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第頁(yè)《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教學(xué)大綱一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)是生物學(xué)所有專(zhuān)業(yè)的一門(mén)專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課程,是一門(mén)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)課程,同時(shí)也是為了配合生物化學(xué)的教學(xué)而開(kāi)設(shè)的一門(mén)實(shí)驗(yàn)課程,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)比色、層析、電泳等基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)(包括實(shí)驗(yàn)方法、操作技術(shù)和一些基本儀器的使用等),分析研究糖、脂、蛋白質(zhì)、核酸、酶等生化物質(zhì)及代謝過(guò)程,培養(yǎng)學(xué)生具有初步的科學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)芰皣?yán)格的科研作風(fēng),同時(shí)驗(yàn)證生化的某些基本理論知識(shí),加深感性認(rèn)識(shí)。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)行一定比例的綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn),將實(shí)驗(yàn)理論和實(shí)驗(yàn)技能融為一體,從而培養(yǎng)學(xué)生的基本實(shí)驗(yàn)思想、實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)技能和綜合應(yīng)用能力。二、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目與提要:序號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目必做選做時(shí)數(shù)內(nèi)容提要實(shí)驗(yàn)類(lèi)型每套儀器人數(shù)1總糖的測(cè)定——蒽酮比色法必做31.分光光度計(jì)的原理及操作方法2.測(cè)定材料的準(zhǔn)備3.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作4.樣品含量的測(cè)定驗(yàn)證性22蛋白質(zhì)的兩性電解質(zhì)性質(zhì)及等電點(diǎn)的測(cè)定必做31.蛋白質(zhì)的兩性電解質(zhì)性質(zhì)原理2.不同pH體系的配制3.蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的測(cè)定驗(yàn)證性23雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量必做31.雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)的原理2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作3.樣品的測(cè)定驗(yàn)證性24考瑪斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定蛋白質(zhì)含量(選)選做31.考瑪斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定蛋白質(zhì)的原理介紹2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作3.樣品的測(cè)定驗(yàn)證性25醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白必做31.蛋白質(zhì)電泳的一般原理介紹2.電泳裝置的介紹3.點(diǎn)樣4.上樣5.醋酸纖維素薄膜電泳驗(yàn)證性26酶的性質(zhì)必做61.溫度對(duì)酶活力的影響2.pH對(duì)酶活性的影響3.唾液淀粉酶的活化和抑制結(jié)果分析4.酶的專(zhuān)一性驗(yàn)證性27維生素C的定量測(cè)定必做31.分光光度法測(cè)定維生素C的原理介紹2.樣品材料的準(zhǔn)備3.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作4.樣品中Vc含量的測(cè)定驗(yàn)證性28核酸的提取及性質(zhì)鑒定必做121.資料查詢2.確定材料3.設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)4.提交實(shí)驗(yàn)可行性報(bào)告5.具體實(shí)驗(yàn)操作(1)核酸的分離(2)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)(3)純度鑒定和含量測(cè)定6.撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告設(shè)計(jì)性29纖溶酶的純化與鑒定必做121.粗酶液的抽提2.上清用60%飽和度的硫酸銨鹽析3.透析脫鹽或者SephadexG-15脫鹽4.SephadexG-100凝膠層析分離粗品5.聚丙烯酰胺凝膠電泳對(duì)纖溶酶進(jìn)行純化和鑒定綜合性210脂肪酸的β-氧化必做31.脂肪酸的β—氧化測(cè)定的基本原理介紹2.樣品的處理3.酮體的測(cè)定4.結(jié)果計(jì)算驗(yàn)證性211氨基酸轉(zhuǎn)移作用與層析法鑒定必做61.紙層析法的基本原理介紹2.轉(zhuǎn)氨酶的提取3.轉(zhuǎn)氨反應(yīng)4.苯酚水平層析驗(yàn)證轉(zhuǎn)氨反應(yīng)5.結(jié)果分析驗(yàn)證性2三、成績(jī)考核方法:1.平時(shí)成績(jī):占總成績(jī)50%(包括出勤、提問(wèn)、實(shí)驗(yàn)操作及報(bào)告等);2.試卷成績(jī):占總成績(jī)50%(試卷成績(jī));3.綜合考核成績(jī):平時(shí)成績(jī)50%+試卷成績(jī)50%=100%。四、教材及主要參考書(shū):1.教材:《基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》白玲,復(fù)旦大學(xué)出版社2004年2.主要參考書(shū):《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)原理和方法》李建武等北京大學(xué)出版社1994《
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