分子流行病學(xué)

分子流行病學(xué)第1頁/共54頁生產(chǎn)實(shí)踐中存在的問題：1、口蹄疫發(fā)生和流行的范圍越來越廣泛；2、疫源地不斷擴(kuò)大，血清型逐漸增加；3、免疫效果不確實(shí)；科學(xué)問題：1、口蹄疫流行區(qū)域本底不清楚；2、口蹄疫病毒生態(tài)學(xué)不明確；3、口蹄疫發(fā)病及免疫分子機(jī)理不確定；第2頁/共54頁存在問題：

1、動(dòng)物感染譜不清楚；

2、人獸共患機(jī)制不明確；第3頁/共54頁抗原漂移(antigenicdrift)：由于基因組自發(fā)的點(diǎn)突變引起小幅度的變異，當(dāng)氨基酸的改變積累到一定程度或突變氨基酸正好使抗原決定簇改變，則引起抗原性的變異，這種變異成為抗原漂移。由于流感病毒HA、NA發(fā)生點(diǎn)突變（主要是HA1），變異幅度小，屬于量變，可引起中小型流行?？乖D(zhuǎn)變(antigenicshift)：主要是指編碼HA或NA的病毒基因發(fā)生基因重組或交換（重排）而導(dǎo)致HA或NA抗原的突變，由于突變幅度大，導(dǎo)致產(chǎn)生新的亞型，這種變異稱為抗原轉(zhuǎn)變。變異涉及的數(shù)量和幅度大小直接影響流行規(guī)模。由于不同流感病毒株或亞型發(fā)生基因重組（或重排），發(fā)生幅度大的抗原性變異，屬于質(zhì)變，可引起大型流行。

流感病毒的遺傳變異第4頁/共54頁存在科學(xué)問題：1、病毒復(fù)制與干擾機(jī)制2、新型疫苗研發(fā)應(yīng)用前景：1、抗病育種、轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物；2、新型疫苗的應(yīng)用；第5頁/共54頁M蛋白和GP5蛋白可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生中和抗體，GP5蛋白參與細(xì)胞免疫和體液免疫，誘導(dǎo)產(chǎn)生主要的中和性抗體。因而，采用GP5蛋白作抗原的診斷試劑不僅能檢測(cè)野毒感染狀況，而且能解決N蛋白作抗原的診斷試劑無法反映機(jī)體免疫狀況的缺陷，有利于疫苗抗體水平的檢測(cè)，為豬場(chǎng)進(jìn)行疫苗免疫效果評(píng)估提供了重要的技術(shù)手段。4.PRRS診斷以膜蛋白（M蛋白、GP2、GP3、GP4、GP5）作為主要包被抗原的PRRSV抗體間接ELISA檢測(cè)試劑盒。應(yīng)用實(shí)例1：應(yīng)用病原結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系，利用膜蛋白作為包被抗原建立間接ELISA，評(píng)價(jià)免疫效果。第6頁/共54頁核衣殼蛋白（N蛋白）作為主要包被抗原的PRRSV抗體間接ELISA檢測(cè)試劑盒。N蛋白在病毒粒子中含量較高，主要結(jié)構(gòu)蛋白之一，保守性高，具有群特異性，能夠同時(shí)用于檢測(cè)歐洲株和美洲株，是最早用于試劑盒研究的蛋白，敏感性高、重復(fù)性好，應(yīng)用廣泛。N蛋白不能誘導(dǎo)產(chǎn)生病毒中和抗體，因此以N蛋白作為包被抗原的ELISA試劑無法反應(yīng)機(jī)體的免疫狀態(tài)，不適合用于對(duì)疫苗免疫效果監(jiān)測(cè)。應(yīng)用實(shí)例2：應(yīng)用病原結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系，利用核衣殼蛋白作為包被抗原建立間接ELISA，用于感染情況調(diào)查。第7頁/共54頁存在問題：多種重要疫病出現(xiàn)病毒持續(xù)性感染問題，使得病毒感染機(jī)制復(fù)雜化；傳染源長(zhǎng)久化；疫源地?cái)U(kuò)大化。第8頁/共54頁

根據(jù)PRRSV在基因組成和結(jié)構(gòu)蛋白抗原特性上存在的明顯差異，又將PRRSV分為歐洲型病毒和美洲型病毒。兩個(gè)毒株間氨基酸的同源性為78%-81%。VR-2332株為代表的美洲基因群（簡(jiǎn)稱B群)LV株為代表的歐洲基因群（簡(jiǎn)稱A群）存在問題：1、流行病學(xué)調(diào)查是否有針對(duì)性？2、疫病分布與特異免疫能否具有目的性？第9頁/共54頁VIIVIVVIIIIVIIIIIIIX存在問題：1、血清型與基因型的關(guān)系2、流行優(yōu)勢(shì)株與疫苗種毒的關(guān)系第10頁/共54頁思考1、動(dòng)物分子流行病學(xué)？2、要解決的關(guān)鍵科學(xué)問題？3、研究的方法和手段？4、疫情案例分析？第11頁/共54頁新的研究方向1、病原結(jié)構(gòu)學(xué)2、病原結(jié)構(gòu)功能學(xué)3、病原生態(tài)學(xué)4、分子診斷學(xué)5、蛋白組學(xué)6、反向遺傳操作技術(shù)7、？第12頁/共54頁一、概論

1

動(dòng)物分子流行病學(xué)

（Animalmolecularepidemiology）應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)和理論，研究引起動(dòng)物疫病的病原變異規(guī)律、結(jié)構(gòu)與功能（發(fā)病機(jī)理、免疫機(jī)理等），進(jìn)而分析疫病在畜禽群中發(fā)生、發(fā)展和分布的規(guī)律，制定預(yù)防、控制和消滅這些疫病的對(duì)策與措施的科學(xué)。

第13頁/共54頁概念的含義：以動(dòng)物群體為單位；病原在同一/不同動(dòng)物群體中分布和變異規(guī)律，以便了解疫病自然史；不同血清型/基因型同一病原分布及演化，有助于確定疫病的重要性及制定有針對(duì)性的特異免疫措施；研究病原生態(tài)學(xué)；病原結(jié)構(gòu)與功能；新型疫苗研發(fā)。

第14頁/共54頁第15頁/共54頁舉例說明FMDV基因所編碼的一個(gè)大的聚蛋白可逐級(jí)裂解病毒結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，產(chǎn)生的非結(jié)構(gòu)蛋白有L、2A、2BC、3AB、3ABC、3D等；

☆其中L蛋白的免疫原性比其他非結(jié)構(gòu)蛋白弱，感染動(dòng)物不一定能產(chǎn)生抗體，即使產(chǎn)生抗體，維持的時(shí)間也比較短。

☆病毒感染動(dòng)物可產(chǎn)生抗2B抗體，但這種抗體在ELISA反應(yīng)中重復(fù)性不好，不能作為檢測(cè)抗體。

☆

2C抗體由于消退的比3ABC快，且免疫牛中可檢測(cè)到2C抗體，因此也不能作為檢測(cè)指標(biāo)。

☆

3D又稱病毒感染相關(guān)抗原，沒有型特異性，檢測(cè)其抗體是評(píng)價(jià)動(dòng)物是否接觸過抗原的重要指標(biāo)，也是國際貿(mào)易必檢項(xiàng)目。目前認(rèn)為僅檢測(cè)3D抗體不能區(qū)分感染動(dòng)物與免疫動(dòng)物，因?yàn)橐呙缰型泻哿康姆墙Y(jié)構(gòu)抗原，經(jīng)過多次免疫后，在免疫動(dòng)物體內(nèi)也能檢測(cè)到3D抗體。

☆

3ABC聚蛋白中，3A免疫原性最強(qiáng)，3C免疫原性較弱。許多資料認(rèn)為3ABC作為感染的標(biāo)志可信度較大。檢測(cè)3ABC抗體是確診感染的重要指標(biāo)。第16頁/共54頁應(yīng)用原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白（NSP）3ABC多肽作為抗原建立了一種可以區(qū)分FMDV感染與接種滅活苗免疫牛的間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，并通過大量的臨床試驗(yàn)確定了血清抗體陽性與陰性效價(jià)的臨界值。方法的原理為：動(dòng)物在感染FMDV后既產(chǎn)生結(jié)構(gòu)蛋白抗體，也產(chǎn)生非結(jié)構(gòu)蛋白抗體，而接種純化滅活病毒后，幾乎只產(chǎn)生結(jié)構(gòu)蛋白抗體。經(jīng)過大量試驗(yàn)結(jié)果證明，該ELISA方法靈敏度比VIAAAGID（病毒感染相關(guān)抗原瓊脂糖凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)）高。意大利的De等(1997)研制出基于3ABC蛋白的間接捕獲ELISA技術(shù)，并可區(qū)分野毒感染和疫苗毒感染。在這套ELISA方法中，應(yīng)用單抗來捕獲在大腸桿菌中表達(dá)的3ABCFMDV非結(jié)構(gòu)聚合肽，并將OD值小于0.２的樣品判為陰性。用此ELISA技術(shù)監(jiān)測(cè)了大量的經(jīng)過免疫的和感染的動(dòng)物，所有的經(jīng)過攻毒試驗(yàn)的動(dòng)物其ELISA試驗(yàn)的OD值都大于0.2，超過99％的經(jīng)過疫苗免疫的動(dòng)物ELISA結(jié)果為陰性（即小于0.2），顯示出該方法良好的敏感性。后經(jīng)特異性試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，該方法的特異性大于99.5％。針對(duì)3ABC抗原的抗體最早可于免疫后8d測(cè)出，并且抗體測(cè)出時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)至少1年。此ELISA方法安全、經(jīng)濟(jì)。鑒于其優(yōu)良特點(diǎn)，可參與FMD根除運(yùn)動(dòng)和防控計(jì)劃。第17頁/共54頁APMV-1是確切報(bào)道的能夠在多種禽類唯一具有廣泛致病性的血清型。20世紀(jì)二十年代—雞、火雞六十年代—鸚鵡、籠養(yǎng)鳥七十年代—鴿、鵪鶉八十年代—鴕鳥、孔雀、企鵝九十年代—鵝21世紀(jì)初—鴨（福建）、豬（上海、江蘇、浙江等）

—人（IsolationofAvianParamyxovirus1fromaPatientwithaLethalCaseofPneumonia

Journalofvirology,Nov.2007,p.12709~12714

鵝副粘病毒病流行態(tài)勢(shì)1、副粘病毒的動(dòng)物感染譜增寬

2、副粘病毒侵犯人類越來越明顯NDV（新城疫病毒）研究背景第18頁/共54頁HendraVirusDisease1、澳大利亞（1994、2004）兩度爆發(fā)人、馬共患的亨德拉病毒病。馬呈現(xiàn)嚴(yán)重的呼吸道癥狀、共濟(jì)失調(diào)和高致死率；人呈現(xiàn)流感樣癥狀/呼吸道癥狀/反復(fù)發(fā)作性腦炎癥狀。2、果蝠是HeV的自然宿主。3、爆發(fā)時(shí)間和果蝠的繁殖季節(jié)有一定聯(lián)系。4、直接接觸是傳播的主要途徑。5、明顯的人獸共患特征，容易通過發(fā)病動(dòng)物傳播到人類，而且致病性強(qiáng)、病死率高。美國CDC將其列為最高生物安全級(jí)別（BSL-4）。Locationsofhenipavirusoutbreaks(redstars–Hendravirus;bluestars–Nipahvirus)anddistributionofhenipavirusflyingfoxreservoirs(redshading–Hendravirus

;blueshading–Nipahvirus)第19頁/共54頁二、感染與疾病1感染過程病原微生物侵入動(dòng)物的機(jī)體和動(dòng)物機(jī)體的反應(yīng)這一對(duì)矛盾對(duì)立統(tǒng)一的過程。第20頁/共54頁2感染

病原微生物侵入動(dòng)物機(jī)體，并在一定的部位定居、生長(zhǎng)繁殖，從而引起機(jī)體一系列病理反應(yīng)的過程。

3傳染病凡是由病原微生物引起，具有一定的潛伏期和臨床癥狀，并具有傳染性的疾病，稱為傳染病。第21頁/共54頁

傳染病的特征由特定的病原體引起；具有傳染性和流行性；機(jī)體發(fā)生特異性反應(yīng)；具有特征性的臨床表現(xiàn)；具有特征性的病理變化；耐過動(dòng)物能獲得特異性免疫。第22頁/共54頁4特異性免疫動(dòng)物患某種傳染病痊愈后，或病原微生物（抗原物質(zhì)）進(jìn)入機(jī)體后，機(jī)體可產(chǎn)生針對(duì)該種微生物的免疫能力，機(jī)體?？傻挚雇环N病原體的再次感染，稱為特異性免疫。體液免疫：病原微生物進(jìn)入機(jī)體后刺激B細(xì)胞，使其轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生多類免疫球蛋白，即抗體。免疫球蛋白可分為五大類，即免疫球蛋白G、A、M、D、E，它們是構(gòu)成體液免疫的基礎(chǔ)。細(xì)胞免疫：是指動(dòng)物體內(nèi)T淋巴細(xì)胞和其它細(xì)胞（主要是巨噬細(xì)胞）受抗原刺激后，分化、增生、轉(zhuǎn)化為致敏淋巴細(xì)胞所表現(xiàn)出來的特異性免疫應(yīng)答。這種免疫應(yīng)答不能通過血清傳遞，只能通過致敏淋巴細(xì)胞傳遞，故稱細(xì)胞免疫。第23頁/共54頁5病原體和宿主在感染過程中的相互關(guān)系

一、病原體對(duì)宿主的作用

1、病原體侵襲力

2、病原體產(chǎn)生毒素的能力

3、病原體的侵入數(shù)量

4、病原體的侵入門戶與特異性定位

5、病原體的變異二、宿主對(duì)病原體的作用

1、天然屏障

2、種間屏障

2、非特異性免疫

3、特異性免疫

第24頁/共54頁7病毒的持續(xù)性感染是指動(dòng)物長(zhǎng)期持續(xù)的感染狀態(tài)。由于入侵的病毒不能殺死宿主細(xì)胞而形成病毒與宿主細(xì)胞間的共生平衡，感染動(dòng)物可長(zhǎng)期或終身帶毒，而且經(jīng)?；蚍磸?fù)不定期地向外界排出病毒，但常缺乏臨床癥狀，或其癥狀與免疫病理反應(yīng)有關(guān)。若由此種動(dòng)物采血或臟器感染同種健康動(dòng)物時(shí)?？沙晒Φ匾鸶腥尽?慢病毒感染又稱長(zhǎng)程感染。是指潛伏期長(zhǎng)，發(fā)病呈進(jìn)行性且最后取死亡轉(zhuǎn)歸的一種病毒感染。其與持續(xù)性感染的不同點(diǎn)，在于疾病過程緩慢，但不斷發(fā)展而且無例外地死亡。

第25頁/共54頁三、傳染病的發(fā)展階段

一、潛伏期從病原體侵入機(jī)體時(shí)起，直至出現(xiàn)最初的一些臨床癥狀為止，這一段時(shí)間稱潛伏期。幾種重要傳染病的平均潛伏期炭疽：2~3天口蹄疫：2~4天結(jié)核?。?6~45天豬瘟：1周雞新城疫：3~6天馬傳染性貧血：10~30天第26頁/共54頁

了解潛伏期長(zhǎng)短在流行病學(xué)上具有重要意義1、確定檢疫（隔離）期限。2、判定傳播媒介的種類和數(shù)量。3、判斷流行過程的長(zhǎng)短。4、推算病畜的感染日期。5、確定緊急免疫動(dòng)物的觀察期限。6、處于潛伏期的動(dòng)物是危險(xiǎn)的傳染源。根據(jù)潛伏期長(zhǎng)短，實(shí)施有效措施。7、評(píng)價(jià)防疫措施的效果。

第27頁/共54頁二、前驅(qū)期潛伏期過后，直至某種傳染病的主要癥狀出現(xiàn)之前，這段時(shí)間叫前驅(qū)期。此期主要呈現(xiàn)大多數(shù)傳染病初期的一般癥狀，如T、P、R值增高，精神、食欲差等。三、明顯期可以理解為典型發(fā)病期，即于前驅(qū)期之后，呈現(xiàn)某種傳染病特有的典型的臨床癥狀或全部主要癥狀時(shí)，稱為明顯期，四、轉(zhuǎn)歸期疾病的轉(zhuǎn)歸期分三種，一是痊愈：病情好轉(zhuǎn)，主要癥狀消失，病畜逐漸恢復(fù)健康；二是帶菌（毒）動(dòng)物：即臨床癥狀消失，但體內(nèi)仍帶菌（毒），如馬傳貧、慢性豬瘟、慢性新城疫等；三是死亡：病情惡化，病畜死亡。

第28頁/共54頁四、病原生態(tài)學(xué)與疫病流行

疫病流行的生物學(xué)基礎(chǔ)

1、流行過程是傳染病在畜禽群中發(fā)生、傳播的過程，也是病原體不斷轉(zhuǎn)移、更換宿主的過程。2、傳染過程是個(gè)體行為，而流行過程是由個(gè)體到群體的過程。163、傳染病要在畜禽群中發(fā)生和傳播，首先必須發(fā)生傳染過程，個(gè)體發(fā)病后，病原體從發(fā)病個(gè)體排出，經(jīng)過一定的傳播途徑，侵入新的易感畜體，形成新的傳染，并在外界環(huán)境因素影響下，不斷地發(fā)生與連續(xù)地傳播。4、動(dòng)物傳染病的流行過程必須具備傳染源、傳播途徑和易感畜群三個(gè)基本環(huán)節(jié)。這三個(gè)基本環(huán)節(jié)是構(gòu)成傳染病在畜禽群中傳播的生物學(xué)基礎(chǔ)，若缺乏任何一個(gè)環(huán)節(jié)，或者三個(gè)環(huán)節(jié)同時(shí)存在，互不相關(guān)，新的傳染都不可能發(fā)生。第29頁/共54頁疫病流行的三個(gè)環(huán)節(jié)及其關(guān)系傳播途徑直接接觸傳播間接接觸傳播垂直傳播水平傳播是指有病原體生長(zhǎng)繁殖并能排除病原體的動(dòng)物和人。包括：病畜、病原攜帶者、受感染的人。畜禽群體易感性增高的因素：1、新生幼畜的增加；2、老齡動(dòng)物的減少；3、易感動(dòng)物的移入；4、免疫水平的消退；5、病原體發(fā)生變異；6、新的病原體出現(xiàn)；傳染源易感畜群第30頁/共54頁傳播途徑自然因素（地理環(huán)境、氣候等）社會(huì)因素社會(huì)制度社會(huì)進(jìn)步科技水平立法執(zhí)法國民素質(zhì)傳染源易感畜群第31頁/共54頁重要概念1、間接接觸傳播及其意義2、經(jīng)蟲媒傳播及其意義（1）基本概念（2）機(jī)械性傳播（3）生物學(xué)傳播（4）蟲媒性疫病的流行特點(diǎn)3、垂直傳播及其意義4、畜禽易感性與流行的關(guān)系5、病原生態(tài)學(xué)及其意義6、發(fā)病率、死亡率、致死率7、流行指數(shù)、流行潛力及其關(guān)系8、流行過程的季節(jié)性及其意義9、疫源地及其消滅疫源地的條件第32頁/共54頁分子流行病學(xué)調(diào)查的內(nèi)容第一部分1、畜主、畜別、數(shù)量、年齡、地點(diǎn)、疫情分布；2、發(fā)病日期、發(fā)病數(shù)量、主要癥狀和病理變化；3、病前接觸史、外引動(dòng)物史、預(yù)防接種史、動(dòng)物流動(dòng)情況、病死率、病程、潛伏期、飼養(yǎng)管理情況；4、疫源地的范圍、媒介Vector的分布、活動(dòng)情況；5、針對(duì)三個(gè)環(huán)節(jié)采取了哪些措施，效果如何。第二部分1、病原監(jiān)測(cè)、結(jié)構(gòu)與功能分析；2、血清流行病學(xué)及抗體性質(zhì)分析3、統(tǒng)計(jì)分析流行病學(xué)4、蛋白組學(xué)第33頁/共54頁NipahvirusDisease1、馬來西亞（1998）、新加坡（1999）、孟加拉國（2001、2003、2004、2005）相繼爆發(fā)人、豬共患的尼帕病毒病。豬主要表現(xiàn)為高熱、呼吸道和神經(jīng)癥狀。母豬在感染早期有流產(chǎn)現(xiàn)象。人主要表現(xiàn)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀（意識(shí)紊亂、昏迷、肌肉震顫和痙攣、肌腱反射消失）和呼吸道癥狀（發(fā)燒、頭痛、呼吸急促、心動(dòng)過速）。對(duì)人呈現(xiàn)高度致死，死亡率在38~75%。豬感染率高（多數(shù)為亞臨床感染，最高可達(dá)100%）、死亡率較低，在5~15%之間。2、果蝠是該病毒的自然宿主。3、爆發(fā)時(shí)間和果蝠的繁殖季節(jié)有一定聯(lián)系。NipahvirusisapreviouslyunknownvirusofthefamilyParamyxoviridaethathasbeenidentifiedinthenorthernpeninsulaofMalaysia.

Thevirushascausedillnessanddeathinhumansandpigs.Theapparentsourceofinfectionforhumansisdirectcontactwithpigs.

Transmissionofvirusisthoughttobefrombodyfluidsofinfectedpigs.

Human-to-humantransmissionhasnotbeendocumented.NipahVirus,Malaysia,May1999EmergingDiseaseNotice第34頁/共54頁基本原則（Basicprinciples）

一、貫徹“預(yù)防為主”的方針

（Carryoutthepolicyof“puttingpreventionfirst”）二、建立和健全各級(jí)防疫機(jī)構(gòu)（Establishmentofperfectepidemicpreventioninstitutions）三、專業(yè)人員與群眾相結(jié)合（Combinepersonnelinaspecificfieldwithmasses）四、綜合措施與重點(diǎn)措施相結(jié)合（Combinecomprehensivemeasureswithkeymeasures）五、因時(shí)因地制宜，科學(xué)合理調(diào)整防疫方案（Takemeasuressuitedtothetimeandlocalconditions，

adjusttheepidemicpreventionprogramscientifically）五、防疫措施第35頁/共54頁

預(yù)防畜禽傳染病的措施

（Preventiveprogramofanimalinfectiousdisease）

一、加強(qiáng)畜禽的飼養(yǎng)管理，增強(qiáng)畜禽的非特異性抵抗力；

（Strengthenraisingandmanagement，enhancethenon-specificresistance）二、制定科學(xué)的免疫程序，提高畜禽的特異性抵抗力；（Workoutimmunityprocedurescientifically，increasethespecificresistance）三、做好流行病學(xué)調(diào)查工作，堅(jiān)持經(jīng)常性的檢驗(yàn)檢疫工作；（Maketheepidemiologicalsurveywell，dotheinspectionandquarantineregularly）四、建立健全并貫徹執(zhí)行獸醫(yī)衛(wèi)生防疫制度；（Setupandcarryouttheperfectveterinarysanitarysystem）五、做好定期消毒和臨時(shí)消毒；（Makethepreventive、regular、concurrentandterminaldisinfectionwell）六、肉用牲畜，在屠宰前后必須經(jīng)獸醫(yī)衛(wèi)生檢驗(yàn)；（Augmenttheveterinarysanitaryinspectionbeforeandafterbutchery）

第36頁/共54頁

撲滅畜禽傳染病的原則

（Stampingoutprincipleofanimalinfectiousdisease）

傳染源傳播途徑易感畜群

第一、查明和消除傳染源；包括疫情報(bào)告和診斷、檢疫、隔離和封鎖。

第二、切斷病原體的傳播途徑；包括尸體無害化處理、消毒、殺蟲、及滅鼠。

第三、建立畜禽群體對(duì)傳染病的不感受性；包括免疫接種、藥物預(yù)防。第37頁/共54頁

撲滅畜禽傳染病的措施

（Stampingoutmeasuresofanimalinfectiousdisease）

一、疫情報(bào)告和診斷（ReportandDiagnosis）

二、檢疫（Quarantine）

三、隔離和封鎖（IsolationandBlockade）四、消毒殺蟲滅鼠（DisinfectionDisinsectionRodentcontrol）

五、免疫接種和藥物防治（Immunizationandpharmacotherapy）

六、病畜的治療（Therapia）七、傳染病的消滅問題（Eradicationofinfectiousdisease）

第38頁/共54頁實(shí)例講授一、某場(chǎng)發(fā)生動(dòng)物傳染病，如何進(jìn)一步確診？

1、流行病學(xué)診斷

2、臨床診斷

3、病理剖檢診斷

4、微生物學(xué)診斷

5、血清學(xué)診斷

6、分子生物學(xué)診斷第39頁/共54頁二、發(fā)生動(dòng)物傳染病后，如何采取撲滅措施？答：“十字”原則報(bào)—疫情報(bào)告診---及時(shí)確診養(yǎng)---加強(qiáng)飼養(yǎng)管理檢---檢查、檢測(cè)、檢疫、監(jiān)測(cè)隔---隔離封---封鎖消---消毒免---免除（撲殺、淘汰）、免疫（緊急免疫）治---治療分---分析總結(jié)動(dòng)物疫病的防治策略？第40頁/共54頁七、免疫接種1、概念：免疫接種是利用人工制備的各種免疫制劑激發(fā)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生特異性抵抗力，使易感動(dòng)物轉(zhuǎn)化為不易感動(dòng)物的一種手段，是防疫措施的一個(gè)重要組成部分。2、種類：預(yù)防接種：為防制疫病的發(fā)生和流行，有計(jì)劃地對(duì)易感動(dòng)物進(jìn)行的免疫接種。緊急接種：發(fā)生疫病時(shí)，對(duì)疫區(qū)和受威脅區(qū)尚未發(fā)病的動(dòng)物群進(jìn)行的免疫接種。3、途徑：注射免疫：將疫苗通過肌肉、皮內(nèi)、皮下或靜脈注入機(jī)體內(nèi)，使動(dòng)物獲得免疫力的一種方法?？诜庖撸簩⒁呙绨枞腼暳现形菇o動(dòng)物使其獲得免疫力的一種方法。飲水免疫：將疫苗混入水中，使動(dòng)物通過飲水而獲得免疫力的一種方法。點(diǎn)眼免疫：將疫苗點(diǎn)入眼結(jié)膜囊內(nèi)，使動(dòng)物獲得免疫力的一種方法。滴鼻免疫：將疫苗滴入鼻腔，使動(dòng)物獲得免疫力的一種方法。氣霧免疫：將稀釋的疫苗用壓縮空氣通過氣霧發(fā)生器噴射出去，使疫苗形成的霧化粒子（直徑1~10um），均勻地浮游在空氣中，使動(dòng)物通過呼吸道吸入而獲得免疫力的一種方法。 第41頁/共54頁4、生物制品種類：菌苗：由特定的細(xì)菌、霉形體、鉤端螺旋體等制成。如炭疽芽胞疫苗。疫苗：由特定的病毒、立克次氏體等制成。如兔化豬瘟弱毒疫苗、雞新城疫疫苗等?；蚬こ桃呙纾豪没蚬こ碳夹g(shù)所制備的疫苗。亞單位疫苗：從微生物中提取含有微生物有效的特異性抗原成分所制備的疫苗。合成肽疫苗：利用人工合成的含有病原微生物保護(hù)性抗原決定簇的短肽所制成的疫苗。核酸疫苗：是應(yīng)用基因重組技術(shù)將編碼的目的抗原蛋白基因插入細(xì)菌質(zhì)粒內(nèi)，構(gòu)建成重組體，將其直接導(dǎo)入動(dòng)物機(jī)體內(nèi)，通過宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)，表達(dá)抗原蛋白，從而誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生特異性體液免疫及以CTL為代表的細(xì)胞免疫應(yīng)答，以達(dá)到預(yù)防和治療疾病的目的。這種能誘導(dǎo)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重組體即核酸疫苗，或稱基因疫苗、裸DNA疫苗。病毒活載體疫苗：基因缺失疫苗：各種免疫佐劑的研究或細(xì)胞因子的共表達(dá)第42頁/共54頁滅活疫苗：以強(qiáng)毒菌、強(qiáng)毒種經(jīng)人工培養(yǎng)，用理化方法將其殺死（滅活）后制成的生物制品。特點(diǎn)：1、種毒要求條件高，生產(chǎn)成本高；

2、保持良好的、較強(qiáng)的免疫原性；

3、無毒、安全、冷藏條件保存；

4、因已滅活，故所用劑量大，免疫途徑單一；

5、免疫期短，需多次免疫，但短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生高滴度特異抗體。

6、大多數(shù)情況下適用于非清靜地區(qū)/發(fā)病地區(qū)。

7、一般不產(chǎn)生細(xì)胞免疫，無干擾素效應(yīng)。

8、依靠免疫佐劑第43頁/共54頁弱毒疫苗：由弱毒菌、強(qiáng)毒株所制成的生物制品。特點(diǎn)：1、毒力減弱，在體內(nèi)短期繁殖，無致病力；

2、可誘生干擾素效應(yīng)

3、免疫力產(chǎn)生快

4、大多數(shù)情況下適用于非疫區(qū)/基礎(chǔ)免疫

5、免疫持續(xù)期長(zhǎng)

6、免疫途徑多

7、粘膜免疫

8、細(xì)胞免疫

9、體液免疫

10、潛伏期動(dòng)物/疫區(qū)動(dòng)物慎用

11、需要冷凍條件運(yùn)輸和保存第44頁/共54頁5、疫苗的選擇和使用原則（1）結(jié)合本場(chǎng)本地區(qū)（疫情、動(dòng)物）實(shí)際；（2）避免免疫干擾；（3）流行毒株與疫苗毒株的統(tǒng)一；（4）免疫途徑的優(yōu)化、組合；（5）聯(lián)苗、多價(jià)苗的合理使用；（6）疫苗性質(zhì)與受體動(dòng)物的正確匹配；（7）科學(xué)合理的免疫程序。6、免疫接種的注意事項(xiàng)（1）制定科學(xué)的免疫程序；免疫程序：根據(jù)各種疫苗的免疫特性、母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律和疫病流行特點(diǎn)及動(dòng)物狀況合理地制定預(yù)防接種的計(jì)劃。（2）疫苗妥善保管與運(yùn)輸，計(jì)劃購買，正確使用（劑量、方法）。（3）弱毒疫苗使用的前后10~15天，不可應(yīng)用抗病毒類藥物。（4）弱毒菌苗使用的前后10~15天，不可應(yīng)用抗菌類藥物。（5）受體動(dòng)物群體的健康狀況。第45頁/共54頁EightNaturalnosoarea

orNaturalfocusofinfectiousdisease

andDiseaseofnaturalinfectiousfocusInfectiousfocus:

1、Concept2、Distinguishbetweeninfectiousfocusandreservoir3、Eradicativecondition第46頁/共54頁NaturalnosoareaorNaturalfocusofinfectiousdiseaseandDiseaseofnaturalinfectiousfocusConcept

自然疫源地：自然疫源性疾病所在的地區(qū)。自然疫源性疾?。阂环N疾病和病原體不依靠人而能在自然界生存繁殖，并只在一定條件下才傳給人和家畜，這種疾病稱為自然疫源性疾病。特點(diǎn)：（1）明顯的地區(qū)性；（2）明顯的季節(jié)性；（3）與人類的經(jīng)濟(jì)活動(dòng)和動(dòng)物的廣泛飼養(yǎng)有