版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
實(shí)驗(yàn)四食品中大腸菌群的測定第一頁,共十六頁,2022年,8月28日一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆沾竽c菌群的原理及其檢驗(yàn)方法,以判別食品的衛(wèi)生質(zhì)量了解MPN測定法在食品衛(wèi)生檢驗(yàn)中的意義第二頁,共十六頁,2022年,8月28日二、實(shí)驗(yàn)原理大腸菌群是指一群在一定培養(yǎng)條件下可發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽孢桿菌。該菌主要來源自人畜糞便,作為糞便污染指標(biāo)評價(jià)食品的衛(wèi)生狀況,推斷食品中腸道致病菌污染的可能。第三頁,共十六頁,2022年,8月28日最近似數(shù)測定法(MPN)是指對未知樣品做連續(xù)的10倍稀釋,選擇3個連續(xù)的10倍稀釋液,每種稀釋液接種3管裝有培養(yǎng)基的試管中培養(yǎng),根據(jù)LST初發(fā)酵試驗(yàn)以及BGLB發(fā)酵證實(shí)實(shí)驗(yàn),證實(shí)大腸菌群的陽性管數(shù),查MPN檢索表,報(bào)告每g(mL)樣品中大腸菌群的最可能數(shù)。食品中大腸菌群數(shù)以每g(mL)樣品中大腸菌群的最可能數(shù)來表示,即為大腸菌群MPN值。第四頁,共十六頁,2022年,8月28日三、實(shí)驗(yàn)器材(一)培養(yǎng)基月桂基硫酸鹽蛋白胨肉湯(LST)培養(yǎng)基煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)培養(yǎng)基(二)實(shí)驗(yàn)材料市售飲料(三)其他三角瓶,試管,培養(yǎng)皿,移液管(四)儀器超凈工作臺,電子天平,高壓蒸汽滅菌鍋第五頁,共十六頁,2022年,8月28日四、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備(一)配制培養(yǎng)基和試劑(以中央臺為單位)
1、配制生理鹽水:1000mL
NaCl8.5g水1000mL
分裝:3個三角瓶(含玻珠)中,225mL/個9支試管,3支/組,9mL/支
滅菌:121~126℃滅菌20min第六頁,共十六頁,2022年,8月28日2、月桂基硫酸鹽蛋白胨肉湯(LST)培養(yǎng)基:300mL分裝到27個已裝有杜氏小管試管中,10mL/個包扎(3支一捆),112~115℃滅菌30min胰蛋白胨
6g
NaCl
1.5g乳糖
1.5gK2HPO40.825gKH2PO40.825g
十二烷基硫酸鈉
0.03g水
300mLpH6.8第七頁,共十六頁,2022年,8月28日3、煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)培養(yǎng)基:150mL分裝到12個已裝有杜氏小管試管中,10mL/個包扎,112~115℃滅菌30min蛋白胨
1.5g乳糖
1.5g牛膽粉溶液30mL
0.1%煌綠水溶液
2mL
水
150mLpH7.2牛膽粉溶液制法:將3g牛膽粉溶于30mL水中,調(diào)pH至7.0~7.5BGLB制法:先將蛋白胨、乳糖溶于約100ml水中,加入牛膽粉溶液30mL,調(diào)節(jié)pH,再加入0.1%煌綠水溶液,最后用水補(bǔ)足到150ml,用紗布過濾后,再分裝到試管中。第八頁,共十六頁,2022年,8月28日(二)其它器具(每個組準(zhǔn)備)移液管10mL1支/組1mL
10支/組第九頁,共十六頁,2022年,8月28日五、實(shí)驗(yàn)步驟1、樣品處理:
以無菌操作,先用酒精棉球擦拭樣品表面,用無菌剪刀將包裝剪破,量取檢樣25mL放入225mL滅菌生理鹽水當(dāng)中,充分振蕩,混合均勻,制成10-1稀釋度樣品2、梯度稀釋法依次稀釋樣品到10-4第十頁,共十六頁,2022年,8月28日3、選擇10-2、10-3、10-4三個稀釋度的樣品均液,用無菌移液管分別吸取1mL到LST發(fā)酵液試管中,每個稀釋度做3個平行(共9管)。4、37℃培養(yǎng)48h5、觀察LST管中小倒管里是否有氣泡。如有氣泡,則繼續(xù)按照下述要求實(shí)驗(yàn);如無氣泡,則是大腸陰性管(-)第十一頁,共十六頁,2022年,8月28日6、如LST小倒管中有氣泡,則按照無菌操作要求,用接種環(huán)將產(chǎn)氣LST發(fā)酵液接種到BGLB試管中,一只產(chǎn)氣LST發(fā)酵液對應(yīng)一只BGLB試管。7、37℃培養(yǎng)48h8、觀察BGLB小倒管中是否有氣泡,如有氣泡,則記為大腸陽性管(+);如無氣泡,則記為大腸陰性管(-)。第十二頁,共十六頁,2022年,8月28日大腸菌群計(jì)數(shù)檢驗(yàn)流程0將產(chǎn)氣的試管內(nèi)樣品接種到BGLB肉湯LST不產(chǎn)氣(-)小導(dǎo)管里無氣泡LST產(chǎn)氣(+)第十三頁,共十六頁,2022年,8月28日9、根據(jù)經(jīng)確證后的對應(yīng)濃度陽性管數(shù)查MPN表,報(bào)告樣品中大腸菌群MPN值。陽性管數(shù)MPN95%可信限0.100.010.001下限上限000<3.0-9.50013.00.159.61003.60.1718333>1100420-第十四頁,共十六頁,2022年,8月28日五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析經(jīng)查MPN表,樣品中大腸菌群數(shù)為
MPN/g(mL)陽性管數(shù)0.010.0010.0001LST發(fā)酵管BGLB證實(shí)管分析第十五頁,共十六頁,202
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 上海財(cái)經(jīng)大學(xué)《馬克思主義文論》2023-2024學(xué)年第一學(xué)期期末試卷
- 地槽回填施工方案模板
- 山西警察學(xué)院《作物栽培學(xué)(Ⅱ)》2023-2024學(xué)年第一學(xué)期期末試卷
- 2025年蓄水池施工與污水處理一體化服務(wù)合同2篇
- 2025年茶樓租賃合同能源管理專項(xiàng)條款3篇
- 山東省金鄉(xiāng)縣重點(diǎn)達(dá)標(biāo)名校2025屆中考生物押題試卷含解析
- 【8生(RJ)期末】蚌埠市2024-2025學(xué)年八年級上學(xué)期期末考試生物試題
- 二零二五年汽車零部件樣機(jī)定制與質(zhì)量檢驗(yàn)合同3篇
- 2025年度體育賽事專用場地租賃合同范本4篇
- 二零二五年度4S店汽車銷售市場調(diào)研合同范本3篇
- 2025年湖北武漢工程大學(xué)招聘6人歷年高頻重點(diǎn)提升(共500題)附帶答案詳解
- 【數(shù) 學(xué)】2024-2025學(xué)年北師大版數(shù)學(xué)七年級上冊期末能力提升卷
- GB/T 26846-2024電動自行車用電動機(jī)和控制器的引出線及接插件
- 遼寧省沈陽市皇姑區(qū)2024-2025學(xué)年九年級上學(xué)期期末考試語文試題(含答案)
- 2024年國家工作人員學(xué)法用法考試題庫及參考答案
- 妊娠咳嗽的臨床特征
- 國家公務(wù)員考試(面試)試題及解答參考(2024年)
- 《阻燃材料與技術(shù)》課件 第6講 阻燃纖維及織物
- 2024年金融理財(cái)-擔(dān)保公司考試近5年真題附答案
- 泰山產(chǎn)業(yè)領(lǐng)軍人才申報(bào)書
- 高中語文古代文學(xué)課件:先秦文學(xué)
評論
0/150
提交評論