九生物堿類藥物分析

九生物堿類藥物分析第1頁(yè)/共66頁(yè)第一節(jié)典型藥物的基本結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)和分類（一）苯烴胺類本類藥物的結(jié)構(gòu)特征為N在側(cè)鏈上，為脂肪胺。代表藥物：鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿。第2頁(yè)/共66頁(yè)鹽酸麻黃堿鹽酸偽麻黃堿性質(zhì)：1.堿性較強(qiáng)，與酸易成鹽；**2.手性特征；*3.氨基醇結(jié)構(gòu)；**4.紫外吸收；*第3頁(yè)/共66頁(yè)（二）、托烷類莨菪醇和莨菪酸縮合而成的脂類化合物代表藥物：硫酸阿托品、氫溴酸東莨菪堿第4頁(yè)/共66頁(yè)硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿性質(zhì)：1.堿性較強(qiáng)，與酸易成鹽；**2.手性特征，阿托品為外消旋體**第5頁(yè)/共66頁(yè)（三）、喹啉類苯并吡啶的衍生物（N在α位）代表藥物如硫酸奎寧、硫酸奎尼丁第6頁(yè)/共66頁(yè)硫酸奎寧硫酸奎尼丁性質(zhì)：1.兩份子藥物與一份子二元酸成鹽**2.手性特征；*第7頁(yè)/共66頁(yè)（四）、異喹啉類苯并吡啶的衍生物（N在β位）代表性藥物如鹽酸嗎啡、磷酸可待因第8頁(yè)/共66頁(yè)鹽酸嗎啡磷酸可待因性質(zhì)：1.鹽酸嗎啡具有兩性，堿性較強(qiáng)**第9頁(yè)/共66頁(yè)（五）、吲哚類本類藥物的結(jié)構(gòu)特征為苯并吡咯代表藥物如硝酸士的寧、利血平等第10頁(yè)/共66頁(yè)硝酸士的寧利血平性質(zhì)：1.N1堿性較強(qiáng)；2.利血平以游離狀態(tài)存在；1122第11頁(yè)/共66頁(yè)（六）、黃嘌呤類咪唑和嘧啶并合的雙雜環(huán)化合物。代表藥物如咖啡因、茶堿第12頁(yè)/共66頁(yè)咖啡因茶堿性質(zhì)：1.以游離堿存在；第13頁(yè)/共66頁(yè)1.堿性**季銨堿＞脂肪胺、脂環(huán)胺＞芳胺、N—芳雜環(huán)＞酰胺麻黃堿、阿托品＞罌粟堿＞咖啡因嗎啡具酸堿兩性二、生物堿的通性：第14頁(yè)/共66頁(yè)2.旋光性

一般多為左旋體有效。3.溶解性游離生物堿不溶或難溶于水，能溶或易溶于有機(jī)溶劑，在稀酸中成鹽而溶解生物堿鹽類易溶于水，不溶于有機(jī)溶劑。第15頁(yè)/共66頁(yè)典型藥物N原子狀態(tài)堿性苯胺類鹽酸麻黃堿鹽酸偽麻黃堿脂肪仲胺N較強(qiáng)（秋水仙堿除外）托烷類硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿脂環(huán)叔胺N較強(qiáng)喹啉類硫酸奎寧硫酸奎尼丁喹啉N喹核脂環(huán)N弱較強(qiáng)異喹啉類鹽酸嗎啡磷酸可待因脂環(huán)叔胺N較強(qiáng)，酸堿兩性（磷酸可待因沒(méi)有）吲哚類硝酸士的寧利血平吲哚N脂環(huán)叔胺N弱較強(qiáng)黃嘌呤類咖啡因茶堿嘌呤N（鄰位有羰基）極弱生物堿堿性比較**第16頁(yè)/共66頁(yè)第二節(jié)鑒別試驗(yàn)一、性狀檢查（一）外觀：形態(tài)、色澤、臭味（二）溶解度第17頁(yè)/共66頁(yè)（三）物理常數(shù)1.熔點(diǎn)例：磷酸可待因（05版藥典）

加入20％NaOH溶液至白色沉淀出現(xiàn)，用玻璃棒摩擦器壁使沉淀完全，濾過(guò)；沉淀用水洗凈，在105℃干燥1小時(shí)，依法測(cè)定，熔點(diǎn)為154℃-158℃。2.比旋度例：硫酸奎寧，硫酸奎尼丁3.吸收系數(shù)第18頁(yè)/共66頁(yè)二、化學(xué)鑒別法（一）顯色反應(yīng)（二）沉淀反應(yīng)常用的生物堿沉淀試劑為：1.重金屬鹽類，如K2HgI4、KBiI4、I2—KI、二氯化汞等；2.大分子酸類，如磷鉬酸、硅鎢酸等。

第19頁(yè)/共66頁(yè)（1）.雙縮脲反應(yīng)芳環(huán)側(cè)鏈氨基醇結(jié)構(gòu)的特征反應(yīng)鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿藍(lán)紫色（三）特征鑒別試驗(yàn)**第20頁(yè)/共66頁(yè)（2）Vitali反應(yīng)莨菪酸結(jié)構(gòu)的托烷類生物堿的特征反應(yīng)硫酸阿托品，氫溴酸東莨菪堿硫酸阿托品加發(fā)煙硝酸5滴水浴蒸干放冷加乙醇2－3滴潤(rùn)濕加固體KOH一粒顯深紫色第21頁(yè)/共66頁(yè)（3）綠奎寧反應(yīng)C6位含氧喹啉類生物堿在此生物堿的微酸水溶液中，加微過(guò)量溴水或者氯水，再加氨溶液，應(yīng)呈翠綠色。硫酸奎寧溴水或者氯水氨試液翠綠色第22頁(yè)/共66頁(yè)（4）紫脲酸銨反應(yīng)黃嘌呤類生物堿第23頁(yè)/共66頁(yè)（5）Marquis反應(yīng)含酚羥基的異喹啉生物堿的特征反應(yīng)：鹽酸嗎啡第24頁(yè)/共66頁(yè)三、儀器分析鑒別法（一）UV（二）IR（三）色譜第25頁(yè)/共66頁(yè)第九章生物堿類藥物的分析第一節(jié)典型藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)一、苯烴胺類：1.堿性**

2.手性*3.氨基醇結(jié)構(gòu)**

4.UV*二、托烷類：1.堿性**

2.阿托品為消旋體**三、喹啉類：1.堿性**四、異喹啉類：1.鹽酸嗎啡酸堿兩性**五、吲哚類：1.堿性**六、黃嘌呤類：1.游離**第二節(jié)鑒別試驗(yàn)一、性狀檢查：外觀、溶解度、物理常數(shù)二、化學(xué)鑒別法1.顯色反應(yīng)；2.沉淀反應(yīng)3.特征鑒別反應(yīng)**（1）雙縮脲反應(yīng)；（2）vitaili反應(yīng)（3）綠奎寧反應(yīng)（4）紫脲酸銨反應(yīng)；（5）Marquis反應(yīng)三、儀器分析法：UV，IR，色譜第26頁(yè)/共66頁(yè)掌握**：非水滴定法的原理、應(yīng)用實(shí)例；提取酸堿滴定法的步驟以及常用試劑；了解：其他實(shí)驗(yàn)條件的選擇。學(xué)習(xí)目標(biāo)第27頁(yè)/共66頁(yè)第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查

一、利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異硫酸奎寧中“氯仿-乙醇中不溶物”的檢查硫酸阿托品中“莨菪堿”的檢查*利血平中“氧化產(chǎn)物”的檢查利用旋光度的差異利用溶解行為的差異利用對(duì)光選擇性吸收的差異第28頁(yè)/共66頁(yè)二、利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的差異

1、鹽酸嗎啡中阿撲嗎啡的檢查本品2、鹽酸嗎啡中罌粟酸的檢查罌粟酸遇三氯化鐵顯紅色。要求本品加入試劑，不得顯紅色。加水溶解加NaHCO3+碘試液加乙醚振搖乙醚層不得顯紅色水層不得顯綠色第29頁(yè)/共66頁(yè)三、色譜法硫酸奎寧中其它金雞納堿的檢查

檢查方法：供試品溶液自身稀釋對(duì)照法有關(guān)物質(zhì)的檢查方法：HPLC第30頁(yè)/共66頁(yè)旋光法*硫酸阿托品（05版藥典）【檢查】莨菪堿取本品，按干燥品計(jì)算，加水制成每1ml中含50mg的溶液，依法測(cè)定（附錄ⅥE），旋光度不得過(guò)－0.40°。（已知莨菪堿的比旋度為-32.5°）求雜質(zhì)限量是多少？-0.4°-32.5°=0.0123g/ml=12.3mg/ml12.350=24.6%×100%第31頁(yè)/共66頁(yè)第四節(jié)含量測(cè)定一、非水滴定法（非水堿量法）(一)原理和方法游離生物堿：生成生物堿的高氯酸鹽生物堿鹽：置換滴定，即強(qiáng)酸滴定液置換出與游離堿結(jié)合的較弱的酸。

BH+·A-+HClO4BH+·ClO4-+HA第32頁(yè)/共66頁(yè)（二）測(cè)定條件的選擇適用范圍及溶劑的選擇Kb＞10-10時(shí)，宜選冰醋酸作為溶劑；Kb為10-10-10-12時(shí)，宜選冰醋酸與醋酐的混合液作為溶劑；Kb＜10

-12時(shí)，選用醋酐作為溶劑。第33頁(yè)/共66頁(yè)2.酸根的影響酸根在冰醋酸中的酸性：

高氯酸＞氫溴酸＞鹽酸＞硫酸＞硝酸＞其它弱酸（磷酸、有機(jī)酸）若滴定過(guò)程中置換出的HA酸性較強(qiáng)，反應(yīng)將不能進(jìn)行到底，需進(jìn)行一定處理，以排除HA的干擾。第34頁(yè)/共66頁(yè)3.指示終點(diǎn)的方法電位法：玻璃—甘汞電極系統(tǒng)指示劑法：結(jié)晶紫第35頁(yè)/共66頁(yè)（三）、測(cè)定實(shí)例**1、游離弱堿性生物堿藥物的含量測(cè)定（咖啡因）咖啡因的堿性很弱（pKb為14.1），所以選用酸酐－冰醋酸作為溶劑，可使突躍顯著增大。4個(gè)N，但只有一個(gè)N堿性稍強(qiáng)，故滴定時(shí)，1mol的高氯酸相當(dāng)于1mol的咖啡因。第36頁(yè)/共66頁(yè)（1）一般均預(yù)先在溶液中加入Hg(Ac)2的冰醋酸溶液，以消除氫鹵酸對(duì)滴定的干擾?！碚摿?～3倍2.氫鹵酸鹽的測(cè)定汞污染第37頁(yè)/共66頁(yè)（2）篩選溶劑，達(dá)到終點(diǎn)易觀察的目的，同時(shí)采用電位法指示終點(diǎn)。（3）部分采用HPLC進(jìn)行含量測(cè)定第38頁(yè)/共66頁(yè)取本品約0.15g，精密稱定，加冰醋酸10ml，加熱溶解后，加醋酸汞試液4ml與結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mo1/L）滴定至溶液顯翠綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于20.17mg的C10H15NO·HCl。鹽酸麻黃堿

ChP(2005)第39頁(yè)/共66頁(yè)生物堿的硫酸鹽，在冰醋酸介質(zhì)中只能被滴定至生物堿的硫酸氫鹽。3.硫酸鹽的測(cè)定第40頁(yè)/共66頁(yè)（1）硫酸阿托品

HClO4直接滴定時(shí)，反應(yīng)摩爾比為1∶1第41頁(yè)/共66頁(yè)（2）硫酸奎寧

HClO4直接滴定時(shí)，反應(yīng)摩爾比為1∶3（C20H24N2O2·H+）2·SO42-+3HCLO4→（C20H24N2O2·2H+）·2CLO4-+（C20H24N2O2·2H+）·HSO4-·CLO4-第42頁(yè)/共66頁(yè)

因HNO3具有氧化性，可使指示劑變色，一般電位法指示終點(diǎn)。如硝酸毛果蕓香堿。4.硝酸鹽的測(cè)定第43頁(yè)/共66頁(yè)無(wú)影響，直接測(cè)定。如磷酸可待因。5.磷酸鹽及其有機(jī)酸鹽的測(cè)定第44頁(yè)/共66頁(yè)（一）原理與方法

二、提取酸堿滴定法適用于堿性比較強(qiáng)的的藥物分析。(Pkb=6-9)第45頁(yè)/共66頁(yè)堿化、分離提取**第46頁(yè)/共66頁(yè)2.滴定**

（1）直接滴定法用于堿性較強(qiáng)的生物堿第47頁(yè)/共66頁(yè)（2）剩余滴定法用于堿性較弱的生物堿第48頁(yè)/共66頁(yè)（3）提取剩余滴定法用于對(duì)熱不穩(wěn)定的生物堿第49頁(yè)/共66頁(yè)堿化試劑最常用氨水**優(yōu)點(diǎn)：使大部分生物堿游離，不會(huì)和生物堿發(fā)生反應(yīng)，不易乳化，易揮發(fā)，易除去，無(wú)干擾。（二）測(cè)定條件的選擇第50頁(yè)/共66頁(yè)2.提取溶劑

（1）提取溶劑選擇的原則對(duì)生物堿溶解度大，而對(duì)其他共存物溶解度盡可能??；與生物堿及堿化試劑不起任何反應(yīng)。（2）常用的提取溶劑最常用氯仿**第51頁(yè)/共66頁(yè)3.選擇合適的指示劑要求：變色范圍在酸性區(qū)域的指示劑；被滴定生物堿的化學(xué)計(jì)量點(diǎn)，應(yīng)在選用的指示劑變色范圍內(nèi)。藥品化學(xué)計(jì)量點(diǎn)的PH值（PT值）滴定突越的PH值指示劑阿托品5.43.8-7.2甲基紅罌粟堿3.603.8-4.6溴酚藍(lán)注：甲基紅：4.2-6.3，溴酚藍(lán)：3.0-4.6第52頁(yè)/共66頁(yè)4.避免乳化措施：采用堿性弱的堿化試劑；選用不易產(chǎn)生乳化的其他有機(jī)溶劑；避免猛烈振搖。如果乳化已經(jīng)出現(xiàn)，則采用以下方法：改變兩相體積比；加入少量乙醇；加入無(wú)機(jī)鹽；離心；熱敷；加少量酸。第53頁(yè)/共66頁(yè)（三）測(cè)定實(shí)例磷酸可待因糖漿的含量測(cè)定

用內(nèi)容量移液管，精密量取本品10ml，以水洗出移液管內(nèi)的附著液，置分液漏斗中，加氨試液使成堿性，用氯仿振搖提取至少4次，第一次25ml，以后每次各15ml，至可待因提盡為止，每次得到的氯仿液均用同一份水10ml洗滌，洗液用氯仿5ml振搖提取，合并氯仿液，置水浴上蒸干，精密加硫酸滴定液(0.01mol/L)25ml，加熱溶解，放冷，加甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液(0.02mol/L)滴定。每1ml的硫酸滴定液(0.01mol/L)相當(dāng)于84.88mg的C18H21NO3·H3PO4·3/2H2O。第54頁(yè)/共66頁(yè)第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查一、利用物理性質(zhì)上的差異：旋光性*二、利用化學(xué)性質(zhì)上的差異三、色譜法第四節(jié)含量測(cè)定一、非水溶液滴定法（一）原理和方法**：游離堿，生物堿鹽（二）測(cè)定條件的選擇1.適用范圍及溶劑的選擇2.酸根的影響3.指示劑方法的選擇（三）測(cè)定實(shí)例**1.游離堿的測(cè)定；2.氫鹵酸鹽的測(cè)定；3.硫酸鹽的測(cè)定；4.硝酸鹽的測(cè)定；5.磷酸及有機(jī)酸鹽的測(cè)定。二、提取酸堿滴定法1.原理和方法：步驟**2.測(cè)定條件的選擇：堿化試劑**、提取溶劑**、指示劑第55頁(yè)/共66頁(yè)三、酸性染料比色法生物堿與某些酸性染料，在一定PH條件下可定量結(jié)合顯色，然后用比色法測(cè)定含量。特點(diǎn)：靈敏度高、方便，并且具有一定專屬性和準(zhǔn)確性。適用于含量較低的樣品測(cè)定。*第56頁(yè)/共66頁(yè)（一）基本原理在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)中，BH+.In-（水相）B+H+BH+HInH++In-BH+.In-（有機(jī)相）+第57頁(yè)/共66頁(yè)（二）測(cè)定條件的選擇※關(guān)鍵：酸性染料與有機(jī)堿能否定量的形成離子對(duì)，并完全被有機(jī)溶劑提取。**1.水相最佳PH值的選擇：使生物堿均形成陽(yáng)離子，且酸性染料電離足夠陰離子。第58頁(yè)/共66頁(yè)2.酸性染料種類的要求：與生物堿定量結(jié)合；生成的離子對(duì)在有機(jī)相中溶解度較大，而染料自身在有機(jī)相中不溶或很少溶解；生成的離子對(duì)有較高吸光度。常用：溴麝香草酚藍(lán)、甲基橙、溴甲酚綠等第59頁(yè)/共66頁(yè)3.有機(jī)溶劑的選擇要求：對(duì)離子對(duì)的提取率高；不能或極少與水互溶。常用三氯甲烷、二氯甲烷等。4.水分的存在完全無(wú)水第60頁(yè)/共66頁(yè)5.有色雜質(zhì)的存在為了防止有色雜質(zhì)的干擾?？蓪?duì)酸性染料進(jìn)行處理：用有機(jī)溶劑提取，除去有色雜質(zhì)。第61頁(yè)/共66頁(yè)供試品溶液的制備：取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于硫酸阿托品2.5mg），置50ml