檢驗(yàn)技術(shù)自動(dòng)分析技術(shù)和儀器

第十五章

自動(dòng)分析技術(shù)和儀器第一節(jié)實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化3自動(dòng)化（automation）全實(shí)驗(yàn)室的自動(dòng)化(totallaboratoryautomation，TLA)實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)(1aboratoryinformationsystem，LIS)醫(yī)院信息系統(tǒng)(hospitalinformationsystem，HIS)重點(diǎn)概念：4定義：

實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員用最小的勞動(dòng)強(qiáng)度使用實(shí)驗(yàn)室儀器和樣品處理設(shè)備來(lái)完成臨床實(shí)驗(yàn)分析。

自動(dòng)化（automation）準(zhǔn)確、精密、快速、高效自動(dòng)化分析儀的優(yōu)勢(shì)：5目前自動(dòng)化的范圍：①檢驗(yàn)申請(qǐng)→②收費(fèi)→③樣品采集→④樣品標(biāo)示→⑤運(yùn)送→⑥樣本的接(驗(yàn))收、檢驗(yàn)項(xiàng)目(含收費(fèi))的確認(rèn)→⑦分析前處理(如離心、分注、貼標(biāo)識(shí))→⑧樣品裝載→⑨樣品分析→⑩分析后處理不僅僅是指分析過(guò)程的自動(dòng)化，還包括分析前和分析后的自動(dòng)化。

自動(dòng)化的范圍：未來(lái)自動(dòng)化的范圍:6全實(shí)驗(yàn)室的自動(dòng)化(totallaboratoryautomation，TLA)定義：借助實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)(1aboratoryinformationsystem，LIS)將臨床實(shí)驗(yàn)室中各類自動(dòng)化分析儀器(生物化學(xué)、血液學(xué)、分子診斷學(xué)、免疫學(xué)等)串聯(lián)起來(lái)，組合成流水線作業(yè)的形式，把樣品輸送到不同的檢測(cè)單元，并將各個(gè)儀器的檢測(cè)結(jié)果合并輸出，實(shí)現(xiàn)了遠(yuǎn)程檢驗(yàn)申請(qǐng)、實(shí)時(shí)在線檢測(cè)、遠(yuǎn)程審核結(jié)果和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的共享。78全實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化9FrontViewofAutomationLine

（自動(dòng)化流水線正面觀）10TailEndofAutomationLine

（自動(dòng)化流水線末端）11基本結(jié)構(gòu)：硬件軟件標(biāo)本自動(dòng)傳送系統(tǒng)

標(biāo)本前處理系統(tǒng)標(biāo)本后處理系統(tǒng)檢測(cè)單元信息處理系統(tǒng)（自動(dòng)化流程控制、支持軟件系統(tǒng)以及計(jì)算機(jī)硬件）12樣本入口區(qū)域急診標(biāo)本裝載區(qū)域條形碼識(shí)別離心揭蓋原始管裝載&卸載,直接進(jìn)行分析智能測(cè)試的貯存區(qū)域無(wú)鏈接儀器樣本分類至原來(lái)區(qū)域樣本分裝樣本入口區(qū)域

揭蓋出口區(qū)域分析儀器無(wú)需離心樣本貯藏室數(shù)據(jù)管理分析儀器

離心標(biāo)本前(后)處理系統(tǒng)分裝模塊13樣本分選自動(dòng)離心自動(dòng)智能分裝自動(dòng)開(kāi)蓋自動(dòng)樣本裝卸重測(cè)存儲(chǔ)復(fù)測(cè)14極大限度地減少了標(biāo)本處理和數(shù)據(jù)處理等過(guò)程中所謂單調(diào)(dull)、臟(dirty)、危險(xiǎn)(dangerous)的“3D”人工操作意義：1、逐步實(shí)現(xiàn)部門(mén)一體化，所需人力資源減少，效率提高；2、所用的標(biāo)本量減少，更好的方便患者；3、人工操作減少，操作誤差減少到最小；4、更快的處理標(biāo)本；回報(bào)結(jié)果的能力增強(qiáng)；5、促進(jìn)實(shí)驗(yàn)室操作的規(guī)范化；6、安全性和整個(gè)過(guò)程的控制更好；7、實(shí)驗(yàn)室占用較少的空間；8、全面提升臨床檢驗(yàn)的管理。15實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)(laboratoryinformation

system，LIS)是以支持實(shí)驗(yàn)室日常工作、管理決策、科研等為目標(biāo)的信息收集、處理、存儲(chǔ)、傳播和應(yīng)用的系統(tǒng)，由信息系統(tǒng)和管理系統(tǒng)兩部分組成。信息系統(tǒng)以實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本檢測(cè)全過(guò)程中產(chǎn)生的數(shù)據(jù)管理為主，管理系統(tǒng)以實(shí)驗(yàn)室的經(jīng)濟(jì)、物資、人事、科研等管理決策為主。定義：1617LIS的特點(diǎn)：①采用客戶／服務(wù)器體系和分布式處理方式建立局域網(wǎng)；②在客戶端使用圖形界面的操作系統(tǒng)(如windows3.x／windows9x)，顯示圖形、圖像等信息更加方便；③具有以圖形界面為基礎(chǔ)的實(shí)時(shí)質(zhì)量控制系統(tǒng)；④在網(wǎng)絡(luò)上，每臺(tái)微機(jī)既可作為L(zhǎng)IS系統(tǒng)的客戶端，也可作為HIS系統(tǒng)的客戶端；⑤每臺(tái)自動(dòng)分析儀都可以實(shí)時(shí)連接到網(wǎng)絡(luò)客戶端上，所有檢驗(yàn)數(shù)據(jù)都能為整個(gè)HIS系統(tǒng)所共享；⑥門(mén)診患者、數(shù)據(jù)存儲(chǔ)、數(shù)據(jù)輸出的編碼已有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，條形碼得到廣泛應(yīng)用；⑦HL7(HealthLevelseven)協(xié)議是目前醫(yī)療信息數(shù)據(jù)交換標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)用最廣泛的一個(gè)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)。18LIS的框架模式LIS把每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的工作步驟設(shè)計(jì)成模塊，用條碼技術(shù)把各個(gè)模塊貫穿起來(lái)，用戶能個(gè)性化地沒(méi)置和組合各個(gè)模塊。在這個(gè)框架模式下，就能滿足不同規(guī)模、流程的臨床實(shí)驗(yàn)室的需求1．檢驗(yàn)申請(qǐng)2．收費(fèi)3．樣品采集4．核收5．質(zhì)控6．分析前處理7．生成工作任務(wù)清單8．分析過(guò)程9．分析后處理10．審核11．生成報(bào)告單和發(fā)布12．查詢19醫(yī)院信息系統(tǒng)(hospitalinformationsystem，HIS)利用電子計(jì)算機(jī)和通訊設(shè)備，為醫(yī)院所屬各部門(mén)提供病人診療信息(PatientCareInformation)

和行政管理信息（AdministrationInformation)的收集(Collect)、存儲(chǔ)(Store)、處理(Process)

、提取(Retrieve)和數(shù)據(jù)交換(Communicate)的能力并滿足所有用戶(AuthorizedUsers)的功能需求。

20第二節(jié)自動(dòng)生化分析儀22自動(dòng)生化分析儀(automaticbiochemicalanalyzer)，是把生化分析中的取樣(樣品稀釋)、加試劑、混勻、保溫反應(yīng)、檢測(cè)、結(jié)果計(jì)算、可靠性判斷、顯示和打印、清洗等步驟實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化的儀器。

一、概述23二、全自動(dòng)生化分析儀的主要類型、基本結(jié)構(gòu)和工作原理(一)自動(dòng)生化分析儀的類型自動(dòng)生化分析儀種類繁多，根據(jù)不同分類標(biāo)準(zhǔn)，可分成不同的種類。242526根據(jù)同時(shí)可測(cè)定項(xiàng)目數(shù)量根據(jù)項(xiàng)目選擇方式

單通道多通道隨機(jī)任選式固定項(xiàng)目式根據(jù)儀器自動(dòng)化程度全自動(dòng)化半自動(dòng)化27（二）連續(xù)流動(dòng)式自動(dòng)生化分析儀

檢測(cè)特點(diǎn)：

測(cè)定項(xiàng)目相同的各待測(cè)樣品與試劑混合后的化學(xué)反應(yīng)及整個(gè)分析過(guò)程，均在同一管道中經(jīng)流動(dòng)過(guò)程完成，又稱管道式分析儀?？諝夥侄蜗到y(tǒng)式試劑分段系統(tǒng)式

分類：28結(jié)構(gòu)：①樣品盤(pán)：用來(lái)放置待測(cè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)品②比例泵：提供使樣品在儀器內(nèi)進(jìn)行運(yùn)動(dòng)的壓力以及向流經(jīng)管道的液體注入空氣③混合管：將比重不同的液體充分混勻④透析器：去除反應(yīng)管中大、小分子對(duì)反應(yīng)的干擾，⑤恒溫器：恒定反應(yīng)所需溫度⑥比色計(jì)和記錄器：獲得檢測(cè)結(jié)果。29單通道管道式自動(dòng)分析儀結(jié)構(gòu)示意圖30（三）離心式自動(dòng)生化分析儀

結(jié)構(gòu)與檢測(cè)原理：

使用特殊材料制成的轉(zhuǎn)盤(pán)作為反應(yīng)器，轉(zhuǎn)盤(pán)上有呈放射狀排列的三個(gè)為一組的凹槽，可多達(dá)30組。檢測(cè)時(shí)，將轉(zhuǎn)盤(pán)放在離心機(jī)上作為轉(zhuǎn)頭，在靠近軸心的凹槽中加入試劑，中間凹槽中加入待測(cè)標(biāo)本轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)動(dòng)后，在離心力的作用下，試劑與標(biāo)本混合，發(fā)生反應(yīng)。經(jīng)適當(dāng)?shù)臅r(shí)間后，反應(yīng)液最后流入離軸心最遠(yuǎn)的凹槽中，該凹槽的上下表面均由透明的塑料材料制成，可作為比色孔。當(dāng)光源光束按垂直方向通過(guò)該比色孔時(shí)，完成比色測(cè)定。最后由微機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理、結(jié)果分析，并將測(cè)試結(jié)果顯示并打印出來(lái)。。在分析過(guò)程中，樣品與試劑的混合、反應(yīng)和檢測(cè)等每一步驟同時(shí)完成，屬于“同步分析”。

31離心式自動(dòng)分析儀結(jié)構(gòu)示意圖32（四）分立式自動(dòng)生化分析儀

模擬手工操作的方式設(shè)計(jì)儀器并編制程序，以機(jī)械臂代替手工，按照程序依次進(jìn)行有序的操作，完成項(xiàng)目檢測(cè)及數(shù)據(jù)分析。檢測(cè)特點(diǎn)：工作流程：33“順序式”分析示意圖34結(jié)構(gòu)：樣品盤(pán)(架)和取樣裝置試劑室(瓶)和取液裝置混勻裝置保溫系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng)清洗系統(tǒng)計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)等3536基本結(jié)構(gòu)和原理分析部分操作部分檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)樣和加液系統(tǒng)反應(yīng)系統(tǒng)清洗系統(tǒng)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)37檢測(cè)系統(tǒng)組成:

檢測(cè)系統(tǒng)

(detectionsystem)光學(xué)系統(tǒng)信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)功能:

作為分析部分的核心，它的功能是將化學(xué)反應(yīng)的光學(xué)變化轉(zhuǎn)變成電信號(hào)。38光學(xué)系統(tǒng)功能:提供足夠強(qiáng)度的光束、單色光及比色的光路。組成:由光源、光路系統(tǒng)、分光器、比色杯等組成。39光源：

一般采用鹵素?zé)?多為12V20W)，壽命為800小時(shí)左右，提供波長(zhǎng)范圍為325nm～800nn的光源。40光路系統(tǒng)：定義:從發(fā)出光到信號(hào)接收的全部路徑。

組成:由一組透鏡、聚光鏡、比色杯和分光元件等組成41光路的分類：直射式光路和集束式光路集束式光路的優(yōu)點(diǎn)：使光束變窄，可檢測(cè)低于180μl的反應(yīng)液，使生化分析儀的超微量檢測(cè)成為可能42前分光光路和后分光光路后分光的優(yōu)點(diǎn)：①可同時(shí)選用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定，提高了分析的精度和準(zhǔn)確度；②不需調(diào)節(jié)儀器的任何部件，降低了噪聲，，減少了故障率。43反射式光路：特點(diǎn)：①在干化學(xué)化分析儀中使用。②載體是固相的試紙，不具備透射功能，反光度與濃度成反比。44分光元件分類:濾光片、棱鏡、全息反射式光柵和蝕刻式凹面光柵

濾光片均為干涉濾光片，有插入式和可旋轉(zhuǎn)式濾光片槽、濾光片盤(pán)兩種。全息反射式光柵是在玻璃上覆蓋一層金屬膜后制成，有一定程度的相差，易被腐蝕。蝕刻式光柵是將所選波長(zhǎng)固定地刻制在凹面玻璃上(1mm內(nèi)可以蝕刻4000～10000條線)，有耐磨損、抗腐蝕、無(wú)相差等優(yōu)點(diǎn)45比色杯比色杯的厚度有0.5cm、0.6cm和1cm三種。光徑小的可以減少樣品和試劑用量。光徑小于1cm時(shí)，儀器可以自動(dòng)校正為1cm。46比色杯有二種類型：

2、反應(yīng)杯兼作為比色杯：反應(yīng)杯以不同形式逐個(gè)連接在一起，形成一個(gè)盤(pán)結(jié)構(gòu)，按指定順序通過(guò)光路，進(jìn)行連續(xù)比色。1、流動(dòng)比色池

:吸液器將試管內(nèi)的有色溶液吸入固定的比色杯，進(jìn)行比色后再吸出，此為單通道比色方式。47信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)功能：是接收由光學(xué)系統(tǒng)產(chǎn)生的光信號(hào)，將其轉(zhuǎn)換成電信號(hào)后放大，再把它們傳送至數(shù)據(jù)處理單元。信號(hào)接收器：一般為硅(矩陣)二極管

信號(hào)傳送方式：光電信號(hào)傳送和光導(dǎo)纖維傳送兩種

48進(jìn)樣、加液系統(tǒng)功能：模仿人工操作，識(shí)別樣品和試劑，并把它們加入到反應(yīng)器中。樣品架(盤(pán))和試劑盤(pán)加液系統(tǒng)攪拌器組成：?jiǎn)瓮ǖ廊詣?dòng)生化分析儀49505152多通道全自動(dòng)生化分析儀53反應(yīng)系統(tǒng)組成：反應(yīng)盤(pán)和恒溫系統(tǒng)兩部分。反應(yīng)盤(pán)

反應(yīng)盤(pán)是生化反應(yīng)的場(chǎng)所，全部的反應(yīng)杯位于其中，目前的全自動(dòng)生化分析儀都用反應(yīng)杯兼作比色杯，置于恒溫箱中。54恒溫系統(tǒng)自動(dòng)生化分析儀通過(guò)恒溫系統(tǒng)保持溫度的恒定，以保證反應(yīng)的正常進(jìn)行，其保持恒溫的方式有干式恒溫、水浴循環(huán)加熱式、恒溫液循環(huán)間接加熱式三種：55清洗系統(tǒng)組成：一般由吸液針、吐液針和擦拭塊組成，可有五至九段清洗，段就是沖洗的步驟。清洗的工作流程：吸出反應(yīng)液吐入清洗劑吸干吐入去離子水吸干擦干→→→→→5657計(jì)算機(jī)系統(tǒng)主要功能：

控制標(biāo)本的識(shí)別、吸取樣品和試劑、樣品和試劑的反應(yīng)、測(cè)定方法的選擇、吸光度的檢測(cè)、數(shù)據(jù)處理、校準(zhǔn)方法、結(jié)果打印、質(zhì)量監(jiān)控等功能表現(xiàn)：具有各種測(cè)定方法、校準(zhǔn)方法、儀器使用狀態(tài)的實(shí)時(shí)監(jiān)控、多種質(zhì)量監(jiān)控方式、項(xiàng)目間結(jié)果計(jì)算、各種統(tǒng)計(jì)功能、多種報(bào)告打印方式、數(shù)據(jù)存儲(chǔ)和調(diào)用。

58三、全自動(dòng)生化分析儀的性能及評(píng)價(jià)（一）性能：自動(dòng)化程度分析效率精度和準(zhǔn)確度應(yīng)用范圍及功能其它性能591.自動(dòng)化程度定義：自動(dòng)化程度指在人發(fā)出指令后，能夠由儀器自己獨(dú)立完成工作的程度和可同步分析的檢測(cè)項(xiàng)目數(shù)量等。決定因素：取決于儀器所使用微機(jī)處理功能的大小。602.分析效率定義：指在測(cè)定方法相同的情況下分析儀的分析速度，即單位時(shí)間可處理標(biāo)本的能力。決定因素：決定于一次測(cè)定中可測(cè)樣品多少和可測(cè)項(xiàng)目的多少。單通道分析儀，一次只能檢測(cè)一個(gè)項(xiàng)目，分析效率較低，這里的分析效率指儀器一次可容納的樣品數(shù)量。多通道分析儀，一次可測(cè)定多個(gè)項(xiàng)目，分析速度一般表示為“test/h”

表示方法:613.精度和準(zhǔn)確度取決于儀器各部件(加液、溫度控制、波長(zhǎng)、計(jì)時(shí)等)的加工精度和精確的工作狀態(tài)以及加樣精度、恒溫方式和測(cè)光方式。624.應(yīng)用范圍及功能儀器的應(yīng)用范圍:指所能進(jìn)行的分析方法以及可測(cè)定項(xiàng)目的種類。

分析方法除了分光光度法外，還能進(jìn)行濁度法、離子選擇性電極法、熒光法等測(cè)定。既可用終點(diǎn)法，也可作動(dòng)態(tài)法檢測(cè)?？蓽y(cè)定項(xiàng)目，早期常規(guī)的生化檢驗(yàn)指標(biāo)，近年來(lái)免疫濁度法測(cè)定特種蛋白、藥物監(jiān)測(cè)的分析和微量元素測(cè)定很多分析儀還具有一些特殊的功能雙波長(zhǎng)和多波長(zhǎng)的測(cè)光技術(shù)雙試劑功能多種校準(zhǔn)及質(zhì)量控制功能635.其它性能儀器的取液量、最小反應(yīng)液體積、反應(yīng)時(shí)間、可測(cè)吸光度范圍。試劑的使用是封閉式還是開(kāi)放式儀器的性能價(jià)格比、條碼識(shí)別功能等。檢測(cè)能力,檢測(cè)范圍等64(二)自動(dòng)生化分析儀的評(píng)價(jià)精密度評(píng)價(jià)波長(zhǎng)檢查相關(guān)性651.精密度評(píng)價(jià)內(nèi)容：批內(nèi)重復(fù)性和總精密度兩個(gè)方面，反映儀器的測(cè)定結(jié)果的精密度。批內(nèi)重復(fù)性測(cè)定批內(nèi)重復(fù)性就是對(duì)樣品的某一個(gè)或幾個(gè)項(xiàng)目各重復(fù)測(cè)定20次，計(jì)算它的CV值即精密度，然后與廠家的該項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)進(jìn)行比較?？偩芏纫匝菫槔?，選擇兩個(gè)濃度(有醫(yī)學(xué)決定水平的正常和異常值)，每天測(cè)定2批，每個(gè)濃度各平行兩次，兩批之間的時(shí)間間隔不少于2小時(shí)，連續(xù)20天，要求每天必須做室內(nèi)質(zhì)量控制。然后計(jì)算總精密度(ST)。662.相關(guān)性內(nèi)容：有兩臺(tái)儀器以上的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)該進(jìn)行儀器間結(jié)果的比較。若僅有一臺(tái)儀器，為了得到實(shí)驗(yàn)室之間的一致性，也可以用參考實(shí)驗(yàn)室的儀器進(jìn)行比較。方法：相同的試驗(yàn)項(xiàng)目在不同的儀器上測(cè)定．然后用線性回歸進(jìn)行比較和校正。673.波長(zhǎng)檢查內(nèi)容：包括線性和準(zhǔn)確性的檢查。線性檢查方法是用系列標(biāo)準(zhǔn)溶液在最大吸收處讀取吸光度，然后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或用回歸法計(jì)算線性相關(guān)。準(zhǔn)確性檢查的方法有兩種：①用已知準(zhǔn)確摩爾濃度和摩爾消光系數(shù)(ε)的溶液在其特定波長(zhǎng)比色，ε=A值／摩爾度，然后與標(biāo)準(zhǔn)ε比較。②與已知準(zhǔn)確波長(zhǎng)的儀器比較，如有漂移，應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)男Ｕ?8七、自動(dòng)生化分析儀分析方法一點(diǎn)終點(diǎn)法二點(diǎn)終點(diǎn)法連續(xù)監(jiān)測(cè)法69(一)一點(diǎn)終點(diǎn)法原理：使用一種或兩種試劑，當(dāng)樣品和試劑混合后，待測(cè)物與試劑的物理化學(xué)反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)時(shí)，測(cè)定一次吸光度，計(jì)算待測(cè)物的濃度。應(yīng)用：該法具有代表性的試驗(yàn)有總蛋白、白蛋白、葡萄糖氧化酶法等雙試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法反應(yīng)示意圖70（二）兩點(diǎn)終點(diǎn)法二點(diǎn)終點(diǎn)法也稱固定時(shí)間法，它可以用一種或二種試劑。單試劑二點(diǎn)法，在樣品與試劑混合后的延滯期后讀取A1，一定時(shí)間后讀取A2，A=A2-A1。雙試劑二點(diǎn)法，屬于試劑啟動(dòng)法，原理是加入樣品—試劑1—讀取A1，加入試劑2—讀取A2，也是讀取兩次吸光度，第一次是相當(dāng)于讀出樣品空白的值，加入試劑2至第二次讀數(shù)才是實(shí)際呈色反應(yīng)，因此A=A2-kA1。特點(diǎn)：可以消除樣品、試劑的顏色、濁度，和一些干擾物質(zhì)對(duì)測(cè)定的干擾。71723.比濁法比濁法也是一種終點(diǎn)法．不過(guò)是一種濁度測(cè)定，比濁法可用于化學(xué)比濁法和免疫比濁法。免疫比濁法又分為透射比濁和散射比濁目前常用的免疫比濁法主要用于血清特種蛋白的檢測(cè)，如載脂蛋白、微量蛋白、急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，免疫球蛋白等，以及某些藥物監(jiān)測(cè)。

734.雙波長(zhǎng)法原理:是檢測(cè)計(jì)在對(duì)一待測(cè)物進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，同時(shí)用兩個(gè)波長(zhǎng)檢測(cè)，用主波長(zhǎng)的吸光度減去副波長(zhǎng)的吸光度．標(biāo)準(zhǔn)物與待測(cè)物同等對(duì)待，計(jì)算待測(cè)物的濃度。優(yōu)點(diǎn):是可以通過(guò)消除背景吸收，而減少樣品的顏色和濁度所產(chǎn)生的影響，它不僅可以有效地校準(zhǔn)樣本的混濁、溶血、黃疸等，還可對(duì)電源波動(dòng)有補(bǔ)償效果。74(二)連續(xù)監(jiān)測(cè)法特點(diǎn)：連續(xù)監(jiān)測(cè)法屬于動(dòng)態(tài)法檢測(cè)，適用于酶活性檢測(cè)，此法是通過(guò)適當(dāng)?shù)膬x器，連續(xù)測(cè)定酶促反應(yīng)過(guò)程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的濃度隨時(shí)間變化的情況。原理：是在酶反應(yīng)的最適條件下，用物理、化學(xué)或酶促反應(yīng)的分析方法，在反應(yīng)速度恒定期(零級(jí)反應(yīng)期)和反應(yīng)呈線性期來(lái)連續(xù)觀察和記錄一定反應(yīng)時(shí)間內(nèi)底物或產(chǎn)物量的變化，以單位時(shí)間酶反應(yīng)初速度計(jì)算出酶活力的大小。①絕對(duì)法：酶活力(u／L)=△A×(反應(yīng)液體積／樣品體積)×(1000／消光系數(shù))②相對(duì)法：酶活力(U／L或mmolI／L)=[△A(測(cè)定)／△A(標(biāo)準(zhǔn))]×標(biāo)準(zhǔn)物的活力或濃度計(jì)算方法有兩種：751．兩點(diǎn)速率法觀察兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的吸光度，與單試劑二點(diǎn)法相似，但必須是在零級(jí)反應(yīng)期和線性期。用兩個(gè)吸光度的差值(A)除以時(shí)間(分)，計(jì)算出每分鐘的吸光度值。76

2．多點(diǎn)速率法

在酶促反應(yīng)進(jìn)程的零級(jí)反應(yīng)期間每隔一定時(shí)間(2秒～30秒)進(jìn)行一次監(jiān)測(cè)，連續(xù)監(jiān)測(cè)多次，求出單位時(shí)間內(nèi)的反應(yīng)速度即△A。

速率A法也稱最小二乘法，它是用最小平方法求得每分鐘的吸光度變化(△A)，從而求出濃度或活性值，是全自動(dòng)生化分析儀上最常使用的速率法。

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