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文檔簡介
免疫組化結果判斷及常見問題的分析演示文稿當前1頁,總共45頁。(優(yōu)選)免疫組化結果判斷及常見問題的分析當前2頁,總共45頁。肝臟:CK8理想著色,膽管上皮細胞強陽性,肝細胞呈不同層次陽性。當前3頁,總共45頁。
panCK(AE1/AE3)在肝臟理想的染色,采用了熱修復。肝細胞膜、膽管強而清晰的著色。背景干凈。當前4頁,總共45頁。一、特異性染色的判斷1.特定的定位
細胞陽性——根據靶抗原不同而呈現(xiàn)胞膜型、胞漿型或胞核型間質陽性——表現(xiàn)為細胞外著色,局限性或彌散性2.染色的不均一性陽性細胞的染色分布不均,片狀或點狀散在分布染色強弱不等,顏色深淺反映抗原量的多少3.排除人為造成的非特異性染色
切片的折疊、刀痕,色素沉著,組織細胞壞死。4.顆粒性顯色
DAB顯色在高倍鏡下呈顆粒狀而非均勻著色。當前5頁,總共45頁。免疫組化標準化照片CK10CD44v6ER當前6頁,總共45頁。當前7頁,總共45頁。當前8頁,總共45頁。當前9頁,總共45頁。當前10頁,總共45頁。當前11頁,總共45頁。合格的免疫組化染色切片
是正確判斷染色結果的基礎和前提
不合格的免疫組化染色切片
容易導致誤判當前12頁,總共45頁。C-erbB-2優(yōu)良中差當前13頁,總共45頁。4321ER當前14頁,總共45頁。子宮內膜PR染色,修復不足子宮內膜PR染色,修復良好
PR當前15頁,總共45頁。編號陽性片待檢片陰性對照結論12345-+-++-++-+-+---操作失誤,抗體失效非特異性著色陽性片不含靶抗原待檢片不含定位抗原待檢片含定位抗原二、染色結果的判斷當前16頁,總共45頁。PCNAS-P×400S-P×4001-dayCM4-dayCM陽性強度20×10視野下,隨機選取5個視野,測100個陽性細胞的平均光密度即為此片的陽性強度。三、結果分析當前17頁,總共45頁。P53陽性細胞百分比計數100個瘤細胞,其中陽性細胞的比例:<5%(-)5%~30%(+)30%~50%(++)>50%(+++)當前18頁,總共45頁。PCNABarnes法A:瘤細胞顯色有無及深淺0(不著色)1(淺黃色)2(棕黃色)3(棕褐色)B:顯色細胞的比例1(1%~10%)2(11%~50%)3(51%~80%)4(>80%)評分=A×B0分:陰性1~4分:弱陽性>4分:強陽性當前19頁,總共45頁。膠原染色陽性面積百分比40×10視野,選取5個視野,計算陽性區(qū)域面積占整個參考面積的百分率。當前20頁,總共45頁。CD34Weidner法(MVD計數)孤立的棕黃色細胞族代表一條微血管。低倍鏡下找到組織內密度最高區(qū)域。40×10視野下計數微血管數目。當前21頁,總共45頁。K-rasVEGF當前22頁,總共45頁。附:定量分析——圖象處理系統(tǒng)
1、圖象處理:利用儀器按照不同的目的進行圖象的修正、變換、特征提取和測量。1)“狹義”指消除圖象的模糊不清部分,校正畸變。2)“廣義”包括對圖象的結構分析,提取特征進行測量。
當前23頁,總共45頁。2、圖象處理系統(tǒng)組成圖象輸入(顯微鏡、掃描儀)圖象處理運算(病理圖文分析軟件)圖象、數據輸出
當前24頁,總共45頁。
3、圖象處理系統(tǒng)功能
幾何形態(tài)學定量分析細胞核、漿的大小、面積、核漿比;細胞分布密度、個數;血管、腺體的面積、密度;間質的面積
免疫組織化學分析按著色灰度分類,計算陽性、陰性細胞的面積含量DNA倍體分析計算正常細胞及腫瘤細胞DNA含量,給出倍體參數、DNA參數分布直方圖
AgNOR分析顆粒分析:數目、大小、面積、比例
當前25頁,總共45頁。當前26頁,總共45頁。四、免疫組化異常著色及對策1.非特異性著色及其對策非特異性著色原因對策操作過程沖洗不充分每步沖洗3×5min內源性過氧化物酶3%H2O2封閉內源性生物素使用生物素阻斷試劑盒阻斷電荷吸附非免疫動物血清封閉抗體不純采用單克隆抗體切片制片不當改善取材和制片加試劑后切片干燥防止切片干燥當前27頁,總共45頁。內源性生物素—腎小管當前28頁,總共45頁。內源性生物素—淋巴結轉移性甲狀腺腺癌當前29頁,總共45頁。蛻膜組織部分胞核PR陽性,血管內紅細胞過氧化物酶顯色當前30頁,總共45頁。嗜酸性粒細胞中細胞色素顯色當前31頁,總共45頁。吞噬細胞內
含鐵血黃素
當前32頁,總共45頁。壞死組織著色:AE1/AE3當前33頁,總共45頁。壞死組織著色當前34頁,總共45頁。交叉反應:乳腺ki-67組織細胞胞漿著色當前35頁,總共45頁。黑色素瘤,細胞內含黑色素,呈紫黑色,HE染色當前36頁,總共45頁。灶狀著色:機械原因著色當前37頁,總共45頁。CyclinD1套細胞淋巴瘤全片著色當前38頁,總共45頁。全片著色當前39頁,總共45頁。邊緣著色當前40頁,總共45頁。“陰陽臉”著色當前41頁,總共45頁。氣泡當前42頁,總共45頁。非特異性著色原因對策操作過程沖洗不充分每步沖洗3×5min內源性過氧化物酶3%H2O2封閉內源性生物素使用生物素阻斷試劑盒阻斷電荷吸附非免疫動物血清封閉抗體不純采用單克隆抗體切片制片不當改善取材和制片加試劑后切片干燥防止切片干燥非特異性著色及其對策當前43頁,總共45頁。無信號片CD30當前
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