艾滋病實(shí)驗(yàn)室的生物安全教學(xué)內(nèi)容

艾滋病實(shí)驗(yàn)室的生物安全疫情呈緩慢上升趨勢，綜合防治效果開始顯現(xiàn)從2000年到2004年疫情呈快速上升趨勢，年平均增幅達(dá)164%；綜合防治效果開始顯現(xiàn)。2005年以后，疫情上升趨勢放緩，年平均增幅為12%。盡管疫情增幅有所減緩，但由于新增感染數(shù)逐年增加，基數(shù)持續(xù)加大，危害仍在持續(xù)加重。我省艾滋病流行概況疫情分布范圍持續(xù)擴(kuò)大，從2002年的50個縣增加到2009年的114個縣。地區(qū)差異明顯，在全省歷年累計(jì)報(bào)告HIV/AIDS中，運(yùn)城市報(bào)告占42.87%，太原市占21.39%，而忻州市只占1.87%，呂梁市占1.49%。2009年報(bào)告的HIV/AIDS中，太原市占34.39%，運(yùn)城市占24.58%，而忻州市和呂梁市各占2.16%。疫情分布范圍擴(kuò)大，地區(qū)差異明顯

山西省自2006年開始，性傳播成為主要傳播途徑，持續(xù)保持在較高比例，每年報(bào)告的HIV/AIDS中約30%-40%為性傳播。2009年占38.1%。

2006年首次報(bào)告經(jīng)男男同性傳播，截止到2009年底，已經(jīng)累計(jì)報(bào)告95例，管理104例。數(shù)量快速增多，分布在全省除朔州市的10個市。性傳播成為主要傳播途徑，同性性傳播上升速度明顯

青年成為艾滋病感染的主要人群

自2006年開始，每年報(bào)告HIV/AIDS中，20～29歲年齡組比例持續(xù)增加，約占當(dāng)年報(bào)告數(shù)的1/3，成為艾滋病病毒感染的主要人群。流動人口成為艾滋病傳播的重要

人群

外來人口和流動人口中發(fā)現(xiàn)的艾滋病感染者逐年增加，從2004年的6.3%上升到2009年的40.55%。該群體在我省流動、生活，作為艾滋病傳播的主要人群，給我省艾滋病防治工作帶來極大挑戰(zhàn)，是艾滋病防控的重點(diǎn)和難點(diǎn)艾滋病檢測艾滋病檢測工作須遵守《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》《全國艾滋病檢測工作管理辦法》《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范（2009版）》艾滋病檢測HIV抗體檢測分為篩查試驗(yàn)（包括初篩和復(fù)檢）和確證試驗(yàn)篩查試驗(yàn)常用方法快速檢測酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（第三代或第四代試劑）試劑包被抗原或抗體類型及來源窗口期方法檢測抗體特點(diǎn)第一代（1985）HIV-1型抗原

(病毒裂解產(chǎn)物)30-60天間接法lgG假陽性較多，血清要高度稀釋，靈敏度低，僅能檢測HIV-1第二代（1990）HIV（1+2型）抗原（基因重組或合成多肽）28-35天間接法lgG靈敏度和特異性優(yōu)于第一代，但只能檢測HIV-lgG第三代HIV（1+2型）抗原（基因重組）14-25天雙抗原夾心法LgG+lgM可檢測HIV不同的抗體亞類（lgG、lgM、lgA等）靈敏度、特異性均較高第四代HIV（1+2型）抗原（基因重組+抗-p24抗體）10-18天雙抗原夾心法和雙抗體夾心法LgG+lgM+Ag檢測HIV（1+2型）抗體和p24抗原，明顯縮短窗口期，進(jìn)一步降低輸血的殘余危險(xiǎn)度篩查結(jié)果

陰性——出具“HIV抗體陰性”報(bào)告陽性——填寫“HIV抗體篩查陽性送檢單”，按照有關(guān)要求送樣品至市級篩查中心實(shí)驗(yàn)室或確證實(shí)驗(yàn)室，必要時可出具“HIV抗體待復(fù)檢”報(bào)告一般工作流程（酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn))檢測試驗(yàn)判斷結(jié)果填寫《HIV抗體篩查陽性送檢單》，上報(bào)篩查中心實(shí)驗(yàn)室或確證實(shí)驗(yàn)室，必要時可出具待復(fù)檢報(bào)告陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)評價試驗(yàn)雙孔復(fù)查均陽性均陰性出具陰性報(bào)告外部質(zhì)控：受控試驗(yàn)有效，如失控，分析原因重新進(jìn)行試驗(yàn)艾滋病的實(shí)驗(yàn)室安全根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》，艾滋病毒（HIV）屬于乙類傳染病，在衛(wèi)生部2006年公布《人類傳染的病源微生物名錄》中將艾滋病毒（1和2型）列為危害程度第二類病原微生物。根據(jù)《人類傳染的病源微生物名錄》要求：艾滋病血清檢測屬于未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作，應(yīng)在符合BSL-2實(shí)驗(yàn)室的艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室（考核發(fā)證）中進(jìn)行。HIV的分類及防護(hù)要求危害程度分類

生物安全級別病毒培養(yǎng)

BSL-3動物感染實(shí)驗(yàn)

BSL-3未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作

BSL-2滅活材料的操作

BSL-1無感染性材料的操作

BSL-1個體防護(hù)的配備原則BSL－2實(shí)驗(yàn)室除符合BSL－1的要求外，還應(yīng)該符合下列條件：在實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)穿著工作服或罩衫等防護(hù)服。離開實(shí)驗(yàn)室時，防護(hù)服必須脫下并留在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。不得穿著外出。用過的工作服應(yīng)先消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。當(dāng)手可能接觸感染材料、污染的表面或設(shè)備時應(yīng)戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或?yàn)R出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實(shí)驗(yàn)室。工作完全結(jié)束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。當(dāng)微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，而必須采取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護(hù)裝置（護(hù)目鏡、面罩、個體呼吸保護(hù)用品或其他防濺出保護(hù)設(shè)備）。

在安排工作人員的實(shí)驗(yàn)室區(qū)域時，要根據(jù)其工作的種類和所涉及的生物試劑，對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境做好安全檢查。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿隔離衣、戴手套，必要時（如對初篩陽性標(biāo)本進(jìn)行復(fù)測或確認(rèn)時，或直接對HIV毒種進(jìn)行操作時）戴防護(hù)眼鏡，以防污染暴露的皮膚和衣物。不用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。如接觸物傳染性危險(xiǎn)大，可戴雙層（兩付）手套以增加保護(hù)。操作時手套破損，應(yīng)立即丟棄、洗手并戴上新手套。禁止采用口腔吸液管，必須使用移液器來操作實(shí)驗(yàn)室的所有液體。操作中有標(biāo)本、檢測試劑外濺時應(yīng)及時消毒。對大量濺出的濃度高的傳染物在清潔之前應(yīng)先用1%次氯酸鈉溶液浸泡，然后戴上手套擦凈。工作完畢，要對工作臺面消毒。工作臺面應(yīng)當(dāng)用0.1%0.2%次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上；工作完畢，脫去手套后洗手，再脫去工作衣，用肥皂和流動水洗手。血清及其它體液樣品均應(yīng)嚴(yán)格按要求妥善保存，HIV抗體陽性樣品應(yīng)做好標(biāo)記單獨(dú)保存。實(shí)驗(yàn)室的安全操作避免利器的使用盡量避免在實(shí)驗(yàn)室使用針頭、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺傷。如果必須使用，在處理或清洗時應(yīng)采取措施防止刺傷或劃傷，并應(yīng)對用過的物品進(jìn)行消毒處理。盡量使用安全針具采血，如蝶形真空針，自毀性針具等，以降低直接接觸血液和刺傷的危險(xiǎn)性。應(yīng)將用過的銳器直接放入耐刺、防滲漏的利器盒，針頭直接放入堅(jiān)固的容器內(nèi)，消毒后廢棄。禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片等銳器。從大量的國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染的報(bào)告中，可以發(fā)現(xiàn)：大多實(shí)驗(yàn)室感染事件是由人為意外事故或違規(guī)操作而造成的，且是可以最大限度減少的！

操作者在實(shí)驗(yàn)過程中的疏忽或錯誤，有時會造成嚴(yán)重后果，對操作者本人、共同進(jìn)行操作的工作人員和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境造成威脅。因此，妥善、果斷地處理這些意外事故對于保證實(shí)驗(yàn)室安全至關(guān)重要。菌（毒）外溢在臺面、地面和其他表面1.處理人員應(yīng)戴手套，穿防護(hù)服，必要時需進(jìn)行臉和眼睛防護(hù)。2.用布或紙巾覆蓋并吸收溢出物。3.向紙巾上傾倒適當(dāng)?shù)南緞⒘⒓锤采w周圍區(qū)域。通?？梢允褂?%漂白劑溶液（次氯酸鈉溶液）；但在飛機(jī)上發(fā)生溢出時，則應(yīng)該使用季銨鹽類消毒劑，如苯扎溴銨等。4.使用消毒劑時，從溢出區(qū)域的外圍開始，向中心進(jìn)行處理。5.作用適當(dāng)時間后（例如30分鐘），將所處理物質(zhì)清理掉。如果含有碎玻璃或其他銳器，則要使用簸箕或硬的厚紙板來收集處理過的物品，并將它們置于可防刺透的容器中以待處理。6.對溢出區(qū)域再次清潔并消毒（如有必要，重復(fù)第2～5步）。7.將污染材料置于防漏、防穿透的廢棄物處理容器中。8.在成功消毒后，通知主管部門目前溢出區(qū)域的清除污染工作已經(jīng)完成。菌（毒）外溢在臺面、地面和其他表面菌（毒）外溢在防護(hù)服上應(yīng)立即進(jìn)行局部消毒，更換。污染的防護(hù)服用消毒液浸泡后進(jìn)行高壓滅菌處理。菌（毒）外溢到皮膚粘膜這種情況被視為有很大危險(xiǎn)，應(yīng)立即停止工作，能消毒的用消毒液在污染部位進(jìn)行消毒，然后用水沖洗15-20min。處理后安全撤離，視情況隔離觀察，期間根據(jù)條件進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)防治療。皮膚刺傷

若皮膚被刺破應(yīng)被視為有極大危險(xiǎn)，應(yīng)立即停止工作，對傷口進(jìn)行擠血，用水沖洗消毒。視情況隔離觀察，其間根據(jù)條件進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)防治療。離心管發(fā)生破裂

非封閉離心桶的離心機(jī)內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂，這種情況被視為發(fā)生氣溶膠暴露事故，應(yīng)立即加強(qiáng)個人防護(hù)力度，其處理原則如下：（1）如果機(jī)器正在運(yùn)行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉機(jī)器電源，停止后密閉離心筒至少30min，使氣溶膠沉積。

（2）如果機(jī)器停止后發(fā)現(xiàn)破裂，應(yīng)立即將蓋子蓋上，并密閉至少30min。發(fā)生這兩種情況時都應(yīng)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。隨后的所有操作都應(yīng)加強(qiáng)個人呼吸保護(hù)并戴厚橡膠手套，必要時可在外面戴一次性手套。當(dāng)清理玻璃碎片時應(yīng)當(dāng)使用鑷子，或用鑷子夾著的棉花來進(jìn)行。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放在無腐蝕性的、已知對相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)浸泡。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個有消毒劑的容器中，然后回收。離心機(jī)內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑反復(fù)擦拭，然后用水沖洗并干燥。清理時所使用的全部材料都應(yīng)按感染性廢棄物處理。離心管發(fā)生破裂工作人員職稱、數(shù)量、上崗培訓(xùn)，復(fù)訓(xùn)上崗人員從事工作前必須進(jìn)行HIV抗體（乙型肝炎丙型肝炎等肝炎病毒標(biāo)記物）的檢測入個人檔案每半年到一年做一次HIV抗體復(fù)測，并保留血樣一年以上遇有意外事故，接觸者應(yīng)在接觸當(dāng)時、4周、8周、12周和6個月各采血檢查一次健康監(jiān)護(hù)艾滋職業(yè)暴露的處理

局部緊急處理局部壓，擠，沖，洗局部消毒：75%酒精，0.2%次氯酸鈉，0.5%碘伏，0.2-0.5%過氧乙酸眼睛，粘膜：沖洗向所在單位有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)向當(dāng)?shù)丶部刂行模ǚ酪卟块T）報(bào)告及早報(bào)告，作好處理緊急報(bào)告咨詢與宣傳穩(wěn)定情緒了解全過程后分析感染可能性提供相關(guān)知識防止傳播向有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)宣傳，做好保密，妥善處理暴露者風(fēng)險(xiǎn)評估緊急處理的質(zhì)量服藥方案明確感染和措施效果流行病學(xué)和實(shí)驗(yàn)研究證明

增加感染的危險(xiǎn)因素接觸血液量大，接觸時間長（血量）受損傷口深（深度）造成傷口