微生物檢驗第十章需氧桿菌

微生物檢驗第十章需氧桿菌第一頁，共九十頁，2022年，8月28日2致病物質(zhì)莢膜：抗吞噬，有利于細(xì)菌在組織內(nèi)繁殖擴(kuò)散炭疽毒素：保護(hù)性抗原、致死因子、水腫因子第二頁，共九十頁，2022年，8月28日3所致疾病

炭疽?。簜魅驹矗夯疾∈巢輨游锛捌渲破坊虮晃廴疚飩鞑ネ緩剑航佑|——皮膚炭疽食用——腸炭疽吸入——肺炭疽可并發(fā)敗血癥，死亡率極高乙類傳染病(發(fā)生肺炭疽按甲類處理)病后可獲得持久免疫力第三頁，共九十頁，2022年，8月28日4形態(tài)染色:致病菌中最大的G+桿菌，兩端平切、竹節(jié)狀有毒株可有明顯莢膜芽胞——橢圓形，小于菌體，位于菌體中央多在有氧條件下形成，25～30℃，在培養(yǎng)基中、土壤內(nèi)、動物尸體解剖后暴露在空氣中，都易形成芽胞在活體或完整未解剖尸體內(nèi)不形成芽胞，尸體嚴(yán)禁解剖二、微生物特性

革蘭染色×1000第四頁，共九十頁，2022年，8月28日5培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧，生長條件不嚴(yán)格，最適溫度30～35℃普通培養(yǎng)基—扁平、粗糙、不透明、灰白色、無光澤，邊緣不整齊的菌落，低倍鏡下菌落邊緣呈卷發(fā)狀BAP：12～15h不溶血，18～24h輕微溶血其他需氧芽胞桿菌大多溶血明顯而快速第五頁，共九十頁，2022年，8月28日6肉湯—絮狀沉淀生長明膠—37℃18～24h表面液化成漏斗狀，由于細(xì)菌沿穿刺線向四周擴(kuò)散形成倒松樹狀。NaHCO3BAP：

--有毒株—5%CO2、37℃24～48h、產(chǎn)生莢膜呈黏液型菌落，挑取時呈粘絲狀(鑒別要點)--無毒株—粗糙型菌落第六頁，共九十頁，2022年，8月28日7生化反應(yīng)：分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、蕈糖，有些菌能遲緩發(fā)酵甘油和水楊素產(chǎn)酸不產(chǎn)氣水解淀粉、還原硝酸鹽不產(chǎn)生吲哚和硫化氫、不利用檸檬酸鹽、不分解尿素在牛乳中生長2～4天牛乳凝固→緩慢胨化觸酶（+）、卵磷脂酶弱（+）第七頁，共九十頁，2022年，8月28日8菌體多糖抗原：與毒力無關(guān)，耐熱、耐腐敗，特異性不高。莢膜多肽抗原：與毒力有關(guān)，有抗吞噬作用，有利于細(xì)菌生長和擴(kuò)散。莢膜腫脹試驗，對本菌鑒定有意義芽胞抗原：血清學(xué)診斷價值炭疽毒素：保護(hù)性抗原（PA)、致死因子（LF）、水腫因子（EF）三個組分。單獨皆無致病性，與PA結(jié)合才顯示出致病性具有抗吞噬和免疫原性。

抗原構(gòu)造：第八頁，共九十頁，2022年，8月28日9抵抗力：--芽胞抵抗力很強(qiáng)，煮沸10min或干熱140℃3h才能殺滅--在干燥土壤中或皮毛中常溫下存活數(shù)十年致病力不減，牧場一旦污染，傳染性可持續(xù)數(shù)十年--生物武器第九頁，共九十頁，2022年，8月28日10--芽胞對化學(xué)消毒劑抵抗力不一，對碘和氧化劑較敏感，常用以下方法殺菌：

1：2500碘10min、

3%H2O21h、

4%高錳酸鉀15min、

0.5%過氧乙酸10min--對磺胺、青霉素、鏈霉素、四環(huán)素、紅霉素、氯酶素均敏感第十頁，共九十頁，2022年，8月28日11要求快速檢出、分離鑒定病原菌，以利早期確診、查清疫源、及時治療和采取預(yù)防對策三、微生物學(xué)檢驗第十一頁，共九十頁，2022年，8月28日12標(biāo)本的采集與處理皮膚炭疽：病灶深部標(biāo)本肺炭疽：痰和血液腸炭疽：糞、嘔吐物腦膜炭疽：CSF、血液死于敗血癥的動物，嚴(yán)禁宰殺和解剖，可消毒皮膚后割取耳朵、舌尖采集少量血液，局限性病灶可取病變組織或附近淋巴結(jié)。第十二頁，共九十頁，2022年，8月28日13無雜菌污染標(biāo)本：直接接種肉湯增菌或固體培養(yǎng)基污染雜菌固體標(biāo)本：加10倍量生理鹽水充分浸泡，振蕩10～15min、靜置10min，取懸液65℃水浴30min或

85℃5min殺死雜菌，保留芽胞活性，再增菌和培養(yǎng)污染雜菌液體標(biāo)本：離心，棄上清液后，加0.5%洗滌劑振蕩10～15min，離心取沉淀物增菌和分離培養(yǎng)第十三頁，共九十頁，2022年，8月28日14生化反應(yīng)噬菌體裂解青霉素抑制毒力試驗檢驗程序皮毛、腐敗臟器等血液Ascoli試驗以NG制成懸液經(jīng)加溫或飽和尿素處理肉湯增菌培養(yǎng)BAP或戊烷脒平板2%兔血清肉湯4-8hG染色鏡檢菌落特征動力觀察串珠試驗確定報告莢膜腫脹試驗第十四頁，共九十頁，2022年，8月28日15痰、嘔吐物、CSF及炎癥分泌物2%兔血清肉湯快速增菌37℃4h莢膜腫脹試驗直接涂片莢膜染色G染色初步報告0.2ml注射小白鼠腹腔，8h后解剖涂片G染色、莢膜染色初步報告第十五頁，共九十頁，2022年，8月28日16涂片染色：--G染色、莢膜染色、芽胞染色—初步報告--莢膜熒光抗體染色核酸檢測：核酸雜交分離培養(yǎng)：--BAP、戊烷脒多粘菌素B平板--2%兔血清肉湯增菌→分離培養(yǎng)第十六頁，共九十頁，2022年，8月28日17鑒定試驗：形態(tài)和菌落特征生化試驗:串珠試驗:--接種于含青霉素(0.05～0.5U/ml)的肉湯中，37℃6h，大而均勻成串的圓球狀菌體--與青霉素抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成有關(guān)--類炭疽無此現(xiàn)象第十七頁，共九十頁，2022年，8月28日18青霉素抑制試驗：接種于含青霉素5、10、100U/ml瓊脂平板，37℃24h生長受抑制不生長串珠和青霉素抑制聯(lián)合試驗：兔血瓊脂平板抑菌環(huán)青霉素紙片青霉素1U／片紙片貼于平板，37℃1—2h，低倍鏡下觀察，可見紙片周圍有一無菌生長的抑菌環(huán)，其外周青霉素濃度低,菌體細(xì)胞壁受抑而成為串珠。第十八頁，共九十頁，2022年，8月28日19

噬菌體裂解試驗：AP631炭疽噬菌體

NaHCO3毒力試驗：接種于含0.5%NaHCO3和10%馬血清的平板，

10%CO2、37℃、24～48h

有毒株形成莢膜—黏液型菌落無毒株不形成莢膜—粗糙型菌落動物試驗：小鼠、家兔或豚鼠皮下接種第十九頁，共九十頁，2022年，8月28日20植物凝集素試驗：Ascoli熱沉淀試驗：可作追溯性診斷第二十頁，共九十頁，2022年，8月28日21第二節(jié)蠟樣芽胞桿菌食物中毒含菌量達(dá)105/g以上嘔吐型——耐熱腸毒素腹瀉型——不耐熱腸毒素全眼球炎（外傷后）心內(nèi)膜炎、敗血癥和腦膜炎第二十一頁，共九十頁，2022年，8月28日22夏、秋季多見食物有米飯、乳品、禽畜肉類、果汁飲料等，大多為加熱烹調(diào)過的熟食在米飯中極易繁殖，由米飯受污染引起的食物中毒在國內(nèi)、外均為常見中毒食物大多無腐敗、變質(zhì)現(xiàn)象，感官性狀正常，應(yīng)引起注意第二十二頁，共九十頁，2022年，8月28日23形態(tài)與染色：-G+大桿菌-生長6h后即形成圓形芽胞、位于菌體中心或次末端、不突出菌體-菌體兩端平截，多數(shù)呈鏈狀排列-引起食物中毒的菌株多有周鞭毛、無莢膜二、微生物特性第二十三頁，共九十頁，2022年，8月28日24培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧營養(yǎng)要求不高最適溫度30~35℃普通瓊脂平板：菌落較大，灰白色，表面粗糙似毛玻璃狀或融蠟狀，有蠟樣光澤第二十四頁，共九十頁，2022年，8月28日25BAP—有β溶血卵黃平板—生長迅速，培養(yǎng)3h后，雖看不到菌落，但該菌可分解卵磷脂而形成白色的混濁環(huán)，稱乳光反應(yīng)或卵黃反應(yīng)第二十五頁，共九十頁，2022年，8月28日26生化反應(yīng)：能分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、水楊素、糊精，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣能胨化牛乳，液化明膠，VP（+）、卵磷脂酶（+）多次傳代后生化特性?？筛淖兊诙?，共九十頁，2022年，8月28日27抵抗力：耐熱，肉湯中細(xì)菌需100℃20min才能殺死，食物中毒菌株的游離芽胞耐受100℃30min、干熱120℃60min才能殺死對氯霉素、紅霉素、慶大霉素敏感，對青霉素、磺胺、呋喃類耐藥第二十七頁，共九十頁，2022年，8月28日28三、微生物學(xué)檢驗標(biāo)本采集：可疑食物、糞便、嘔吐物，因食品暴露于空氣中，在一定程度都會受到本菌污染，所以不能分離出該菌就認(rèn)為是引起食物中毒的病原菌。第二十八頁，共九十頁，2022年，8月28日29確診由該菌引起的食物中毒必須：從食物中分離出菌數(shù)≥105CFU/g，提示本菌活躍生長，構(gòu)成潛在危險從可疑食物分離到的菌株與從病人糞便和(或)嘔吐物中分離到的菌株屬同一血清型第二十九頁，共九十頁，2022年，8月28日30檢驗程序嘔吐物、殘留食物等活菌計數(shù)

接種普通瓊脂平板、BAP、卵黃平板37℃18-24h純培養(yǎng)動物試驗（腸毒素測定）生化反應(yīng)血清凝集（分型）報告結(jié)果直接涂片染色鏡檢第三十頁，共九十頁，2022年，8月28日31檢驗方法：直接鏡檢分離培養(yǎng)與活菌計數(shù)普通瓊脂平板、BAP、卵黃平板鑒定與分型：根據(jù)菌落特點、形態(tài)染色、生化反應(yīng)等初步鑒定生化分型、血清分型、噬菌體分型，腸毒素檢測第三十一頁，共九十頁，2022年，8月28日32產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌

（Listeriamonocytogenes

)

致病物質(zhì)：李斯特菌溶血素O(LLO)——主要毒力因子內(nèi)在素——表面蛋白（侵襲性蛋白）磷脂酶C第三十二頁，共九十頁，2022年，8月28日33所致疾病:健康帶菌者是主要的傳染源污染食物，糞-口途徑傳播，通過腸道擴(kuò)散全身胎盤和產(chǎn)道——感染新生兒接觸病畜及產(chǎn)品——眼和皮膚的局部感染第三十三頁，共九十頁，2022年，8月28日34（二）微生物特性形態(tài)與染色：

G+短小桿菌，形態(tài)與培養(yǎng)時間有關(guān)-37℃3～6h，菌體主要呈桿狀，隨后以球桿狀為主，3～5天常形成長絲狀無芽胞，一般不形成莢膜，在含血清的葡萄糖蛋白胨水中能形成粘多糖莢膜第三十四頁，共九十頁，2022年，8月28日3520～25℃形成周鞭毛，有動力；37℃時鞭毛很少或無細(xì)菌接種半固體培養(yǎng)基，置室溫，由于動力強(qiáng)，細(xì)菌自穿刺線向四周彌漫生長，在離瓊脂表面數(shù)毫米處出現(xiàn)一個倒傘形的生長，是本菌特征之一第三十五頁，共九十頁，2022年，8月28日36培養(yǎng)特性：兼性厭氧菌、生長溫度范圍廣0.5～45℃均生長（4℃冷增菌），最適30～37℃營養(yǎng)要求不高，在含血液、血清、腹水的培養(yǎng)基生長更好BAP—極小的露滴狀、側(cè)光微顯藍(lán)綠色→灰白色菌落。狹窄的β溶血環(huán)萘啶酸選擇性平板—細(xì)密濕潤、邊緣整齊的蘭色圓形小菌落肉湯——均勻混濁，表面有菌膜第三十六頁，共九十頁，2022年，8月28日37生化反應(yīng)：37℃24h，發(fā)酵葡萄糖、果糖、蕈糖、麥芽糖和水楊素產(chǎn)酸不產(chǎn)氣觸酶（+）甲基紅（+）VP（+）水解七葉苷、水解精氨酸產(chǎn)氨CAMP（+）第三十七頁，共九十頁，2022年，8月28日38分型：根據(jù)O抗原和H抗原，分4個血清型，

1、3、4型可分若干亞型抗原結(jié)構(gòu)與毒力無關(guān)，與地理分布有聯(lián)系與葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌、大腸桿菌等有共同抗原第三十八頁，共九十頁，2022年，8月28日39抵抗力：耐鹽、耐堿、不耐酸對熱、常用消毒劑敏感多種抗生素敏感，首選氨芐青霉素，青霉素、鏈霉素、紅霉素等也敏感對桿菌肽、多粘菌素耐藥第三十九頁，共九十頁，2022年，8月28日40（三）微生物學(xué)檢驗標(biāo)本采集：血液、CSF、宮頸、陰道、鼻煙分泌物等直接涂片：

--在CSF標(biāo)本中成對排列，形如球菌，易誤認(rèn)為肺炎鏈球菌

--G染色過度脫色形似流感桿菌

--有時與類白喉桿菌也極易混淆可用該菌1型和4型及多價熒光抗體染色，同時作動力檢查第四十頁，共九十頁，2022年，8月28日41分離培養(yǎng)：BAP、巧克力平板雜菌污染標(biāo)本可用20%NaCl心腦浸液肉湯2支

1支—10%CO2，37℃24～48h→分離培養(yǎng)（BAP、萘啶酸選擇性平板）

1支—4℃“冷增菌”→分離培養(yǎng)（每24h一次，共4次，以后每周一次，至少4周）第四十一頁，共九十頁，2022年，8月28日42鑒定：形態(tài)特征、菌落特點、動力及生化反應(yīng)作出鑒定可疑菌落用已知李斯特菌1型、4型或多價抗血清做玻片凝集試驗進(jìn)行鑒定與其他G+菌鑒別第四十二頁，共九十頁，2022年，8月28日43

觸酶動力馬尿酸鹽水解產(chǎn)單核李斯++-B群鏈球菌--+本菌有耐堿耐鹽的特點，可用??試驗與腸球菌鑒別第四十三頁，共九十頁，2022年，8月28日44二、紅斑丹毒絲菌毒力與其產(chǎn)生的神經(jīng)氨酸酶有關(guān)，能使細(xì)菌粘附至靶細(xì)胞從事屠宰、經(jīng)營魚類和皮革行業(yè)的人員及獸醫(yī)等感染機(jī)會較多通過破損皮膚侵入，引起局限性皮膚病灶，通常稱“魚毒”或“類丹毒”第四十四頁，共九十頁，2022年，8月28日45（二）微生物特性形態(tài)與染色：

G+桿菌，菌體細(xì)長、直或稍彎，單個或短鏈狀，慢性期分離的菌落為粗糙型，常呈長絲狀，而且有分支及斷裂，與放線菌近似.無莢膜、無芽胞、無鞭毛

紅斑丹毒絲菌革蘭染色1000×第四十五頁，共九十頁，2022年，8月28日46培養(yǎng)特性:厭氧或微需氧、初次分離需在厭氧環(huán)境，傳代后有氧環(huán)境也能生長，最適溫度30-35℃。在含葡萄糖或血清培養(yǎng)基生長旺盛BAP：35℃24h可形成兩種菌落光滑型：菌落細(xì)小、透明突起、發(fā)亮、邊緣整齊、質(zhì)軟易于懸于液體中，毒力較強(qiáng)粗糙型：菌落較大，顆粒狀、扁平、邊緣不齊可呈卷發(fā)狀，無毒力第四十六頁，共九十頁，2022年，8月28日47BAP上新分離的菌株有輕微的α溶血，培養(yǎng)時間延長溶血現(xiàn)象明顯，傳代后溶血特性常消失含碲鹽的培養(yǎng)基——黑色菌落

第四十七頁，共九十頁，2022年，8月28日48

葡萄糖肉湯：培養(yǎng)24h后，呈輕微混濁，不形成菌膜，室溫靜置2~3天后，管底有少量灰色沉淀；粗糙型沉淀較多。

S-R變異同時毒力、抗原性也發(fā)生變異，但遺傳學(xué)上不穩(wěn)定，常出現(xiàn)互變。

第四十八頁，共九十頁，2022年，8月28日49（三）微生物學(xué)檢驗標(biāo)本：病灶邊緣組織碎片或皮膚病變抽出液直接涂片G染色鏡檢：G+細(xì)長桿菌，有時長絲形，單獨或呈短鏈狀。分離培養(yǎng)：1%葡萄糖肉湯，35℃5%CO2環(huán)境增菌，每日移種BAP，可出現(xiàn)二種菌落（S型和R型）第四十九頁，共九十頁，2022年，8月28日50鑒定依據(jù)：

G+、H2S+、無動力、觸酶-、吲哚-、VP-與產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌鑒別（表11-2）新霉素敏感試驗：紅斑丹毒絲菌—R

產(chǎn)單核李斯特菌—S動物毒力試驗：對小鼠、大鼠、兔、鴿均有致病性，0.2ml的2~4天培養(yǎng)物注入小鼠腹腔，4-5天后，敗血癥而死，心血培養(yǎng)（+）第五十頁，共九十頁，2022年，8月28日51第四節(jié)

陰道加特納菌屬于加特納菌屬,此菌屬只有本菌一個種與非特異性陰道炎（細(xì)菌性陰道?。┯嘘P(guān)第五十一頁，共九十頁，2022年，8月28日52二、微生物特性形態(tài)與染色：

--G染色視菌株和菌齡不同而異，實驗室保存菌株趨向G-，新鮮臨床標(biāo)本中分離的菌株趨向G+，生長在高濃度的血清中呈G+

--具有多形性，兩端鈍圓，無芽胞、無莢膜、無鞭毛第五十二頁，共九十頁，2022年，8月28日53培養(yǎng)特性：

兼性厭氧，營養(yǎng)要求較高，在含5%人血瓊脂平板上3%～5%CO2、35～37℃環(huán)境中培養(yǎng)48h后，可形成0.3～0.5mm大小、圓形、光滑不透明的菌落，在兔血平板上可出現(xiàn)β溶血，在羊血平板上不溶血。第五十三頁，共九十頁，2022年，8月28日54生化反應(yīng)：氧化酶-、觸酶-、尿素酶-發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、蔗糖等產(chǎn)酸不產(chǎn)氣水解馬尿酸鈉和淀粉，吲哚-、明膠液化-、甘露醇分解-抵抗力：對氨芐青霉素、羥氨芐青霉素、苯唑青霉素、青霉素、萬古霉素、甲硝噠唑敏感，對萘啶酸、新霉素、多粘菌素和磺胺嘧啶耐藥。第五十四頁，共九十頁，2022年，8月28日55三、微生物學(xué)檢驗標(biāo)本采集：陰道和宮頸分泌物等直接濕片鏡檢：大量陰道上皮細(xì)胞，少量膿細(xì)胞及無數(shù)成簇的細(xì)小桿菌群集并吸附于上皮細(xì)胞表面，使細(xì)胞特別是邊緣不清，呈鋸齒形，即為線索細(xì)胞第五十五頁，共九十頁，2022年，8月28日56涂片染色鏡檢：觀察線索細(xì)胞，了解陰道菌群狀況，常見大量小的G-和染色不定的桿菌和球桿菌，而無大的G+桿菌（乳酸桿菌）pH測定：pH＞4.5，提示細(xì)菌性陰道病胺試驗：滴加10%KOH即發(fā)出魚腥嗅為“+”第五十六頁，共九十頁，2022年，8月28日57分離培養(yǎng)：

5%人血瓊脂平板、35℃、5%CO2環(huán)境48h鑒定：菌落、涂片染色、氧化酶-、觸酶-、糖發(fā)酵及其他生化反應(yīng)第五十七頁，共九十頁，2022年，8月28日58分泌物（陰道、宮頸）新鮮濕片（找線索細(xì)胞）涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)（5%人血平板）β溶血菌落純培養(yǎng)（5%人血平板）觸酶（-）氧化酶（-）GV的主要鑒定試驗初步報告最后報告第五十八頁，共九十頁，2022年，8月28日第五節(jié)

棒狀桿菌屬

第五十九頁，共九十頁，2022年，8月28日

棒狀桿菌屬是一群革蘭染色陽性桿菌，菌體形態(tài)特征是在其一端或兩端常呈棒狀膨大，故名，歸屬放線菌科。

棒狀桿菌屬概述第六十頁，共九十頁，2022年，8月28日棒狀桿菌屬種類繁多，主要有：白喉棒狀桿菌（C.diphtheriae）假白喉棒狀桿菌（C.pseudodiphtheriticum）干燥棒狀桿菌（C.xerosis）化膿棒狀桿菌（C.pyogenes）潰瘍棒狀桿菌（C.ulcerans）假結(jié)核棒狀桿菌（C.pseudotuberculosis）溶血棒狀桿菌（C.haemolyticum）J-K群棒狀桿菌（C.jeikeium-CDCgroupJK）第六十一頁，共九十頁，2022年，8月28日G+桿菌、一端或兩端膨大成棒狀染色不均勻，兩端濃染或有異染顆粒無鞭毛、無芽胞排列不規(guī)則，呈柵欄狀白喉棒狀桿菌——致病菌類白喉棒狀桿菌——條件致病菌第六十二頁，共九十頁，2022年，8月28日白喉棒狀桿菌

C.diphtheriae第六十三頁，共九十頁，2022年，8月28日致病物質(zhì)

(一)白喉外毒素毒力強(qiáng)，130ng/kg可使人死亡抗原性強(qiáng)編碼外毒素的tox基因——β-棒狀桿菌噬菌體一、臨床意義第六十四頁，共九十頁，2022年，8月28日作用機(jī)制：

A亞單位可使細(xì)胞延伸因子-2（EF-2）滅活，影響蛋白質(zhì)的合成作用特點：毒性作用大，1分子能殺一個細(xì)胞作用于多種細(xì)胞，心肌、神經(jīng)細(xì)胞均有毒素受體腫瘤細(xì)胞對此毒素敏感第六十五頁，共九十頁，2022年，8月28日（二）索狀因子細(xì)菌表面的一種糖脂，能破壞細(xì)胞的線粒體，影響細(xì)胞的呼吸與磷酸化（三）K抗原--細(xì)胞壁外面的一種不耐熱糖蛋白--抗吞噬--有利于細(xì)菌在黏膜表面的定植第六十六頁，共九十頁，2022年，8月28日所致疾?。喊缀?-急性呼吸道傳染病傳染源：患者及帶菌者傳播途徑：飛沫或污染臨床表現(xiàn)細(xì)菌------上呼吸道粘膜，生長繁殖，產(chǎn)生毒素細(xì)菌與毒素共同作用引起局部炎癥：炎性滲出，壞死，纖維蛋白→→假膜→→窒息毒素→→血液→→全身中毒癥狀外周N---N炎：膈肌麻痹---呼吸困難聲帶麻痹---聲音嘶啞軟頜麻痹---吞咽困難心肌---心肌炎第六十七頁，共九十頁，2022年，8月28日

白喉假膜第六十八頁，共九十頁，2022年，8月28日抗毒素免疫感染后機(jī)體可獲得牢固的免疫力機(jī)體還可通過其它方式獲得免疫力：六月以下嬰兒---------母親成人---------------------隱性感染、人工主動免疫易感者：1~5歲兒童成人---也有可能免疫性：第六十九頁，共九十頁，2022年，8月28日二、生物學(xué)特性形態(tài)與染色:G+細(xì)長微彎的桿菌一端或兩端膨大呈棒狀常排列呈V、L、X等文字形異染顆?！螒B(tài)上的鑒別特征無莢膜、無芽胞、無鞭毛白喉棒狀桿菌異染顆粒1000×第七十頁，共九十頁，2022年，8月28日培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧，最適溫度35～37℃營養(yǎng)要求高，在含血液、血清、雞蛋的培養(yǎng)基上生長良好呂氏（Loeffler)血清斜面或雞蛋斜面：生長最快，6h即生長，10～12h長出灰白色、濕潤、有光澤的光滑型菌苔/菌落，菌體形態(tài)典型、異染顆粒明顯，連續(xù)傳代可保持形態(tài)和產(chǎn)毒性能不變第七十一頁，共九十頁，2022年，8月28日

BAP中菌落BAP：菌落灰白色、光滑型、直徑1～2mm、有狹窄

β溶血環(huán)（輕型）多次傳代后菌體變?yōu)榍蛐偷谄呤?，共九十頁?022年，8月28日亞碲酸鉀BAP：選擇鑒別培養(yǎng)基黑色菌落——鑒別依據(jù)不同菌型還原能力不同，呈現(xiàn)黑色或灰黑色菌落根據(jù)菌落特征及生化反應(yīng)特點可將本菌分為：重型、中間型、輕型白喉棒狀桿菌在亞碲酸鉀BAP中菌落第七十三頁，共九十頁，2022年，8月28日液體培養(yǎng)基：生長較好，但菌型不同其生長特點也不相同第七十四頁，共九十頁，2022年，8月28日生化反應(yīng)：分解葡萄糖、半乳糖、麥芽糖、果糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖、甘露糖，一般不分解蔗糖，吲哚（-）、硝酸鹽還原（+）、觸酶（+）、氧化酶（-）、明膠液化（-）尿素（-）重型能分解淀粉、糖原、糊精，遲緩分解蔗糖第七十五頁，共九十頁，2022年，8月28日抵抗力：對干燥、寒冷和日光抵抗力較其他無芽胞細(xì)菌強(qiáng)，在干燥的假膜中可生存3個月對青霉素、紅霉素等敏感，對磺胺不敏感第七十六頁，共九十頁，2022年，8月28日三、微生物學(xué)檢驗分離出白喉桿菌，并證明其毒力1、標(biāo)本采集：分泌物取雙份如不能及時檢驗，標(biāo)本浸于無菌生理鹽水或15%甘油生理鹽水保存第七十七頁，共九十頁，2022年，8月28日三、微生物學(xué)檢驗2、標(biāo)本直接檢查，初步報告3、分離培養(yǎng)4、鑒定5、毒力試驗第七十八頁，共九十頁，2022年，8月28日直接涂片染色鏡檢：--2～3張涂片→G染色、異染顆粒染色鏡檢——初報“直接涂片檢出形似白喉桿菌”——早期診斷--用無菌棉拭子浸以動物血清，采集標(biāo)本，37℃10h，涂片染色鏡檢——提高陽性率第七十九頁，共九十頁，2022年，8月28日分離培養(yǎng)：呂氏血清斜面：

37℃、8～12h→→涂片染色鏡檢--檢出率要比直接涂片高，有助于快速診斷亞碲酸鉀BAP：

37℃、24～48h，黑色菌落BAP：

輕型有β溶血環(huán)，應(yīng)注意與溶血性鏈球菌鑒別第八十頁，共九十頁，2022年，8月28日鑒定：形態(tài)染色、菌落特點、生化反應(yīng)糖發(fā)酵試驗、尿素酶、硝酸鹽還原

—鑒別棒狀桿菌屬不同的種白喉：葡萄糖（+）、麥芽糖（+）蔗糖（-）第八十一頁，共九十頁，2022年，8月28日毒力試驗（鑒定致病菌株的重要依據(jù)）體外法：瓊脂平板毒力