)，藥物的作用常隨劑量的加大而增強(qiáng)。所以有條件時(shí)，最好同時(shí)用幾個(gè)劑量作實(shí)驗(yàn)，以便迅速獲得關(guān)于藥物作用的較完整的資料。如實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)劑量與作用強(qiáng)度之間毫無規(guī)律時(shí)，則更應(yīng)慎重分析。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心585．用大動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，開始的劑量可采用給鼠類劑量的十五分之一～二分之一，以后可根據(jù)動(dòng)物的反應(yīng)調(diào)整劑量。6．確定動(dòng)物給藥劑量時(shí)，要考慮給藥動(dòng)物的年齡大小和體質(zhì)強(qiáng)弱。一般說確定的給藥劑量是指成年動(dòng)物的，如是幼小動(dòng)物，劑量應(yīng)減少。如以狗為例：6個(gè)月以上的狗給藥量為1份時(shí)，3-6個(gè)月的給1/2份，45-89日1/4份，20-44日的給1/8份，10-19日的給1/16份。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心597．確定動(dòng)物給藥劑量時(shí)，要考慮因給藥途徑不同，所用劑量也不同，以口服量為100時(shí)，灌腸量應(yīng)為100-200，皮下注射量30-50，肌肉注射量為25-30，靜脈注射量為25。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心60（二）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用藥量的計(jì)算方法動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所用的藥物劑量，一般按mg/kg體重或g/kg體重計(jì)算，應(yīng)用時(shí)須從已知藥液的濃度換算出相當(dāng)于每kg體重應(yīng)注射的藥液量（ml數(shù)），以便給藥。例1：計(jì)算給體重1.8kg的家兔，靜脈注射20%氨基甲酸乙酯溶液麻醉，按每kg體重1g的劑量注射，應(yīng)注射多少ml？計(jì)算方法：兔每kg體重需注射1g，注射液為20％，則氨基甲酸乙酯溶液的注射量應(yīng)為5ml/kg體重，現(xiàn)在兔體重為1.8kg，應(yīng)注射20%氨基甲酸乙酯溶液用量=5×1.8=9ml。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心61例2：計(jì)算給體重23g的小白鼠，注射鹽酸嗎啡15mg/kg重，溶液濃度為0.1%，應(yīng)注射多少ml？計(jì)算方法：小白鼠每kg體重需嗎啡的量為15mg，則0.1%鹽酸嗎啡溶液的注射量應(yīng)為15ml/kg體重，現(xiàn)小白鼠體重為23g，應(yīng)注射0.1%鹽酸嗎啡溶液的用量=15×0.023=0.345ml。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心62八、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉在一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，特別是手術(shù)等實(shí)驗(yàn)，為減少動(dòng)物的掙扎和保持其安靜，并便于操作，常對(duì)動(dòng)物采用必要的麻醉。由于動(dòng)物種屬間的差異等情況，所采用的麻醉方法和選用的麻醉劑亦有不同。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心63(一)常用的麻醉劑動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的麻醉劑分為三類，即揮發(fā)性麻醉劑、非揮發(fā)性麻醉劑和中藥麻醉劑。1．揮發(fā)性麻醉劑這類麻藥包括乙醚、氯仿等。乙醚吸入麻醉適用于各種動(dòng)物，其麻醉量和致死量差距大，所發(fā)安全度亦大，動(dòng)物麻醉深度容易掌握，而且麻醉后蘇醒較快。其缺點(diǎn)是對(duì)局部刺激作用大，可引起上呼吸道粘膜液體分泌增多，再通過神經(jīng)反射可影響呼吸、血壓和心跳活動(dòng)，并且容易引起窒息，故在乙醚吸入麻醚時(shí)必需有人照看，以防麻醉過深而出現(xiàn)上情況。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心642．非揮發(fā)性麻醉劑這類麻醉劑種類較多，包括苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉等巴比妥類的衍生物，氨基甲酸乙脂和水合氯醛。這些麻醉劑使用方便，一次給藥可維持較長的麻醉時(shí)間，麻醉過程較平衡，動(dòng)物無明顯掙扎現(xiàn)象。但缺點(diǎn)是蘇醒較慢。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心653．中藥麻醉劑

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)有時(shí)也用到象洋金花和東莨菪堿等中藥麻醉劑，但由于其作用不夠穩(wěn)定，而且常需加佐劑麻醉效果才能理想，故在使用過程中不能得到普及，因而，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室不選用這類麻醉劑進(jìn)行麻醉。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心66（二）動(dòng)物的麻醉方法1．全身麻醉（1）吸入法用一塊圓玻璃板和一個(gè)鐘罩或一個(gè)密閉的玻璃箱作為揮發(fā)性麻醉劑的容器，多選用乙醚作麻藥。麻醉時(shí)用幾個(gè)棉球，將乙醚倒可其中，迅速放入鐘罩或箱內(nèi)，讓其揮發(fā)，然后把待麻醉動(dòng)物投入，約隔4-6分鐘即可麻醉，麻醉后應(yīng)立即取出，并準(zhǔn)備一個(gè)蘸有乙醚的棉球小燒杯，在動(dòng)物麻醚變淺時(shí)給套在鼻上使其補(bǔ)吸麻藥。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心67（2）腹腔和靜脈給藥麻醉法非揮發(fā)性和中藥麻醉劑均可用作腹腔和靜脈注射麻醉，操作簡便，是實(shí)驗(yàn)室最常采用的方法之一。腹腔給藥麻醉多用于大小鼠和豚鼠，較大的動(dòng)物如兔、狗等則多用靜脈給藥進(jìn)行麻醉。由于各麻醉劑的作用長短以及毒性的差別，所以在腹腔和靜脈麻醉時(shí)，一定控制藥物的濃度和注射量。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心682．局部麻醉⑴貓的局部麻醉一般應(yīng)用0.5-1.0%鹽酸普魯卡因注射，粘膜表面麻醉宜用2%鹽酸可卡因。⑵兔在眼球手術(shù)時(shí)，可于結(jié)膜囊滴入0.02%鹽酸可卡因溶液，數(shù)秒鐘即可出現(xiàn)麻醉。⑶狗的局部麻醉用0.5-1%鹽酸普魯卡因注射。眼鼻、咽喉表面麻醉可用2%鹽酸可卡因。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心693．麻醉注意事項(xiàng)⑴靜脈注射必須緩慢，同時(shí)觀察肌肉緊張性、角膜反射和對(duì)皮膚夾捏的反應(yīng)，當(dāng)這些活動(dòng)明顯減弱或消失時(shí)，立即停止注射。配制的藥液濃度要適中，不可過高，以兔麻醉過急；但也不能過低，以減少注入溶液的體積。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心70⑵麻醉時(shí)需注意保溫。麻醉期間，動(dòng)物的體溫調(diào)節(jié)機(jī)能往往受到抑制，出現(xiàn)體溫下降，可影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。此時(shí)常需采取保溫措施。保溫的方法有，實(shí)驗(yàn)桌內(nèi)裝燈，電褥，臺(tái)燈照射等。無論用哪種方法加溫都應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的肛門體溫而定。常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常體溫：貓為38.6℃±1.0℃，兔為38.4℃±1.0℃，大鼠為39.3℃±0.5℃。⑶作慢性實(shí)驗(yàn)時(shí)，在寒冷冬季，麻醉劑在注射前應(yīng)加熱至動(dòng)物體溫水平。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心71九、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血方法實(shí)驗(yàn)研究中，經(jīng)常要采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血液進(jìn)行常規(guī)檢查或某些生物化學(xué)分析，故必須掌握血液的正確采集、分離和保存的操作技術(shù)。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心72采血方法的選擇，主要決定于實(shí)驗(yàn)的目的所需血量以及動(dòng)物種類。凡用血量較少的檢驗(yàn)如紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白的測定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破組織取毛細(xì)血管的血。當(dāng)需血量較多時(shí)可作靜脈采血。靜脈采血時(shí)，若需反復(fù)多次，應(yīng)自遠(yuǎn)離心臟端開始，以免發(fā)生栓塞而影響整條靜脈。例如，研究毒物對(duì)肺功能的影響、血液酸堿平衡、水鹽代謝紊亂，需要比較動(dòng)、動(dòng)脈血氧分壓、二氧化碳分壓和血液pH值以及K+、Na+、CI-離子濃度，必須采取動(dòng)脈血液。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心73采血時(shí)要注意：⑴采血場所有充足的光線；室溫夏季最好保持在25-28℃，冬季，15-20℃為宜；⑵采血用具、采用部位一般需要進(jìn)行消毒；⑶采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥；⑷若需抗凝全血，在注射器或試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑?，F(xiàn)將采血方法按動(dòng)物和部位分別加以介紹。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心74(一)小鼠、大鼠采血法1.割(剪）尾采血當(dāng)所需血量很少時(shí)采用本法。固定動(dòng)物并露出鼠尾。將尾部毛剪去后消毒，然后浸在45℃左右的溫水中數(shù)分鐘，使尾部血管充盈。再將尾擦干，用銳器（刀或剪刀）割去尾尖0.3-0.5cm，讓血液自由滴入容器或用血紅蛋白吸管吸取，采血結(jié)束，傷口消毒并壓迫止血。也可在尾部作一橫切口，割破尾動(dòng)脈或靜脈，收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml，大鼠0.3～0.5ml。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心752.鼠尾刺血法大鼠用血量不多時(shí)（僅做白細(xì)胞計(jì)數(shù)或血紅蛋白檢查），可采用本法。先將鼠尾用溫水擦拭，再用酒精消毒和擦拭，使鼠尾充血。用7號(hào)或8號(hào)注射針頭，刺入鼠尾靜脈，拔出針頭時(shí)即有血滴出，一次可采集10～50mm3。如果長期反復(fù)取血，應(yīng)先靠近鼠尾末端穿刺，以后再逐漸向近心端穿刺。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心763.眼眶靜脈叢采血采血者的左手拇食兩指從背部較緊地握住小鼠或大鼠的頸部（大鼠采血需帶上紗手套），應(yīng)防止動(dòng)物窒息。當(dāng)取血時(shí)左手拇指及食指輕輕壓迫動(dòng)物的頸部兩側(cè)，使眶后靜脈叢充血。右手持續(xù)接7號(hào)針頭的1ml注射器或長頸（3～4cm）硬質(zhì)玻璃滴管（毛細(xì)管內(nèi)徑0.5-1.0mm），使采血器與鼠面成45℃的夾角，由眼內(nèi)角刺入，針頭斜面先向眼球，刺入后再轉(zhuǎn)180度使斜面對(duì)著眼眶后界。刺入深度，小鼠約2～3mm，大鼠約4～5mm。當(dāng)感到有阻力時(shí)即停止推進(jìn)，同時(shí)，將針退出約0.1-0.5mm，邊退邊抽。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心774.斷頭取血采血者的左手拇指和食指以背部較緊地握住大（?。┦蟮念i部皮膚，并作動(dòng)物頭朝下傾的姿勢。右手用剪刀猛剪鼠頸，約1/2-4/5的頸部前剪斷，讓血自由滴入容器。小鼠可采用約0.8～1.2ml;大鼠約5-10ml。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心785.心臟采血鼠類的心臟較小，且心率較快，心臟采血比較困難，故少用。若做開胸一次死亡采血，先將動(dòng)物作深麻醉，打開胸腔，暴露心臟，用針頭刺入右心室，吸取血液。小鼠約0.5-0.6ml；大鼠約0.8-1.2ml。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心796.頸動(dòng)靜脈采血先將動(dòng)物仰位固定，切開頸部皮膚，分離皮下結(jié)締組織，使頸靜脈充分暴露，可用注射器吸出血液。在氣管兩側(cè)分離出頸動(dòng)脈，離心端結(jié)扎，向心端剪口將血滴入試管內(nèi)。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心807.腹主動(dòng)脈采血最好先將動(dòng)物麻醉，仰臥固定在手術(shù)架上，從腹正中線皮膚切開腹腔，使腹主動(dòng)脈清楚暴露。用注射器吸出血液，防止溶血?；蛴脽o齒鑷子剝離結(jié)締組織，夾住動(dòng)脈近心端，用尖頭手術(shù)剪刀，剪斷動(dòng)脈，使血液噴入容器。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心818.股動(dòng)（靜）脈采血先由助手握住動(dòng)物，采血者左手拉直動(dòng)物下肢，使靜脈充盈，右手用注射器刺入血管。體重15-20g小鼠采血約0.2-0.8ml，大鼠約0.4-0.6ml。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心82（二）豚鼠采血法1.耳緣剪口采血將耳消毒后，用銳器（刀或刀片）割破耳緣，在切口邊緣涂抹20%檸檬酸鈉溶液，阻止血凝，則血可自切口自動(dòng)流出，進(jìn)入容器。操作時(shí)，使耳充血效果較好。此法能采血0.5ml左右。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心832.心臟采血取血前應(yīng)探明心臟搏動(dòng)最強(qiáng)部位，通常在胸骨左緣的正中，選心跳最顯的部位作穿刺。針頭宜稍細(xì)長些，以免發(fā)生手術(shù)后穿刺孔出血，其操作手法同兔心臟采血。因豚鼠身體較小，一般可不必將動(dòng)物固定在解剖臺(tái)上，而可由助手握住前后肢進(jìn)行采血即可。成年豚鼠每周采血應(yīng)不超過10ml為宜。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心843.股動(dòng)脈采血將動(dòng)物仰位固定在手術(shù)臺(tái)上，剪去腹股溝區(qū)的毛，麻醉后，局部用碘酒消毒。切開長約2-3cm的皮膚，使股動(dòng)脈暴露及分離。然后，用鑷子提起股動(dòng)脈，遠(yuǎn)端結(jié)扎，近端用止血鉗夾住，在動(dòng)脈中央剪一小孔，用無菌玻璃小導(dǎo)管或聚乙烯、聚四氟乙烯管插入，放開止血鉗，血液即導(dǎo)管口流出。一次可采血10-20ml。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心85（三）兔采血法1.耳靜脈采血本法為最常用的取血法之一，常作多次反復(fù)取血用，因此，保護(hù)耳緣靜脈，防止發(fā)生栓塞特別重要。選耳靜脈清晰的耳朵，將耳靜脈部位的毛拔去，用75%酒精局部消毒，待干。用手指輕輕摩擦兔耳，使靜脈擴(kuò)張，用連有5（1/2）號(hào)針頭的注射器在耳緣靜脈末端刺破血管待血液漏出取血或?qū)⑨橆^逆血流方向刺入耳緣靜脈取血，取血完畢用棉球壓迫止血，此種采血法一次最多可采血5-10ml。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心862.耳中央動(dòng)脈采血兔耳的中央有一條較粗、顏色較鮮紅的中央動(dòng)脈，用左手固定兔耳，右手取注射器，在中央動(dòng)脈的末端，沿著動(dòng)脈平行地向心方向刺入動(dòng)脈，即可見動(dòng)脈血進(jìn)入針筒，取血完畢后注意止血。此法一次抽血可達(dá)15ml。取血用的針頭一般用6號(hào)針頭，不要太細(xì)。針刺部位從中央動(dòng)脈末端開始。不要在近耳根部取血，因耳根部軟組織厚，血管位置略深，易刺透血管造成皮下出血。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心873.心臟取血將家兔仰臥固定，在第三肋間胸骨左緣3毫米處注射針垂直刺入心臟，血液隨即進(jìn)入針管。注意事項(xiàng)有：⑴動(dòng)作宜迅速，以縮短在心臟內(nèi)的留針時(shí)間和防止血液凝固；⑵如針頭已進(jìn)入心臟但抽不出血時(shí)，應(yīng)將針頭稍微后退一點(diǎn)。⑶在胸腔內(nèi)針頭不應(yīng)左右擺動(dòng)以防止傷及心，肺、一次可取血20-25ml。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心885.股靜脈、頸靜脈取血先作股靜脈和頸靜脈暴露分離手術(shù)⑴股靜脈取血注射器平行于血管，從股靜脈下端向心方向刺入，慢慢抽動(dòng)針?biāo)纯扇⊙?。抽血完畢后要注意止血。股靜脈較易止血，用于紗布輕壓取血部位即可。若連續(xù)多次取血，取血部位宜盡量選擇遠(yuǎn)離心端。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心89⑵外頸靜脈取血注射器由近心端（距頸靜脈分支2-3厘米處）向頭側(cè)端順血管平等方向刺入，使注射針一直引深至頸靜脈分支叉處，即可取血。此處血管較粗，很容易取血，取血量也較多，一次可取10ml以上。取血完畢，拔出針頭，用干紗布輕輕壓迫取血部位也易止血。兔急性實(shí)驗(yàn)的靜脈取血，用此法較方便。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心90（四）狗、貓采血法1.后肢外側(cè)小隱靜脈和前肢內(nèi)側(cè)下頭靜脈采血此法最常用，且方便。后肢外側(cè)小隱靜脈在后肢脛部下1/3的外側(cè)淺表的皮下，由前側(cè)方向后行走。抽血前，將狗固定在狗架上或使狗側(cè)臥，由助手將狗固定好。將抽血部位的毛剪去，碘酒或酒精消毒皮膚。采血者左手拇指和食指握緊剪毛區(qū)上部，使下肢靜脈充盈，右手用連有6號(hào)或7號(hào)針頭的消毒器迅速穿刺入靜脈，左手放松將針固定，以適當(dāng)速度抽血（以無氣泡為宜）。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心91或?qū)⒛z皮帶綁在狗股部，或由助手握緊股部，即可，若僅需少量血液，可以不用注射器抽取，只需用針頭直接刺入靜脈，待血從針孔自然滴出，放入容器或作涂片。采集前肢內(nèi)側(cè)皮下的頭靜脈血時(shí)，操作方法基本與上述相同。一只狗一般采10-20ml血并不困難。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心922.股動(dòng)脈采血本法為采取狗動(dòng)脈血最常用的方法。稍加以訓(xùn)練的狗，在清醒狀態(tài)下將狗臥位固定于狗解剖臺(tái)上。伸展后肢向外伸直，暴露腹股溝三角動(dòng)脈搏動(dòng)的部位，剪去毛。用碘酒消毒。左手中指、食指探摸股動(dòng)脈跳動(dòng)部位，并固定好血管，右手取連有5（1/2）號(hào)針頭的注射器，針頭由動(dòng)脈跳動(dòng)處直接刺入血管，若刺入動(dòng)脈一般可見鮮紅血液流入注射器，有時(shí)還需微微轉(zhuǎn)動(dòng)一下針頭或上下移動(dòng)一下針頭，方見鮮血流入。待抽血完畢，迅速拔出針頭，用干藥棉壓迫止血2～3分鐘。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心933.心臟采血本法最好在麻醉下進(jìn)行，馴服的狗不麻醉也行。將固定在手術(shù)臺(tái)上，前肢向背側(cè)方向固定，暴露胸部，將左側(cè)第3-5肋間的被毛剪去，用碘酒-酒精消毒皮膚。采血者用左手觸摸左側(cè)3-5肋間處，選擇心跳最顯處穿刺。一般選擇胸骨左緣外1cm第4肋間處。取連有6（1/2）號(hào)針頭的注射器，由上述部位進(jìn)針，并向動(dòng)物背側(cè)方向垂直刺入心臟。采血者可隨針接觸心跳的感覺，隨時(shí)調(diào)整刺入方向和濃度，擺動(dòng)的角度盡量小，避免損傷心肌過重，或造成胸腔大出血。當(dāng)針頭正確刺入心臟時(shí)，血即可進(jìn)入抽射器，可抽取多量血液。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心944.耳緣靜脈采血本法宜取少量血液作血常規(guī)或微量酶活力檢查等。有訓(xùn)練的狗不必綁嘴，剪去耳尖部短毛，即可見耳緣靜脈，手法基本與兔相同。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心955.頸靜脈狗不需麻醉，經(jīng)訓(xùn)練的狗不需固定，未經(jīng)訓(xùn)練的狗應(yīng)予固定。取側(cè)臥位，剪去頸部被毛約10×3cm2范圍，用碘酒、酒精消毒皮膚。將狗頸部拉直，頭盡量后抑。用左手拇指壓住頸靜脈入胸部位的皮膚。使頸靜脈怒張，右手取連有6（1/2）號(hào)針頭的注射器。針頭沿血管平行方向向心端刺往前血管。由于此靜脈在皮下易滑動(dòng)，針刺時(shí)除用左手固定好血管外，刺入要準(zhǔn)確。取血后注意壓迫止血。采用此法一次可取較多量的血。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心96（七）雞、鴿、鴨的采血方法雞和鴿常采用的取血方法，是從其翼根靜脈取血。如需抽取血時(shí)，可將翅膀展開，露出腋窩，將羽毛拔去，即可見到明顯的翼根靜脈，此靜脈是由翼根進(jìn)入腋窩的一條較粗靜脈。用碘酒、酒精消毒皮膚，抽血時(shí)用左手拇指、食指壓迫此靜脈向心端，血管即怒張；右手取連有5（1/2）號(hào)針頭的注射器，針頭由翼根向翅膀方向沿靜脈平行刺入血管內(nèi)，即可抽血，一般一只成年動(dòng)物可抽取10-20ml血液。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心97也常采用右側(cè)頸靜脈取血。右側(cè)頸靜脈較左側(cè)粗，故用右側(cè)頸靜脈。以食指和中指按住頭的一側(cè)，用酒精棉球消毒右側(cè)頸靜脈的部位，以拇指輕壓頸根部以使靜脈充血。右手持注射器刺入靜脈取血。常采用取血法還有爪靜脈取血和心臟取血。在爪根部與爪中所見血管尖端之間切斷血管，以吸管或毛細(xì)胞直接取血。亦可將注射針刺入心臟內(nèi)取血。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心98十、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的急救措施當(dāng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中因麻醉過量、大失血、過強(qiáng)的創(chuàng)傷、窒息等各種原因，而使動(dòng)物血壓急劇下降甚至測不到。呼吸極慢而夫規(guī)則甚至呼吸停止、角膜反射消失等臨床死亡癥狀時(shí)，應(yīng)立即進(jìn)行急救。急救的方法可根據(jù)動(dòng)物情況而定。對(duì)狗、兔、貓常用的急救措施有下面幾種。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心99（一）針刺針刺人中穴對(duì)挽救家兔效果較好。對(duì)狗用每分鐘幾百次頻率的脈沖電刺激膈神經(jīng)效果較好。

2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心100（二）注射強(qiáng)心劑可以靜脈注射0.1%腎上腺素1ml，必要時(shí)直接作心臟內(nèi)注射。腎上腺素具有增強(qiáng)心肌收縮力，使心肌收縮幅度增大與加速房室傳導(dǎo)速度、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、增強(qiáng)心肌供血、供氧及改善心肌代謝、刺激高位及低位心臟起搏點(diǎn)等作用。當(dāng)動(dòng)物注射腎上腺素后，如心臟已搏動(dòng)但極為無力時(shí)，可從靜脈或心腔內(nèi)注射1%氯化鈣5ml。鈣離子可興奮心肌緊張力，而使心肌收縮加強(qiáng)，血壓上升。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心101（三）注射呼吸中樞興奮藥可從靜脈注射山梗萊堿或尼可剎米。給藥劑量和藥理作用如下：尼可剎米：每條動(dòng)物一次注25%1ml。此藥可直接興奮延髓呼吸中樞，使呼吸加速加深；對(duì)血管運(yùn)動(dòng)中樞的興奮作用較弱。山梗萊堿：每條動(dòng)物一次可注入1%0.5ml。此藥可刺激頸動(dòng)脈體的化學(xué)感受器，反射性地興奮呼吸中樞；同時(shí)此藥對(duì)呼吸中樞還有輕微的直接興奮作用。作為呼吸興奮藥，它比其他藥作用迅速而顯著。呼吸可迅速加深加快，血壓亦同時(shí)升高。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心102（四）動(dòng)脈快速注射高滲葡萄糖液一般常采用經(jīng)動(dòng)物肌動(dòng)脈逆血流加壓、快速、沖擊式的注入40%葡萄糖溶液。注射量根據(jù)動(dòng)物而定，如狗可按2-3ml/kg體重計(jì)算。這樣可刺激動(dòng)物血管內(nèi)感受器，反射性地引起血壓呼吸的改善。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心103（五）動(dòng)脈快速輸血、輸液在作失血性休克或死亡復(fù)活等實(shí)驗(yàn)時(shí)采用?？稍趧?dòng)物股動(dòng)脈插一軟塑料套管，連接加壓輸液裝置（血壓計(jì)連接輸液瓶上口，下口通過膠皮管連接塑料套管）。當(dāng)動(dòng)物發(fā)生臨床死亡時(shí)，即可加壓（180-2000mmHg）快速從股動(dòng)脈輸血和低分子右旋糖酐。如實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物曾用肝素抗凝，由于微循環(huán)血管中始終保持通暢，不出現(xiàn)血管中血液凝固現(xiàn)象，因此就是動(dòng)物出現(xiàn)臨床死亡后數(shù)分鐘，采用此種急救措施仍易救活。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心104（六）人工呼吸可采用雙手壓迫動(dòng)物胸廓進(jìn)行人工呼吸。如有電動(dòng)人工呼吸器，可行氣管分離插管后，再連接人工呼吸器進(jìn)行人工呼吸。一旦見到動(dòng)物自動(dòng)呼吸恢復(fù)，即可停止人工呼吸。有條件時(shí)，當(dāng)動(dòng)物呼吸停止，而心搏極弱或剛停止時(shí)，可用5%CO2和60%O2的混合氣體進(jìn)行人工呼吸，效果更好。2023/3/14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心105十一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法（一）蛙類常用金屬探針插入枕骨大孔，破壞腦脊椎的方法處死。將蛙用溫布包住，露出頭部，左手執(zhí)蛙，并且用食指按壓