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PAGEPAGE5專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)過關(guān)檢測(時間:60分鐘,總分值:100分)一、選擇題(共25小題,每題2分,共50分)1.以下表達(dá)錯誤的選項是()A.改變NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色C.用電泳法可別離帶電性質(zhì)、分子大小和形狀不同的蛋白質(zhì)D.用透析法可去除蛋白質(zhì)樣品中的小分子物質(zhì)答案:A2.在DNA提取過程中,最好使用塑料試管和燒杯,目的是()A.不易破碎B.減少提取過程中DNA的損失C.增加DNA的含量D.容易洗刷答案:B3.以下關(guān)于血紅蛋白提取和別離的過程及原理的表達(dá),正確的選項是()A.紅細(xì)胞洗滌過程中要參加5倍體積的蒸餾水,重復(fù)洗滌3次B.將血紅蛋白溶液放在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液中透析12hC.凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻,不能有氣泡存在D.蛋白質(zhì)通過凝膠時,相對分子質(zhì)量較大的移動速度慢答案:C4.以下有關(guān)“血紅蛋白的提取和別離〞的相關(guān)表達(dá),不正確的選項是()A.可通過SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度B.將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析,其目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)C.血紅蛋白釋放時參加有機溶劑,其目的是使血紅蛋白溶于有機溶劑D.整個過程不斷用磷酸緩沖液處理,是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)答案:C5.以下對有關(guān)實驗的表達(dá),正確的選項是()A.最先從凝膠色譜柱中別離出來的是相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)分子B.向初步純化的DNA中參加二苯胺溶液,可直接觀察到溶液呈藍(lán)色C.加酶洗衣粉常用的酶制劑包括堿性脂肪酶、酸性蛋白酶等D.裝填凝膠色譜柱時,下端的尼龍管應(yīng)先關(guān)閉后翻開答案:A6.將粗提取的DNA絲狀物分別參加物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液、物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液、體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液中,然后用放有紗布的漏斗過濾,分別得到濾液P、Q、R以及存留在紗布上的黏稠物p、q、r,其中由于含DNA少可以丟棄的是()A.P、Q、RB.p、q、rC.P、q、R D.p、Q、r答案:C7.假設(shè)選擇的實驗材料為植物細(xì)胞,破碎細(xì)胞時要參加一定量的洗滌劑和食鹽。參加食鹽的目的是()A.利于DNA的溶解B.別離DNA和蛋白質(zhì)C.溶解細(xì)胞膜D.溶解蛋白質(zhì)答案:A8.下面不能影響DNA粗提取含量的是()A.選材B.洗滌劑的用量C.二苯胺的用量D.攪拌和研磨的程度答案:C9.粗提取DNA的最后一步用到冷卻的酒精溶液,DNA會以白色絲狀物的形態(tài)析出,其中每一根白色絲狀物是()A.一條脫氧核苷酸鏈B.一個DNA分子C.扭結(jié)在一起的多個DNA分子D.一條染色體答案:C10.DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)解開的溫度范圍是()A.10~20℃ B.80~C.20~30℃ D.40~答案:B11.以下有關(guān)PCR技術(shù)的說法,不正確的選項是()A.PCR技術(shù)是在細(xì)胞外完成的B.PCR技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)C.PCR技術(shù)的原理與DNA復(fù)制的原理不同D.PCR技術(shù)的前提是有一段的目的基因的核苷酸序列答案:C12.關(guān)于DNA的復(fù)制,以下表達(dá)正確的選項是()A.DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從5'端延伸DNA鏈B.DNA復(fù)制不需要引物C.引物與DNA母鏈通過堿基互補配對進(jìn)行結(jié)合D.DNA的合成方向總是從子鏈的3'端向5'端延伸答案:C13.PCR一般要經(jīng)過三十屢次循環(huán),從第二輪循環(huán)開始,上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反響,由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈作模板時將()A.仍與引物Ⅰ結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延伸B.無需與引物結(jié)合,在酶的作用下從頭合成子鏈C.同時與引物Ⅰ和引物Ⅱ結(jié)合進(jìn)行子鏈延伸D.與引物Ⅱ結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延伸答案:D14.PCR利用了DNA的熱變性原理,PCR儀實際上也是一種能自動調(diào)控溫度的儀器。以下對PCR過程中“溫度的控制〞的說法,錯誤的選項是()A.PCR反響需要高溫,是為了確保模板鏈?zhǔn)菃捂淏.延伸的溫度必須高于復(fù)性溫度,而低于變性溫度C.要用耐高溫的DNA聚合酶D.需要耐高溫的解旋酶答案:D15.復(fù)性溫度是影響PCR特異性的較重要因素。變性后溫度快速冷卻至40~60℃A.由于模板DNA比引物復(fù)雜得多B.引物和模板之間的碰撞結(jié)合時機遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于模板互補鏈之間的碰撞C.參加引物的量足夠多而模板鏈數(shù)量少D.模板鏈加熱解旋已經(jīng)變性不可能再次結(jié)合答案:D16.在PCR過程中,一般進(jìn)行自動控制的是()A.引物的設(shè)計B.反響成分的配制C.移液器槍頭的更換D.溫度由94℃→55℃→答案:D17.為了提取血紅蛋白,從學(xué)校附近的屠宰場索取新鮮的豬血,對豬血處理的正確操作是()A.要在采血容器中預(yù)先參加抗凝血劑檸檬酸鈉B.取血回來后,馬上進(jìn)行高速長時間離心C.將離心后的血細(xì)胞參加清水緩慢攪拌D.重復(fù)洗滌直到上清液呈紅色為止答案:A18.利用離心法純化蛋白質(zhì)主要是利用了蛋白質(zhì)的 ()A.結(jié)構(gòu)與組成B.種類和數(shù)量C.大小和密度D.所攜帶電荷的多少答案:C19.有資料顯示,在非洲,作為鐮刀形細(xì)胞貧血癥基因攜帶者更能適應(yīng)于當(dāng)?shù)氐沫h(huán)境。有人認(rèn)為這種人的血紅蛋白可能與正常人或鐮刀形細(xì)胞貧血癥病人的有一定差異。為證實這種猜測,需對攜帶者的血紅蛋白進(jìn)行實際的檢測,而欲要檢測,就必須別離得到這種血紅蛋白。試想別離提純鐮刀形細(xì)胞貧血癥攜帶者(Aa)的血紅蛋白時,用不到的藥品或儀器是 ()A.瓊脂糖 B.磷酸緩沖液C.離心機 D.自來水答案:D20.以下有關(guān)PCR技術(shù)的表達(dá),錯誤的選項是()A.PCR技術(shù)一定需要解旋酶和DNA聚合酶B.DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,而只能從引物的3'端延伸DNA鏈C.PCR的引物的根本單位是脫氧核苷酸或核糖核苷酸D.擴增DNA時,需要參加兩種引物答案:A21.以下關(guān)于高中生物學(xué)實驗的根本原理,表達(dá)不正確的選項是()A.噬菌體須在活菌中增殖培養(yǎng)是因其缺乏獨立的代謝系統(tǒng)B.提取組織DNA是利用不同化合物在溶劑中溶解度的差異C.成熟植物細(xì)胞在高滲溶液中發(fā)生質(zhì)壁別離是因為細(xì)胞壁具有選擇透(過)性D.PCR呈指數(shù)擴增DNA片段是因為上一輪反響產(chǎn)物可作為下一輪反響模板答案:C22.對含血紅蛋白的樣品透析和洗脫均用到磷酸緩沖液。磷酸緩沖液的pH依次為()、8.0 B.8.0、5.0C.7.0、8.0 D.7.0、7.0答案:D23.在血紅蛋白別離過程中,如果紅色帶區(qū)歪曲、散亂、變寬,與其有關(guān)的主要是()A.樣品的處理B.凝膠色譜柱的裝填C.洗脫過程D.凝膠色譜柱的制作答案:B24.下表是關(guān)于DNA的粗提取與鑒定實驗中所使用的材料、操作及其作用的表述,正確的選項是()試劑操作作用A檸檬酸鈉溶液與雞血混合保持細(xì)胞形狀B蒸餾水與雞血細(xì)胞混合防止血液凝固C蒸餾水參加到溶解有DNA的NaCl溶液中析出DNA絲狀物D冷卻的酒精參加到過濾后含DNA的NaCl溶液中產(chǎn)生特定的顏色反響答案:C25.以下圖甲是用DNA測序儀測出的某人DNA片段的堿基排列順序。圖乙是DNA測序儀測出的另外四個DNA片段的堿基排列順序,請認(rèn)真比擬這四幅圖,其中與所給樣本堿基排列順序最相似的是()答案:C二、非選擇題(共4小題,共50分)26.(8分)關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定〞的實驗裝置如以下圖。 (導(dǎo)學(xué)號52260068)(1)實驗材料選用雞血細(xì)胞液,而不用雞全血,主要原因是雞血細(xì)胞液中含量較高。
(2)在圖A所示的實驗步驟中,加蒸餾水20mL的目的是。通過圖B所示的步驟取得濾液,再在濾液中參加物質(zhì)的量濃度為2mol/LNaCl溶液的目的是。圖C所示實驗中加蒸餾水的目的是。
(3)為鑒定實驗所得絲狀物的主要成分是DNA,可用在沸水浴的條件下呈現(xiàn)。
解析:(1)雞血細(xì)胞中含較多的DNA,而血漿中不含DNA,因此,實驗材料應(yīng)用雞血細(xì)胞液而不用雞全血。(2)要明確區(qū)別兩次加蒸餾水的目的,第一次目的是讓雞血細(xì)胞吸水漲破,釋放出DNA;第二次加蒸餾水是為了降低NaCl溶液的濃度,使溶解于物質(zhì)的量濃度為2mol/LNaCl溶液中的DNA析出。(3)此題考查DNA的鑒定,可以加二苯胺,在沸水浴的條件下變藍(lán)色。答案:(1)DNA(2)使血細(xì)胞吸水漲破,釋放出DNA使濾液中的DNA溶于鹽溶液使DNA析出(3)二苯胺藍(lán)色27.(12分)PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒错?技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),以下圖表示合成過程,請據(jù)圖分析答復(fù)以下問題。(1)A過程高溫使DNA變性解旋,對該過程的原理表達(dá),正確的選項是()A.該過程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵B.該過程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵C.該過程不需要解旋酶的作用D.該過程與人體細(xì)胞的過程完全相同(2)C過程要用到的酶是。這種酶在高溫下仍保持活性,因此在PCR擴增時可以參加,(需要/不需要)再添加。PCR反響除提供酶外,還需要滿足的根本條件有
。
(3)如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記,游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記,控制“95℃~55℃~72℃〞溫度循環(huán)3次,那么在形成的子代DNA中含有15(4)如果模板DNA分子共有a個堿基對,其中含有胞嘧啶m個,那么該DNA復(fù)制10次,需要參加胸腺嘧啶脫氧核苷酸個。
(5)PCR中由堿基錯配引起的變異屬于。假設(shè)對一個DNA進(jìn)行擴增,第一次循環(huán)時某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯配,那么擴增假設(shè)干次后檢測所用DNA的擴增片段,與原DNA相應(yīng)片段相同的占。
解析:(1)高溫所起的作用類似于解旋酶,使雙鏈DNA變?yōu)閱捂湣?2)C過程為PCR技術(shù)的延伸階段,當(dāng)系統(tǒng)溫度上升至72℃左右,溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下合成新的DNA鏈。Taq(3)PCR技術(shù)遵循半保存復(fù)制的特點。經(jīng)過三次循環(huán),共產(chǎn)生23個DNA分子,其中有2個DNA分子含有15N標(biāo)記。(4)在一個雙鏈DNA分子中,C+T占堿基總數(shù)的一半,故T的數(shù)目為a-m,復(fù)制10次,相當(dāng)于新增加了(210-1)個DNA分子。故需補充T的數(shù)目為(210-1)(a-m)。(5)基因中的堿基對改變屬于基因突變。對一個DNA進(jìn)行擴增,第一次循環(huán)時某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯配,第二次以后按正常配對方式進(jìn)行擴增,錯配鏈作模板擴增的都是錯誤的DNA分子,原正常鏈擴增得到的DNA分子都是正常的DNA分子,故假設(shè)干次后檢測所用DNA的擴增片段,與原DNA相應(yīng)片段相同的占3/4。答案:(1)C(2)TaqDNA聚合酶一次性不需要DNA模板、引物、四種脫氧核苷酸、適當(dāng)?shù)臏囟?3)25%(4)(210-1)(a-m)(5)基因突變75%28.(14分)下面是凝膠色譜法別離蛋白質(zhì)時樣品的參加(圖Ⅰ)和洗脫(圖Ⅱ)示意圖,請據(jù)圖答復(fù)以下問題。(1)在加樣示意圖中,正確的加樣順序是
。
(2)用吸管加樣時,應(yīng)注意正確操作,分別是:①;
②;
③。
(3)等樣品時,才參加緩沖液。
(4)別離血紅蛋白時,待接近色譜柱底端時,用試管收集流出液,每mL收集一管,連續(xù)收集。
解析:進(jìn)行凝膠色譜操作加樣時,加樣前,翻開色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到與凝膠面平齊,用吸管小心地將1mL透析后的樣品加到色譜柱的頂端,注意不可破壞凝膠面。吸管應(yīng)貼著管壁加樣,待樣品完全進(jìn)入凝膠層后才可關(guān)閉下端出口,參加緩沖液,待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時,用試管收集流出液,每5mL收集一管,連續(xù)收集。答案:(1)④→①→②→③(2)不要觸及破壞凝膠面貼著管壁加樣使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動(3)完全進(jìn)入凝膠層(4)紅色的蛋白質(zhì)529.(16分)如今人類已跨入了蛋白質(zhì)時代,對蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用,首先需要獲得高純度的蛋白質(zhì)。請答復(fù)以下問題。 (導(dǎo)學(xué)號52260069)(1)蛋白質(zhì)的提取和別離一般分為四步:、、?和純度鑒定。
(2)如果要從紅細(xì)胞中別離出血紅蛋白,實驗前取新鮮血液要在采血容器中預(yù)先參加檸檬酸鈉,這樣做的目的是。
(3)血紅蛋白的提取又可以細(xì)分為:紅細(xì)胞的洗滌、、別離血紅蛋白溶液和。其中別離血紅蛋白溶液時需要用到(儀器)別離出下層紅色透明液體。
(4)裝填凝膠色譜柱時,要注意色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在,一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡必須重新裝。這是因為
。
(5)欲探究色譜柱的高度是否是影響蛋白質(zhì)別離的因素,應(yīng)把
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