全波長儀器功能概述

全波長儀器功能概述第一頁，共七十八頁，2022年，8月28日Varioskan檢測光路系統(tǒng)第二頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlash的光學(xué)部件結(jié)構(gòu)VF的光學(xué)結(jié)構(gòu)由以下六個部件組成激發(fā)光部件產(chǎn)生用于熒光和光密度檢測的特定波長的光測量部件產(chǎn)生高清晰的光束用于熒光和光密度檢測，激發(fā)光參比檢測器被整合入測量部件發(fā)射部件對特定波長熒光和基于掃描模式的發(fā)光信號進行讀數(shù)光吸收測量模塊檢測穿過微孔的光密度信號熒光底讀模塊引導(dǎo)來自光譜掃描模塊的激發(fā)和發(fā)射光在底部檢測微孔板熒光靈敏的化學(xué)發(fā)光檢測部件檢測微孔板的光信號第三頁，共七十八頁，2022年，8月28日激發(fā)光部件光源使用氙閃燈作為光源，氙閃燈提供光密度和熒光檢測所需的寬廣的光譜范圍，脈沖功率為100Hz,只在測量時才激活，短的光脈沖可以進行準(zhǔn)確的時間分辨熒光檢測。一次檢測根據(jù)檢測質(zhì)量和檢測速度的要求可包括1-1000次閃爍脈沖。衍射次序選擇濾光片（截止濾光片）激發(fā)衍射次序濾光片實際就是Cut-off濾光片，用于阻止不想要的單色器的諧波發(fā)射，正確的衍射次序濾光片是自動選擇的。單色器單色器是基于衍射光柵，光柵的凹槽表面將不同顏色分散至不同的角度，通過光柵的轉(zhuǎn)動來選擇不同波長的光。帶寬選擇帶寬是由單色器的狹縫寬度來設(shè)定的，二種帶寬的選擇（5nm和12nm)通過控制狹縫來產(chǎn)生。第四頁，共七十八頁，2022年，8月28日干涉濾光片

interferencefilm

利用干涉原理只使特定光譜范圍的光通過的光學(xué)薄膜。通常由多層薄膜構(gòu)成。干涉濾光片種類繁多，用途不一，常見干涉濾光片分截止濾光片和帶通濾光片兩類截止濾光片能把光譜范圍分成兩個區(qū)，一個區(qū)中的光不能通過(截止區(qū))，而另一區(qū)中的光能充分通過（通帶區(qū)）。典型的截止濾光片有低通濾光片（只允許長波光通過）和高通濾光片（只允許短波光通過）它們均為多層介質(zhì)膜，具有由高折射率層和低折射率層交替構(gòu)成的周期性結(jié)構(gòu)帶通濾光片只允許較窄波長范圍的光通過，常見的是法布里-珀羅型濾光片，具體結(jié)構(gòu)為：玻璃襯底上涂一層半透明金屬層，接著涂一層氟化鎂隔層，再涂一層半透明金屬層，兩金屬層構(gòu)成了法布里-珀羅標(biāo)準(zhǔn)具的兩塊平行板。當(dāng)兩極的間隔與波長同數(shù)量級時，透射光中不同波長的干涉高峰分得很開，利用別的吸收型濾光片可把不允許透過的光濾掉，從而得到窄通帶的帶通濾光片，其通頻帶寬度遠比普通吸收型濾光片要窄。另外還有全電介質(zhì)的法布里-珀羅型濾光片根據(jù)需要，帶通濾光片的通頻帶可從紅外到紫外。在可見光區(qū)，彩色電視攝像機中可利用這種濾光片把像分離成不同顏色；在紅外區(qū)，常用于二氧化碳激光器、導(dǎo)彈制導(dǎo)系統(tǒng)及衛(wèi)星傳感器等第五頁，共七十八頁，2022年，8月28日測量部件測量光學(xué)部件是前表面的光鏡系統(tǒng)，用于產(chǎn)生不受波長約束的，非常鮮明光束，在測量位F進行熒光和光密度檢測。同時此測量部件收集進入發(fā)射讀數(shù)通道的發(fā)射光。在測量光束進入微孔前，先由參比傳感器測一下光束密度，參比傳感器的數(shù)據(jù)用于校準(zhǔn)結(jié)果，以補償光源長時間閃爍和短時閃爍強度的波動。第六頁，共七十八頁，2022年，8月28日發(fā)射光讀數(shù)模塊發(fā)射光單色器通過二個順序連接的衍射光柵單色器獲得高純度的光線，帶寬12nm。發(fā)射衍射順序濾光片用于阻止不想要的單色器產(chǎn)生的諧波發(fā)射發(fā)射光檢測器通過光電倍增管將發(fā)射光信號轉(zhuǎn)化為電子信號，動力學(xué)范圍自動可調(diào)或根據(jù)測量條件手工調(diào)節(jié)。手工調(diào)節(jié)有4種選擇：低、中低、中高、和高范圍。除熒光檢測，此模塊也可用于化學(xué)發(fā)光光譜掃描。第七頁，共七十八頁，2022年，8月28日光密度檢測模塊光密度測量是將激發(fā)光模塊作為光度測量的光源。光密度測量模塊位于測量位F第八頁，共七十八頁，2022年，8月28日熒光底讀模塊此模塊基于光纖將光由光譜掃描模塊傳輸至底讀模塊。此底讀光學(xué)部件位于測量位L。第九頁，共七十八頁，2022年，8月28日化學(xué)發(fā)光檢測模塊此模塊是選項，位于儀器前部，自動進樣器之間。連接至測量位L交叉干擾防護罩可阻止鄰近孔的干擾，根據(jù)板的類型自動設(shè)定縫隙。有明確的縫隙選擇可用于96、384和1536孔，大孔板還是使用96孔板的縫隙。第十頁，共七十八頁，2022年，8月28日光吸收檢測模式第十一頁，共七十八頁，2022年，8月28日波長選擇器檢測器Io=未被樣品吸收光的強度光源波長選擇器檢測器光源樣品I=被樣品吸收光的強度透光率(%T)=I/Iox100，吸光度A=-lg（I/Io）光吸收檢測模式原理第十二頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlash光吸收檢測模式特點---光譜范圍光源：高能量氙燈通過雙單色光發(fā)生器（DoubleMonochromator）進行分光，最大程度消除光柵

分光過程中所產(chǎn)生的游離雜散光，確保所產(chǎn)生的光譜更純波長范圍200–1000nm，波長連續(xù)可調(diào)，1nm遞增量第十三頁，共七十八頁，2022年，8月28日光程校正技術(shù)---PathlengthcorrectionPathlength水平光路檢測（分光光度計檢測方式）使用比色皿光程通常固定為1cm光程與液體體積無關(guān)OD值只取決于液體濃度A=€

cLA=吸光度值€=消光系數(shù)(摩爾吸光系數(shù))C=濃度L=光程(incm)比爾定律垂直光路檢測（微孔板檢測方式）使用微孔板光程與液體體積有關(guān)OD值取決于液體體積和濃度第十四頁，共七十八頁，2022年，8月28日對于已知濃度的樣品，其€c為常數(shù)（k=€c）公式中k為CorrectionFactor以水相溶液為例，水在970~998nm處有吸收峰（975nm為特征峰），AH2O=A975–A900，可確定1cm光程下純H2O的A（以水為例，純H2O的濃度為C=1000/18）故可根據(jù)水相溶液中水的A來確定溶液的高度，即樣本實際光程L‘）通過L‘，將A‘校正為光程1cm條件下的AA=€cLPathlengthcorrection光程校正技術(shù)原理A’=€cL’A=A’/L’=€c

1第十五頁，共七十八頁，2022年，8月28日Pathlengthcorrection光程校正技術(shù)優(yōu)越表現(xiàn)1、將在微孔板上讀出的OD值直接轉(zhuǎn)換為1cm光程下的OD值（分光光度值），無需通過標(biāo)準(zhǔn)品，在UV區(qū)可直接在微孔板上檢測出核酸、蛋白的濃度，提高實驗的平行性2、將傳統(tǒng)酶標(biāo)儀(MicroplateReader)的檢測精度提高到微孔板分光光度計(MicroplateSpectraphotometer)的水平第十六頁，共七十八頁，2022年，8月28日光吸收模式技術(shù)參數(shù)光源：氙燈（Xenonflashlamp）波長選擇：雙單色器（Doublemonochromator）波長范圍：200~1000nm，1nm遞增量帶寬：5nm檢測器：光電二級管（PDT）解析度：0.001Abs線性范圍：0~4Abs@450nm,<2%(96孔板)準(zhǔn)確性：<1%,@400~1000nm(0-3Abs)<2%@200~399nm(0-2Abs)精確性：SD<0.001Abs或CV<0.5%@450nm(0-3Abs)光徑校正技術(shù)：具有PathlengthCorrection讀板類型：6、12、24、48、96&384孔板測量速度：15秒/96孔板；45秒/384孔板第十七頁，共七十八頁，2022年，8月28日123123激發(fā)光能量損耗熒光發(fā)射光信號S0S1S1’TimeExcited-statelifetime熒光檢測模式原理Light第十八頁，共七十八頁，2022年，8月28日CuvettebasedandmicroplatefluorometerExcitation

BeamAreaof

DetectedEmissionEmission

BeamStandard90°opticsanglesinacuvette-basedfluorometerExcitation

BeamBeam

SplitterEmission

BeamTypicalPlate-ReadingFluorometer第十九頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlash熒光光路---四光柵雙激發(fā)光/雙發(fā)射光（四光柵）設(shè)計方式：

激發(fā)光采用雙單色器進行分光，發(fā)射光同樣采用雙單色器進行分光該設(shè)計方式最大程度減少了游離雜散光的通過，產(chǎn)生最為純的單色光，降低了雜散光干擾，避免了激發(fā)光反射光對發(fā)射光的干擾，大大提高了熒光實驗的信噪比，ExExEm第二十頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlash熒光四光柵設(shè)計的優(yōu)勢第二十一頁，共七十八頁，2022年，8月28日連續(xù)光譜熒光較濾光片熒光的優(yōu)勢Stoke’sshiftFluorophoresApplicationsExEmPro-QEmerald488Glycoproteinstains510520GreenBODIFFPermeantcellstains522529BODIFYFLActin,transferrin,phosphatidicacid,Receptors,enzymes,etc.505512BODIFYFLLDLLowdensitylipoproteinstain515520AlexaFluorTransferrin555565PerylenePhosphocholinestain440450GreenDND26Lysozymestain504511新的熒光染料，窄stoke’sShift1、適合于絕大多數(shù)熒光染料實驗，無需更換濾光片2、可進行熒光光譜掃描，優(yōu)化實驗條件，選擇最佳

激發(fā)/發(fā)射波長，提高實驗的靈敏度3、可檢測新型熒光染料（stoke’sshift較窄）和紫外

區(qū)熒光激發(fā)實驗第二十二頁，共七十八頁，2022年，8月28日連續(xù)光譜熒光較濾光片熒光的優(yōu)勢半峰寬(HBW)[wavelengthrangeof50%fluorescenceexcitationoremissionattainmentoffilter]通常熒光濾光片的帶寬在25-55nm之間為避免HBW的重合，濾光片式機器往往會選擇并不位于最佳激發(fā)/發(fā)射位置的濾光片來提供波長，其結(jié)果造成熒光信號變?nèi)?，降低了檢測靈敏度同種熒光染料選擇不同位置激發(fā)產(chǎn)生不同強度的發(fā)射光第二十三頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlash熒光檢測

---孔掃描，頂部、底部讀數(shù)TopreadingBottomreadingMicrowellscanning

VarioskanFlash!AbsorbanceFluorescenceLuminometrymicrowellscanningtopandbottomreading第二十四頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlash熒光光譜掃描

---熒光實驗優(yōu)化定量實驗需確定熒光染料最適激發(fā)/發(fā)射波長對于已知熒光實驗體系，通過光譜掃描可優(yōu)化實驗條件：許多熒光燃料對環(huán)境較敏感，如buffer,pH及溫度的改變，因此需要優(yōu)化實驗條件，找出最佳波長用于多標(biāo)記及FRET實驗檢測樣品及試劑純度監(jiān)測試劑或結(jié)合物的穩(wěn)定性Fig.2pHdependenceof4-MeUEmissionspectraFig.1.pHdependenceof4-MeUExcitationspectra第二十五頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlash熒光檢測器

---光電倍增管（PMT）增益自動可調(diào)AutoRange(自動調(diào)節(jié))最廣的讀數(shù)范圍和最好的靈敏度Manualrange比自動設(shè)范圍讀數(shù)更快:Highrange

用于高濃度樣品Lowrange范圍較窄但靈敏度高Mediumrange

靈敏度處于二者間，因此所測濃度亦介于二者間第二十六頁，共七十八頁，2022年，8月28日熒光模式技術(shù)參數(shù)光源：氙燈(Xenonflashlamp)波長選擇：激發(fā)光2個單色器，發(fā)射光2個單色器激發(fā)光波長：200-1000nm發(fā)射光波長：270-840nm帶寬：激發(fā)光：5nm或12nm；發(fā)射光：12nm波長遞增量：1nm檢測器：光電倍增管（PMT）靈敏度：頂部檢測：<0.4fmol熒光素/孔（黑色384板）底部檢測：<4fmol熒光素/孔（黑色384板）動態(tài)范圍：>106（黑色384板）讀板類型：6、12、24、48、96、384、1536孔板測量速度：

15秒/96孔板；45秒/384孔板；135秒/1536孔板第二十七頁，共七十八頁，2022年，8月28日時間分辨熒光模式第二十八頁，共七十八頁，2022年，8月28日Varioskan---TRF檢測原理第二十九頁，共七十八頁，2022年，8月28日蛋白活性分析—時間分辨熒光技術(shù)免疫分析(TRF-ELISA)第三十頁，共七十八頁，2022年，8月28日多標(biāo)記熒光模式第三十一頁，共七十八頁，2022年，8月28日熒光共振能量轉(zhuǎn)移FRET檢測WavelengthEx/EmDonorAcceptorDistance(?)Transferefficiency(%)第三十二頁，共七十八頁，2022年，8月28日時間分辨能量轉(zhuǎn)移實驗:PerkinElmerLANCE根據(jù)能量轉(zhuǎn)移從Eu標(biāo)記的抗體到受體SA-APC的原理使得受體發(fā)熒光第三十三頁，共七十八頁，2022年，8月28日化學(xué)發(fā)光模式第三十四頁，共七十八頁，2022年，8月28日化學(xué)發(fā)光檢測模式原理123123化學(xué)發(fā)應(yīng)過程中產(chǎn)生的能量能量損耗發(fā)光信號S0S1S1’TimeExcited-statelifetimeCH·、ATP…

發(fā)光信號很微弱，需儀器具有很高的檢測靈敏度，amol水平；

熒光信號相對較強，一般檢測器靈敏度在fmol水平Luminesence:Chemi-luminescenceBio-luminescence第三十五頁，共七十八頁，2022年，8月28日對于閃式反應(yīng)類型（Flashtype），儀器需配有自動加液裝置全程跟蹤快速動力學(xué)反應(yīng)過程，保證數(shù)據(jù)的完整性有些實驗需要先后加入兩種液體，為保證無須中止測讀即可進入下一反應(yīng)，如dual-luciferase報告基因的實驗?；瘜W(xué)發(fā)光反應(yīng)類型---Glow&FlashtypeNeedInjector第三十六頁，共七十八頁，2022年，8月28日single-anddual-luciferasereportergenes（熒光素酶）第三十七頁，共七十八頁，2022年，8月28日化學(xué)發(fā)光模式技術(shù)參數(shù)微孔板格式6~1536孔板，光譜掃描6~384孔板波長選擇所有波長，濾光片和光柵波長范圍360-670nm，光譜掃描：270-840nm靈敏度<7amolATP/孔,flashATPreaction,384-wellplatepreliminaryspecifications)第三十八頁，共七十八頁，2022年，8月28日Varioskan微孔板格式光吸收模式下可讀：6,12,24,48,96&384孔板熒光模式下可讀：6,12,24,48,96，384&1536孔板；覆蓋了從實驗研發(fā)到高通量檢測的各種應(yīng)用

---根據(jù)通量要求，優(yōu)化實驗測定至不同板型高密度（孔數(shù)）板，提高了通量并減少了試劑用量，允許了更多的實驗重復(fù)

---能直接測量細胞培養(yǎng)板，定區(qū)掃描功能可對每一孔進行多點測量，從而保證了整孔讀數(shù)。這對基于細胞類實驗尤為重要，因為細胞常常不均勻生長第三十九頁，共七十八頁，2022年，8月28日Varioskan內(nèi)置分液器內(nèi)置分液器，可分1–1000μl液量，遞增量1μl，優(yōu)化動力學(xué)測量分液體積:1–1000μl，1μl增量適用板型:6–384孔板分液管嘴尺寸:D.tip0.25(0.25mm)可分1-20μlD.tip0.40(0.40mm)可分5-1000μ1、分液和測量同步進行，使快速動力學(xué)反應(yīng)在一開始即可被測量，如酶動力學(xué),Ca2+通量2、動力學(xué)測量的時間很容易被控制，可以使實驗自動化，如DNA定量(Hoechstdyes,PicoGreen)3、方便處理有毒液體減少處理有毒液體的時間4、結(jié)果可靠，無人為誤差，可重復(fù)性高分液速度可調(diào)，可優(yōu)化實驗結(jié)果!!!第四十頁，共七十八頁，2022年，8月28日Varioskan分液器---Ca2+流實驗第四十一頁，共七十八頁，2022年，8月28日Varioskan分液器優(yōu)勢5-10%better50%better第四十二頁，共七十八頁，2022年，8月28日Varioskan溫度控制裝置UpperheaterUniversaltrayframe96-welladapter孵育器主要由兩部分組成:固定的上部加熱器可移的通用托板盤溫度范圍（室溫+4）°Cto45°C孔間的差異性：<0.4oC孵育器支持24-to1536-孔板上部加熱器比下部稍熱，防止板蓋水汽凝結(jié)（可帶蓋檢測）使用通用托板盤和特別的板適配器，可進行孵育使用任何托板盤和適配器都能用上部加熱器進行加熱

1.2.3.第四十三頁，共七十八頁，2022年，8月28日Varioskan操作自動化與機械臂兼容，方便系統(tǒng)全自動化機械臂專用的托板盤，其設(shè)計允許機械臂方便地取放板機械臂從上、左、右及前方都能進入機械手爪可從正面或側(cè)面抓握SkanIt軟件帶有特別的遠端控制界面，可與LIMS及全自動系統(tǒng)整合第四十四頁，共七十八頁，2022年，8月28日

Varioskan應(yīng)用概述光吸收檢測功能

免疫診斷：ELISAs蛋白質(zhì)定量：A280,BCA，Brafold，Lowery核酸定量：A260,DNA，RNA，A260/A280細胞增殖、毒性實驗：MTT,XTT酶活、酶動力學(xué)實驗：VmaxandKm計算，內(nèi)毒素檢測 細菌生長檢測：BacterialGrowthAssay蛋白活性檢測

熒光（時間分辨熒光）檢測功能

報告基因?qū)嶒灒簾晒獾鞍祝℅FP），GUS分子探針標(biāo)記實驗：PicoGreen,OliGreen,NanoorangeCa2+流、離子通道 蛋白質(zhì)-配體結(jié)合：?-lactoglobulin定點突變檢測：SNP-detectionTRF測量：BasicTRFMeasurements化學(xué)發(fā)光檢測功能報告基因分析：螢火蟲熒光素酶（luciferase）、β-ga1、β-葡糖苷酸酶或分泌性堿性磷酸酶等ATP檢測：水母發(fā)光蛋白：DNA探針檢測：幾種基于acridiniumester的診斷DNA探針被用于極為靈敏的診斷傳染病的檢測發(fā)光免疫分析(LIA,ILMA,發(fā)光ELISA)：體外診斷方面，將HPR和AP的呈色底物變成發(fā)光底物時，可將酶反應(yīng)的靈敏度提高100倍第四十五頁，共七十八頁，2022年，8月28日分析控制軟件---SkanItSoftware1、可視化操作流程和圖列表結(jié)構(gòu)性能，方便用戶進行儀器設(shè)置和數(shù)據(jù)分析處理2、實時顯示數(shù)據(jù)（光譜掃描和動力學(xué)實驗）檢測結(jié)果3、內(nèi)置多種數(shù)據(jù)分析方法，如背景扣除、多點檢測、曲線擬合、Cut-Off、動力學(xué)分析、光譜掃描實驗中光譜疊加/扣除、Ratio/Inhibition,EffectiveDoseandQualityControl等4、完全兼容OFFICE，實驗室自動化LIMS系統(tǒng)5、生命科學(xué)研發(fā)版本（ResearchEdition）和遵照FDA‘s21CFRPart11法則藥物研發(fā)版本（DrugDiscoveryEdition）第四十六頁，共七十八頁，2022年，8月28日ThermoTecanMDCBio-TekPEFeatureVarioskanFlashVarioskanSafire2InfiniteM200SpectraMaxM5SpectraMaxM2SynergyHTVictoryAbs√√√√√√√√Spectrumscanning√√√√√√√Pathlength√√√√√FI√√√√√√√√Spectrumscanning√√√√√√QuadupleMono-√√√√TRF/FRET√√√√√√√FP√√√√√Lumi√√√√√√ATP(amol)√√Dispenser√√√√√Software*√√√√√第四十七頁，共七十八頁，2022年，8月28日性能ThermoVarioskanFlashTecanSafire2TecanInfiniteM200MDCSpectraMaxM5/M2Bio-tekSynergyHt檢測模式Abs,FI,TRF,LumiAbs,FI,TRF,Lumi,FPAbs,FI,TRF,Lumi,FPAbs,FI,TRF,Lumi,FPAbs,FI,TRF,Lumi光譜掃描Abs,FI,TRFAbs,FI,TRFAbs,FI,TRFAbs,FI,TRFAbs波長范圍（nm）FI,TRF:ex:200-1000em:270-840Abs:200-1000FI,TRF:ex:230-850em:280-850Abs:230-1000FI,TRF:ex:230-600em:330-600Optional:Ex230-850,Em:280-850Abs:230-1000FI,TRF:ex/em:250-850Abs:200-1000FI,TRF:鹵鎢燈（需預(yù)熱）ex:300-650em:300-700Abs:200-1000光吸收性能Pathlengthcorrection0.001ODNo0.001ODNo0.01ODPathchecksensor0.001ODPathlengthcorrection0.001OD熒光（四光柵）YesYesYesOnlydouble,CutofffiltersNo,onlyfilters熒光靈敏度/頂部檢測0.4fmol/wellfluorescein0.2fmolfmol/well

fluorescein1fmol/wellfluorescein(redsensitivityPMT)40pM/wellfluorescein1.3fmolfmol/well

Fluorescein化學(xué)發(fā)光靈敏度<7amolATP/well1

fmolATP/well1

fmolATP/well2fgluciferase1fmolluciferase內(nèi)置分液器Upto3,internaldispenserratecanbechangedNoUpto2,externalNoUpto2軟件（FDA21CFR11compliance）YesYes,withMagellanSWYes,withMagellanSWYesYes第四十八頁，共七十八頁，2022年，8月28日我們的競爭對手有那些?-TecanInfiniteM200,Safire2-MDSpectraMaxM2,M5-BiotekSynergyHT,2我們的優(yōu)勢在哪里?-品質(zhì)非凡的光學(xué)系統(tǒng)

(四光柵,高能氙燈,石英光纖等)-在紫外熒光檢測方面的極佳性能

-獨一無二的opticalresponsecompensation,可獲得realspectral-光吸收檢測的極佳性能,如基線噪音控制功能

-極佳的化學(xué)發(fā)光檢測性能,如低電流光子計數(shù)的光電倍增管,高敏模式,掃描模式

-Upto3dispensers

VarioskanFlash第四十九頁，共七十八頁，2022年，8月28日InfiniteM200

價低,4光柵,4種檢測技術(shù)，完全模塊化設(shè)計,2個自動進樣器如何競爭?-在Tecan之前介紹產(chǎn)品并教育客戶

-VF的指標(biāo)要好很多，M200光密度檢測分辨率只能達到0.01-M200有四個光柵，但質(zhì)量如何?他們的光纖是玻璃的.-客戶總想得到與他所付相當(dāng)?shù)漠a(chǎn)品,建議客戶向Tecan詢Safire2的價格,就可以知道為什么同樣帶4個光柵，并有2個進樣器，而Safire2不帶自動進樣器，但價格僅是Safire2的一半f?-所有Tecan產(chǎn)品列出的技術(shù)指標(biāo)都是“典型值”VarioskanFlashvsInfiniteM200第五十頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanbenefitsThephotometricperformanceofVarioskanissuperiortoSafire HighconcentrationmeasurementsVarioskancoverswiderabsorbancerangeFig.1.Varioskanvs.Safire:Absorbancelinearityseries,450nm,384–wellplateFig.2.Varioskanvs.Safire:Absorbancelinearityseries,405nm,96–wellplateVarioskanFlashvsSafire2第五十一頁，共七十八頁，2022年，8月28日Varioskanbenefits

LowconcentrationmeasurementsGreatstabilityisneededforlowabsorbancereadingsVarioskanzero-levelstabilityisconsiderablybetter

Varioskanvs.Safire:Baselinespectra:EmptyGreinerUV-Star96-wellplateVarioskanFlashvsSafire2第五十二頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlashvsInfiniteM200

ThermoVarioskanFlashTecanInfiniteM200說明GeneralSpecificationsOpticalSystemFlashXenonLamp，doubledualmonochromatorFlashXenonLamp，doubledualmonochromatorPlatetype6-15366-384VarioskanFlashcanreadmoreplatetype,suitableforUHTSScanningScanninginP,FL,TRF1nmstepincrementScanninginP,F,TRF1nmstepincrementVFcanperformLscanningwhichprovidemoreflexiblityWavelengthAutoCheckVFwilldoWavelengthAutoCheckautomaticallybeforetherealreadingNeedtousesoftwaretodoWavelengthAutoCheck,butnotautomaticallyVarioskanFlashismoreaccuracyShakingOrbitalShake,diameter,speedandtimeisadjustable.Anddiameterandspeedareoptimisedtoensurethebestresultandnocrosscontamination.OribitalandLinear,3speedsThoughInfiniteM200haslinearshaking，butonly3speedscanbeselectedsoitisnotflexibleasVFTemp.ControlAmbient+4℃to45℃，SD0.3℃；Variancewtow0.5℃Ambient+4℃to42℃VFhas3dimensionincubationsoithasbetterperformanceDispenser1-3dispenser，volumerange1-1000ul1-2dispenser，volumerange5-800ulVFhasmoredispenserandwidervolume第五十三頁，共七十八頁，2022年，8月28日PhotometryWavelengthRange200-1000nm，1nmincrement230-1000nm，1nmincrementBandWidth5nm<5nm（<295nm），<9nm（>295nm）；VFhasnarrowbandwidthinwholespectrumsocanbringsmoreaccuratewavelengthselectionDetectionChannelSingleChannel4ChannelisoptionalUsesinglechannelcanavoidthelightcrossinterference,thusprovidemoreaccurateresultMultichannelcanprovidefastspeed,buthascertainlightcrossinterference,andactuallyM200doesn’thaveafasterreadingReadout0-4O.D0-3O.DVFhasbetterreadoutrangeLinearity0-4O.D(96wellplate)0-3O.D(384wellplate)0-3O.D(96wellplate)0-2O.D(384wellplate)（Thisistheresultwhenwedosidebysidecomparison）VFhasbetterreadoutrangeAccuracy0-3O.D,±1.0%0-2O.D,±1.0%VFismoreaccurateReadingspeed15s（96wellplate）45s（384wellplate）20s（96wellplate）25s（384wellplate）DetectorPTDPTDVarioskanFlashvsInfiniteM200

第五十四頁，共七十八頁，2022年，8月28日FluorensenceWavelengthrangeExcitation:200-800nmEmission:270-800nmStandard:Excitation230-600nm，Emission330-600nm；Optional：Excitation230-850nm，Emission:280-850nm，1nmincrementStandardcannotprovidewiderangewavelength,whilechoosingoptionaljustmeanspriceincreaseHBWExcitation：5nmor12nmoptionalEmission：12nmExcitation：<5nm(<295nm)<9nm(>295nm)Emission:<20nmVFhasnarrowbandwidthinwholespectrumsocanbringsmoreaccuratewavelengthselectionSensitivity0.4fmol/wll（Black384wellplate，top）4fmol/wll（Black384wellplate，bottom）Top：1fmolBottom：9fmolThesensitivityofInfiniteistypicalvaluegotviaIRsensitivePMT,ifstandardPMTwasusedthespecificationisevenworseSpeed15s（96wellplate）45s（384wellplate）20s（96wellplate）30s（384wellplate）TRFWavelengthExcitation:200-800nmEmission:270-800nmN/ASensitivity120amolEuropium(384wellwhiteplate)90amolEuropiumThereisnostatementofhowtogettheresultforInfiniteVarioskanFlashvsInfiniteM200

第五十五頁，共七十八頁，2022年，8月28日LuminescenceSensitivity<7amolFlurosein/well,384wellplate1

fmolATP/wellVarioskanFlashhasmuchbettersensitivityDetectorPhotoncountingPMTPhotoncountingPMTApplicationGlow/FlashGlow/FlashDispensersUpto3dispensersUpto2dispensersScanning2detectionmodes:ScanningandLumiScenshighsensitivitymode。Scanningrange270－840nmNoScanningfunctioncanhelptooptimisetheexperimentsandalsoveryhelpfulindevelopingreagentsforkitsmanufacturerFPNoNoVarioskanFlashvsInfiniteM200

第五十六頁，共七十八頁，2022年，8月28日MDSpectraMaxM5

在多功能檢測儀器方面的強大品牌優(yōu)勢文獻和應(yīng)用指導(dǎo)很多

5個功能(incl.FP),相同的價格水平如何競爭?-強調(diào)4個光柵vs2+cut-off濾光片,更好的信噪比S/N，在消除光漂移方面可提高100萬倍、更靈活的波長選擇，不需要優(yōu)化濾光片和光柵組合、在光譜掃描時不會有假峰、掃描速度快6倍紫外熒光檢測方面的性能更好無自動進樣器,無法檢測鈣離子和閃爍化學(xué)發(fā)光反應(yīng)FP?應(yīng)用范圍有限,對客戶是否必須?如不能在熒光檢測方面得到好的結(jié)果，又怎能相信FP結(jié)果的可靠性?VarioskanFlashvsMDSpectraMaxM5第五十七頁，共七十八頁，2022年，8月28日PerformingsamedemonstrationatcustomersiteFollowingtoMolrecularDevice

Application

note#32

Fluorescein10nM(PBSph8.5)200ulEx485nm

cutofffilter530nmscaningrange500-580nmMDsaidmaximumS/N＝179on545nm

OptimumWavelengthS/NVarioskan488-516397.838Fluoroskan485-538104.864SpectramaxGemini485-545179DatafromNationalInstituteofHealthScience,Japan第五十八頁，共七十八頁，2022年，8月28日GFPgeneexpressionexperimentInstrument：Varioskan(Thermo)Ex：485nmEm：527nmbandwidth：12nmYellow:Sample;white:Blank，Blank：0.061SD：0.007CV%：10.9Instrument：VarioskanEx：485nmEm：527nmbandwidth：5nm

Yellow:Sample;white:BlankBlank：0.061SD：0.017CV%：28.7DatafromthePharmaceuticalInstitute,ChineseAcademyofMedical第五十九頁，共七十八頁，2022年，8月28日GFPgeneexpressionexperimentInstrument：GeminiXS(MDC)Ex:485nmEm:527nmbandwidth:9nmYellow:Sample;white:Blank，blank：2.074SD：0.523CV%：25.2DatafromthePharmaceuticalInstitute,ChineseAcademyofMedical第六十頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlashvsMDSpectraMaxM5ThermoVarioskanFlashMDCSpectraMaxM5說明PhotometryPlatetype6-384wellplateonly96/384wellplatemorechoiceWavelength200–1000nm，1nmincrement200–1000nm，1nmincrement2monochromator1monochromator5nm帶寬<4.0nmLinearity0-4O.D(96wellplate)0-3O.D(384wellplate)0-3O.DVFhasbetterlinearityAccuracy<±1%or0.003Abs,at400–1000nm(0–3Abs)<±2%or0.003Abs,at200–399nm(0–2Abs)<±0.006AbsorOD±1.0%,0-2ODVFhasbetteraccuracyLampXenonXenonDetectorPDTPMT？Speed96wellplate：15s

384wellplate：45s96wellplate：18s

384wellplate：49sFasterreadingspeedPathlengthCorrectionyesyesPrinciplesarealmostsameinVFandM5，VFaccuracyis<2%，M5is<2.5%

第六十一頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlashvsMDSpectraMaxM5FluometerPlatetype6-15366-384VFcanread1536,alsomeansinterferencebetweenwellsissmallWavelengthDoubledualmonochromatorl-2monochromator1）4mono.canincreasetheaccuracyofwavelengthselectionandS/Nratio.ThisisextremelyusefulinmultilabeltestandFRET.S/NratioofVFis100%higherthanMD.ThesensitivityinUVdetectionismuchbetterinVF.2）Ifexandemoffluolabelisclosetoeachother,thennarrowbandwidthisneeded.Ex：200-1000nm,1minc.Em：270-840nm,1minc.Ex：250-850nm，1nminc.

Ex：250-850nm，1nminc.BandWidthEx:5nmor12nmEx：9nmEm:12nmEm：15nmLampXenonXenonDetectorPMTPMTTop/bottomYesYesSensitivity<1fmolfluorescein/well

（384wllblackplate）<15pM[[i]]fluoresceinin96wellswithtop-read(=3fmol)BettersensitivityofVFSpeed96wellplate：15s

384wellplate：45s96wellplate：17s

384wellplate：48sVFisfaster

第六十二頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlashvsMDSpectraMaxM5FPNOYesLuminometryPlatetype6-15366-384Wavelength360-670nm250nm-850nmGlowGlowM5cannotdoflashasithasn’tdispenserFlashNoDispensersUpto3NoSensitivity<7amolLuciferin/well,384孔板<2fgLuciferein/well(glow)BettersensitivityinVFScanning2detectionmodes:ScanningandLumiScenshighsensitivitymode。Scanningrange270－840nmNoScanningfunctioncanhelptooptimisetheexperimentsandalsoveryhelpfulindevelopingreagentsforkitsmanufacturer

[i]應(yīng)用Promega的DLR，推薦使用2個分液器（化學(xué)發(fā)光）第六十三頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlashvsMDSpectraMaxM5DispensersUpto3NoDispenserisveryimportantinflash-L,kinetictest,Ca2+testDis.volume1–1000μl，1μlincrement，5000ulisoptionalIncubatorTemp.rangeAmbient+4℃to45℃Ambient+4℃to60℃Uniformity±0.5℃at37℃<1℃at37℃VFismoreaccuratefromwtowellTemperatureincreaseSoftwarewillcontrolincubation，quicktemp.increase，only2-3mfromAmbientto37CIncubationneedtobecontrolledmanually,slowintemp.increaseordecreseShakerOrbitalShake,diameter,speedandtimeisadjustable.Anddiameterandspeedareoptimisedtoensurethebestresultandnocrosscontamination.LinearVFprovidebetterchoice第六十四頁，共七十八頁，2022年，8月28日VarioskanFlashvsBiotekSynergyBiotekSynergy2低價,多功能，2個自動進樣器,SQ(superquiet)xenonlampandDPR(DoubleParabolicReflector)xenonlamphTRF=CisBio’sproductfamilyforTR-FRETreagentsandkits我們?nèi)绾胃偁?-在BioTek之前介紹產(chǎn)品并教育客戶-Synergy并不是光柵多功能儀器,他只有一個光柵用于光吸收檢測,我們并不認為他是競爭對手-發(fā)現(xiàn)客戶的預(yù)算和真正的需求非常重要,我們可提供超強的功能，從而使我們的性價比更高。

第六十五頁，共七十八頁，2022年，8月28日MultiskanSpectrum我們的競爭對手有哪些?-MDSpectraMax190&384-BiotekμQuant,Powerwave-TecanInfiniteM200我們的優(yōu)勢在哪里?-強大的比色杯功能雙比色杯，同時檢測樣本和空白只有MSS可使用標(biāo)準(zhǔn)50ul比色杯只有MSS帶比色杯檢測攪拌功能

-讀板的類型更多(6-384)-重要技術(shù)指標(biāo)都優(yōu)于競爭對手第六十六頁，共七十八頁，2022年，8月28日特點ThermoElectronMultiskanSpectrumMDCSpectraMaxPlus384MDCSpectraMax190Bio-TekPowerWaveXSBio-TekPowerWaveHTBio-TekμQuant波長[nm]200–1000190–1000190–850200–999200–999200–999板的類型6–38496and384966-38496and3846–384比色杯基座twoonenoneBio-CellBio-CellBio-Cell比色杯容量stdto50μlStdto450/900μl?none>2ml>2ml>2ml孵育yesyesyesyesyesno振蕩

yesyesyesyesyesno軟件21CFR11no,yeswithnewSWyesyesyesyesyes機械臂兼容性yesyesyesyesyesno第六十七頁，共七十八頁，2022年，8月28日MSS的光學(xué)系統(tǒng)光源使用氙閃燈作為光源，氙閃燈提供光密度和熒光檢測所需的寬廣的光譜范圍，脈沖功率為300Hz,只在測量時才激活。一次檢測根據(jù)檢測質(zhì)量的要求可包括1-64次閃爍脈沖。10年左右2萬多人民幣衍射次序選擇濾光片激發(fā)衍射次序濾光片實際就是Cut-off濾光片，用于阻止不想要的單色器的諧波發(fā)射，正確的衍射次序濾光片是自動選擇的。單色器單色器是基于衍射光柵，光柵的凹槽表面將不同顏色分散至不同的角度，通過光柵的轉(zhuǎn)動來選擇不同波長的光。帶寬選擇帶寬是由單色器的狹縫寬度來設(shè)定的，2nm帶寬通過控制狹縫寬度來產(chǎn)生。光纖光由石英光纖傳到測量部件，4根光纖通到微孔板光學(xué)部件，2根光纖通到比色杯部件。測量部件下部測量部件集中光束并傳到樣品，光穿過樣品后由上部測量部件收集進入檢測器。第六十八頁，共七十八頁，2022年，8月28日MultiskanSpectrum與MD競爭

-強大的比色杯檢測功能雙光束同時檢測樣本和空白標(biāo)準(zhǔn)50ulcuvette只能用于MSS

攪拌功能用于比色杯檢測

-檢測更多的微孔板類型(6-384)-更好的溫控功能

-光程校準(zhǔn)功能更好

RecommendthemodelWithCuvettefirst!ControlthePriceYouOffered!第六十九頁，共七十八頁，2022年，8月28日MolecularDevicesSPECTRAmaxPlus384(MDC)可用于比色杯讀數(shù)，但比色杯基座是單光束的，空白和樣本的檢測分開進行，并不來源于同一束光，因此檢測結(jié)果會有誤差MultiskanSpectrum帶有雙光束比色杯基座，同時檢測樣本和空白，并對樣本自動減空白，讀數(shù)無誤差，方便用戶使用。方便客戶的使用，有一些其他品牌的分光光度計需要先插入空白比色杯做空白校準(zhǔn)，然后取出空白杯放入樣品杯進行檢測，而MSS的操作則更方便和快速雙光束操作在比色杯動力學(xué)檢測中有很大的優(yōu)勢，在每次的檢測中，空白都可以自動被扣除只能檢測96-和384-孔板MultiskanSpectrum可檢測6-384–孔板，在細胞生物學(xué)研究領(lǐng)域6－48孔板的使用相當(dāng)普遍，特別是在用光度法檢測細胞增殖和細胞凋亡時，培養(yǎng)的細胞都是放在大孔板內(nèi)的。配合軟件所提供的大孔板區(qū)域多點掃描功能，可對細胞的不均勻生長進行精確的檢測。第七十頁，共七十八頁，2022年，8月28日MolecularDevicesSPECTRAmaxPlus384(MDC)必須同時用