實(shí)驗(yàn) 玻璃器皿的包扎及滅菌

實(shí)驗(yàn)玻璃器皿的包扎及滅菌第一頁，共十五頁，2022年，8月28日課前預(yù)習(xí)與目的要求【課前預(yù)習(xí)】

1.高壓蒸汽滅菌原理。

2.上海申安LDZX-50KBS滅菌鍋的使用方法。【目的要求】

1.學(xué)習(xí)并掌握玻璃器皿的包扎方法。

2.掌握高壓蒸汽滅菌的基本原理及操作方法。第二頁，共十五頁，2022年，8月28日基本原理微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)所用的器皿，大多數(shù)要進(jìn)行消毒、滅菌，才能用來培養(yǎng)微生物。玻璃器皿的包裝方法正確合理，在使用過程中才能有效防止雜菌的污染。玻璃器皿包裝好后，一般用高壓蒸氣滅菌法進(jìn)行滅菌。第三頁，共十五頁，2022年，8月28日基本原理高壓蒸氣滅菌是將待滅菌的物品放在一個(gè)密閉的加壓滅菌鍋內(nèi)，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸氣。待水蒸氣急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，關(guān)閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時(shí)由于蒸氣不能溢出，而增加了滅菌鍋內(nèi)的壓力，從而使沸點(diǎn)增高，得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。第四頁，共十五頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)用品棉花，試管，培養(yǎng)皿，紗布，三角瓶，橡皮筋，量筒，牛皮紙（或舊報(bào)紙），LDZX-50KBS立式高壓蒸氣滅菌鍋等。第五頁，共十五頁，2022年，8月28日方法步驟1.熟悉微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的結(jié)構(gòu)與功能。2.清洗試管、三角瓶，培養(yǎng)皿等玻璃器具，烘干。3.制作試管棉塞及三角瓶棉塞（參照微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)）。4.用量筒或吸管取適量自來水于三角瓶和試管中，包裝好以制備無菌水。5.包裝空培養(yǎng)皿，移液管。6.滅菌（參照Ⅰ）。第六頁，共十五頁，2022年，8月28日玻璃器皿清洗方法玻璃器皿在使用過程中確保干凈，用過的器皿應(yīng)及時(shí)清洗。器皿一般可以用去污粉、肥皂或洗潔凈清洗。瓊脂培養(yǎng)基的器皿應(yīng)先將培養(yǎng)基刮去。瓊脂和固體物不能丟棄到水池中，以免堵塞管道。清洗方法詳見Ⅰ。第七頁，共十五頁，2022年，8月28日棉塞的制作棉塞的作用有二：一是防止雜菌污染，二是保證通氣良好。形狀，大小，松緊適度。第八頁，共十五頁，2022年，8月28日培養(yǎng)皿的包裝培養(yǎng)皿常用舊報(bào)紙緊緊包裹，一包7～10套，包好后干熱或濕熱滅菌。也可用金屬筒包裝。第九頁，共十五頁，2022年，8月28日移液管的包裝作用：以免使用時(shí)將雜菌吹入其中，或不慎將微生物吸出管外。第十頁，共十五頁，2022年，8月28日試管和三角瓶的包裝試管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅膠塞；用二層報(bào)紙包扎好（如有牛皮紙，效果更好），進(jìn)行干熱或濕熱滅菌。試管較多時(shí)，一般7個(gè)或10個(gè)一組，再用雙層報(bào)紙包扎。第十一頁，共十五頁，2022年，8月28日上海申安LDZX-50KBS滅菌鍋的使用

1）打開電源與開關(guān)，檢查水位顯示燈；2）加滅菌物品；3）蓋緊；4）設(shè)定溫度和時(shí)間；5）查看排氣（水）閥旋至排氣處；6）排氣；7）結(jié)束后取物。第十二頁，共十五頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄自己制作的實(shí)驗(yàn)用品（含無菌水）名稱的規(guī)格與數(shù)量。第十三頁，共十五頁，2022年，8月28日注意事項(xiàng)1.實(shí)驗(yàn)前，熟悉實(shí)驗(yàn)室平面布局圖，了解實(shí)驗(yàn)儀器用品擺放規(guī)律及用途。2.制備無菌水時(shí)，試管裝水量要超過試管高度的1/5，三角瓶裝水量不要超過規(guī)格容量的1/2（裝量過多，滅菌過程中易噴出或潤(rùn)濕棉塞）；3.滅菌鍋的操作安全。第十四頁，共十五頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)報(bào)告1.高壓蒸氣滅菌開始之前，為什么要將鍋內(nèi)冷空氣排盡滅菌完畢后，為什么待壓力降低“0”時(shí)才能打開排氣閥，開