GB/T 18651-2002牛無漿體病快速凝集檢測方法

ICS.11.220B41中華人民共和國國家標準GB/T18651—2002牛無漿體病快速凝集檢測方法Methodsoffastagglutinationtestforbovineanaplasmosis2002-02-19發(fā)布2002-05-01實施中華：人民共和國發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

GB/T18651-2002過去認為無漿體(anaplasma)是原蟲，現(xiàn)確定是一種立克次氏體.譯名還有微粒孢子蟲、無形體等，根據(jù)生物學特征,無漿體”最為確切.因此本標準中用此名。牛無漿體病是一種牛血液傳播病。牛一且感染·即可成為終生帶蟲者，使養(yǎng)牛業(yè)造成很大經(jīng)濟損失。世界動物衛(wèi)生組織WorldOrganizationforAnimalHealth(英),fficeIntentionaldesEpizootic(法).OIEJ將本病列為B類傳染病，本病也是我國出人境動物檢疫對象之一〇IE推薦診斷牛無漿體病的方法中.卡片凝集檢測具有微量、快速、靈敏度高和特異性好等優(yōu)點.故得到廣泛應(yīng)用。我國曾報道過用補體結(jié)合試驗診斷牛無漿體病，但因部分血清有抗補體作用，而常被誤判,目前·國內(nèi)尚無卡片凝集檢測標準。本標準以O(shè)IE推薦技術(shù)為依據(jù)，參考了澳大利亞和美國檢測方法·抗原保存期為一年到三年，試驗溫度范圍為25C～28C。本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出本標準由全國動物檢疫標準化技術(shù)委員會歸口本標準起草單位：農(nóng)業(yè)部動物檢疫所本標準主要起草人：吳鑒三、張肖正。

中華人民共和國國家標準牛無漿體病快速凝集檢測方法GB/T18651-2002Methodsoffastagglutinationtestforbovineanaplasmosis1范圍本標準規(guī)定了牛無漿體病快速凝集檢測方法。本標準適用于牛無漿體病的診斷。其他動物無漿體病的診斷亦可參照本方法2試劑和器械2.1試劑a）無漿體凝集抗原.4C保存；b)陰性協(xié)同血清(牛血清因子)-70C～—80C保存；c）陽性對照血清，-20C保存；d）陰性對照血清，-20C保存。以上試劑由制標單位提供。2.2器械2.2.1微量移液器：5PL、10L或5L～25L(連續(xù)可調(diào))2.2.2微最移液器頭若干個。2.2.3試驗用板：取85mmX12.5mm潔凈透明塑料平板,用油漆或油性記號筆劃成4排×6個區(qū)位3操作步驃實驗應(yīng)在25C～28C環(huán)境下進行。3.1被檢血清按常規(guī)采集和分離·從采集到第一次檢測前，要在室溫放置38h～48h,然后冷藏或凍存?zhèn)溆谩らL期低溫保存會使陽性率下降3.2取出凝集抗原、陰性協(xié)同血清、陽性和陰性對照血清以及被檢血清,在25C～28C下放置15min～20min。3.3同時在平板第-一排左起1、2區(qū)位劃上陽性（十）和陰性（一）符號，其余各區(qū)位依次編上被檢血清號。3.4用微量移液器在編號區(qū)位內(nèi)按號分別加陽性、陰性對照血清和待檢血清10L.3.55在各區(qū)位加凝集抗原5L.靠近血清，互不接觸。3.6在各區(qū)位抗原旁加陰性協(xié)同血清10L.互不接觸。37用牙簽將各區(qū)位的三種反應(yīng)物推成液面(約成人小指甲蓋面積）混合均勾。做一份血清換用一根3.8用手輕輕兄動該平板，在4min～8min內(nèi).當