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第8頁生物2023高考蛋白質(zhì)和DNA技術(shù)專題測試題和答案聰明出于勤奮,天才在于積累。我們要振作精神,下苦功學(xué)習(xí)。查字典生物網(wǎng)編輯蛋白質(zhì)和DNA技術(shù)專題測試題,以備借鑒。1.我們通常選用豬、牛、羊等動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),來提取和別離血清蛋白。請(qǐng)答復(fù)以下有關(guān)問題:(1)實(shí)驗(yàn)前取新鮮血液,靜置凝固后會(huì)析出淡黃色的液體血清,其中含有的蛋白質(zhì)有________、________等。(2)血清蛋白提取和別離的活動(dòng)程序?yàn)椋篲_______________________________________________________________________________________________________________________________________________,在染色和脫色步驟中,所用試劑分別為__________________、____________________。(3)能利用電泳技術(shù)別離血清蛋白的原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析:此題考查提取和別離血清蛋白的相關(guān)知識(shí)。(1)血清中含有兩種球蛋白、凝集素等多種蛋白質(zhì)。(2)血清蛋白的提取和別離步驟為:點(diǎn)樣電泳染色脫色制干膠板,其中染色、脫色所用試劑分別為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%的考馬斯亮藍(lán)R250染色液、體積分?jǐn)?shù)為7%的醋酸溶液。(3)血清蛋白為兩性電解質(zhì),在一定條件下帶有電荷,可在電場中移動(dòng),故可用電泳技術(shù)進(jìn)行別離。答案:(1)兩種球蛋白凝集素(2)點(diǎn)樣電泳電泳染色脫色制干膠板質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%的考馬斯亮藍(lán)R250染色液體積分?jǐn)?shù)為7%的醋酸溶液(3)血清蛋白為兩性電解質(zhì),在一定條件下帶有電荷,可在電場中移動(dòng)2.血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分,負(fù)責(zé)血液中O2和局部CO2的運(yùn)輸。請(qǐng)根據(jù)血紅蛋白的提取和別離流程圖答復(fù)以下問題。(1)將實(shí)驗(yàn)流程補(bǔ)充完整:A為________________,B為________________。凝膠色譜法的根本原理是根據(jù)________________而到達(dá)蛋白質(zhì)別離的有效方法。(2)洗滌紅細(xì)胞的目的是去除________,洗滌次數(shù)過少,無法除去________;離心速度過高和時(shí)間過長會(huì)使______________________一同沉淀,達(dá)不到別離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是________________________。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是____________________。(3)在洗脫過程中參加物質(zhì)的量濃度為20mol/L的磷酸緩沖液(pH為7.0)的目的是____________________________________________________________________________________________________。如果紅色區(qū)帶__________________,說明色譜柱制作成功。答案:(1)血紅蛋白的釋放樣品的參加和洗脫相對(duì)分子質(zhì)量的大小(2)雜蛋白(血漿蛋白)血漿蛋白白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞離心后的上清液中沒有黃色蒸餾水和甲苯(3)準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境,保持體外的pH和體內(nèi)的一致均勻一致的移動(dòng)3.以下圖為細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制過程示意圖,該過程在體外也可進(jìn)行,以獲得大量相同的DNA片段,該項(xiàng)技術(shù)稱之為PCR技術(shù),又稱多聚酶鏈?zhǔn)椒错?,?qǐng)分析答復(fù):(1)PCR過程與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比,主要有兩點(diǎn)不同:________________________________________________________________________________________________________________________________________________、________________________________________________________________________。(2)PCR技術(shù)過程的三個(gè)步驟:______、______、________________________________________________________________________。(3)假設(shè)PCR過程中,只用一條DNA片段作為模板,請(qǐng)計(jì)算30次循環(huán)后,反響物中大約有多少個(gè)這樣的DNA片段?____________。(4)PCR技術(shù)能在幾小時(shí)內(nèi)將極微量的DNA片段特異性地?cái)U(kuò)增上百萬倍,從而解決了樣品中DNA含量低,難以別離的難題。試舉兩例,說明PCR技術(shù)的應(yīng)用。________________________________________________________________________。答案:(1)PCR過程的引物是一小段單鏈DNA或RNA,而細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制的引物是RNAPCR過程是高溫變性解旋,不需要解旋酶(2)變性復(fù)性延伸(3)230(4)刑偵案件;親子鑒定;疑難疾病的診斷;基因序列分析等(任選兩例)4.1970年,特明和巴爾的摩證實(shí)了RNA病毒能以RNA為模板合成DNA,并發(fā)現(xiàn)了催化此過程的酶。圖為形成cDNA的過程和PCR擴(kuò)增過程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖答復(fù):(1)催化①過程的酶是________。(2)③過程也稱為DNA的變性,此過程在溫度高達(dá)90℃~95℃時(shí)才能完成,說明DNA分子具有________性。(3)由圖中信息分析可知,催化②⑤過程的酶都是________,兩者在作用特性上的區(qū)別是________________。(4)江蘇有一道涼菜白斬雞,雞肉嫩而不韌、味美鮮香。其加工過程中添加了從木瓜中提取的酶制成的嫩肉粉。以下有關(guān)嫩肉粉的表達(dá)中,正確的選項(xiàng)是()A.嫩肉粉可能是通過催化細(xì)胞間的纖維素水解而實(shí)現(xiàn)嫩肉的B.與高溫蒸煮相比,嫩肉粉是通過降低反響活化能而實(shí)現(xiàn)嫩肉的C.嫩肉粉應(yīng)在蒸煮雞肉時(shí)參加,才能實(shí)現(xiàn)嫩肉D.嫩肉粉是一種化工產(chǎn)品,不利于人體健康,實(shí)際應(yīng)用中能少那么少、能無那么無解析:由題圖可知,RNADNA為逆轉(zhuǎn)錄過程,需要逆轉(zhuǎn)錄酶。②⑤都是DNA復(fù)制過程,需要DNA聚合酶。PCR擴(kuò)增使用的某些酶具有耐高溫的特性。答案:(1)逆轉(zhuǎn)錄酶(2)穩(wěn)定(3)DNA聚合酶催化⑤過程的酶耐高溫(4)B5.下面是某校某班同學(xué)在生物技術(shù)實(shí)踐課中進(jìn)行的實(shí)驗(yàn),請(qǐng)答復(fù):(1)在20世紀(jì)50年代,酶已經(jīng)大規(guī)模地應(yīng)用于各個(gè)生產(chǎn)領(lǐng)域,到了70年代又創(chuàng)造了固定化酶與固定化細(xì)胞技術(shù)。在實(shí)際生產(chǎn)中,固定化酶技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是________________________________________________。與固定化酶技術(shù)相比,固定化細(xì)胞固定的是________。在制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中,常用的包埋材料是________。(2)某一同學(xué)運(yùn)用PCR技術(shù),準(zhǔn)備對(duì)別離得到的大腸桿菌一個(gè)DNA分子進(jìn)行體外擴(kuò)增。他往擴(kuò)增儀中參加模板DNA、四種脫氧核苷酸,此外還應(yīng)參加________和________________________________________________________________________。DNA體外擴(kuò)增過程包括了三個(gè)連續(xù)的步驟分別是變性、______和________。(3)還有同學(xué)將大腸桿菌破碎并提取得到大腸桿菌蛋白質(zhì),一同學(xué)利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行別離,在電泳過程中,影響蛋白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的________、________以及分子的形狀等。而另一位同學(xué)那么利用凝膠過濾法別離蛋白質(zhì)(以下圖),他在操作中加樣的正確順序是________。待蛋白質(zhì)接近色柱底端時(shí),用試管連續(xù)收集流出液。先收集到的蛋白質(zhì)與后收集到的蛋白質(zhì)的區(qū)別是________。答案:(1)酶既能與反響物接觸,又容易與產(chǎn)物別離,固定在載體上的酶能反復(fù)利用多酶系統(tǒng)(一系列、多種酶)海藻酸鈉(2)DNA聚合酶引物復(fù)性延伸(3)帶電性質(zhì)分子大小④①②③先收集到的蛋白質(zhì)分子量大、后收集到的分子量小6.在遺傳病及刑偵破案中常需要對(duì)樣品DNA進(jìn)行分析,PCR技術(shù)能快速擴(kuò)增DNA片段,在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬份的DNA拷貝,有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行分析研究的問題。據(jù)圖答復(fù)相關(guān)問題。(1)在相應(yīng)的橫線上寫出引物Ⅱ,并在復(fù)性這一步驟中將引物Ⅱ置于適宜的位置。(2)在相應(yīng)的橫線上寫出循環(huán)一次后生成的DNA分子。(3)假設(shè)將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P標(biāo)記,請(qǐng)分析循環(huán)一次后生成的DNA分子的特點(diǎn):__________________,循環(huán)n次后生成的DNA分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為________。(4)PCR反響過程的前提條件是________,PCR技術(shù)利用了DNA的________原理解決了這個(gè)問題。(5)在對(duì)樣品DNA分析過程中發(fā)現(xiàn),DNA摻雜著一些組蛋白,要去除這些組蛋白可參加的物質(zhì)是________。解析:(1)DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從3端延伸DNA鏈,所以引物就提供了3端,子鏈延伸方向?yàn)?3,引物Ⅰ與b鏈局部堿基互補(bǔ),引物Ⅱ那么與a鏈局部堿基互補(bǔ),且連接到a鏈的3端,故引物Ⅱ的結(jié)構(gòu)為5GAOH,HOAG5。復(fù)性結(jié)果為:3CCAG5(2)經(jīng)過一次循環(huán)后,產(chǎn)生的兩個(gè)DNA分子分別含有引物Ⅰ和引物Ⅱ。(3)由于作為原料的四種脫氧核苷酸被32P標(biāo)記,所以新合成的子鏈均含有放射性,一次循環(huán)后的兩個(gè)DNA分子各有一條鏈含32P,假設(shè)復(fù)制n次,產(chǎn)生子鏈共2n2,其中只有DNA母鏈不含32P,那么其所占比例為2/(2n2)=1/2n。(4)DNA復(fù)制是以兩條母鏈為模板,按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原那么進(jìn)行的。因此,首先要解旋,使兩條母鏈的堿基暴露出來,才能按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原那么把相應(yīng)的堿基一個(gè)個(gè)地連接起來。只有解旋后,再以母鏈為模板合成一小段引物,引物才起作用。DNA分子在80℃~1

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