天然藥物化學1

天然藥物化學1第1頁/共160頁天然藥物化學第一章總論第2頁/共160頁第一節(jié)緒論

一、天然藥物化學研究的內(nèi)容和目的 中藥化學是運用近代科學技術(shù)和方法，研究中藥中化學成份（主要是活性成份）的一門科學。它所包含的范圍很廣，涉及中藥中有效成份的提取，分離，鑒定，結(jié)構(gòu)測定和必要的結(jié)構(gòu)修飾，結(jié)構(gòu)改造，有效成份的生源途徑，外界條件的影響，以便提高療效降低毒性等。第3頁/共160頁

天然藥物中藥草藥傳統(tǒng)藥物民族藥海洋藥物

第4頁/共160頁

（一）主要內(nèi)容1、有效成份的提取

有效成份：具有特定臨床療效的成份。

生理活性成份：經(jīng)不同程度的藥效和生物活性試驗，證明對機體有一定生理活性的成份，但它們不一定代表真正中藥的臨床療效的有效成份。

2、有效成份的分離。

3、有效成份的結(jié)構(gòu)測定。

4、有效成份的結(jié)構(gòu)改造。第5頁/共160頁相關概念（1）單體：即化合物,指具有一定分子量、分子式、理化常數(shù)和確定的化學結(jié)構(gòu)式的化學物質(zhì)。（2）有效成分:具有生物活性且能起到防治疾病作用的化學成分。（3）無效成分：沒有生物活性和防病治病作用的化學成分。第6頁/共160頁（4）有效部位：在中藥化學中，常將含有一種主要有效成分或一組結(jié)構(gòu)相近的有效成分的提取分離部分，稱為有效部位。如人參總皂苷、苦參總生物堿、銀杏總黃酮等。

（5）有效部位群：含有兩類或兩類以上有效部位的中藥提取或分離部分。

第7頁/共160頁（二）學習本課程的目的：1、以探索更安全、更高效、低毒性的由植物成份衍生的新化合物，（如度冷?。?。2、并根據(jù)己闡明的結(jié)構(gòu)的成份，按照植物的生源關系、生源途徑探索同類藥物，如黃蓮素），以擴大藥源，發(fā)掘新的有效成份。3、研究有效成份在植物體內(nèi)隨生長季節(jié)、外界條件對這些成份的影響，以及有效成份和中藥之間的關系等。4、使中藥的療效得到近代科學理論的闡明，以便更好地掌握藥性，控制中藥質(zhì)量，保證中醫(yī)臨床用藥的準確性，提高中藥的療效，并從中尋找新的藥物，發(fā)現(xiàn)新用途，開辟目前尚未解決的防病、治病的新領域。第8頁/共160頁三、學習天然藥化的意義1、去粗取精，增強療效2、控制質(zhì)量，保證療效3、改進劑型，合理炮制采集4、探索中藥治病原理，追蹤有效成分5、改進結(jié)構(gòu)，化學合成，創(chuàng)制新藥第9頁/共160頁

二、學習要求1、掌握：中藥化學成份的結(jié)構(gòu)類型和結(jié)構(gòu)特點，化學成份的主要類型，主要成份及結(jié)構(gòu)，理化性質(zhì)，提取分離及有關理化鑒定。2、了解結(jié)構(gòu)測定的方法。概括了解中藥化學研究進展，尋找有效成份的方法及結(jié)構(gòu)修飾。第10頁/共160頁

三、學習方法1、掌握好基本概念。

2、熟悉必要的結(jié)構(gòu)式，主要反應式。

3、各類化學試劑的組成，用途。

4、有關波譜數(shù)據(jù)及分析。

5、主要類型化學成份的提取，分離方法。

6、主要類型吸附劑的應用及分離原理。第11頁/共160頁

四、天然藥物化學的研究進展

第12頁/共160頁第二節(jié)生物合成

一、一次代謝及二次代謝

第13頁/共160頁一、一次代謝及二次代謝第14頁/共160頁一次代謝過程：對維持植物生命活動來說是不可缺少的過程，且?guī)缀醮嬖谟谒械木G色植物中。一次代謝產(chǎn)物：糖、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸等這些對植物機體生命活動來說不可缺少的物質(zhì)。二次代謝過程：并非在所有的植物中都能發(fā)生，對維持植物生命活動來說又不起重要作用的過程。二次代謝產(chǎn)物：第15頁/共160頁二、生源研究的意義

人為地于植物中注入前體或中間產(chǎn)物來增加所需成分的積累和產(chǎn)量從生源關系密切的成分中來擴大生物活性物質(zhì)的資源從生源學說來確定某類成分的結(jié)構(gòu)類別進行植物成分的生物合成提供理論規(guī)律第16頁/共160頁二、生物合成假說的提出

三、主要的生物合成途徑

常見的基本單位大有以下幾種類型；

l、C2單位，（醋酸單位）如脂肪酸，酚類，苯醌類等化合物

2、C5單位，（異戊二烯單位）如：萜類，甾類

3、C6單位，如香豆素類，木脂素類等

4、氨基酸單位，生物堿

6、復合單位，上述單位復合而成，如：黃酮母核上連一個單萜。第17頁/共160頁（一）醋酸一丙二酸途徑（acetate－malonatepathway，AA—MA途徑）

一些脂肪酸、酚類、葸醌等均由此途徑生成。第18頁/共160頁1、脂肪酸類：有下列三種情況，（1）脂肪酸碳數(shù)為偶數(shù)，其合成過程起始單位是乙酰輔酶A，C2單位，由此延伸連接，得到脂肪酸為偶數(shù)。（2）脂肪酸碳數(shù)為奇數(shù)：起始單位系丙酰輔酶A。（3）支鏈脂肪酸的前體為異丁酰輔酶A，甲基丁酰輔酶A及甲基丙二酸單酰輔酶A。（4）不飽和脂肪酸類，其生物合成途徑較多，主要以環(huán)氧化合物為前體，按下述途徑脫水而成。第19頁/共160頁

第20頁/共160頁2、酚類，酚類化合物的生物合成與脂肪酸有所不同，由乙酰輔酶A經(jīng)縮合過程，最后生成聚酮類中間體，再由不同途徑環(huán)合而成。

特點；芳環(huán)上取代基（-OH，-OCH3）多相互在間位。第21頁/共160頁3、萘及蒽醌類

與酚類相似，首先由乙酰輔酶A出發(fā)，延伸，縮合→聚酮類，再經(jīng)不同形式環(huán)合而成。如：

紅鐮刀素大黃素甲醚第22頁/共160頁（二）甲戊二羥酸途徑（MVA）

——萜類

過去，認為萜類是由異戊二烯經(jīng)首尾連接而成，后來發(fā)現(xiàn)很多情況不符，研究發(fā)現(xiàn)，萜類的真正前體是甲戊二羥酸，在植物體內(nèi)，萜類化合物是由焦磷酸二甲烯酯（DMP）及其異構(gòu)體焦磷酸異戊烯酯（IPP），它們均由MVA轉(zhuǎn)化而成，由焦磷酸酯活化，首尾連接而成。當然，也有尾尾連接，如：三萜類，見反應式：

第23頁/共160頁甲戊二羥酸單酰輔酶A乙酰乙酰輔酶A甲戊二羥酸焦磷酸二甲烯丙酯（DPP）焦磷酸異戊烯酯（IPP）甲戊二羥酸-5-焦磷酸第24頁/共160頁

三、桂皮酸途徑及莽草酸途徑

天然化合物中具有C6—C3骨架的化合物，如；香豆素，苯丙素及黃酮類，具有C6—C3—C6結(jié)構(gòu)，均由桂皮酸轉(zhuǎn)化而來，其中，桂皮酸又是苯丙氨酸經(jīng)苯丙氨酸脫氨酶作用脫去NH2基生成的，具體過程：第25頁/共160頁酪氨酸

苯丙氨酸香草酸肉桂酸阿魏酸羥基肉桂酸咖啡酸第26頁/共160頁

以上所示，苯丙素經(jīng)環(huán)化、氧化、還原、甲基化等一系列反應，可生成C6—C2、C6—C1等化合物，進一步反應，還可生成黃酮類C6—C3—C6類，其中，苯丙氨酸、酷氨酸在高等到植物中很有限，故這一途徑可以忽略。第27頁/共160頁

桂皮酸前體為莽草酸，生源過程見Pl3-14，所以，過去桂皮酸途徑一直以其前體莽草酸命名，稱莽草酸途徑，可是，由于莽草酸還是醋氨酸，色氨酸等其也芳香酸類的前體，而后者（氨基酸）又與生物堿有密切關系，因此，說莽草酸途徑，無法限定為僅由掛皮酸而來的苯丙素類化合物，故現(xiàn)在把這一途徑更名為桂皮酸途徑。第28頁/共160頁

四、氨基酸途徑

天然產(chǎn)物中，生物堿類成份均由此途徑生成，有些氨基酸脫氧生成胺類，再經(jīng)一系列化學反應（氧化、還原、重排等）轉(zhuǎn)變?yōu)樯飰A，如圖；

全去甲勞丹諾蘇堿反應小檗堿網(wǎng)狀荔枝堿甲基化第29頁/共160頁

但是，并非所有的氨基酸都能變?yōu)樯飰A，己知作為生物堿前體的氨基酸，脂肪族化合物中主要有鳥氨酸，賴氨酸，芳香族中則有苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸等，如下列生物堿，都可以從其結(jié)構(gòu)中找出其中包含的前體氨基酸的部份。如，

鳥氨酸賴氨酸色氨酸第30頁/共160頁

五、復合途徑

對一些結(jié)構(gòu)復雜的化合物，往往不只是通過某一途徑，而是經(jīng)過幾種途徑而生成，如查爾酮：

可以看出，上述途徑是由兩個以上不同途徑組成。第31頁/共160頁常見的復合途徑有以下幾種組合，1、醋酸—丙二酸—

莽草酸途徑

2、醋酸—丙二酸—

甲戊二羥酸途徑

3、氨基酸—甲戌二羥酸途徑

4、氨基酸—醋酸—

丙二酸途徑

5、氨基酸—莽草酸途徑第32頁/共160頁第三節(jié)、取取分離方法

天然藥物化學的主要任務是效成份的提取、分離、結(jié)構(gòu)測定——結(jié)構(gòu)改造，那么，要做到結(jié)構(gòu)測定，首先要拿到化合物的單體——純品，這就要通過提取、分離工作來完成，也就是說，天然藥物化學研究，首先就要從有效成份的提取、分離工作開始。尤其是中草藥有效成份的含量往往很低，如；延胡素乙素含量0.1％，長春花中含長春新堿僅3ppm，但成份復雜，因此，遠遠滿足不了臨床需求，為解決這個向題，并提高療效，尋找新藥，研究構(gòu)效關系，確定有效成份單體的結(jié)構(gòu)，其首要任務就是提取。第33頁/共160頁

一、中草藥有效成份的提取

中草藥有效成份的提取方法主要有：（一）溶劑提取法：是根據(jù)中藥中各成份在溶劑中溶解的性質(zhì)，選用對活性成份溶解度大，對不須要成份溶解度小的溶劑將有效成份溶解出來的方法。

生藥

溶劑法，是提取過程中最重要的方法，極大多數(shù)情況下，都是采用溶劑取取法。

提取分離

生物及藥理指標

（相結(jié)合）指標追綜

有效

無效

有效

無效

··········依次第34頁/共160頁1、原理；主要依據(jù)物質(zhì)的“相似相溶”性質(zhì)。其過程是，

（1）滲透，

（2）擴敬，

（3）溶解，

第35頁/共160頁常見的溶劑大分為如下幾類:（1）水（2）親水性有機溶劑（甲醇，乙醇，丙酮）（3）親脂性有機溶劑（石油醚，CHCl3等）（4）水不溶性親水性有機溶劑（正丁醇，戊醇，異丁醇）第36頁/共160頁

常用溶劑的親水性強弱順序石油醚＞苯＞氯仿＞乙酸乙酯＞丙酮＞乙醇＞甲醇＞水親脂性增←———————→親水性增強第37頁/共160頁

對化合物來講

親水性化合物，極性基團多（—OH，—COOH）親脂性化合物，極性基團少（烴類）如：糖；多－OH，易溶于水，淀粉；也有許多－OH，理論上溶于水，但實際上，不完全如此，因為分子量大，水化現(xiàn)象，難溶解。（是分子的溶劑化過程）。苷，苷元部分極性小，難溶于水，苷中糖部分多－OH，易溶。生物堿：游離堿水溶液性一般較小，易溶于有機溶劑，但成鹽后——易溶于水。第38頁/共160頁2、溶劑的選擇——三條元則；

（1）對有效成份溶解度大，對雜質(zhì)溶解度小。（2）不與成份起化學反應。（3）要經(jīng)濟，易得，使用安全。第39頁/共160頁3、常用溶劑簡介：（1）水（強極性）是一種最常用溶劑，溶解范圍廣（酸性水，堿性水）。酸性水；可使堿性成份成鹽而溶解。堿性水；可使酸性成份成鹽而溶解。第40頁/共160頁

缺點：①易酶解，如：甙水解成糖和甙元。②霉壞變質(zhì)。③果膠，樹膠，粘液質(zhì)（多糖類）等，造成澎漲，過濾困難，淀粉易被糊化，增加過濾困難，因此，對淀粉含量高的原料，不宜用水取取。④皂甙。粘液質(zhì)等，減壓濃縮時，會產(chǎn)生大量泡沫，濃縮困難。⑤溶出許多其它成份（水溶性雜質(zhì)多）。

注意：加溫提取時，往往有助溶作用。（主要是淀粉起助溶作用，其它分子量較大的皂苷，大分子化合物也有此作用）。第41頁/共160頁（2）親水性有機溶劑；（甲醇，

乙醇，丙酮等）

乙醇（EtOH）：最常用，其溶解范圍廣，穿透力強，即可溶解親水性成份，也可溶解親脂性成份，而對蛋白質(zhì)，多糖，粘液質(zhì)，果膠，樹膠，淀粉等溶解度小。用不同濃度乙醇提取，可得不同的成份，如；30—40％EtOH提取皂甙，70—80％EtOH提取強心甙與水相比，EtOH溶劑用量小，可以回收，提取時問短。第42頁/共160頁

缺點；

易燃，但毒性小，便宜，來源方便，能破壞酶。甲醇（CH3OH）；與EtOH類似，其最主要缺點是毒性。丙酮；溶解范圍廣，與水和極性小的有機溶劑相溶，因比，主要用于調(diào)解溶劑的極性，重結(jié)晶時常用。第43頁/共160頁（3）水不溶性親水性有機溶劑：丁醇，戊醇（與水部分互溶），主要用于萃取，從水中提取極性成份。（4）親脂性溶劑；石油醚，苯，氯仿等。

特點：選擇性強，不能或不易取出親水性成份（雜質(zhì)），

缺點：多易燃，揮發(fā)性大，毒性大，價格較貴，設備要求嚴格，且不易穿過植物細胞壁。第44頁/共160頁

4、提取方法

（1）浸漬法將藥材末或粹塊浸于溶劑中，經(jīng)一整天浸泡，以溶解藥材中成份的方法。優(yōu)點；簡便易行，易操作。缺點；時間長，用水提，易酶解，發(fā)霉等，須加防腐劑，侵出率較差。

適用于：①有效成份受熟易破壞時。②原料中果膠，粘液質(zhì)等雜質(zhì)含量高時。第45頁/共160頁

（2）滲漉法

方法：原料裝入滲漉筒后，不斷加入新溶劑，使其通過藥材，自上而下流出。具體過程是；①藥材要粉碎，②潤濕，③裝筒2/3，④浸泡約24h，⑤滲漉，500g藥材，流速約在5ml/min，⑥收集流出液量約為藥材的10倍。優(yōu)點：有浸漬法的優(yōu)點（常溫），但效果比浸漬法好。缺點；溶劑用量大，時間長。第46頁/共160頁

（3）煎煮法（不能與鐵器接觸）

優(yōu)點：簡便，提取范圍較廣，大部分成份可被提出。缺點：藥材受熟，容易湖焦，有些成份遇熟破壞。第47頁/共160頁

（4）回流提取注，應用有機溶劑，加熱提取，需要采用回流裝置，以免溶劑捐失。

優(yōu)點；時簡短，效率高。缺點；受熱易破壞的成份不宜用。第48頁/共160頁（5）連續(xù)提取法，用揮發(fā)性有機溶劑，連續(xù)回流提取。

優(yōu)點；應用溶劑少，提取憲全，回收容易。缺點：時間長4—10h，受熱時間長，不宜對熱不穩(wěn)定的成份。（索氏提取器）第49頁/共160頁（二）水蒸汽蒸餾法

該法應用范圍有限，主要對一些揮發(fā)性成份或能與水蒸汽一起蒸餾的成份，如；揮發(fā)油，其原理即為水蒸汽蒸餾原理。第50頁/共160頁

（三）升華法

適用于有升華性質(zhì)的成份提取，升華法提取的成份一般純度較高，缺點是不能把所有成份提出來，不徹底，有時伴有分解現(xiàn)象，往往產(chǎn)生揮發(fā)性焦狀物，粘于升華物上，不易的除去。第51頁/共160頁

影響取取效率的因素，①溶劑的選擇，②提取方法，③原斜的粒度，④提取時間，⑤提取溫度。第52頁/共160頁二、中萆藥有效成份的分離與精制

由上述方法提取得到的提取物，系混合物，若想得到單體，還需要進一步分離、精制，常用方法如下：第53頁/共160頁

（一）根據(jù)物質(zhì)的溶解性差異進行分離。（溶劑分離法）

屬溶劑分離，許多成份往往通過溶劑方法進行分離，常采用下列方法，第54頁/共160頁1、結(jié)晶重結(jié)晶：利用物質(zhì)在不同溫度下，溶解度不同進行精制。①除雜質(zhì)；

②溶劑選擇③結(jié)晶溶液的制備④分步重結(jié)晶A、把雜質(zhì)溶出去。B、可溶有效成份。第55頁/共160頁2、溶劑分離：改變?nèi)軇┑臉O性，使某些成份析出，達到分離目的。

常用方法（經(jīng)典），于提取液中加入另一種溶劑（改變混含溶劑的極性），使溶液極性發(fā)生變化。使某些成份析出，達到分離目的。如；水取取物，含水溶性雜質(zhì)較多（多糖，蛋白質(zhì)），加入乙醇至40—70％，則析出沉淀（雜質(zhì)），濾出雜質(zhì)，達到除去雜質(zhì)的目的或提取有效成份，如；有效成份提取；白及膠提取液，加入乙醇，白及膠析出，過濾得白及膠。除雜質(zhì)；提取液，加乙醇沉淀（多糖，蛋白質(zhì)，樹膠等）第56頁/共160頁3、酸堿性成份的分離

通過調(diào)節(jié)溶液的pH，改變分子的存在狀態(tài)，從而使其溶解度發(fā)生變化，沉淀析出，達到分離目的。酸性溶液，溶解堿性成份（生物堿），溶液堿化后，堿性成份游離析出，得堿性成份。堿性溶液，溶解酸性成份，溶液酸化后，酸性成份游離析出，得酸性成份。第57頁/共160頁

還可通過調(diào)節(jié)pH，使不同酸堿性成份析出。

強堿性成份中強堿性成份弱堿性成份

堿性溶液一溶解酸性成份，香豆素，黃酮，蒽醌，有機酸等，采用PH梯度法，不同PH溶液法。1、用酸性溶液分次溶出——堿化——析出沉淀2、酸液溶液，依次調(diào)整堿性——分批沉淀。第58頁/共160頁4、沉淀法：

用沉淀法，（即在取取液中加入某種試劑，使某種成份生成水不溶性鹽類或復合物等沉淀析出）。使雜質(zhì)與有效成份或成份之間分離，常用的方法有：鉛鹽法，也可做成鈣鹽，鋇鹽，苦味酸鹽等。第59頁/共160頁

鉛鹽法：——酸性化合物；酚類，在以后章節(jié)講。堿式醋酸鉛；——沉淀范圍更廣，脫鉛后得有效成份。對堿性化合物，如，生物堿，可用試劑沉淀法，生物堿加雷式胺鹽，生成沉淀（生物堿沉淀試劑）試劑法也常用于其它類化合物，，如鞣質(zhì)，加明膠——沉淀，洋地黃提取物加膽甾醇——生成沉淀。此外，還有鹽析法，透析法等。第60頁/共160頁

（二）根據(jù)物質(zhì)在兩相溶液中的分配系數(shù)不同進行分離（液——液萃取法）

是利用混合物中各成份在兩相溶液中的分配系數(shù)不同而達到分離的方法。分配系數(shù)越大，分離效果越好。常用方法；兩相溶液萃取法，逆流分溶法（CCD），液滴逆流分溶注（DCCC），高速逆流層析（HPLC）及液——液分配層析等。第61頁/共160頁

基本原理：1、分配系數(shù)（K）當物質(zhì)在兩相互不相溶的溶劑中（如水和丁醇，氯仿），于分液漏斗中充分振搖，放置后，即可分為兩層，此時，溶質(zhì)將分別溶于兩層溶劑中，并在一定溫度，壓力下為一常數(shù)，此時，溶質(zhì)在兩層溶劑中的濃度比值為一常數(shù)（K），用公式表示如下：第62頁/共160頁K=CU/CLCU：上層濃度，CL：下層濃度。若有兩種成份時（A，B），則A，B各有其分配系數(shù)KA，KB，則兩者差別越大，分離效果越好。如，KA＝10說明振搖一次平衡后，A則有90％以上溶于上層溶液中。而KB＝0.l時，振搖一次平衡后，B則有90％以上溶于下層中，過樣A和B兩成份就有較大程度分離，連續(xù)分離萃取幾次，就可能達到A，B的全部分離。若有多種成份時，分離情況將更復雜。第63頁/共160頁

注意：（1）振搖時，常發(fā)生乳化，所以萃取前，可先用小試管試驗，觀察乳化情況，若有乳化，可作如下處理。①分去乳化層，②抽濾，③加熱，④較長時間放置，⑤加入電解質(zhì)。（2）水溶液的比重一般1.1一1.2之間，過稀過濃都不好。（3）溶劑用量；第一次用量相當于水溶液的1/3，第二次1/4——1/6。（4）次數(shù)：3次左右，實際上多用4-6次，采用分液漏斗。第64頁/共160頁2、分離難易及分離因子

兩成份的分配系數(shù)差別越大，兩者就越容易分離。因此兩成份的分配系數(shù)比就可以反應其分離的難易程度，過個比值稱為分離因子（β），用公式表示為：

β＝KAKB

一般說；β＞100一次萃取就可以實現(xiàn)基本分離，

100＞β＞10則需萃取10—20次，

β＜2需連續(xù)萃取100次以上，才能基本分離，

β＝1時，則KA=KB兩者性質(zhì)相近，無法分離。第65頁/共160頁 3、分配比與pH

對于酸性成份，因其在不同酸堿性溶液中，存在狀態(tài)不同（成鹽），因此，其溶解度有很大差別。對于酸性化合物；酚類；pKa值一般為9.2——10.8，羧酸類：pKa≈5，因此在pH=3以下，大部分酸性物質(zhì)以游離形式存在，易溶于有機溶劑。pH＞12時，則以解離形式（A.），存在，易分配于水中。

對于堿性成份；一般pH＜3，多呈解離狀態(tài)，易溶于水，pH＞12，多呈游離狀態(tài)，易于有機溶劑。第66頁/共160頁4、逆流分溶法（CCD）

液液萃取法，在實際中，經(jīng)常遇到幾種成份溶解性很相近的情況，需要進行多次萃取，有時需要進行幾十次到上百次，此時用簡單萃取己不能滿足，而要采用逆流分溶法（Countercurruentdistribustion，CCD），該法是一種多次連續(xù)的液液萃取分離過程，如圖：第67頁/共160頁

第一次溶劑如入萃取后，進入第二號......

第二號溶劑萃取一號后，濃度較低，再進入第二號中.......提高濃度，最后達到分離。（強心苷提?。┑?8頁/共160頁

缺點：

玻璃儀器易破損，操作麻煩，時間較長，溶劑耗量大。當萃取次數(shù)多時，用分液漏斗就不方便，這時可采用逆流分溶儀來進行，該儀器是由上百個萃取單元組成，每個單元都相當一個分液漏斗。見圖：第69頁/共160頁

振搖靜止轉(zhuǎn)移第70頁/共160頁

優(yōu)點：操作條件溫和，樣品容易回收，適用于中等極性，不穩(wěn)定成份分離。缺點：玻璃儀器易破損，操作較麻煩，乳化系統(tǒng)不宜采用。第71頁/共160頁5、液一液萃取與紙層析（ppc）

紙層析與液一液萃取的基本原理相同，因此液一液萃取的分離因子對紙層析同樣是個重要參考；具體方法，可借助紙層析中的Rf值來求得。如下：

R；濾紙定數(shù)，當濾紙濕重為干重的1.5倍時，R=2Rf值又稱比移值，其計算方法為：原點與展開后斑點的中心距離和原點與展開劑前沿間的距離之比值。設有兩種物質(zhì)A，B，其Rf分別為Rfa，Rfb則，

Rfa＞Rfb第72頁/共160頁6、液—液分配柱層析

前面講過逆流分溶法，要手工操作，費時，麻煩，易破損，乳化等原因，現(xiàn)己不多用，更好的方法，現(xiàn)在常用柱層析法。該方法是將兩相溶劑中的一相涂于載體（硅膠，硅燥土，纖維素）上，作為固定相，裝于層折柱中，然后，用另一溶劑（流動相）沖洗（洗脫），各成份在這兩相溶劑中分配系數(shù)不同，達到分離。第73頁/共160頁（1）正相層析與反相層析

正相層析；固定相極性大，流動相極性小，用于分離極性大的成份，如；生物堿，甙類，糖類，有機酸類等。固定相常用水，緩沖溶液等，流動相則用極性小的有機溶劑如；氯仿，乙酸，乙醚，丁醇等弱極性溶劑。反相層析：固定相極性小，流動相極性大，用于分離極性小的成份，主要是脂溶性成份，如；高級脂肪酸，油脂，游離甾體。如：固定相用石臘油，而流動相用水或甲醇等極性溶劑。第74頁/共160頁正、反相層析也可以在紙層和薄層上進行，主要用于摸索柱層析的條件?，F(xiàn)在常用的反相層析的固定相，是將硅膠進行化學修飾，鍵合上不同長度的烴基，形成親脂表面。≡Si＋X－SiR→＝Si－O－SiR＋HX常用的有以下幾種（根據(jù)R長度不同）：R=－C2H5（Rp－2），C8H17=（辛基，Rp－8），C18H37（十八烷基，Rp－18）親脂性——————

加強———→第75頁/共160頁

（2）加壓液相柱

以上所講，主要指經(jīng)典方法，即在常壓下進行層析，載體顆粒較大，比表面積小，吸附主要發(fā)生在表面上，因此，效率低，且費時，為增大比表面積，就要使載體顆粒更小，然而，顆粒小，流動相阻力大，洗脫困難，為解決這一間題，采用加壓的辦法，以加速流動相的流動速度，根據(jù)所加壓力的大小，又分為以下幾種；第76頁/共160頁

1、高效液相層折；20大氣壓，用于分析，制備。

2、Lobar低壓柱層析；小于5個大氣（CPLC）。

3、中壓柱層析：5—20個大氣壓。

4、快速層析；2個大氣壓。第77頁/共160頁（三）根據(jù)物質(zhì)的吸附性差別進行分離（吸附層析）

吸附層析在天然產(chǎn)物分離和精制中，應用十分廣泛，主要以固一液吸附層析為主，分為物理吸附，化學吸附和半化學吸附。物理吸附（表面吸附）；是通過分子間引力和互作用引起。第78頁/共160頁

特點；

無選擇性，是通過吸附—解吸附—再吸附過程。是最常用的方法之一，常用硅膠，氧化鋁，活性炭為吸附劑，分為極性吸附劑和非極性吸附劑。第79頁/共160頁

化學吸附：酸堿相互作用引起。如硅膠上有－OH，顯酸性，與生物堿發(fā)生吸附，或堿性氧化鋁與酸性成份，如；黃酮等發(fā)生的吸附，有選擇性，吸附力強，不易洗脫，有時甚至洗不下來，所以，不常用。第80頁/共160頁半化學吸附：是通過氫鍵作用產(chǎn)生，常用吸附劑為聚酰胺，對一些含酚－OH的化合物如；黃酮，蒽醌類等，吸附力較強，在分離黃酮類化合物時常用。第81頁/共160頁以下側(cè)重介紹物理吸附1、物理吸附的基本規(guī)律——

相似者易于吸附。

固——液吸附；吸附劑，溶質(zhì)，溶劑三者統(tǒng)稱為吸附過程的三要素，所以，分離能否成功，先要考慮成份的性質(zhì)，選擇吸附劑，洗脫劑是至關重要的。第82頁/共160頁（1）硅膠；

通式，SiOⅹXH2O

分子中具有硅氧烷交鏈結(jié)構(gòu)，因為硅醇基，吸附主要發(fā)生在醇-OH上，吸附性能主要與醇-OH有關，硅-OH通過氫鍵與水結(jié)合而吸附水份，而影響硅膠的吸附性能，硅-OH與水形成氫鍵越少，吸附效果越好，吸水多吸附力下降。當水達到17％時，不具吸附力，所以，此時硅膠需要活化。（活化；使吸附劑吸附力增大的過程）。第83頁/共160頁

硅膠活化：加熱除去水份，一般在100一120℃烘1--4小時，溫度過高則發(fā)生脫水，失效。以硅膠活性強弱可分為：活性I級II級llI級含水量0％12％15％硅膠系酸性吸附劑（硅－OH），與堿性成份結(jié)合牢固（化學吸附），不易洗脫，所以，一般不用硅膠分離生物堿。第84頁/共160頁

用途：

主要用于中等分子量，中性或酸性化合物。

極性吸附劑，因它的吸附能力與含水量有關，因此，又稱極性吸附劑或親水性吸附劑。第85頁/共160頁

（2）氧化鋁（Al2O3）：

兩性氧化物，一般常含有Na2CO3而呈堿性，Al2O3的吸附力也與含水量有關，含水量高，吸附力下峰，含水量低，吸附力增大，因此，亦為極性吸附劑，多用于堿性成份分離，但有時可使醛、酮、酯等發(fā)生次極化反應。第86頁/共160頁

分級：

活性；I級lI級llI級IV級V級含水量：1％3％6％10％15％活化，用烘干的方法，一般是在1500C，烘3小時，可達3—4級，4000C，烘6小時，可達1—2級。吸附劑的粒度：吸附主要發(fā)生在吸附劑的表面上，理論上粒越細越，比表面積越大，吸附效果越好，但實際上，太細，流速太慢，易使譜帶擴散，一般層析柱，料度在100目一120目之間，實際上硅膠常用200目一300目。第87頁/共160頁

硅膠和氧化鋁都是極性吸附劑，故有以下共同特點：①對極性物質(zhì)吸附力強，符合“相似者易于吸附”原則，故極性強的成份優(yōu)先吸附。②溶劑（洗脫劑），極性弱，洗脫力下降，表現(xiàn)在吸附劑對成份吸附力增強。原因是：溶劑與溶質(zhì)爭奪吸附劑表面，另一方面，對溶質(zhì)的溶解。③以強極性溶劑洗脫，絕大多數(shù)成份均可被置換下來。（如甲醇）。第88頁/共160頁

（3）活性炭；與上述兩種情況不同，其吸附性與水無關，因此，屬非極性吸附劑或疏水性吸附劑。處理；先用鹽酸洗滌，再用乙醇洗，水洗，于800C烘干即可。用于水溶性成份的分離，如氨基酸，糖類。第89頁/共160頁

缺點：太黑，影響視線。

在溶劑中的吸附力；水＞甲醇＞乙醇＞有機溶劑（洗脫時洗脫力相反）吸附力與分子結(jié)構(gòu)之間的關系，吸附力：①芳香族＞脂肪族，②大分子＞小分子，③極性基團多＞極性基團少的。第90頁/共160頁2、極性及其強弱的判斷能否有效分離，除選擇吸附劑和洗脫劑外，還有一要素——溶質(zhì)的性質(zhì)，其極性是支配吸附過程的一個要素，往往與電荷的不對稱程度，偶極矩，極化度，介電常數(shù)等因素相對應，其判斷方法一般有以下幾點。第91頁/共160頁

對極性吸附劑而言：

（1）吸附力與物質(zhì)結(jié)構(gòu)的關系，

—CH2—CH—＜—CH=CH—＜—OCH3＜—COOCH3＜=C＝O＜－CHO＜－SH＜NH2＜OH＜COOH

——————→極性增強被分離物質(zhì)的極性基團越多，吸附能力越強。（2）雙鍵，共軛雙鍵越多，吸附力越強。（3）分子內(nèi)部狀態(tài)，取代基的位置，空間結(jié)構(gòu)，如：第92頁/共160頁

（4）溶劑的極性，大小順序：水＞甲醇＞乙醇＞乙酸乙酯＞氯仿＞苯＞石油醚柱層析用的溶劑稱洗脫劑，薄層析用的溶劑稱展開劑。<第93頁/共160頁

3、簡單吸附法，進行物質(zhì)的濃縮和精制

一般有兩種方式：（1）除雜質(zhì)，如脫色，采用活性炭進行脫色，結(jié)晶。但有些色素活性炭也不行。（2）濃縮，對提取液體積過大，濃度低時，此時可采用在溶劑中加入吸附劑，吸附有效成份，然后，用溶劑洗脫，達到濃縮目的。第94頁/共160頁4、吸附柱層析用于物質(zhì)分離有關注意事項；（1）用量，一般吸附劑用量為樣品的30—100倍，對成份復雜，極性相近的難于分離者，吸附劑用量可增加至于100—200倍。（2）裝柱（干法和濕法），硅膠，Al2O3極性吸附劑，在極性溶劑中吸附力弱，在濕法裝柱時，應選擇極性小的溶劑裝柱。（3）洗脫，實際中，多采用梯度洗脫，即先用低極性溶劑洗，逐漸增加洗脫劑極性，以加強洗脫能力。（注意：不能先用極性大的溶劑）。第95頁/共160頁（4）避免化學吸附酸性成份宜用硅膠，堿性成份宜用氧化鋁，否則產(chǎn)生死吸附，必要時，洗脫劑中可加入適量的酸或堿，（如醋酸，氨，吡啶等），根據(jù)實際上情況而定。（5）溶劑系統(tǒng)在柱層析前，要先通過薄層析（TLC）摸索，以尋找最佳洗脫系統(tǒng)。第96頁/共160頁5、聚酰胺吸附層析法

屬氫鍵吸附，應用也比較廣泛，主要用于分離酚類化合物，特別對分離黃酮類，醌類應用最多。第97頁/共160頁

（1）性質(zhì)和原理

聚酰胺屬高分子，其組成是由己二酸和己二胺通過酰胺鍵連接而成的大分子化合物，分子中即有＝C＝O，又有NH2即可與同分子形成氫鍵，又能與其它分子形成氫鍵，如：C=O可與酚—OH，—NH—與=C=O通過氫鍵吸附，與不含酚－OH的成份分離。屬半化學吸附。第98頁/共160頁

特點：

吸附容量大，范圍廣，凡能與=C=O，—NH—形成氫鍵的成份都可用于分離，一般說，吸附能力與形成氫鍵有如下關系：1、形成氫鍵的基團越多，吸附力越強。

>>第99頁/共160頁2.與形成氫鍵的基團的位置有關：>>

>

原因是分于內(nèi)形成氫鍵，減弱了對聚酰胺的吸附，故易于洗脫。第100頁/共160頁3、芳香化程度越高，吸附力越強（共軛程度）。

＞＞

第101頁/共160頁

以上是化合物本身對吸附作用的影響，那么，在聚酰胺層析中，還有另一重因素，即溶劑通過與溶質(zhì)爭奪吸附劑表面，從而改變了成份對聚酰胺的吸附，有下列幾個途徑；第102頁/共160頁

（1）溶劑通過與溶質(zhì)形成氫鍵而將溶質(zhì)從聚酰胺表面上拉下來，解吸附。

（2）溶劑與溶質(zhì)爭奪聚酰胺表面，而將溶質(zhì)置換下來，解吸附。因此，溶劑無論與溶質(zhì)，還是與聚酰胺形成氫鍵越強，其洗脫能力就越強。不同溶劑對聚酰胺層析中洗脫能力如下：水＜甲醇＜乙醇＜丙酮＜稀堿＜二甲基甲酰胺＜尿素水溶液洗脫力增強吸附力增強（3）應用；主要用于酚類，黃酮類，其它類也有應用，但相對少些。第103頁/共160頁

（四）根據(jù)分子量大小差別進行分離（疑膠過濾法、凝膠滲透層析，分子篩過濾，排阻層折）天然產(chǎn)物分子大小各異，幾十—幾百，因此，可根據(jù)分子量大小進行分離，常用的方法有透析注，凝膠過濾法，超濾法，超速離心法，以上幾種方法中，凝膠過濾法應用最多，下面著重介紹一下凝膠過濾法。第104頁/共160頁1、原理

根據(jù)分子量大小差別進行分離，其過程是利用分子大小不同，象過篩一樣，將大小不同的分子分開，故稱分子篩，該法所用的載體種類較多，常用的有葡聚糖凝膠（SephadexG）及羥丙基葡聚糖凝膠（SephadexLH—20）。以葡聚糖凝膠為例，說明其過程，葡聚糖凝膠在水中不溶，但可以溶漲，形成球狀顆粒，具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，即顆粒內(nèi)有孔，裝入柱后，于上部加入樣品，當用洗脫劑進行洗脫時，如圖；第105頁/共160頁

葡聚糖凝膠；是由葡聚糖（右旋糖酐）和甘油通過醚鍵相交聯(lián)而成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。教材中介紹了幾種凝膠，葡聚糖凝膠和羥丙基葡聚糖凝膠（Sephadex-LH-20）自己看

SephadexLH-20是由sephadex-G25經(jīng)羥丙基處理后的產(chǎn)物。第106頁/共160頁

（五）利用物質(zhì)解離程度不同進行分離（離子交換樹脂法）

具有酸堿性的成份，在水中可呈解離狀態(tài)，或調(diào)整PH使其解離，可以通過電泳和離子交換樹脂法進行分離，常用離子交換樹脂法。本章主要介紹：第107頁/共160頁1、原理

根據(jù)物質(zhì)的解離度不同進行分離，以離子交換樹脂為固定相，以水或與水混溶的溶劑作流動相，具有酸堿性的成份，在水中可呈離子狀態(tài)或調(diào)整PH使其解離，當流動相通過樹脂時，溶液中呈離子狀態(tài)的組份被樹脂吸附，交換，而呈分子狀態(tài)的組份不被樹脂交換而流出，達到分離目的。主要有以下幾點：第108頁/共160頁1、特點：（1）選擇性，親合力大小不同而分離。（2）解離度差別進行分離，控制流動相的PH，可使不同組份以離子或游離形式出現(xiàn)—分離。（3）形成絡離子后，再進行離子交換。如糖類為中性分子，不發(fā)生交換，但可在硼酸中形成硼酸絡離子，不同的糖形成的硼酸絡離子穩(wěn)定性不同，通過交換樹脂分離。第109頁/共160頁2、溶劑的選擇

（1）酸，堿性不同的溶劑。

如生物堿，用堿處理——生物堿游離，有機溶劑萃取，也可用PH梯度法。（2）離子強度，競爭性離子。（同離子效應）第110頁/共160頁3、離子交換樹脂的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

離子交換樹脂的核，是由苯乙烯通過二乙烯苯為交聯(lián)劑聚合而成的球形網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，外觀呈球形顆粒，不溶于水，但可在水中溶漲，其主要性能有兩個方面；（結(jié)構(gòu)見P33）第111頁/共160頁

（1）交聯(lián)度

交聯(lián)度大，則網(wǎng)孔小，質(zhì)地密，水中不易溶漲，交聯(lián)度小，網(wǎng)孔大，質(zhì)地疏松，水中易于澎漲，不同交聯(lián)度適用于不同大小的分子。表示離子交換樹脂中交聯(lián)劑的含量，常以百分比表示，分為三個等級。（見P33表）第112頁/共160頁以離子交換基團不同，又分為陽離子交換樹脂和陰離子交換樹脂，

陽離子交換樹脂；

陰離子交換樹脂

（3）交換能力可用交換當量表示；一克干樹脂可交換離子的毫克當量數(shù)

（2）交換基團

強堿型（—N（CH3）3Cl）弱堿型（—NH2，—NH—）

強酸型（—SO3H），磺酸型離子交換樹脂弱酸型（—COOH），或（—PO3H2）第113頁/共160頁

（4）應用①用于不同電荷的離子分離，離子和分子分離。②相同電荷離子的分離，相同電荷的離子因其酸堿強弱不同，可采用不同PH溶劑洗脫分離。

第114頁/共160頁第四節(jié)結(jié)構(gòu)研究法

結(jié)構(gòu)研究是天然藥物化學的一項主要內(nèi)容，通過前述的提取分離得到的化合物，接下來的一項主要工作就是結(jié)構(gòu)測定。只有在搞清結(jié)構(gòu)的基礎上，才能有效研究其構(gòu)效關系，結(jié)構(gòu)改造，開發(fā)新藥。但是，天然有效成份往往含量很低，結(jié)構(gòu)復雜，（與合成藥物不同，因其己知結(jié)構(gòu)，可以預測產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)），所以，其結(jié)構(gòu)測定多相當困難，為正確確定一個化合物結(jié)構(gòu)，要從多方面信息來分析。第115頁/共160頁

一、純度測定1.外觀：顏色，晶形。

2.熔點：敏銳的熔點。

3.確定純度，一般要求用同一種溶劑進行三次重結(jié)晶，mp不變。紙層折，薄層析用三種不同溶劑展開，一個斑點。

4、有時也用氣相層析或高效液相層折（HPLC）。第116頁/共160頁

二、結(jié)構(gòu)研究的主要程序1、初步推定化合物的類型。（1）觀察在提取，分離過程中的行為，（2）測定有關理化性質(zhì)，如PH，溶解度及層析行為，灼燒試驗，化學定性反應。（3）結(jié)合文獻。第117頁/共160頁2、分子式確定，不飽和度，可采用質(zhì)譜法3、確定分子中的官能團，結(jié)構(gòu)片斷，由IR，UV，Ms和NMR光譜等方法。4、確定平面結(jié)構(gòu)，連接結(jié)構(gòu)片斷，排除不合理的結(jié)構(gòu)，可與有關相近似的化合物比較，必要時，可通過化學合成來驗證。5、確定分子的立體結(jié)構(gòu)，①CD譜或ORD譜（元二色散和旋光譜）②由NOE或2D—NMR譜，③X—射線單晶衍射，④化學合成6、文獻對照第118頁/共160頁

三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法

結(jié)構(gòu)測定方法，主要是以光譜法，如；Ms，分子式，IR：官能團，下面主要介紹一下旋光譜。第119頁/共160頁（一）、確定分子式、計算不飽和度（二）、質(zhì)譜EI-MS

電子轟擊質(zhì)譜ESI-MS電噴霧電離質(zhì)譜FAB-MS快速原子轟擊電離質(zhì)譜FD-MS場解析電離質(zhì)譜第120頁/共160頁（二）、紅外光譜（IR）分子振動能級譜3300~3000弱吸收烯氫、芳氫、C=N強吸收O-H、N-H3000~2700飽和C-H2400~2100不飽和三鍵1900~1650C=O及其衍生物1680~1500C=C及芳香核骨架震動、C=N等1500~1300飽和C-H面內(nèi)彎曲振動1000~650不飽和C-H面外彎曲振動第121頁/共160頁（三）、紫外可見吸收光譜(UV)電子躍遷而產(chǎn)生的電子能級譜解決不飽和共軛體系化合物的問題近UV200~400nm遠UV<200nm（四）、核磁共振光譜(NuclearMagneticResonance

，NMR)原子核在磁場中吸收一定頻率的無線電波而發(fā)生核自旋能級躍遷的現(xiàn)象，稱為核磁共振。第122頁/共160頁1、氫核磁共振光譜(PMR)提示：（1）由下圖譜中能得到什麼?（2）為什麼?第123頁/共160頁第124頁/共160頁第125頁/共160頁A化學位移δ（chemicalshift)(以四甲基硅烷TMS為內(nèi)標物，將其化學位移定為0，測定各質(zhì)子共振頻率與它的相對距離，這個相對值稱為化學位移）一般δ1-10ppmsp3δ1~2sp2δ6~8

一般來說δ烯氫>δ炔氫

>δ

烷氫

第126頁/共160頁~0.9-C-CH3

~1.8-C=C-CH3~2.1-COCH3

~3.0-NCH3

~3.7-OCH3

11109876543210-COOH-CHOAr-H-C=C-H常見結(jié)構(gòu)的化學位移大致范圍（要求熟記）(δ(δppm)

推斷化合物的結(jié)構(gòu)（含1H核基團的結(jié)構(gòu)）

第127頁/共160頁B偶合常數(shù)J(couplingconstant)

偕偶J=16Hz左右鄰偶J=6~8Hz

遠程偶合J=1~3Hz

第128頁/共160頁裂分符合n+1規(guī)律(n=磁等同質(zhì)子的數(shù)目)用偶合常數(shù)（J）表示峰裂分的數(shù)目峰裂分的距離不同系統(tǒng)偶合常數(shù)(JHz)大小s單峰d雙峰t三重峰q四重峰m多重峰第129頁/共160頁

芳環(huán)J鄰6~10HzJ間0~3HzJ對0~1Hz

雙鍵J順7~11HzJ反12~18Hz環(huán)己烷Jaa10~13Hz(θ=180O)Jae2~5Hz(θ=60O)Jee2~5Hz(θ=60O)第130頁/共160頁C積分曲線

也稱積分面積，與分子中的總質(zhì)子數(shù)相當。第131頁/共160頁2、碳核磁共振光譜(CMR)第132頁/共160頁A化學位移δa\范圍為δ1~250ppm，分辨率高

b.影響化學位移的因素

C雜化方式(sp3、sp2、sp)

一般δsp2>δsp>δ

sp3

第133頁/共160頁不同13C核δC大小與13C

核所處的化學環(huán)境（周圍電子云密度）有關

用于13C核類型的推斷

(δCppm)

150~220(c=o)

200150100500

c=cAr

50~80(c-o)

飽和碳原子（0~60）

主要結(jié)構(gòu)13C核δC的大致范圍(要求熟記)

第134頁/共160頁C、基本圖譜I.一維圖譜

a.噪音去偶譜:也叫全氫去偶(COM)或?qū)拵ヅ?，BBD）

b.選擇氫核去偶譜（selectiveprotondecouplingspectrum，SPD)

第135頁/共160頁c.NOE效應選擇的照射一種質(zhì)子使其飽和，則與該質(zhì)子在立體空間位置上接近的另一個或數(shù)個質(zhì)子信號強度增高的效應稱為核Overhauser效應，簡稱NOE。是確定分子中某些基團的位置，立體構(gòu)型和優(yōu)勢構(gòu)象的重要手段之一。第136頁/共160頁d.DEPT:系通過改變1H核的脈沖寬度（θ）或設定不同的弛豫時間，使不同類型的13C信號在圖譜上呈單峰形式分別朝上或向下伸出。

θ=135?

時季C信號消失

CH3,CH↑CH2↓

θ=90?

時季C信號消失

CH3,CH2信號消失

CH↑

θ=45?時季C信號消失，其它都向上第137頁/共160頁II.二維圖譜(2D-NMR)a.1H-1HCOSY1H1H相關譜bHMQC譜（1H檢測的異核多量子相干試驗）

1H13C近程相關（一般為兩根鍵）相當于1H-13CCOSY3HMBC譜（1H13C遠程相關譜）一般觀察到的為二至三個鍵的1H13C偶合

第138頁/共160頁11H-1HCOSY即1H1H相關譜第139頁/共160頁第140頁/共160頁2HMQC譜（1H13C近程相關）

第141頁/共160頁3HMBC譜（1H13C遠程相關譜）第142頁/共160頁4NOESY譜（1H核之間的NOE相關）為了在二維圖譜上觀察NOE效應而開發(fā)出來的新技術(shù)。在其譜中，不僅空間相近的質(zhì)子間NOE效應可以觀測到，而且還能作為相關峰出現(xiàn)在圖譜上。第143頁/共160頁

旋光譜（OpticolRotationDispersionORD）1、旋光譜的種類非對稱化合物分子能使平面偏振光的振動面發(fā)生旋轉(zhuǎn)，稱之為旋光性。這種旋轉(zhuǎn)角度隨光的波長而變化，如果以旋光度［α］或摩爾旋光［M］為縱坐標，以波長為橫坐標進行作圖，即可得到一條曲線，稱為旋光譜。常見的有以下兒種類型。第144頁/共160頁

（1）平坦曲線，分子中有不對稱C，但無發(fā)色團，如圖：有正負之分：隨波長變長，曲線下降①，為正性曲線。隨波長變長，曲線升高②、③負性曲線。①②③00a振幅b幅寬第145頁/共160頁

（2）單純Cotton效應曲線，若光學分子中還有發(fā)色團時，其ORD譜發(fā)生異常，出現(xiàn)峰和谷，稱為cotton效應。亦有正負之分。

正cotton效應曲線，先谷后峰。（谷在短波長處） 負cotton效應曲線，先峰后谷。（谷在長波長處）第146頁/共160頁

（3）復合cotton效應，即一個ORD譜中，出現(xiàn)兩個以上峰和谷的曲線，稱復合cotton效應。第147頁/共160頁2、旋光譜的測定意義

旋光譜及其cotton效應，對測定分子的立體化學結(jié)構(gòu)，有著重要意義，最重要是用于測定具有環(huán)己體系的化合物，如：甾體，三萜類，其構(gòu)型不同，旋光譜有較大區(qū)別，因此，可根據(jù)ORD譜推測分子的構(gòu)型和構(gòu)象。就其方法中最主要的是飽和環(huán)己酮的八區(qū)律規(guī)則，下面著重介紹八區(qū)律及其應用。第148頁/共160頁