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實(shí)驗(yàn)玻璃器皿的包扎及滅菌第一頁,共十五頁,2022年,8月28日課前預(yù)習(xí)與目的要求【課前預(yù)習(xí)】
1.高壓蒸汽滅菌原理。
2.上海申安LDZX-50KBS滅菌鍋的使用方法。【目的要求】
1.學(xué)習(xí)并掌握玻璃器皿的包扎方法。
2.掌握高壓蒸汽滅菌的基本原理及操作方法。第二頁,共十五頁,2022年,8月28日基本原理微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)所用的器皿,大多數(shù)要進(jìn)行消毒、滅菌,才能用來培養(yǎng)微生物。玻璃器皿的包裝方法正確合理,在使用過程中才能有效防止雜菌的污染。玻璃器皿包裝好后,一般用高壓蒸氣滅菌法進(jìn)行滅菌。第三頁,共十五頁,2022年,8月28日基本原理高壓蒸氣滅菌是將待滅菌的物品放在一個(gè)密閉的加壓滅菌鍋內(nèi),通過加熱,使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸氣。待水蒸氣急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡,關(guān)閉排氣閥,繼續(xù)加熱,此時(shí)由于蒸氣不能溢出,而增加了滅菌鍋內(nèi)的壓力,從而使沸點(diǎn)增高,得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。第四頁,共十五頁,2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)用品棉花,試管,培養(yǎng)皿,紗布,三角瓶,橡皮筋,量筒,牛皮紙(或舊報(bào)紙),LDZX-50KBS立式高壓蒸氣滅菌鍋等。第五頁,共十五頁,2022年,8月28日方法步驟1.熟悉微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的結(jié)構(gòu)與功能。2.清洗試管、三角瓶,培養(yǎng)皿等玻璃器具,烘干。3.制作試管棉塞及三角瓶棉塞(參照微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù))。4.用量筒或吸管取適量自來水于三角瓶和試管中,包裝好以制備無菌水。5.包裝空培養(yǎng)皿,移液管。6.滅菌(參照Ⅰ)。第六頁,共十五頁,2022年,8月28日玻璃器皿清洗方法玻璃器皿在使用過程中確保干凈,用過的器皿應(yīng)及時(shí)清洗。器皿一般可以用去污粉、肥皂或洗潔凈清洗。瓊脂培養(yǎng)基的器皿應(yīng)先將培養(yǎng)基刮去。瓊脂和固體物不能丟棄到水池中,以免堵塞管道。清洗方法詳見Ⅰ。第七頁,共十五頁,2022年,8月28日棉塞的制作棉塞的作用有二:一是防止雜菌污染,二是保證通氣良好。形狀,大小,松緊適度。第八頁,共十五頁,2022年,8月28日培養(yǎng)皿的包裝培養(yǎng)皿常用舊報(bào)紙緊緊包裹,一包7~10套,包好后干熱或濕熱滅菌。也可用金屬筒包裝。第九頁,共十五頁,2022年,8月28日移液管的包裝作用:以免使用時(shí)將雜菌吹入其中,或不慎將微生物吸出管外。第十頁,共十五頁,2022年,8月28日試管和三角瓶的包裝試管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅膠塞;用二層報(bào)紙包扎好(如有牛皮紙,效果更好),進(jìn)行干熱或濕熱滅菌。試管較多時(shí),一般7個(gè)或10個(gè)一組,再用雙層報(bào)紙包扎。第十一頁,共十五頁,2022年,8月28日上海申安LDZX-50KBS滅菌鍋的使用
1)打開電源與開關(guān),檢查水位顯示燈;2)加滅菌物品;3)蓋緊;4)設(shè)定溫度和時(shí)間;5)查看排氣(水)閥旋至排氣處;6)排氣;7)結(jié)束后取物。第十二頁,共十五頁,2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄自己制作的實(shí)驗(yàn)用品(含無菌水)名稱的規(guī)格與數(shù)量。第十三頁,共十五頁,2022年,8月28日注意事項(xiàng)1.實(shí)驗(yàn)前,熟悉實(shí)驗(yàn)室平面布局圖,了解實(shí)驗(yàn)儀器用品擺放規(guī)律及用途。2.制備無菌水時(shí),試管裝水量要超過試管高度的1/5,三角瓶裝水量不要超過規(guī)格容量的1/2(裝量過多,滅菌過程中易噴出或潤(rùn)濕棉塞);3.滅菌鍋的操作安全。第十四頁,共十五頁,2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)報(bào)告1.高壓蒸氣滅菌開始之前,為什么要將鍋內(nèi)冷空氣排盡滅菌完畢后,為什么待壓力降低“0”時(shí)才能打開排氣閥,開
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