第二章血液一般檢驗紅細胞檢驗

第二章血液一般檢驗紅細胞檢驗1第一頁，共八十六頁，2022年，8月28日紅細胞生成過程干細胞原始紅細胞早幼紅細胞中幼紅細胞晚幼紅細胞網織紅細胞成熟紅細胞72h48h脾:破壞分解死亡RBCRBC壽命:120天血管Epo促紅細胞生成素第二頁，共八十六頁，2022年，8月28日一.紅細胞計數redbloodcell,RBC(一)、原理

1.顯微鏡計數法:用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數后，滴入血細胞計數盤，然后于顯微鏡下，計數一定范圍內的紅細胞數，經過換算即可求得每升血液中紅細胞數。（XXX×1012/L）2.血液分析儀法:電阻抗或流式細胞術激光檢測法原理(二)、質量保證:技術、儀器、分布誤差（三）、參考值

成年男性：(4.0～5.5)×1012/L成年女性：(3.5～5.0)×1012/L新生兒：(6.0～7.0)×1012/L醫(yī)學決定水平：高于6.8×1012/L，應采取相應治療措施；低于3.5×1012/L可診斷貧血；低于1.5×1012/L應考慮輸血(四)、臨床意義第三頁，共八十六頁，2022年，8月28日二

.血紅蛋白測定（HemoglobinHb）

Hemoglobin:是一種微紅色的膠體物質，是一種呼吸載體,由珠蛋白和亞鐵血紅素組成，其相對分子質量為64458。

第四頁，共八十六頁，2022年，8月28日(一).Hb的結構

1、血紅蛋白由珠蛋白和亞鐵血紅素組成，分子量為64458，它是一種呼吸載體，每克血紅蛋白可攜帶氧1.34ml。血紅蛋白由4條多肽鏈組成，每條有1個分子的亞鐵血紅素。組成Hb的多肽鏈分為α和非α兩大類：①α類鏈：α，ζ和θ鏈；②非α鏈：β，δ，γ，ε鏈。α鏈由141個氨基酸組成，β鏈由146個氨基酸組成。

2、珠蛋白肽鏈有三種形式：

HbA（α2?2），成人主要血紅蛋白，約97%。

HbA2（α2δ2），成人次要血紅蛋白，約2-3%。

HbF（α2γ2），胎兒血紅蛋白，約2%。

第五頁，共八十六頁，2022年，8月28日

Fe2+有6個配位鍵，4個與原卟啉環(huán)連接，1個與珠蛋白連接，1個與O2結合。

3.亞鐵血紅素結構式

第六頁，共八十六頁，2022年，8月28日1.Hb的合成受激素的調節(jié),激素有兩種.一是紅細胞生成素,二是雄激素。2.正常情況下，血紅蛋白主要為HbO2和Hbred，還有少量HbCO和Hi。3.血紅蛋白分子降解為珠蛋白和血紅素。血紅素中大部分鐵由單核-吞噬細胞系統(tǒng)細胞加工處理后，再重新回到循環(huán)血液中。（二）.Hb的合成及代謝第七頁，共八十六頁，2022年，8月28日（三）.

血紅蛋白Hb測定即測定血液中各種血紅蛋白的總濃度。（xxg/L）

血液中血紅蛋白以各種形式存在，包括氧合血紅蛋白、碳氧血紅蛋白、高鐵血紅蛋白或其他衍生物。第八頁，共八十六頁，2022年，8月28日Hb測定的方法

1、測鐵法：1gHb—3.47mgFe2、測氧法：1gHb—1.34mlO2此兩種方法較準確，但不易操作。目光比色法：沙利氏法，現(xiàn)已淘汰。3、比色法光電比色法：常用，有HiCN、SDS-Hb

1966年國際血液學委員會HiCN是測定Hb的標準方法也是參考方法（WHO）第九頁，共八十六頁，2022年，8月28日氰化高鐵血紅蛋白法（HiCN法）1.檢測原理血液在血紅蛋白轉化液中溶血后，除SHb外各種血紅蛋白均可被高鐵氰化鉀氧化成高鐵血紅蛋白（Hi），Hi與氰化鉀的氰根（CN-）生成穩(wěn)定的棕紅色氰化高鐵血紅蛋白（HiCN）。其在540nm有吸收峰。特定標準條件下，其毫摩爾消光系數為44L/（mmol.cm），可測得吸光度并計算Hb（g/L）。

A/44×64458（mg）/1000×251=A×367.7但在實際工作中，一般實驗室的分光光度計達不到WHO規(guī)定的標準條件，所以利用Hb參考液制備標準曲線，或算K(K=∑Hb/∑A)值，間接計算出Hb（G/L）。第十頁，共八十六頁，2022年，8月28日氰化高鐵血紅蛋白法轉化液作用及評價第十一頁，共八十六頁，2022年，8月28日氰化高鐵血紅蛋白法（HiCN法）質量保證第十二頁，共八十六頁，2022年，8月28日Hb測定方法學評價第十三頁，共八十六頁，2022年，8月28日

RBC和Hb臨床意義

參考值：

Hb：RBC：

成年男:120～160g/L（4.0～5.5）X1012/L

成年女:110～150g/L（3.5～5.0）X1012/新生兒：180～190g/L(6.0～7.0)×1012/L

第十四頁，共八十六頁，2022年，8月28日RBC、Hb臨床意義：生理變化（1）年齡與性別的差異；初生2周男6-7歲25-30歲（2）精神因素；（3）劇烈的體力勞動；（4）氣壓降低；（5）長期多次獻血者紅細胞亦可代償性增多；（6）生理性貧血。第十五頁，共八十六頁，2022年，8月28日RBC、Hb臨床意義：病理變化-------增多：相對性增多：因脫水血液濃縮所致；

如劇烈嘔吐、大面積燒傷、出汗、多尿、慢性腎上腺皮質功能減退、尿崩癥、甲狀腺功能亢進等。繼發(fā)增多：組織缺氧、促紅細胞生成素代償性增多所致。如法洛四聯(lián)癥、紫紺型先天性心臟病、阻塞性肺氣腫、肺源性心臟病、肺動-靜脈瘺以及攜氧能力低的異常血紅蛋白病等。原發(fā)增多：真性紅細胞增多癥，多能造血干細胞受累所致。第十六頁，共八十六頁，2022年，8月28日RBC、Hb臨床意義：病理變化------減少：一般成年男性血紅蛋白＜120g/L,成年女性血紅蛋白＜110g/L，紅細胞＜3.5X1012/L為貧血。根據血紅蛋白減低的程度貧血可分為四級。輕度：90g／L

<血紅蛋白<120g／L、中度：血紅蛋白60～90g／L、重度：血紅蛋白30～60g／L、極度：血紅蛋白＜30g/L。當RBC＜1.5×1012/L，Hb＜45g/L時，應考慮輸血

第十七頁，共八十六頁，2022年，8月28日

三.紅細胞形態(tài)檢查

第十八頁，共八十六頁，2022年，8月28日紅細胞形態(tài)檢查的檢測常用方法第十九頁，共八十六頁，2022年，8月28日人為原因造成的紅細胞形態(tài)異常人為原因紅細胞形態(tài)異常涂片不當棘形紅細胞、皺縮紅細胞、紅細胞緡錢狀形成等使用非疏水性玻片口形紅細胞染色不當嗜多色紅細胞抗凝劑EDTA濃度過高，或長時間放置血液鋸齒狀紅細胞涂片干燥過慢，或由于固定液中混有少許水分面包圈形紅細胞涂片末端附近長軸方向一致的假橢圓形紅細胞第二十頁，共八十六頁，2022年，8月28日

（一）、RBC正常形態(tài)直徑6~9.5μm，平均7.2μm，厚度2μm。瑞氏染色成淡紅色，中央1/3為生理性淡染區(qū)，胞內無特殊結構。外觀：雙凹圓盤狀，大小相似。第二十一頁，共八十六頁，2022年，8月28日

正常形態(tài)紅細胞圖正常形態(tài)紅細胞掃描電鏡圖第二十二頁，共八十六頁，2022年，8月28日（二）、RBC異常形態(tài)（1）紅細胞大小改變（2）紅細胞形態(tài)改變（3）紅細胞內血紅蛋白含量改變（4）紅細胞內結構改變第二十三頁，共八十六頁，2022年，8月28日（1）大小異常：①小紅細胞microcyte：直徑小于6μm。

見于：缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血。②大紅細胞macrocyte：直徑大于10μm。

見于：溶貧、巨幼貧。③巨紅細胞megalocyte：直徑大于15μm。

見于：巨幼紅。④大小不均anisocytosis：直徑相差一倍以上。見于：嚴重增生性貧血，如巨幼紅。第二十四頁，共八十六頁，2022年，8月28日巨紅細胞紅細胞大小不均第二十五頁，共八十六頁，2022年，8月28日（2）形態(tài)異常：①

球形紅細胞spherocyte②橢圓形紅細胞elliptocyte③靶形紅細胞targetcell④鐮形紅細胞sicklecell⑤口形紅細胞stomatocyte⑥棘紅細胞acanthocyte⑦裂片紅細胞schistocyte⑧紅細胞形態(tài)不齊poikilocytosis:新月形、

淚滴形、蝌蚪形等多形紅細胞

第二十六頁，共八十六頁，2022年，8月28日①

球形紅細胞（spherocyte）結構：球狀，直徑6μm，厚>2.6μm，體積較小，中央著色深。見于：遺傳性球形紅細胞增多癥(>20%)、自身免疫性溶貧等。第二十七頁，共八十六頁，2022年，8月28日第二十八頁，共八十六頁，2022年，8月28日②橢圓形紅細胞（elliptocyte）結構：細胞呈卵圓形、桿形、長度可大于寬度3-4倍，最大直徑可達12.5μm，橫徑可為2.5μm。

見于：遺傳性橢圓形紅細胞增多癥>25%、大紅細胞性貧血等

第二十九頁，共八十六頁，2022年，8月28日第三十頁，共八十六頁，2022年，8月28日③靶形紅細胞（targetcell）結構：紅細胞中心部位染色較深，其外圍為蒼白區(qū)域，而細胞邊緣又深染形如射擊之靶。見于：地中海性貧血、嚴重缺鐵性貧血等第三十一頁，共八十六頁，2022年，8月28日第三十二頁，共八十六頁，2022年，8月28日④鐮形紅細胞（sicklecell）結構：形如鐮刀狀。這是由于紅細胞內存在著異常HbS所致，在缺氧情況下尤易形成此類紅細胞。見于：遺傳性鐮形紅細胞增多癥。第三十三頁，共八十六頁，2022年，8月28日第三十四頁，共八十六頁，2022年，8月28日⑤

口形紅細胞（stomatocyte）第三十五頁，共八十六頁，2022年，8月28日口形RBC第三十六頁，共八十六頁，2022年，8月28日第三十七頁，共八十六頁，2022年，8月28日⑥

棘紅細胞（acanthocyte）結構：紅細胞表面有針尖狀突起，其間距不規(guī)則。突起的長度和寬度不一。見于：在β-脂蛋白缺乏癥病人的血涂片中出現(xiàn)較多。也可見于脾切除后、酒精中毒性肝臟疾病、尿毒癥。第三十八頁，共八十六頁，2022年，8月28日棘形RBC皺縮RBC第三十九頁，共八十六頁，2022年，8月28日⑦裂片紅細胞（schistocyte）結構：為紅細胞碎片或不完整的紅細胞。大小不一。外形不規(guī)則，有各種形態(tài)如棘形、盔形、三角形、扭轉形等。常見于：彌漫性血管內凝血、微血管病性溶血性貧血、重型珠蛋白生成障礙性貧血。第四十頁，共八十六頁，2022年，8月28日裂片紅細胞第四十一頁，共八十六頁，2022年，8月28日⑧紅細胞形態(tài)不齊（poikilocytosis）結構：紅細胞形態(tài)呈淚滴狀、梨形、棍棒形、新月形等。常見于：巨幼細胞性貧血。病因：可能因貧血嚴重但又缺乏原料，在骨髓內粗制濫造；也可能因紅細胞脆性增大，在推片時碎裂所致。第四十二頁，共八十六頁，2022年，8月28日淚滴狀RBC第四十三頁，共八十六頁，2022年，8月28日（3）紅細胞內血紅蛋白含量改變①正常色素性normochmic：見于：正常人、急性失血、再障等。②低色素性hypochromic：見于：缺鐵性貧血、地中海性貧血等。③高色素性hyperchromic：見于：巨幼貧。④嗜多色素性polychromatic：為未成熟紅細胞，含有嗜堿性RNA物質，染成灰蘭色。見于：骨髓造血旺盛時，溶貧最多見。第四十四頁，共八十六頁，2022年，8月28日巨幼紅細胞第四十五頁，共八十六頁，2022年，8月28日低色素性RBC第四十六頁，共八十六頁，2022年，8月28日嗜多色性RBC第四十七頁，共八十六頁，2022年，8月28日（4）、RBC內結構異常①點彩紅細胞（basophilicstipplingcell）：未完全成熟紅細胞胞漿內殘存變性的嗜堿性RNA，經瑞氏染色，呈藍黑色顆粒。50個視野點彩紅細胞數5個視野內紅細胞總數×10參考值：<3×10-4常見于：鉛、汞、銀、苯胺中毒患者血液涂片中。點彩紅細胞%=第四十八頁，共八十六頁，2022年，8月28日第四十九頁，共八十六頁，2022年，8月28日②染色質小體(howelljolly’sbody)定義：又稱豪周氏小體。成熟或幼紅細胞的胞質內含有的，直徑1-2μm大小，可1至數個，暗紫紅色圓形小體，已證實為核碎裂或溶解后核殘余物，常見于巨幼細胞性貧血、紅白血病、溶血性貧血及脾切除術后。第五十頁，共八十六頁，2022年，8月28日第五十一頁，共八十六頁，2022年，8月28日③卡波氏環(huán)(Cabot’sring)定義：在嗜多色性、點彩紅細胞胞漿中出現(xiàn)的紫紅色細線圈狀結構，為脂蛋白變性所致，呈“8”字形或環(huán)形，常與豪周氏小體一起存在。見于：巨幼貧、鉛中毒。第五十二頁，共八十六頁，2022年，8月28日卡波氏環(huán)第五十三頁，共八十六頁，2022年，8月28日④有核紅細胞

（nucleatederyhrocyte）幼稚紅細胞，病理時出現(xiàn)。見于：溶血性貧血；造血系統(tǒng)惡性疾患或骨髓轉移性腫瘤；慢性骨髓增生性疾?。黄⑶谐?。第五十四頁，共八十六頁，2022年，8月28日有核紅細胞第五十五頁，共八十六頁，2022年，8月28日⑤、寄生蟲當患者感染瘧原蟲、微絲蚴等時，可見紅細胞胞質內相應的病原體。第五十六頁，共八十六頁，2022年，8月28日第五十七頁，共八十六頁，2022年，8月28日四.

紅細胞比容測定

（hematocrit，HCT、PCV）（一）、概念及測定原理

是指血液中紅細胞所占全血容積的比值。通常是將不改變紅細胞體積的抗凝血置于壓積管中，經一定的離心力離心后計算被壓實紅細胞層所占的比值。第五十八頁，共八十六頁，2022年，8月28日（二）Hct測定方法

1、溫氏法：常用，但殘留血漿量有3%。2、毛細管高速離心法：

WHO定為首選常規(guī)方法，用量少，快速（離心5分鐘），同時可測多個標本，結果準確。

3、血液分析儀法：由紅細胞計數和紅細胞平均體積導出HCT，HCT＝紅細胞計數×紅細胞平均體積。4、放射核素法：ICSH推薦為參考方法。第五十九頁，共八十六頁，2022年，8月28日（三）Hct臨床意義：1、參考值：成年男性：0.40～0.50女性：0.37～0.48兒童：0.33～0.42新生兒：0.47～0.672、增高：見于各種原因所致的血液濃縮可作為補液的指標（燒傷、脫水HCT增高）真性紅細胞增多癥HCT>0.7，RBC(7~10）X1012/L,Hb>180g/L3、減低：見于各種貧血，有助于貧血的鑒別、分類。4、是影響全血粘度的因素之一。第六十頁，共八十六頁，2022年，8月28日五、紅細胞平均指數

【檢測原理】1．手工法根據RBC、Hb、HCT測定結果計算紅細胞平均指數。

2．血液分析儀法MCV由血液分析儀直接測定導出；由儀器測定HGB、RBC可計算出MCH＝HGB/RBC；MCHC＝HGB/（RBC×MCV）。第六十一頁，共八十六頁，2022年，8月28日平均紅細胞容積（meancorpuscularvolume，

MCV）=HCTx1015/RBC（飛升fl）

參考值：80-92fl（1L=1015fl）

三種紅細胞平均值的手工法計算第六十二頁，共八十六頁，2022年，8月28日

三種紅細胞平均值的手工法計算平均血紅蛋白量（meancorpusucularhemoglobin，MCH）=HBx1012/RBC（皮克pg）參考值：27-31pg（1g=1012pg）第六十三頁，共八十六頁，2022年，8月28日平均紅細胞血紅蛋白濃度（meancorpusucularhemoglobinconcentration，MCHC）=HB/HCT（g/L）參考值：320-360g/L

三種紅細胞平均值的手工法計算第六十四頁，共八十六頁，2022年，8月28日

MCV、MCH、MCHC臨床意義第六十五頁，共八十六頁，2022年，8月28日六.網織紅細胞計數

(ReticulocyteCount)定義：

是未完全成熟的紅細胞，是晚幼紅細胞脫核后到完全成熟的紅細胞之間的過渡型紅細胞，其胞漿內殘存有少量嗜堿性物質（RNA），經煌焦油藍活體染色，嗜堿性物質凝集成顆粒，其顆粒又聯(lián)綴成線，而構成淺藍色或深藍色的網狀結構。

第六十六頁，共八十六頁，2022年，8月28日Ret形態(tài)及分型第六十七頁，共八十六頁，2022年，8月28日

網織紅細胞第六十八頁，共八十六頁，2022年，8月28日Ret計數方法：

1、顯微鏡計數法：（活體染色）煌焦油蘭：常用的，染色效果好，但沉渣較多。新亞甲蘭：WHO推薦的，染色效果好，但試劑昂貴。2、儀器法：儀器采用熒光染色和激光測量（流式技術）的原理，不但能客觀地測量大量網織紅細胞，而且還能將其分為高熒光強度、中熒光強度、低熒光強度三類。

第六十九頁，共八十六頁，2022年，8月28日Ret手工計數操作

1.試管法：

染色時間長（30min），效果好，易重復計數。2.玻片法：染色時間短，水分易蒸發(fā)，結果偏低。制薄片，不復染，油鏡下計數1000個RBC。

3.縮小視野法或Miller窺盤。ICSH推薦第七十頁，共八十六頁，2022年，8月28日Miller盤結構第七十一頁，共八十六頁，2022年，8月28日

Ret報告形式Ret分數數（百分數）：是評價紅系造血的有效性最簡單的方法

Ret絕對值：更能準確反映骨髓造血的實際情況熒光Ret：HFR、MFR、LFRRet成熟指數：RMI=（MFR+HFR）/LFR

×100Ret生成指數(代表Ret的生成相當于正常人的多少倍)RPI=Ret%×被測Hct×1正常人HctRet成熟天數第七十二頁，共八十六頁，2022年，8月28日Ret臨床意義

參考值：Ret分數數（0.005-0.015）

Ret絕對值（24-84）×109/L

新生兒（0.002-0.006）

1、Ret增高：表示骨髓生長旺盛。（1）溶貧：高達20%以上。（2）巨幼貧、缺鐵貧：輕度升高。（3）急性失血：5-10天Ret升高明顯，2周后恢復。（4）慢性失血：Ret持續(xù)增高。（5）但骨髓受到白血病、腫瘤侵潤，Ret不規(guī)則升高，不反映骨髓機能。

第七十三頁，共八十六頁，2022年，8月28日Ret臨床意義

2、Ret下降：造血機能減弱。

再障：治療后增高不明顯，低于0.005。如低于15ⅹ109/L可作為急性再障的診斷指標。3、Ret可作為療效的觀察指標。

骨髓移植后21天，Ret>15ⅹ109/L，表示無并發(fā)癥。

第七十四頁，共八十六頁，2022年，8月28日Ret臨床意義4.其他參數意義(儀器所檢)（1）LFR和HFR：可作為鑒別診斷的初篩指標，例如：溶血性貧血時，RET、LFR和HFR明顯增高；腎性貧血患者，HFR上升，LFR下降，RET不增高。（2）RMI（成熟指數）：增高見于溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜，慢性淋巴細胞白血病、急性白血病、真性紅細胞增多癥、再生障礙性貧血，但特發(fā)性血小板減少性紫癜患者的Ret絕對值正常。RMI降低通常與骨髓衰竭或無效造血有關，如巨幼細胞貧血。（3）MFR+HFR：MFR+HFR稱為未成熟的網織紅細胞比率（immaturereticulocytefraction,IRF）,是血液分析儀提供的較新參數。IRF增高是估計骨髓移植后造血恢復的早期指標。第七十五頁，共八十六頁，2022年，8月28日七.點彩紅細胞計數嗜堿性點彩紅細胞（basophilicstipplingcell）：簡稱點彩紅細胞，指在瑞氏染色條件下，成熟紅細胞或幼紅細胞的胞質內出現(xiàn)形態(tài)不一的藍色點狀物（ribonucleicacid,RNA），屬于未完全成熟紅細胞，其顆粒大小不一、多少不等計算公式:50個視野內點彩紅細胞數點彩紅細胞（%）=—————————————5個視野內紅細胞總數×10第七十六頁，共八十六頁，2022年，8月28日點彩紅細胞計數的臨床意義參考值:＜3×10-4如鉛、汞、銀、鉍等金屬中毒及硝基苯、苯胺等中毒時，點彩紅細胞顯著增高.如溶血性貧血、巨幼細胞性貧血、惡性貧血、惡性腫瘤等，此時網織紅細胞增加常表示造血旺盛。第七十七頁，共八十六頁，2022年，8月28日八.

紅細胞沉降率測定

(ErythrocyteSedimentationRate,ESR）定義：指在規(guī)定條件下，單位時間內離體抗凝全血中的紅細胞自然下沉的速率。

（mm/h）第七十八頁，共八十六頁，2022年，8月28日（一）.ESR形成機制

目前尚不明確，但與RBC相互聚集成串錢狀關系密切，也與RBC間電位有關。第七十九頁，共八十六頁，2022年，8月28日（二）.ESR方法魏氏法（ICSH推薦）血沉架上1小時，讀數。現(xiàn)有血沉機自動讀數，也可繪制出曲線。第八十頁，共八十六頁，2022年，8月28日（二）.ESR方法TEST1自動血沉儀：TEST1自動血沉儀是意大利UDINE專利技術檢測ESR的半自動分析系統(tǒng)。微量的EDTA-K2抗凝全血充分混勻后被吸入儀器的毛細管內，20g的離心力下離心，檢測的溫度保持在37。C條件下