rochetbil和dbil項(xiàng)目介紹課件

RocheTBIL和DBILTBIL和DBIL檢測(cè)方法學(xué)比較DennyDong;Dec07,2012主要內(nèi)容

膽紅素的代謝膽紅素的分類和臨床應(yīng)用膽紅素的檢測(cè)方法羅氏膽紅素試劑盒特點(diǎn)膽紅素檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化

膽紅素是膽汁中的主要色素，呈橙黃色。膽紅素具有：脂溶性，難溶于水。毒性作用抗氧化（抑制亞油酸和磷脂的氧化）膽色素代謝以膽紅素代謝為中心。

肝臟在膽色素代謝中起著重要作用反映肝臟的分泌與排泄功能。膽紅素測(cè)定的作用膽紅素的生成部位：肝、脾及骨髓等網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞中衰老紅細(xì)胞血紅蛋白珠蛋白血紅素還原膽紅素單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)識(shí)別、吞噬（肝、脾、骨髓）NADPH+H+FeCO膽綠素NADPH+H+(250~300mg/天)膽紅素在血液中的運(yùn)輸膽紅素：脂溶性，難溶于水增高膽紅素的水溶性，有利于運(yùn)輸限制膽紅素通透細(xì)胞膜對(duì)組織造成毒性作用血液：白蛋白膽紅素白蛋白—膽紅素復(fù)合物（可逆結(jié)合）競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合劑：

如磺胺藥，水楊酸，膽汁酸等膽紅素在肝中的轉(zhuǎn)變嬰兒出生7周后，體內(nèi)Y蛋白才會(huì)達(dá)成人水平1.攝取白蛋白—膽紅素復(fù)合物血液肝臟白蛋白(不可逆結(jié)合）膽紅素特異受體細(xì)胞膜胞漿膽紅素載體蛋白膽紅素—Y蛋白膽紅素—Z蛋白內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膽紅素在腸道中的變化

結(jié)合膽紅素膽紅素膽素原（無(wú)色）

(中膽素原、糞膽素原、尿膽素原)

糞膽素尿膽素葡萄糖醛酸基膽素腸道細(xì)菌非結(jié)合膽紅素膽紅素在體內(nèi)的代謝膽汁膽色素代謝總結(jié)膽紅素的分類（1）未結(jié)合膽紅素(Bu)：未與葡萄糖醛酸基結(jié)合，具親脂性，須加入加速劑破壞分子內(nèi)部的氫鍵后才能與重氮試劑反應(yīng)，又稱間接膽紅素。占總膽紅素的4/5。（2）結(jié)合膽紅素(Bc)

：與葡萄糖醛酸基結(jié)合，具親水性，與重氮試劑直接反應(yīng)，又稱直接膽紅素(DBIL)。占總膽紅素的1/5。非結(jié)合膽紅素的結(jié)構(gòu)（α,Bu）血紅蛋白的降解產(chǎn)物在血液中和白蛋白以非共價(jià)鍵的方式結(jié)合在肝臟被清除折疊的結(jié)構(gòu)，幾乎不溶于水。不能直接參與重氮反應(yīng)是新生兒生理性黃疸的最好指標(biāo)結(jié)合膽紅素(β和γ;Bc)在肝細(xì)胞內(nèi)由非結(jié)合膽紅素轉(zhuǎn)化而來(lái)在肝臟的酶作用，生成了單葡萄糖醛酸酯膽紅素和雙葡萄糖醛酸酯膽紅素造成膽紅素分子內(nèi)各基團(tuán)間原有距離增大，難以再形成氫鍵，由此，使膽紅素的親水基團(tuán)暴露在外，表現(xiàn)出水溶性，便于從膽管排入腸道。是膽道梗阻解除后最敏感的指標(biāo)可直接參與重氮反應(yīng)，表現(xiàn)為直接反應(yīng)的膽紅素。黃疸的種類(按血清膽紅素的來(lái)源)：

溶血性黃疸又稱肝前性黃疸。

膽紅素的來(lái)源>肝臟的轉(zhuǎn)化能力游離膽紅素過(guò)多肝細(xì)胞性黃疸又稱肝原性黃疸。肝臟轉(zhuǎn)化能力降低游離和結(jié)合膽紅素均升高阻塞性黃疸又稱肝后性黃疸。結(jié)合膽紅素排泄障礙

結(jié)合膽紅素過(guò)多黃疸是指高膽紅素血癥引起皮膚、鞏膜和粘膜等組織黃染的現(xiàn)象。黃疸的鑒別診斷膽紅素檢測(cè)的臨床意義（1）黃疸及鑒別

DBi/TB比值<20%溶血性黃疸比值40%~60%肝細(xì)胞性黃疸

比值>60%阻塞性黃疸（2）肝細(xì)胞損害程度和預(yù)后的判斷。（3）新生兒黃疸病情掌握。（4）再障等疾病，TB減少。膽紅素的異常代謝黃疸

1、膽紅素（橙黃色）+彈性蛋白組織黃染鞏膜、皮膚、黏膜2、根據(jù)血漿膽紅素濃度，黃疸程度：—隱性黃疸（1.0~2.0mg/dl）—顯性黃疸（>2.0mg/dl）

來(lái)源增多、去路受阻血漿膽紅素濃度升高高膽紅素血癥⑴溶血性黃疸（肝前性黃疸）溶血→血漿游離膽紅素↑肝臟中結(jié)合膽紅素↑→腸道中膽素原重吸收↑→尿膽素原↑→尿膽素↑但是，血漿結(jié)合膽紅素不變，尿膽紅素陰性

溶血→血漿游離膽紅素↑肝臟中結(jié)合膽紅素↑→腸道中膽素原重吸收↑→尿膽素原↑→尿膽素↑但是，血漿結(jié)合膽紅素不變，尿膽紅素陰性。結(jié)合膽紅素⑵肝細(xì)胞性黃疸（肝原性黃疸）肝臟對(duì)膽紅素的攝取、轉(zhuǎn)化障礙→血漿游離膽紅素↑肝內(nèi)毛細(xì)膽管破裂，結(jié)合膽紅素返流入血→血漿結(jié)合膽紅素↑→尿膽紅素陽(yáng)性尿膽素原、尿膽素不確定⑶阻塞性黃疸（肝后性黃疸）膽管阻塞破裂→血漿結(jié)合膽紅素↑→尿膽紅素陽(yáng)性腸道中膽素原生成、重吸收減少→尿膽素原、尿膽素↓游離膽紅素不變；尿三膽1、膽管阻塞破裂→血漿結(jié)合膽紅素↑→尿膽紅素陽(yáng)性2、腸道中膽素原生成、重吸收減少→尿膽素原、尿膽素↓3、重氮試劑間接、直接反應(yīng)雙陽(yáng)性；游離膽紅素不變反相HPLC(A436nm)分離法時(shí)間(min)α:Bu未結(jié)合膽紅素β:mBc單葡萄糖醛酸結(jié)合膽紅素δ:Bd與白蛋白共價(jià)結(jié)合的膽紅素KuenzleCC,etal.:四種血清膽紅素及三種膽汁膽紅素的分離和定量檢測(cè)。JLabClinMed1966;67:282LauffJJ,etal.:血清和膽汁膽紅素反相HPLC分離法。

JChromatogr1981;226:391γ:dBc雙葡萄糖醛酸結(jié)合膽紅素膽紅素的四種成分在血液循環(huán)中結(jié)合膽紅素和白蛋白形成的。白蛋白緩慢地非酶作用置換了原葡萄糖醛酸酯。類似于糖化血紅蛋白。在長(zhǎng)期的高結(jié)合膽紅素血癥患者的血液內(nèi)，才能被檢測(cè)出來(lái)。在血液循環(huán)中的清除緩慢。半衰期2-3周。因?yàn)槟懠t素不存在氫鍵的影響，所以膽紅素可以與重氮直接膽紅素反應(yīng)。Bδ不能通過(guò)腎小球．故不從尿排出。Bδ只存在于人血清而不存在于膽汁，說(shuō)明它不從膽汁排出，即它的代謝調(diào)節(jié)不依賴肝膽的排泄功能δ膽紅素Bδ的代謝及其在疾病時(shí)表現(xiàn)與其它三種組份有重要差別。正常人血清中沒(méi)有Bδ。新生兒黃疸：以Bu為主黃疽。體質(zhì)性肝功能不良性黃疸：(Gilbert‘s綜合癥,葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶(UGT)不足引起）Bδ占TBIL<20%。阻塞性黃疸、肝細(xì)胞黃疸：Bδ占TBIL>50%。認(rèn)為Bδ源于Bc。它的形成與肝的結(jié)合，與肝功能的成熟有關(guān)。δ膽紅素MeRCOOR2CH2CH2MeMeMeRNHCHONHCHNHNHOCH2COOR1CH2CH2mBc=R1

=glucuronicacidandR2

=H(monoglucuronide)dBc=R1

and

R2=glucuronicacid(diclucuronide)結(jié)合膽紅素的結(jié)構(gòu)MeRCOOHCH2CH2MeMeMeRNHCHONHCHNHNHOCH2COOHCH2CH2CHMe=

CH3R

=

CH2非結(jié)合膽紅素的結(jié)構(gòu)

MeRCOOCH2CH2MeMeMeRNHCHONHCHNHNHOCH2COOCH2CH2δ膽紅素:R1或

R2=白蛋白

共價(jià)鍵結(jié)合白蛋白白蛋白δ膽紅素結(jié)構(gòu)主要內(nèi)容

膽紅素的代謝膽紅素的分類和臨床應(yīng)用膽紅素的檢測(cè)方法羅氏膽紅素試劑盒特點(diǎn)膽紅素檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化膽紅素檢測(cè)的常用方法分類1.重氮鹽法－diazoreaction原理：橙黃色的膽紅素與重氮鹽反應(yīng)生成有色的偶氮膽紅素（偶氮膽紅素在酸性PH值為紅色，堿性PH值為藍(lán)色）

一般在酸性環(huán)境下，主波長(zhǎng)546nm，次波長(zhǎng)800nm2.氧化法-oxidativemethods原理：橙黃色的膽紅素被氧化成綠色的膽綠素 450nm主波長(zhǎng)，546nm次波長(zhǎng)3.直接分光光度法（DirectSpectrophotometry）原理：直接檢測(cè)膽紅素的顏色，波長(zhǎng)460nm（血清指數(shù)）4.高壓液相色譜（HPLC）5.經(jīng)皮直接測(cè)量（transcutaneousmethods）膽紅素常用生化檢測(cè)方法重氮鹽法－diazoreaction2，5-二氯苯重氮四氟硼酸鹽法（DPD法）改良Malloy-Evelyn法Jendrassik-GrOf法改良JG法改良間氨基苯磺酸法強(qiáng)生干片法氧化法－oxidative（enzymatic&chemicalmethods）膽紅素氧化酶法（BOD)化學(xué)氧化法oxidative,chemicalmethods釩酸鹽氧化法VanadateMethods硝酸氧化法過(guò)硫酸鹽氧化法綜合氧化劑法復(fù)合有機(jī)氧化法重氮法檢測(cè)膽紅素重氮反應(yīng)（Ehrlich1883）1916年vandenBerghandMuller根據(jù)膽紅素是否直接與重氮試劑反應(yīng)，將其分為直接膽紅素和間接膽紅素，并且應(yīng)用于臨床。JendrassikandGrof法（1938年）結(jié)合膽紅素反應(yīng)快速。游離膽紅素幾乎不參與反應(yīng)（分子折疊，不溶性）。當(dāng)某些物質(zhì)（強(qiáng)酸酸，乙醇，咖啡因和苯甲酸鈉等

）的存在時(shí)，才會(huì)打開(kāi)游離膽紅素間的氫鍵，使溶解在水，并和重氮試劑反應(yīng)。由Doumas領(lǐng)導(dǎo)的AACC小組對(duì)J-G方法改良(1983)。目前確定該方法為總膽紅素的推薦法。總膽紅素=具有加速劑的重氮反應(yīng)直接膽紅素=不加加速劑的重氮反應(yīng)間接膽紅素=總膽紅素-直接膽紅素。按照反應(yīng)條件區(qū)分為直接和間接膽紅素。重氮法檢測(cè)總膽紅素在使用加速劑的條件下，檢測(cè)樣品中的總膽紅素（a、b、g、d膽紅素總和）。目前，國(guó)際上確定了游離膽紅素的標(biāo)準(zhǔn)，也明確采用J-G法檢測(cè)血清總膽紅素的方法為國(guó)際推薦方法?？偰懠t素的檢測(cè)結(jié)果從1980年代后期起，實(shí)現(xiàn)了可比性。國(guó)內(nèi)大多試劑廠商已采用膽紅素血清為校準(zhǔn)品?？偰懠t素檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量大致上問(wèn)題不大（除非產(chǎn)品質(zhì)量低劣或仍然使用非膽紅素的化學(xué)色素為標(biāo)準(zhǔn)）。DPD法(2，5-二氯苯重氮四氟硼酸鹽法)DPD法試劑盒復(fù)溶后保存時(shí)間不長(zhǎng)。該法測(cè)定總膽紅素呈色為紅色，易受溶血的干擾，對(duì)脂血的抗干擾性好。重氮鹽：2，5-二氯苯重氮四氟硼酸鹽HCL,表面活性劑WahlefeldAW,HerzG,BerntE.ModificationoftheMalloy-Evelynmethodforasimple,reliabledeterminationoftotalbilirubininserum.ScandJClinLabInvest1972;29Suppl126:Abstract11.12.主波長(zhǎng)：570nm吸收峰：紫色RocheBIL-T(ACN101)總膽紅素試劑，抗干擾：H<75，L<50改良Malloy-Evelyn重氮法MalloyHT,EvelynKA.Thedeterminationofbilirubinwiththephotoelectriccolorimeter.JBiolChem1937;119:481-490WahlefeldAW,HerzG,BerntE.ModificationoftheMalloy-Evelynmethodforasimple,reliabledeterminationoftotalbilirubininserum.ScandJClinLabInvest1972;29Supplement126:Abstract11.12.重氮鹽：

氨基磺酸和重氮基離子，醋酸鈉，HCL，表面活性劑主波長(zhǎng)：550nm吸收峰：紫紅色1972WahlefeldAW試劑穩(wěn)定性好，抗溶血及脂血的干擾性好。RocheTBILI(ACN294)總膽紅素試劑抗干擾:H<1000，L<0100J-G法

Jendrassik&Grof法（1938年）重氮鹽：對(duì)氨基苯磺酸EDTA，NACl，亞硝酸鈉主波長(zhǎng)：546nm吸收峰：紫紅色RocheDBIL(ACN294)總膽紅素試劑，抗干擾:H<25，L<140JendrassikL,GrofP.VereinfachtephotometrischeMethodenzurBestimmungdesBilirubins.BiochemZ1938;297:81-89.改良J-G法（IFCC參考方法）

改良J-G法2004年確認(rèn)為參考方法，其靈敏度、準(zhǔn)確度和特異性均較高，但顯色時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)。Jendrassik&Grof法（1938年）由Doumas領(lǐng)導(dǎo)的AACC小組提出改良J-G法(1983)。重氮鹽：對(duì)氨基苯磺酸HCL，亞硝酸鈉，碳酸氫鈉主波長(zhǎng)：546nm吸收峰：紫紅色RocheDBIL1(ACN659)總膽紅素試劑，抗干擾:溶血干擾，L<100LoDH,WuTW.AssessmentofthefundamentalaccuracyoftheJendrassik-Gróftotalanddirectbilirubinassays.ClinChem1983;29:31-36.改良間氨基苯磺酸重氮法

重氮鹽：3,5間氨基苯磺酸磷酸，HEDTA，NaClRocheBILD2(ACN734)總膽紅素試劑，抗干擾:H<25，L<750Roche于2012年上市試劑開(kāi)瓶穩(wěn)定期為6周，加強(qiáng)了δ膽紅素的檢測(cè)，抗干擾能力得到了提升。主波長(zhǎng)：546nm吸收峰：紫紅色改良間氨基苯磺酸重氮法vs改良JG法

重氮鹽：3,5間氨基苯磺酸－2,5對(duì)氨基苯磺酸

緩沖體系：磷酸，HEDTA，NaCl（PH1.9）

HCL，亞硝酸鈉，碳酸氫鈉（PH1.2）主要特點(diǎn)。緩沖體系的PH值略有升高，減少了膽紅素的自然氧化。更新緩沖體系，減少與白蛋白結(jié)合的游離膽紅素溶解在反應(yīng)體系中。重氮鹽由對(duì)位改為間位，讓重氮反應(yīng)更加平穩(wěn)。提高了δ膽紅素的結(jié)合能力。---優(yōu)勢(shì)試劑開(kāi)蓋上機(jī)穩(wěn)定性總體增加，可達(dá)6周。抗溶血和脂血干擾能力得到了提升。肝素干擾不會(huì)導(dǎo)致假性偏的檢測(cè)。低的測(cè)試結(jié)果，適用于新生兒樣本。準(zhǔn)確度增加，可最大程度避免“直接膽紅素濃度>總膽紅素濃度”的矛盾檢測(cè)結(jié)果。均為即用型試劑盒，不需要手工制備。改良間氨基苯磺酸重氮法

二甲亞砜（DMSO）法DMSO法的最大優(yōu)點(diǎn)為反應(yīng)時(shí)間短，呈色后穩(wěn)定性極佳（可穩(wěn)定近2小時(shí)）對(duì)脂血抗干擾性較強(qiáng)，受溶血干擾較輕血紅蛋白＞3.5g/L時(shí)依然有較大的干擾只能測(cè)定總膽紅素膽紅素氧化酶（BOD）法膽紅素氧化酶（BOD）在堿性環(huán)境中可氧化所有膽紅素成分，包括大部分（＞85%）的Bδ，這一特性可用于總膽紅素測(cè)定。在酸性條件下，mBc、dBc和大部分Bδ均被氧化，只有Bu不被氧化，這一特性可用于Bc（結(jié)合膽紅素或直接膽紅素）的測(cè)定。可根據(jù)不同膽紅素反應(yīng)的最適pH差別，可分別定量測(cè)定總/直膽。特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好，對(duì)溶血、脂血等抗干擾性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)單，適用于自動(dòng)化測(cè)定等。但該法所涉及的工具酶價(jià)格昂貴，故商品試劑價(jià)格昂貴。膽紅素氧化酶容易受到血清蛋白，尤其是白蛋白的影響，這主要由于作為底物的膽紅素在摻入血清白蛋白的α螺旋鏈時(shí)，底物便不能接近酶分子中的活性中心（這一現(xiàn)象稱為立體障礙）。與血清白蛋白結(jié)合的δ膽紅素在保持白蛋白α螺旋鏈的pH范圍內(nèi)對(duì)膽紅素氧化酶的作用有抵抗性。氧化酶法特異性較好，但酶的來(lái)源、純度、穩(wěn)定性等問(wèn)題，目前較少使用釩酸鹽法1993年日本和光開(kāi)發(fā)出商品釩酸鹽膽紅素氧化法試劑。缺點(diǎn)：與d膽紅素的反應(yīng)不充分，血清中膽綠素也會(huì)干擾到膽紅素的檢測(cè)，直接膽紅素，溶血對(duì)測(cè)定值會(huì)有負(fù)誤差。釩酸鹽環(huán)保問(wèn)題。DoumasBT,YeinF,PerryB,etal:Determinationofthesumofbilirubinsugarconjugatesinplasmabybilirubinoxidase.ClinChem45:1255-1260,1999Tbil檢測(cè)PH＝8，主波長(zhǎng)450nm，吸收峰：黃色DBIL檢測(cè)PH＝4，主波長(zhǎng)450nm，吸收峰：黃色PH＝10時(shí)，選擇性氧化雙葡萄糖醛酸脂和5%的的非結(jié)合膽紅素，但不包含d膽紅素，血清中膽綠素也會(huì)干擾到膽紅素的檢測(cè)。優(yōu)點(diǎn)：試劑穩(wěn)定性好，抗干擾能力強(qiáng)。BILD2vsDBIL1vsWako釩酸法

BILD2DBIL1WAKODBIL檢測(cè)方法改良間氨基苯磺酸法改良JG法（參考方法）釩酸鹽法開(kāi)瓶穩(wěn)定期6周14天4周溶血干擾H<25H<25溶血負(fù)誤差脂血干擾L<750L<100脂血幾無(wú)干擾吸收峰紫紅色紫紅色黃色低值結(jié)果準(zhǔn)確性優(yōu)良差(血清本底對(duì)低值結(jié)果干擾）d膽紅素檢測(cè)能力優(yōu)良差試劑環(huán)保性良良差（人體釩酸鹽中毒）線性范圍0.09-170.1-100.04-20精密度1.9%2.0%5%（>1mg/dL)準(zhǔn)確度偏差4.8%4.8%20%（>1mg/dL)強(qiáng)生Vitros干片法膽紅素檢測(cè)2種干片（TBil/Bubc），

2種方法學(xué)（重氮法/光譜法）TBIL干片：重氮反應(yīng)以J-G方法為參考方法使用540nm和

460nm波長(zhǎng)BuBc干片：膽紅素組分-分光光度法以HPLC方法參考方法使用400nm和460nm波長(zhǎng)[TBIL]=[Bu]+[mBc]+[dBc]+[Bdelta]TBIL干片檢測(cè)膽紅素的全部組分Vitros膽紅素的分析方法—Tbil干片地城[BuBc]=[Bu]+[mBc]+[dBc]

檢測(cè)的BU

檢測(cè)的BCVitros膽紅素的分析方法—BuBc通過(guò)酶染劑增強(qiáng)游離膽紅素的反射光強(qiáng)度。通過(guò)不同的反射光譜測(cè)量，一張干片同時(shí)檢測(cè)Bu和Bc。由于δ膽紅素分于體積較大而被阻止在擴(kuò)散層而無(wú)法到達(dá)反射層。所BUBC干片不直接測(cè)定δ膽紅素。

δ膽紅素＝TBII－BUBC膽紅素主要內(nèi)容

膽紅素的代謝膽紅素的分類和臨床應(yīng)用膽紅素的檢測(cè)方法羅氏膽紅素試劑盒特點(diǎn)膽紅素檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化12144336216P模塊小包裝

12144492216/12144506216D模塊大包裝

BIL-TACN101－DPD重氮法檢測(cè)原理在洗滌劑作用下釋放出間接膽紅素。隨后總膽紅素在強(qiáng)酸性條件下（pH值1–2）與2,5-二氯苯基重氮鹽耦合形成偶氮膽紅素。膽紅素+重氮離子????→偶氮膽紅素形成的紅色偶氮染料的色強(qiáng)度與總膽紅素濃度成正比，光度計(jì)測(cè)定。試劑-工作溶液R1表面活性劑；鹽酸：100mmol/LR2，R2a表面活性劑；鹽酸：100mmol/L；2,5-二氯苯基重氮鹽：3.0mmol/L穩(wěn)定性：R1：即用型42天R2：配制好后14天11822713190P模塊小包裝

11877941190/11877950190DP大包裝

TBILIACN018－改良Malloy-Evelyn重氮法檢測(cè)原理在加入適合的增溶劑后，總膽紅素與酸性介質(zhì)中的重氮離子相結(jié)合。膽紅素+重氮離子????→偶氮膽紅素生成的偶氮膽紅素顏色強(qiáng)度與總膽紅素濃度成比例，光度計(jì)測(cè)定。試劑-工作溶液R1 C2H3NaO2（乙酸鈉緩沖液）：85mmol/L；H3NO3S（氨基磺酸）：110mmol/L；表面活性劑；增溶劑R2

HCl：100mmol/L；重氮離子：3mmol/L穩(wěn)定性：R1：即用型35天R2：即用型35天11555413216P模塊小包裝

BIL-DACN294－JG法檢測(cè)原理重氮化對(duì)氨基苯磺酸（對(duì)氨基苯磺酸與酸化亞硝酸鈉反應(yīng)產(chǎn)生）與膽紅素反應(yīng)形成偶氮膽紅素。在直接膽紅素檢測(cè)中，僅有結(jié)合膽紅素與重氮化對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)。膽紅素+重鹽離子????→偶氮膽紅素所形成的紅色偶氮染料的顏色強(qiáng)度與直接（結(jié)合）膽紅素濃度成正比，可采用光度計(jì)進(jìn)行測(cè)量。試劑-工作溶液R1 EDTA：1.5mmol/L；NaCl：152.5mmol/L。R2 2,5二氨基苯磺酸（對(duì)氨基苯磺酸）：29mmol/L；鹽酸：170mmol/LR2a 亞硝酸鈉：25mmol/L.穩(wěn)定性：R1：即用型6周

R2：配制后7天11986660018/11986651018因子法大包裝

DBILI大包裝ACN659－改良JG法比色法?樣本加入R1，

加入R2并開(kāi)始反應(yīng)：重氮化對(duì)氨基苯磺酸（對(duì)氨基苯磺酸與酸化亞硝酸鈉反應(yīng)產(chǎn)生）與膽紅素反應(yīng)形成偶氮膽紅素。在直接膽紅素檢測(cè)中，僅有結(jié)合膽紅素與重氮化對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)。膽紅素+重鹽離子????→偶氮膽紅素所形成的紅色偶氮染料的顏色強(qiáng)度與直接（結(jié)合）膽紅素濃度成正比，可采用光度計(jì)進(jìn)行測(cè)量。試劑-工作溶液R1 鹽酸：50mmol/LR2 對(duì)氨基苯磺酸：25.7mmol/L；鹽酸70mmol/L,亞硝酸鈉：2.7mmol/L，碳酸氫鈉13.9mmol/L穩(wěn)定性：R1：即用型至有效期，R2:配制后14天因子法：使用mg/dL單位保留兩位小數(shù)K因子=2510理論因子：使用umol/L單位，保留一位小數(shù)2510X17.1/10=4292.1，經(jīng)驗(yàn)設(shè)置成550005589037190新一代直膽試劑盒

BILD2ACN734－改良間氨基苯磺酸法檢測(cè)原理重氮化間氨基苯磺酸（間氨基苯磺酸與酸化亞硝酸鈉反應(yīng)產(chǎn)生）與膽紅素反應(yīng)形成偶氮膽紅素。在直接膽紅素檢測(cè)中，僅有結(jié)合膽紅素與重氮化對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)。膽紅素+重鹽離子????→偶氮膽紅素所形成的紅色偶氮染料的顏色強(qiáng)度與直接（結(jié)合）膽紅素濃度成正比，可采用光度計(jì)進(jìn)行測(cè)量。試劑-工作溶液R1 磷酸：85mmol/L，HEDTA:4.0mmol/L，NaCl:50mmol/L;表面活性劑pH1.9R2 3.5間氨基苯磺酸：1.5mmol/L；pH1.3穩(wěn)定性：R1:即用型6周，R2即用型：6周貨號(hào)代碼ACN代碼試劑成分及方法名稱規(guī)格包裝人份開(kāi)瓶穩(wěn)定期使用模塊線性mg/dL干擾主/次波長(zhǎng)主波長(zhǎng)顏色1214449221612144506216BIL-T1012，5-二氯苯重氮四氟硼酸鹽,HCL,表面活性劑

（DPD重氮法）總膽紅素

T-BilirubinModD-DPDR1:4x653mlR2:4x146ml;

R2a:4x14614040tests14天D0.1-30H<75L<50570/700紫色12144336216R1:4x66;R2:4x16mL;

R2a:4x16ml1240testsP1187794119011877950190TBILI018氨基苯磺酸，醋酸鈉，HCL，表面活性劑（改良Malloy-Evelyn重氮法）總膽紅素

BilirubintotalR1:6x250mlR2:6x80ml6780tests5周DP0.1-35H<1000L<1000546/700紫紅色11822713190R1:6x62;

R2:6x19ml1400testsPWakoTotalBil開(kāi)放表面活性劑，釩酸（釩酸鹽氧化法）和光礬酸鹽法總膽紅素試劑盒R1:4x49ml;

R2:4X15ml

4周P0.04-40溶血幾無(wú)影響450/546黃色11986660018DBIL16592,5對(duì)氨基苯磺酸，HCL，亞硝酸鈉，碳酸氫鈉（改良JG重氮法）直接膽紅素(K因子)

DirectBilirubin(D-BILI,Kfactor)2位小數(shù)

K因子

mg/dL2510;umol/L42921R1:6x244mlR2:6x64;

R2a→6x64ml7500tests14天DP0.1-10溶血干擾

L<100570/660紫色12217716001R1:6x62;R2→6x15;

R2a→6x15ml1500testsP11555413216DBIL2942,5對(duì)氨基苯磺酸，EDTA，NACl，亞硝酸鈉（Jendrassik-GrOf重氮法）直接膽紅素檢測(cè)試劑盒

BilirubindirectCoMeHIT917R1:5x17ml;

R2:5x6;R2a:1x3ml400tests7天P0.1-10H<25L<140546/700紫紅色BILD27343,5間氨基苯磺酸，磷酸，HEDTA，NaCl（改良3,5間氨基苯磺酸重氮法）直接膽紅素檢測(cè)試劑盒

BilirubindirectGen.2ModPR1:4x66ml;

R2:4X17ml1216tests6周P0.09-17H<25L<750546/800紫紅色WakoDireBil開(kāi)放表面活性劑，礬酸（釩酸鹽氧化法）和光礬酸鹽法直接膽紅素試劑盒R1:4x38ml;

R2:4X11ml

4周P0.04-20溶血負(fù)誤差450/546黃色物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收－吸收互補(bǔ)光溶液之所以呈現(xiàn)不同的顏色，是與它對(duì)光的選擇性吸收有關(guān)。當(dāng)一