GB/T 4789.30-2008食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)

犐犆犛０７．１００．３０

犆５３

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜４７８９．３０—２００８

代替ＧＢ／Ｔ４７８９．３０—２００３

食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)

犕犻犮狉狅犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾犲狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犳狅狅犱犺狔犵犻犲狀犲—

犈狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犔犻狊狋犲狉犻犪犿狅狀狅犮狔狋狅犵犲狀犲狊

２００８１１２１發(fā)布２００９０３０１實(shí)施

中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部

發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書(shū)

犌犅／犜４７８９．３０—２００８

前言

本標(biāo)準(zhǔn)的第一法修改采用美國(guó)ＦＤＡ《細(xì)菌性檢驗(yàn)手冊(cè)》（Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎａｌｙｔｉｃａｌｍａｎｕａｌ，Ｃｈａｐｔｅｒ

１０，２００２）；第二法等同采用國(guó)際分析家學(xué)會(huì)的《單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)方法》（ＡＯＡＣＲＩＰｅｒ

ｆｏｒｍａｎｃｅｔｅｓｔｅｄｍｅｔｈｏｄｓＶＩＤＡＳ犔犻狊狋犲狉犻犪犿狅狀狅犮狔狋狅犵犲狀犲狊Ｔｅｓｔ，９９９．０６）；第三法等同采用國(guó)際分析家學(xué)

會(huì)的《單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)方法》（ＡＯＡＣＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＯｆｆｉｃｉａｌＭｅｔｈｏｄ２００３．１２，ＢＡＸ犔犻狊狋犲

狉犻犪犿狅狀狅犮狔狋狅犵犲狀犲狊）。

本標(biāo)準(zhǔn)的第一法與美國(guó)ＦＤＡ／ＢＡＭ方法相比主要區(qū)別如下：

———增菌培養(yǎng)基以ＬＢ肉湯替代了ＢＬＥＢ肉湯；

———選擇性分離培養(yǎng)基以ＰＡＬＣＡＭ代替了ＯＸＡ，增加了ＣＨＲＯＭａｇａｒ犔犻狊狋犲狉犻犪顯色培養(yǎng)基；

———增加了初篩步驟；

———培養(yǎng)溫度以３６℃±１℃代替３５℃。

本標(biāo)準(zhǔn)代替ＧＢ／Ｔ４７８９．３０—２００３《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》。

本標(biāo)準(zhǔn)與ＧＢ／Ｔ４７８９．３０—２００３相比主要修改如下：

———?jiǎng)h除了規(guī)范性引用文件。

———修改了第一法。包括選擇性分離培養(yǎng)基以ＰＡＬＣＡＭ代替了ＭＭＡ，增加了ＣＨＲＯＭａｇａｒ

犔犻狊狋犲狉犻犪顯色培養(yǎng)基；增加了初篩步驟；刪除了尿素酶試驗(yàn)和硝酸鹽還原試驗(yàn)。

———增加了第二法，全自動(dòng)酶聯(lián)熒光免疫分析儀篩選法。

———增加了第三法，全自動(dòng)病原菌檢測(cè)系統(tǒng)篩選法。

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄Ａ為規(guī)范性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部負(fù)責(zé)解釋。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：中國(guó)疾病預(yù)防控制中心營(yíng)養(yǎng)與食品安全所。

本標(biāo)準(zhǔn)參加起草單位：福建省疾病預(yù)防控制中心、陜西省疾病預(yù)防控制中心、湖北省疾病預(yù)防控制

中心。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：劉秀梅、楊洋、陳偉偉、郭云昌、田靜、馬國(guó)柱、馬弋。

本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷年版本發(fā)布情況為：

———ＧＢ／Ｔ４７８９．３０—１９９４、ＧＢ／Ｔ４７８９．３０—２００３。

Ⅰ

書(shū)

犌犅／犜４７８９．３０—２００８

食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌（犔犻狊狋犲狉犻犪犿狅狀狅犮狔狋狅犵犲狀犲狊）的檢驗(yàn)方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品和食源性疾病樣品中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢驗(yàn)。

２設(shè)備和材料

除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)無(wú)菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：

２．１冰箱：２℃～５℃。

２．２恒溫培養(yǎng)箱：３０℃±１℃、３６℃±１℃。

２．３均質(zhì)器。

２．４顯微鏡：１０×～１００×。

２．５電子天平：感量０．１ｇ。

２．６錐形瓶：１００ｍＬ、５００ｍＬ。

２．７無(wú)菌吸管：１ｍＬ（具０．０１ｍＬ刻度）、１０ｍＬ（具０．１ｍＬ刻度）。

２．８無(wú)菌平皿：直徑９０ｍｍ。

２．９無(wú)菌試管：１６ｍｍ×１６０ｍｍ。

２．１０離心管：３０ｍｍ×１００ｍｍ。

２．１１無(wú)菌注射器：１ｍＬ。

２．１２金黃色葡萄球菌（ＡＴＣＣ２５９２３）。

２．１３馬紅球菌（犚犺狅犱狅犮狅犮犮狌狊犲狇狌犻）。

２．１４小白鼠：１６ｇ～１８ｇ。

２．１５全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)（ＶＩＴＥＫ）１）。

２．１６全自動(dòng)酶聯(lián)熒光免疫分析儀（ｍｉｎｉＶＩＤＡＳ或ＶＩＤＡＳ）１）。

２．１７全自動(dòng)病原菌檢測(cè)系統(tǒng)（ＢＡＸ系統(tǒng)，包含ＢＡＸ系統(tǒng)Ｑ７）２）。

３培養(yǎng)基和試劑

３．１含０．６％酵母浸膏的胰酪胨大豆肉湯（ＴＳＢＹＥ）：見(jiàn)第Ａ．１章。

３．２含０．６％酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂（ＴＳＡＹＥ）：見(jiàn)第Ａ．２章。

３．３李氏增菌肉湯ＬＢ（ＬＢ１，ＬＢ２）：見(jiàn)第Ａ．３章。

３．４１％鹽酸吖啶黃（ａｃｒｉｆｌａｖｉｎｅＨＣｌ）溶液：見(jiàn)Ａ．３．２．１。

３．５１％萘啶酮酸鈉鹽（ｎａｌａｄｉｘｉｃａｃｉｄ）溶液：見(jiàn)Ａ．３．２．１。

３．６ＰＡＬＣＡＭ瓊脂：見(jiàn)第Ａ．４章。

３．７革蘭氏染色液：見(jiàn)第Ａ．５章。

１）由法國(guó)生物梅里埃