LY/T 2305-2014油茶品種微衛(wèi)星標記鑒別技術(shù)規(guī)程

ICS6502020

B61..

中華人民共和國林業(yè)行業(yè)標準

LY/T2305—2014

油茶品種微衛(wèi)星標記鑒別技術(shù)規(guī)程

TechnicalregulationsofCamelliavarietiesidentificationbySSRmarkers

2014-08-21發(fā)布2014-12-01實施

國家林業(yè)局發(fā)布

LY/T2305—2014

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由國家林業(yè)局提出

。

本標準由全國林木種子標準化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC115)。

本標準負責起草單位南京林業(yè)大學

:。

本標準參加起草單位湖北省林業(yè)科學研究院福建省林木種苗總站

:、。

本標準主要起草人尹佟明戴曉港陳贏男李淑嫻史潔張新葉陳偉

:、、、、、、。

Ⅰ

LY/T2305—2014

油茶品種微衛(wèi)星標記鑒別技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標準規(guī)定了以油茶Camellia幼嫩組織葉片芽等為材料利用微衛(wèi)星標記法對油茶品

(spp.)(、),

種進行分子鑒定的術(shù)語原理主要儀器和設(shè)備試劑與溶液操作程序和鑒定

、、、、。

本標準適用于附錄中所列油茶品種的鑒別

A。

2術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

21

.

微衛(wèi)星microsatellite

簡單重復序列

simplesequencerepeats;SSR

也稱基因組中由個個核苷酸組成的串聯(lián)重復序列

2~6DNA。

22

.

基因型頻率genotypefrequency

群體中某一位點特定基因型個體數(shù)占全部個體數(shù)的比率

。

3原理

微衛(wèi)星廣泛分布于植物基因組的不同位置微衛(wèi)星位點具有高度的遺傳多態(tài)性微衛(wèi)星標記具有高

,,

度的物種特異性和良好的擴增重現(xiàn)性是用于植物品種遺傳鑒別的首選標記本標準采用高通量測序

,。

獲得了大量微衛(wèi)星標記通過實驗檢測篩選了對高度多態(tài)性的微衛(wèi)星標記用于油茶品種的遺傳鑒

,,10,

別在檢驗過程中我們可采用真實品種的模板做為標準品從待檢苗木中抽樣做為待檢樣品

。,DNA,。

利用微衛(wèi)星引物進行擴增時若待檢樣品與標準品在任一引物擴增位點上基因型不同則可判定待檢樣

,,

品與標準品不是同一品種當不同引物擴增位點上基因型都相同時可根據(jù)標準品種在不同位點上的

。,

基因型頻率乘積計算出待檢樣品與標準品是同一品種的概率

,。

4主要儀器和設(shè)備

41擴增儀

.PCR。

42離心機

.12000r/min。

43微量可調(diào)移液器

.(2μL、10μL、100μL、1000μL)。

44數(shù)顯式穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀電壓電流

.EPS-300(10V~300V,10mA~400mA)。

45全自動數(shù)碼凝膠圖像分析系統(tǒng)透射紫外波長透射紫外面積

.(:302nm,:20cm×20cm)。

46微量核酸蛋白檢測儀波長范圍波長精度檢測范圍

.