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實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)心功能的影響因素第一頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日學(xué)習(xí)離體在位牛蛙心臟的恒壓灌流法,觀察前、后負(fù)荷,心肌收縮能力對(duì)心肌收縮功能的影響制備藥物性全心衰的模型觀察強(qiáng)心藥物對(duì)衰竭心肌的治療作用目的第二頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日原理一般作為衡量心功能的指標(biāo)是心輸出量,在此次實(shí)驗(yàn)中利用離體在位的牛蛙心臟,消除了神經(jīng)反射對(duì)心率變動(dòng)的影響,所以相當(dāng)于在心率基本恒定的情況下,主要考慮每搏輸出量對(duì)心輸出量的影響。在一定范圍內(nèi),回心血量增加,心室舒張末期容積(前負(fù)荷)增加,使心肌纖維初長(zhǎng)度拉長(zhǎng),心肌收縮力加強(qiáng),每博輸出量增加.即Frank-Starling定律。當(dāng)心室后負(fù)荷增加時(shí),心室收縮射血克服后負(fù)荷增加,心室壁收縮期張力增大,作功增加。心肌收縮性能改變是指心肌內(nèi)在收縮機(jī)制改變所引起的收縮力量的改變,與前后負(fù)荷無(wú)關(guān),而可受去甲腎上腺素、乙酰膽堿等體液因素的影響。改變心肌收縮性能可使心功能曲線左移或右移。第三頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日第四頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日第五頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日主要儀器設(shè)備蛙類手術(shù)器械恒壓灌流裝置動(dòng)脈和靜脈導(dǎo)管10ml量筒滴管藥物:1:10000去甲腎上腺素、1:10000乙酰膽堿、2×10-6硫酸鎘任氏液、A、B兩種藥。第六頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日恒壓灌流裝置第七頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日第八頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日離體在位牛蛙心臟灌流模型制備毀腦、脊髓,剪去胸骨、鎖骨,固定兩前肢在蛙板上。剪開(kāi)心包膜,暴露心臟分離左右主動(dòng)脈,在主動(dòng)脈下穿兩根線備用,另在右主動(dòng)脈下穿線結(jié)扎。第九頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日離體在位牛蛙心臟灌流模型制備用玻璃分針將心臟翻向頭側(cè),可看到靜脈竇與下腔靜脈及左右肝靜脈,小心分離并剪開(kāi)與左右肝靜脈相連的心包膜等組織,在其下方穿一根線備用;同時(shí)將剛才穿于主動(dòng)脈下的一根備用線一起穿過(guò),結(jié)扎此線,將兩主動(dòng)脈和下腔靜脈以及左右肝靜脈以外的全部血管扎住。結(jié)扎將絲線下壓,切勿扎到靜脈竇。第十頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日右肝靜脈插管,用備用線結(jié)扎固定。然后在左主動(dòng)脈遠(yuǎn)端剪一小口,然后打開(kāi)靜脈插管開(kāi)關(guān),用任氏液沖洗心臟,注意不要進(jìn)氣泡。第十一頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日將事先充滿任氏液的動(dòng)脈插管向心性插入左主動(dòng)脈,作為心搏出口,并用備用線結(jié)扎固定。第十二頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)觀察1、觀測(cè)項(xiàng)目的操作和有效心功率計(jì)算方法測(cè)量:每分輸出量:用玻璃皿收集心臟搏出的灌流液3分鐘,用小量筒測(cè)定搏出液量。于然后除以3。同時(shí)計(jì)數(shù)心率。有效心功率(g.cm/min)=心輸出量(ml/min)×負(fù)荷(側(cè)管高度)(cm)×水密度(1g/ml)繪制心功能曲線:以前負(fù)荷為橫坐標(biāo),以有效心功率為縱坐標(biāo)。記下不同前負(fù)荷下的有效心功率之點(diǎn),將各點(diǎn)連結(jié)成線即為該心臟的功能曲線。第十三頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日2、改變前負(fù)荷對(duì)心功能的影響固定后負(fù)荷于15cmH2O(使動(dòng)脈插管的連接管的高度在15cm高度),調(diào)節(jié)儲(chǔ)液管的高度,使零點(diǎn)分別處于10cm、20cm、30cm、40cm和50cm等高度(即前負(fù)荷),分別依次測(cè)定各高度下的心輸出量、心率,從而計(jì)算出有效心功率,填入表格。第十四頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日前負(fù)荷對(duì)心功能影響固定于后負(fù)荷于15cmH2O
HR(B/min)CO(ml/min)有效心功率(g·cm/min)前負(fù)荷對(duì)照NEACh心衰()藥對(duì)照NEACh心衰()藥對(duì)照NEACh心衰()藥心功能曲線(橫坐標(biāo):前負(fù)荷縱坐標(biāo):有效心功率
)。第十五頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日3、改變后負(fù)荷對(duì)心功能的影響把前負(fù)荷固定在20cmH2O,改變動(dòng)脈插管的接出管的高度,每檔的間距為5厘米,依次為5、10、15、20和25cm,觀察并測(cè)定上述“1”中各項(xiàng)指標(biāo)。填入表格,注意:在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,每改變一次側(cè)管高度要穩(wěn)定1-2分鐘,再進(jìn)行測(cè)定;當(dāng)側(cè)管高度超過(guò)心臟代償范圍至有效心功率下降時(shí)(心衰),應(yīng)不再繼續(xù)增加側(cè)管高度,把側(cè)管高度降回到側(cè)管1,保持灌流,待心輸出量基本達(dá)到測(cè)定前時(shí),以此為心縮力恢復(fù)的正常對(duì)照值,再進(jìn)行以下的實(shí)驗(yàn)。(下面的各次實(shí)驗(yàn)也遵循此原則)第十六頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日后負(fù)荷對(duì)心功能影響固定于前負(fù)荷于20cmH2O
HR(B/min)CO(ml/min)有效心功率(g·cm/min)后負(fù)荷對(duì)照NEACh心衰()藥對(duì)照NEACh心衰()藥對(duì)照NEACh心衰()藥心功能曲線(橫坐標(biāo):前負(fù)荷縱坐標(biāo):有效心功率
)。第十七頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日4、心肌收縮性能對(duì)心功能的影響
(周日不做)去甲腎上腺素:1:10000NE1-2滴用滴管均勻滴加于心臟表面,待1-2分鐘效果明顯后,注意數(shù)心率基本不變?cè)僦貜?fù)“2”或“3”實(shí)驗(yàn)步驟。乙酰膽堿:將NE沖洗干凈、恢復(fù)后,滴加1:10000ACh1-2滴于心臟表面,待1-2分鐘效果明顯后,注意數(shù)心率基本不變?cè)僦貜?fù)“2”或“3”實(shí)驗(yàn)步驟。
注意:藥物要滴在心室上,不要滴在靜脈竇上。第十八頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日5.制備藥物性全心衰待心臟活動(dòng)恢復(fù)后,用硫酸鎘任氏液代替任氏液灌流3-4分鐘,重復(fù)“2”或“3”實(shí)驗(yàn)步驟,觀察并比較更換灌流液前后各項(xiàng)指標(biāo)有何不同。第十九頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日6.藥物治療分組進(jìn)行藥物療效觀察第一組:往心室表面滴2滴A藥,待作用明顯后(5-10min),重復(fù)“2”或“3”實(shí)驗(yàn)步驟。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每3-4分鐘往心室表面滴1滴A藥。第二組:往心室表面滴1-2滴B藥,待作用明顯后,重復(fù)“2”或“3”實(shí)驗(yàn)步驟。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每3-4分鐘往心室表面滴1滴B藥。注:A藥:可抑制鈉泵的活動(dòng);
B藥:β受體激動(dòng)劑。第二十頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)分組(周六用)A組:前負(fù)荷A組對(duì)照、心衰、A藥B組:前負(fù)荷B組對(duì)照、心衰、B藥C組:前負(fù)荷C組對(duì)照、A藥、NED組:前負(fù)荷D組對(duì)照、B藥、ACh第二十一頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)分組(周六用)E組:后負(fù)荷A組對(duì)照、心衰、A藥F組:后負(fù)荷B組對(duì)照、心衰、B藥G組:后負(fù)荷C組對(duì)照、A藥、NEH組:后負(fù)荷D組對(duì)照、B藥、ACh第二十二頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日注意:
1.開(kāi)空調(diào)。
2.輸液速度應(yīng)調(diào)至前負(fù)荷為10cm、后負(fù)荷為5cm時(shí),搏出量為20-25滴/分。調(diào)好后,以后的輸液速度不能再改變。
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果填在發(fā)下的表格中,計(jì)算結(jié)果要求取小數(shù)點(diǎn)后3位有效數(shù)字。同時(shí)要求填寫同學(xué)的名字和Email地址(Email地址每組填寫一個(gè))。
4.每組寫一篇論文,題目自擬,結(jié)果自選(可選部分結(jié)果)。要求在收到實(shí)驗(yàn)結(jié)果后2周內(nèi)上交論文至生理學(xué)辦公室(7A225)。要注明論文的每一部分分別由哪位同學(xué)所完成。
5.值日。第二十三頁(yè),共二十五頁(yè),2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)分組
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