心肌酶和心肌蛋白的檢測(cè)課件

心肌酶和心肌蛋白檢測(cè)概述

心臟是人體最重要的器官之一，它與血管組成人體的血液循環(huán)系統(tǒng)。擔(dān)負(fù)著氧、二氧化碳、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、中間代謝產(chǎn)物、激素等物質(zhì)的運(yùn)輸。心血管疾病是發(fā)達(dá)國(guó)家的第一位死因心肌損傷是指伴心肌細(xì)胞壞死的疾病，包括急性心肌梗死（心內(nèi)膜下心肌梗死，穿透性心肌梗死，非Q波性壞死）、不穩(wěn)定性心絞痛，心肌炎。急性心肌梗死（AMI）是最常見(jiàn)的疾病之一，且發(fā)病率呈逐年增加的趨勢(shì)。因此急性心肌梗死的早期診斷對(duì)于治療是非常重要的U.S.A.RussiaEastEuropeWestEuropeChinaIndiaAustraliaSoutheastAsiaAfrica50403020100%ofalldeaths心血管疾病的死亡率AHASupplement19942004動(dòng)脈粥樣硬化暫時(shí)性腦缺血(TIA)

缺血性中風(fēng)嚴(yán)重腿部缺血不穩(wěn)定心絞痛(UA)血栓急性心肌梗死(AMI)急性冠脈綜合征(ACS)腦血管疾病外周血管疾病(PAD)斑塊形成穩(wěn)定性心絞痛間歇性跛行心血管疾病:

一個(gè)連續(xù)漸進(jìn)的過(guò)程Adaptedfrom:

StaryH.C.Circulation.1995;92:1355-1374

FusterV.VascMed.1998;3:231-239

RossR.NEJM.1999;340:115-126心力衰竭心肌損傷斑塊心肌損傷標(biāo)志物CK/CK-MB集中在胞核、線粒體；cTn在肌漿中是細(xì)絲的一部分；Mb散在分布肌漿中。心肌細(xì)胞

7理想的心肌損傷標(biāo)志物條件

高敏感性和高特異性；主要或僅存在于心肌組織（特異），在心肌中有較高的含量，在正常血液中不存在，可反映小范圍的損傷（敏感）能檢測(cè)早期心肌損傷，且窗口期長(zhǎng)；能估計(jì)梗死范圍大小，判斷預(yù)后；能評(píng)估溶栓效果；檢測(cè)方法簡(jiǎn)便快速；其應(yīng)用價(jià)值已由臨床所證實(shí)（一）傳統(tǒng)的心肌酶譜肌酸激酶(CK) α-羥丁酸脫氫酶(HBDH) 門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶

(AST/GOT)

乳酸脫氫酶(LD)

乳酸脫氫酶同功酶肌酸激酶同工酶及其亞型

10（1）LD及其同工酶

細(xì)胞的胞漿和線粒體中

H4(LD1)，MH3(LD2)，M2H2(LD3)，M3H(LD4)，M4(LD5)；肝臟和骨骼肌所含LD以LD4和LD5為主心臟、腎臟和紅細(xì)胞所含的LD同工酶以LD1和LD2為主；LD的半壽期為57～170h，1.分布二：參考值：總LD活性104-245U/L同工酶LD1(32.7±4.60)%LD2(45.1±3.53)%LD3(18.5±2.96)%LD4(2.90±0.89)%LD5(0.85±0.55)%LD1/LD20.45～0.7；13（2）CK及其同工酶細(xì)胞胞質(zhì)由M和B兩種亞單位組成的二聚體CKBB(CK1)存在于腦組織中，CKMB(CK2)和CKMM(CK3)存在各種肌肉組織中；CKMB可分為MB1和MB2（為主）兩種異型

CK-MB占心肌總CK的l5%～25%（骨骼肌中為1~2%）。CK半壽期：10～12h1.分布14CKMB的質(zhì)量檢測(cè)：1985年，單克隆抗體法，其診斷AMI較酶法更敏感、更穩(wěn)定、更快（10～40min），且可以自動(dòng)化。

CK同工酶亞型：常用高壓電泳分離（快速、敏感）2.檢測(cè)153.臨床意義（CK及其同工酶）（1）％CK-MB：CK-MB/總CK（測(cè)酶活性）

總CK＞100U／L，CK-MB＞15U／L，％CKMB＜6％，多考慮肌肉疾病，％CKMB在6％～25%，AMI診斷可成立％CKMB＞25％，有CK–BB或巨型CK存在。較早期診斷AMI、估計(jì)梗死范圍大小或再梗死。（2）觀察再灌注的效果：溶栓后幾小時(shí)內(nèi)，

CK-MB繼續(xù)升高，然后下降（沖洗現(xiàn)象）。

急性心肌梗死后心肌酶的時(shí)相變化對(duì)單純性急性心肌梗死病人心肌酶的生理變異在應(yīng)用心肌酶對(duì)AMI進(jìn)行診斷時(shí)，需考慮生理因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。1．性別：LDH在出生時(shí)為成人兩倍，隨著年齡增長(zhǎng)逐漸下降，到14歲時(shí)達(dá)成人水平。2．年齡：3．運(yùn)動(dòng)：血清CK在男性明顯高于女性，升高程度和運(yùn)動(dòng)量及持續(xù)時(shí)間有關(guān)，也與運(yùn)動(dòng)者是否經(jīng)常鍛煉有關(guān)，訓(xùn)練有素的運(yùn)動(dòng)員，其心肌酶升高幅度小。

3血清心肌酶的測(cè)定對(duì)急性心肌梗死的診斷存在的不足之處：

③特異性較差①酶活性升高出現(xiàn)較晚②持續(xù)時(shí)間短（1）肌紅蛋白（myoglobin，Mb）

生物化學(xué)特性Mb是一種氧結(jié)合蛋白，廣泛存在于各種肌肉中（特異性不高），約占肌肉中所有蛋白的2％。

Mb分子量小，僅17.8kD，位于胞質(zhì)中，故AMI發(fā)生后出現(xiàn)較早釋放入血。CK-MB（84kD）LD（134kD）當(dāng)AMI病人發(fā)作后0.5～2h即升高。5～12h達(dá)高峰，18～30h恢復(fù)至正常水平。2122臨床應(yīng)用與評(píng)價(jià)在急性心肌梗死發(fā)作12h內(nèi)診斷敏感性很高，有利于早期診斷，是至今出現(xiàn)最早的急性心肌梗死標(biāo)志物。能用于判斷再灌注是否成功。是判斷再梗死的良好指標(biāo)：Mb消除很快在胸痛發(fā)作2～12h內(nèi)，Mb陰性可排除急性心肌梗死（Mb的陰性預(yù)測(cè)價(jià)值為100％）。23Mb與碳酸酐酶Ⅲ聯(lián)用可提高早期診斷AMI的特異性。TroponinT(39.7kD)連接肌鈣蛋白復(fù)合物至原肌球蛋白細(xì)絲TroponinC(18kD)結(jié)合鈣離子使肌肉收縮

TroponinI(22.5kD)在靜止?fàn)顟B(tài)抑制收縮

肌鈣蛋白(Troponin，Tn)2.檢測(cè)方法通過(guò)cTn的特異性單克隆抗體利用化學(xué)發(fā)光及電化學(xué)發(fā)光的方法進(jìn)行定量檢測(cè)利用單克隆抗體制備的免疫層析法進(jìn)行定性檢測(cè)2629心梗發(fā)作后cTn、CK、Mb的診斷敏感度敏感性cTnCKMb癥狀發(fā)作后時(shí)間(小時(shí))30心梗后灌注成功與未再灌注病例cTnT的變化未再灌注灌注成功31（4）心肌肌鈣蛋白的評(píng)價(jià)（優(yōu)點(diǎn)）cTn的敏感度及檢測(cè)特異性均高于CK，而且能檢測(cè)微小損傷（如UA、心肌炎）；有較長(zhǎng)的窗口期，有利于診斷遲到的AMI、UA和心肌炎的一過(guò)性損傷（cTnT長(zhǎng)達(dá)7天，cTnI長(zhǎng)達(dá)10天，甚至14天）；雙峰的出現(xiàn)，易于判斷再灌注成功與否；與心肌損傷范圍大小相關(guān)，可用于判斷病情輕重，指導(dǎo)正確治療；胸痛發(fā)作6h后，血cTn濃度正常可排除AMI。符合理想的心肌損傷的標(biāo)志物條件32（3）脂肪酸結(jié)合蛋白（FABP）

FABP是小分子量(14～l5kD)胞漿蛋白，心肌內(nèi)FABP含量（0.46mg/g心肌,）比骨骼肌組織內(nèi)豐富許多。

FABP診斷早期AMI的敏感性和特異性和Mb相近，比CK-MB高。33糖原磷酸化酶（GP）三種同工酶：腦和心臟的GPBB，骨骼肌的GPMM和肝臟的GPLL。心肌缺氧、缺血時(shí)，處于糖原糖酵解狀態(tài)，GPBB隨糖原降解加速進(jìn)入胞漿，透過(guò)胞膜進(jìn)入循環(huán)。GPBB被認(rèn)為是診斷心肌缺血的最為敏感指標(biāo)之一。在急性心肌梗死時(shí)，GPBB在胸痛2～4h開(kāi)始升高，它的特異性與CK-MB相似。小結(jié)心肌損傷標(biāo)志物

①早期標(biāo)志物：即急性心肌梗死發(fā)生6h內(nèi)血中即相對(duì)增加如：MbMB2/MB1。

②確診標(biāo)志物：即在急性心肌梗死發(fā)生后6～