抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病

抗核抗體基本概念及臨床檢測(cè)抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第1頁(yè)傳統(tǒng)定義針對(duì)細(xì)胞核成份本身抗體總稱。廣義定義針對(duì)細(xì)胞內(nèi)全部抗原成份本身抗體總稱。對(duì)ANA了解不再局限于核成份，而是指核酸和核蛋白抗體總稱靶抗原存在于包含細(xì)胞核、細(xì)胞漿、細(xì)胞骨架、細(xì)胞分裂結(jié)構(gòu)等部位抗核抗體定義抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第2頁(yè)ANA可見(jiàn)于各種疾病，尤其是結(jié)締組織疾病，常作為結(jié)締組織病診療、病情判斷和療效觀察指標(biāo)在非結(jié)締組織病中也可出現(xiàn)陽(yáng)性。正常人中（尤其是老年人）也可出現(xiàn)陽(yáng)性，但滴度低，而且常表現(xiàn)為IgM型高滴度ANA則高度提醒本身免疫性疾病當(dāng)前，ANA檢測(cè)已成為臨床上一個(gè)極主要本身免疫病篩查試驗(yàn)。ANA檢測(cè)臨床意義抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第3頁(yè)系統(tǒng)性紅斑狼瘡活動(dòng)期非活動(dòng)期藥品誘導(dǎo)紅斑狼瘡混合性結(jié)締組織?。∕CTD、Sharp綜合征）類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥多發(fā)性肌炎及皮肌炎干燥綜合征慢性活動(dòng)性肝炎潰瘍性結(jié)腸炎其它風(fēng)濕病正常人95－10080－10010010020－4020－5085－9530－5070－8030－40265-10ANA檢測(cè)臨床意義抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第4頁(yè)ANA試驗(yàn)室檢測(cè)策略推薦抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第5頁(yè)ANA間接免疫熒光法篩查試驗(yàn)抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第6頁(yè)間接免疫熒光法檢測(cè)ANA—基本原理間接免疫熒光法包被HEp-2細(xì)胞基質(zhì)玻片樣本中ANA-IgGFITC標(biāo)識(shí)抗人IgG抗體抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第7頁(yè)抗原譜完整(細(xì)胞核、細(xì)胞漿中近百種本身抗原)人源細(xì)胞，無(wú)種屬非特異熒光干擾腫瘤細(xì)胞，易于培養(yǎng)及商品化生產(chǎn)核質(zhì)比大，可觀察到各種不一樣熒光核型ANA篩查經(jīng)典和標(biāo)準(zhǔn)基質(zhì):HEp-2抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第8頁(yè)均質(zhì)型核點(diǎn)型著絲點(diǎn)型核仁型Scl-70粗顆粒型細(xì)顆粒型核膜型.核糖體P蛋白線粒體型高爾基體溶酶體肌動(dòng)蛋白波形蛋白基于Hep-2細(xì)胞為基質(zhì)ANA初篩試驗(yàn)抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第9頁(yè)ANA間接免疫熒光法篩查試驗(yàn)實(shí)際價(jià)值初步甄別本身免疫性疾病患者（陰陽(yáng)性結(jié)果）盡可能判斷熒光核型（縮小靶抗原確認(rèn)試驗(yàn)范圍）獲取抗體滴度信息（判斷病情進(jìn)展、預(yù)后等）考慮到熒光法篩查試驗(yàn)存在主觀性強(qiáng)特點(diǎn)，所以應(yīng)以一個(gè)客觀和現(xiàn)實(shí)態(tài)度去面對(duì)篩查試驗(yàn)結(jié)果抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第10頁(yè)幾個(gè)相對(duì)常見(jiàn)且主要熒光核型均質(zhì)型核點(diǎn)型著絲點(diǎn)型核仁型粗顆粒型核膜型.核糖體P蛋白線粒體型肌動(dòng)蛋白常見(jiàn)且主要核型標(biāo)準(zhǔn)核型表現(xiàn)相對(duì)經(jīng)典陽(yáng)性率相對(duì)較高靶抗原相對(duì)明確抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第11頁(yè)應(yīng)重視ANA滴度檢測(cè)抗體滴度臨床意義1、明確界定本身免疫性疾病患者；2、作為疾病進(jìn)程、臨床療效和病情預(yù)后及轉(zhuǎn)歸等判斷指標(biāo)當(dāng)前國(guó)際主流ANA間接免疫熒光法檢測(cè)系統(tǒng)廣泛采取起始稀釋度為1:40。即該檢測(cè)系統(tǒng)正常參考范圍為1:40。梯度稀釋時(shí)稀釋因子為1:2。HOB企業(yè)產(chǎn)品推薦按照1:80開(kāi)展稀釋。抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第12頁(yè)熒光強(qiáng)弱及血清稀釋度熒光強(qiáng)弱判讀觀察標(biāo)本特異性熒光強(qiáng)度普通用“+”號(hào)表示?！啊睘闊o(wú)或僅見(jiàn)極微弱熒光；“+”為熒光較弱但清楚可見(jiàn)；“++”為熒光明亮；“+++”為刺眼強(qiáng)熒光。臨床上依據(jù)特異性熒光強(qiáng)度達(dá)“+”以上判定為陽(yáng)性抗體梯度稀釋起始稀釋：1:80梯度稀釋（稀釋因子2）1:1601:3201:6401:12801:2560…直至抗體轉(zhuǎn)陰抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第13頁(yè)各稀釋度反應(yīng)性抗體滴度臨床意義1:801:640陽(yáng)性+—1:80陽(yáng)性，需結(jié)合臨床表現(xiàn)綜合判斷陽(yáng)性++—1:160陽(yáng)性，提醒可能存在相關(guān)疾病陽(yáng)性++弱+1:320明確陽(yáng)性，提醒可能存在相關(guān)疾病陽(yáng)性+++陽(yáng)性+1:640中等陽(yáng)性，提醒可能存在相關(guān)疾病陽(yáng)性+++陽(yáng)性++1:1280強(qiáng)陽(yáng)性，高度提醒存在相關(guān)疾病陽(yáng)性++++陽(yáng)性+++1:2560極強(qiáng)陽(yáng)性，高度提醒存在相關(guān)疾病。ANA熒光滴度判讀舉例抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第14頁(yè)HOB企業(yè)間接免疫熒光法產(chǎn)品系列產(chǎn)品系列基質(zhì)檢測(cè)項(xiàng)目ANA篩查HEp-2細(xì)胞ANA各種不一樣核型dsDNA綠蠅短膜蟲(chóng)抗dsDNA抗體AKA大鼠食管抗角蛋白抗體ANCA中性粒細(xì)胞乙醇和甲醛固定抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體組織器官大鼠肝/腎/胃ASMA\PCA\AMA\LKM-1\LC-1HEp-2細(xì)胞產(chǎn)品系列（舉例）16×6孔10×10孔8×12孔抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第15頁(yè)ANA靶抗原確認(rèn)試驗(yàn)抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第16頁(yè)條帶酶免分析法檢測(cè)ANA—基本原理LIA檢測(cè)方法原理底物顏色反應(yīng)硝酸纖維膜IgG抗體堿性磷酸酶標(biāo)識(shí)抗人IgG抗體抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第17頁(yè)ANA譜系列抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第18頁(yè)U1-nRNP和Sm抗原SLE:5-30%SLE:15-40%MCTD:95-100%功效:參加mRNA前體剪切抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第19頁(yè)SS-A(Ro-60),Ro-52和SS-BAnti-SS-A(60kDa)干燥綜合征.: 40-95%SLE: 20-60%新生兒狼瘡: 96%Anti-SS-B干燥綜合征.: 40-95%SLE: 10-20%新生兒狼瘡: 78%Anti-Ro-52(52kDa)非特異功效:調(diào)控RNA翻譯功效:RNA聚合酶III輔助蛋白X抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第20頁(yè)Scl-70(DNA-拓?fù)洚悩?gòu)酶I)功效:在DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程中完成雙鏈解螺旋疾病: 硬化癥:50%-75%抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第21頁(yè)Anti-Scl-70特點(diǎn)局限型和彌散型硬化癥病中陽(yáng)性率分別為10%和48%。抗Scl-70抗體陽(yáng)性患者通常病情發(fā)展快、預(yù)后差、多器官累及?？购丝贵w基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第22頁(yè)P(yáng)M-Scl抗原:幾個(gè)多肽復(fù)合物(分子量間于20-100kDa)，主要靶抗原為100kDa

相關(guān)疾病: 硬化癥: 2%-5%

肌炎: 8%

重合綜合征: 24%

抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第23頁(yè)Jo-1抗原: 組氨酰tRNA合成酶(50kDa),

細(xì)胞漿中磷蛋白

相關(guān)疾病: 多肌炎/皮肌炎血清學(xué)標(biāo)志，陽(yáng)性率為25-35%，當(dāng) 伴有肺間質(zhì)纖維化多肌炎，陽(yáng)性率可高達(dá)70%。

抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第24頁(yè)著絲點(diǎn)抗原：動(dòng)粒中4種蛋白：A(17kDa),B(80kDa),C(140kDa),D蛋白(50kDa)。

著絲點(diǎn)蛋白B為主要靶抗原

(與IIF：100%)

功效: 分裂期紡垂體附著點(diǎn)

相關(guān)疾病: 硬化癥: 18%

局限型: 80%-95%

(CREST綜合征)

抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第25頁(yè)P(yáng)CNA:細(xì)胞增殖相關(guān)核抗原I型抗原: DNA聚合酶δ輔助蛋白發(fā)揮控制細(xì)胞周期作用

相關(guān)疾病: 系統(tǒng)性紅斑狼瘡特異性抗體，但其發(fā)生率僅為3%。

抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第26頁(yè)染色體結(jié)構(gòu)示意圖DNA核小體染色體染色質(zhì)組蛋白抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第27頁(yè)dsDNA抗原： 雙鏈DNA，天然DNA(脫氧核糖核酸骨架)

相關(guān)疾?。?

dsDNA:

為SLE診療標(biāo)準(zhǔn)之一，陽(yáng)性率為60-90%，不一樣檢測(cè)方法診療特異性差異較大?？贵w滴度與疾病活動(dòng)性、狼瘡腎炎發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)含有相關(guān)性?？购丝贵w基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第28頁(yè)組蛋白抗原: H1,H2A,H2B,H3,H4，H2A-H2B，H3-H4

(主要靶抗原為H1和H2B)

相關(guān)疾病: 藥品誘導(dǎo)性LE:100%(抗組蛋白抗體是該病唯一標(biāo)志性抗體)

各種結(jié)締組織?。?SLE: 30-80%

SSc: 30%

SS:10%

抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第29頁(yè)核小體抗原: 組蛋白和DNA形成復(fù)合物

相關(guān)疾病:

SLE：高特異性指標(biāo)，陽(yáng)性率為50-95%，特異性幾乎100%，抗核小體抗體可獨(dú)立于抗dsDNA抗體單獨(dú)出現(xiàn)，因而抗核小體抗體與抗dsDNA抗體聯(lián)合檢測(cè)，可提升SLE血清學(xué)檢出率?？购丝贵w基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第30頁(yè)40S亞基60S亞基P0P1P1P2P2

抗原: 核糖體60S亞基中3種蛋白質(zhì):

P0,P1,P2.具備相同碳端抗原位點(diǎn)核糖體P蛋白相關(guān)疾病: SLE: 為SLE高特異性指標(biāo)，陽(yáng)性率為5-15%，常見(jiàn)于神經(jīng)狼瘡。抗核抗體基本概念和對(duì)應(yīng)臨床疾病第31頁(yè)AMA與AMA-M2靶抗原: 線粒