ABO定型及配血不合的分析

ABO血型系統(tǒng)疑難定型及配血不合的分析吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院輸血科劉玉潔前言臨床輸血是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中診治疾病，挽救生命的重要醫(yī)療手段。同時(shí)，輸血可能引起多種不良反應(yīng)，直接危機(jī)到患者生命，稍有不慎將可能發(fā)生無(wú)法彌補(bǔ)的過(guò)失。所以，每個(gè)細(xì)小環(huán)節(jié)都必須做到安全、準(zhǔn)確、有效。血型鑒定、交叉配血、抗體篩選是輸血前的最后一道防線，要求輸血科從業(yè)人員必須有高度的責(zé)任感、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)，確保試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤。我們?cè)谂R床工作中經(jīng)常遇見(jiàn)血型鑒定、交叉配血、抗體篩查不符及各種干擾情況。下面把在血型血清學(xué)臨床實(shí)踐中的一點(diǎn)體會(huì)做如下匯報(bào)，供大家參考。ABO正定型必備的試劑及意義疑難定型中正定血型所用抗血清抗-A及抗-B抗-AB:確認(rèn)弱A和弱B抗原,與弱A及弱B抗原親和力強(qiáng),會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng)抗-H:用于檢查亞型等,A亞型紅細(xì)胞上的H抗原多于正常A型抗-A1:用于A亞型(如A2,A3)檢測(cè)ABO反定型中必備的試劑及意義

A及B細(xì)胞:確認(rèn)抗-A或抗-B抗體O型紅細(xì)胞:檢查是否存在ABO系統(tǒng)以外抗體自身對(duì)照:用于確認(rèn)正反定型結(jié)果的有效性,排除自身抗體對(duì)定型的干擾(如冷凝集等)A2細(xì)胞:用于亞型的鑒定,尤其是在懷疑是A亞型且又存在抗-A1抗體的情況下ABO疑難血型檢測(cè)項(xiàng)目正反定型：正定型：-A,-B，-AB,-H,-A1反定型：Ac,Bc,Oc,自身對(duì)照型物質(zhì)檢查（唾液）吸收抑制試驗(yàn)放散試驗(yàn)家系調(diào)查吸收抑制試驗(yàn)原理：本試驗(yàn)用以間接證明紅細(xì)胞上的抗原。如全凝聚或多凝聚細(xì)胞無(wú)法用標(biāo)準(zhǔn)血清檢查血型，但紅細(xì)胞加入血清后，若有相應(yīng)抗原，便吸收血清中抗體。吸收后的血清再用相應(yīng)紅細(xì)胞測(cè)定效價(jià)并與吸收前血清效價(jià)比較。當(dāng)血清效價(jià)顯著下降或不凝聚相應(yīng)紅細(xì)胞時(shí)，便可證明受檢紅細(xì)胞含有這一抗原，間接推測(cè)受檢紅細(xì)胞的血型放散試驗(yàn)原理：抗體與相應(yīng)的抗原在適合條件下發(fā)生凝聚或致敏但這種結(jié)合是可逆的，如改變某些物理?xiàng)l件時(shí)抗體又可以從結(jié)合的紅細(xì)胞上解脫下來(lái)。通過(guò)檢測(cè)放散出來(lái)的抗體，可以證明弱A或弱B抗原的存在?？筛鶕?jù)需要決定方法型ABH物質(zhì)測(cè)定意義原理：某些血型抗原以可溶解形式存在于血清、血漿、唾液、尿液等體液中，稱(chēng)為可溶性血型物質(zhì)；有分泌型和非分泌型之分.A型人唾液含A型物質(zhì)、B型含B物質(zhì)、AB型含A及B物質(zhì)。H型在A、B、O、AB四型均存在，但以O(shè)型人含量最多。唾液中血型物質(zhì)為多糖類(lèi)－－半抗原，能特異地與相應(yīng)抗體結(jié)合，從而抑制該抗體與相應(yīng)紅細(xì)胞發(fā)生凝聚。意義：可作為判斷血型的輔助依據(jù)。可鑒定抗體性質(zhì)。O型篩選紅細(xì)胞的應(yīng)用抗原組成:三組合細(xì)胞,要求必須具備全部的Rh因子I:O型(CDe/Cde);II:O型(cDE/cDE);III:O型(cde/cde)

用途:用于受血者、獻(xiàn)血員及孕產(chǎn)婦等的ABO系統(tǒng)以外不規(guī)則抗體的篩選目的:在配血之前,有針對(duì)性、病人相配合的血自身冷凝集血樣的ABO定型正定型用紅細(xì)胞的準(zhǔn)備:血樣采集后,立即離心,獲得壓積紅細(xì)胞用37℃溫鹽水洗滌紅細(xì)胞45℃熱放散3分鐘巰基試劑處理(或2-ME):破壞IgM獲得性B及多凝集現(xiàn)象獲得性B:腸紊亂及感染病人,細(xì)菌酶影響A抗原的受體腸內(nèi)壁通透性增加,而后細(xì)菌多糖吸附在紅細(xì)胞表面特點(diǎn)：1、因紅細(xì)胞上的類(lèi)B抗原是獲得的，病情好轉(zhuǎn)，類(lèi)B消失。2、AB型人血清中一般沒(méi)有抗體，而類(lèi)B一般是A型紅細(xì)胞獲得的，所以血清中沒(méi)有抗B抗體。

3、多凝聚現(xiàn)象:異?；蜃冃蔚腞BC被所有正常人的血清凝集(微生物酶作用暴露或激活膜隱蔽受體(多凝集血樣中的血清不與自身反應(yīng))獲得類(lèi)B解決辦法詢(xún)問(wèn)病史：是否有腸道感染用自身血清檢查紅細(xì)胞，獲得性類(lèi)B抗原其血清不凝聚自身紅細(xì)胞。唾液型物質(zhì)檢測(cè)：如是分泌型，其唾液只含有A物質(zhì)而不含B物質(zhì)

ABO正反定型不符事例-A -B -AB Ac Bc

Oc

自身

- - - - - - -可能血型:O新生兒或老年人,丙球蛋白缺乏或服用免疫抑制劑解決方案:檢查年齡及丙球水平,室溫30分鐘或4度15分鐘ABO正反定型不符事例-A -B -AB Ac Bc

Oc

自身4+- 4+ 1+ 4+ - -可能血型:亞型,可能是A2型有抗-A1解決方案:使用抗-A1血清鑒定ABO正反定型不符事例-A -B -AB Ac Bc

Oc

自身4+4+ 4+ 2+ 2+ 2+ 2+可能血型:AB型，但有緡錢(qián)形成(多發(fā)骨髓瘤,白蛋白:球蛋白比例失調(diào),血漿蛋白紊亂),冷自家抗體(AB型有抗-I),解決方案:洗滌紅細(xì)胞(鹽水替代試驗(yàn)),自家吸收ABO正反定型不符事例-A -B -AB Ac Bc

Oc

自身4+-

4+ - 4+ 3+ -可能血型:A1可能有抗-H解決方案:使用抗-A1確認(rèn)A抗原,抗-H驗(yàn)證H抗原ABO正反定型不符事例

-A -B -AB Ac Bc

Oc

自身3+4+ 4+ 1+ - - -可能血型:AB亞型,可能是A2B有抗-A1解決方案:使用抗-A1ABO正反定型不符事例-A-B-ABAcBcOc自身4+2+4+-4+--可能血型:A型有獲得性B原解決方案:詢(xún)問(wèn)病史,用酸化的抗-B(pH6.0)檢查ABO正反定型不符事例-A-B-ABAcBcOc自身4+4+4+2+-2+-可能血型:AB型有同種抗體解決方案:進(jìn)行抗體篩選及抗體鑒定ABO正反定型不符事例

-A -B -AB Ac Bc

Oc

自身

+ + + 4+ 4+ + +可能血型:O型有問(wèn)題抗體或有輸血反應(yīng),引起RBC包被抗體解決方案:直接抗球蛋白試驗(yàn)及抗體鑒定ＡＢＯ定型不一致的原因分析（一）

弱反應(yīng)或缺失抗體１、新生兒２、老人３、低球蛋白癥的白血病人４、低球蛋白的淋巴瘤病人（惡性）５、使用免疫抑止藥物而導(dǎo)致低球蛋白的病人６、先天丙球缺乏的病人７、免疫缺陷病人８、骨髓移植病人（由于治療導(dǎo)致球蛋白缺乏，且移植入的骨髓制造另一群紅細(xì)胞９、雙胞胎嵌合體弱或缺失抗體導(dǎo)致的正反定型不符

正定型反定型抗Ａ抗Ｂ抗ＡＢＡ細(xì)胞Ｂ細(xì)胞－３＋４＋－－

＊：可能血型：Ｂ（老年人）ＡＢＯ定型不一致的原因分析（二）弱反應(yīng)或缺失抗原１、Ａ亞型、Ｂ亞型或ＡＢ亞型２、白血病導(dǎo)致Ａ或Ｂ抗原減弱３、何杰金病（Hodgkin’s）有時(shí)會(huì)抑制抗原表達(dá)，與白血病類(lèi)似４、由于某種疾?。ㄈ绺骨话⒁认侔?dǎo)致血漿中存在大量的型物質(zhì)，中和抗－Ａ或抗－Ｂ抗體，引起正定型為假陰性或弱陽(yáng)性。通過(guò)洗滌紅細(xì)胞可解決此問(wèn)題。５、獲得性Ｂ

6、抗－Ａ或抗－Ｂ試劑中存在低頻抗原的抗體白血病人的血型血清定型的典型反應(yīng)

正定型反定型自身

病人血型抗Ａ，抗Ｂ，抗ＡＢＡ細(xì)胞，Ｂ細(xì)胞，O細(xì)胞Ａ+－2+３＋－－Ｂ－±/＋＋４＋－－ABO定型不一致的原因分析（三）

蛋白或血漿不正常引起的正反定型不符1、某些疾病導(dǎo)致球蛋白水平增高（多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、Hodgkin’s淋巴瘤）引起緡錢(qián)狀凝集，纖維蛋白原水平的增高也會(huì)引起緡錢(qián)狀凝集，導(dǎo)致假陽(yáng)性凝集。（洗滌紅細(xì)胞）２、血漿增溶劑（葡聚糖、PVP）也會(huì)引起緡錢(qián)狀凝集。（洗滌紅細(xì)胞）緡錢(qián)狀假凝集特點(diǎn)：①在顯微鏡下紅細(xì)胞膜完整，細(xì)胞間界限清洗地成緡錢(qián)串聚集。②緡錢(qián)狀假凝集反應(yīng)不受溫度影響，室溫與37℃結(jié)果一樣。解決方法：被檢細(xì)胞先用鹽水洗滌后再作配血試驗(yàn)緡錢(qián)狀凝集引起的正反定型不符

正定型反定型自身

抗Ａ抗Ｂ抗ＡＢＡ細(xì)胞Ｂ細(xì)胞O細(xì)胞

４＋２＋４＋２＋４＋2+－ABO定型不一致的原因分析（四）

其他原因引起的正反定型不符１、多凝集：當(dāng)病人感染細(xì)菌或病毒后，病毒或細(xì)菌產(chǎn)生的酶使紅細(xì)胞上掩蔽的Ｔ抗原暴露激活，由于正常人血清中都含有抗－Ｔ抗體，因此可與正常人血清產(chǎn)生凝集反應(yīng)，正定型試驗(yàn)假陽(yáng)性。（利用植物凝集素解決）２、冷自身抗體引起的自家凝集反應(yīng)：正反定型均可出現(xiàn)假陽(yáng)性（自身吸收及巰基試劑處理）３、存在 ABO系統(tǒng)的意外抗體：如A2或A2B個(gè)體血清中可能存在天然抗－Ａ1，導(dǎo)致反定型試驗(yàn)多出抗體。ABO定型不一致的原因分析（四）

其他原因引起的正反定型不符４、被檢者血清中存在ABO系統(tǒng)以外的同種抗體，反定型時(shí)出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。（譜細(xì)胞鑒定抗體特異性）５、非抗－Ａ及抗－Ｂ的抗體與相應(yīng)抗原形成復(fù)合體吸附在紅細(xì)胞表面，引起正定型非特異性凝集。ABO定型不一致的原因分析（五）

技術(shù)方面的原因引起的正反定型不符標(biāo)準(zhǔn)血清方面的原因：血清抗體效價(jià)過(guò)低、保存不當(dāng)細(xì)菌污染、試驗(yàn)器皿不干凈等。操作方面的原因：紅細(xì)胞濃度、血清與紅細(xì)胞的比例不當(dāng)、離心過(guò)度或離心不足。錯(cuò)誤的記錄。Ｔ抗原活化引起正反定型不符

正定型反定型自身抗Ａ抗Ｂ抗ＡＢＡ細(xì)胞Ｂ細(xì)胞O細(xì)胞２＋１＋４＋４＋４＋－－

＊：可能血型：Ｏ在人的紅細(xì)胞上有一種不活動(dòng)的T抗原，血清中又存在一種抗T抗體，正常時(shí)不會(huì)發(fā)生凝聚。但某些細(xì)菌或細(xì)菌酶污染紅細(xì)胞后，能激活原來(lái)不活動(dòng)的T抗原，使成為有活性的T抗原，此時(shí)遇到抗T抗體，便與任何人的血清都能凝聚，所有把被激活的T抗原細(xì)胞叫全凝集細(xì)胞。自身冷抗體引起的正反定型不符

正定型反定型自身抗Ａ抗Ｂ抗ＡＢＡ細(xì)胞Ｂ細(xì)胞O細(xì)胞２＋４＋４＋４＋３＋２＋２＋＊：可能是Ｂ型自身溫抗體或輸血反應(yīng)引起細(xì)胞

包被抗體導(dǎo)致的正反定型不符

正定型反定型自身抗Ａ抗Ｂ抗ＡＢＡ細(xì)胞Ｂ細(xì)胞O細(xì)胞＋＋＋４＋４＋１＋１＋＊：可能血型Ｏ亞型抗體引起的正反定型不符

正定型反定型自身抗Ａ抗Ｂ抗ＡＢＡ細(xì)胞Ｂ細(xì)胞O細(xì)胞４＋４＋４＋１＋－－－＊：可能血型A2B抗A1抗體

疑難配血及原因分析

常規(guī)配血技術(shù)選擇的技術(shù)不僅要能檢查出不配合的IgM抗體，還必須能檢查出盡可能多的不配合的IgG抗體。最大限度的減少抗體的漏檢。立即離心技術(shù)配血法：用于檢查ABO的不配合及室溫反應(yīng)活性抗體引起的不配合。抗人球蛋白配血法：用于檢查不規(guī)則抗體(IgG)引起的交叉配血不配合。特殊配血技術(shù)預(yù)溫配血技術(shù)：主要用于解決室溫反應(yīng)活性的無(wú)臨床意義的抗體引起的交叉配血不配合。冷型自家溶貧病人的配血試驗(yàn)，用于解決自身冷凝集引起的配血困難。溫型自家溶貧病人的配血試驗(yàn)，用于解決自身溫抗體引起的配血困難。纖原未完全析出的血樣，如腎透析、凝血功能差的病人，在配血時(shí)引起假陽(yáng)性。－－－

主側(cè)交叉配血不相合的原因病人或供血者ABO定型不正確，或二者的ABO血型不配合。病人血清中存在同種抗體，與供血者紅細(xì)胞上的相應(yīng)抗原反應(yīng)。病人血清中存在自身抗體，與供血者紅細(xì)胞上的相應(yīng)抗原反應(yīng)。主側(cè)交叉配血不相合的原因供血者紅細(xì)胞上已經(jīng)包被了抗體，導(dǎo)致抗球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。病人血清不正常，如白蛋白／球蛋白比例不正常引起緡錢(qián)狀假凝集，血清中存在高分子聚合物的血漿擴(kuò)容劑引起假陽(yáng)性（用鹽水添加試驗(yàn)來(lái)解決）。試驗(yàn)系統(tǒng)被污染。次測(cè)交叉配血不相合的原因（一）供血者血漿中存在針對(duì)病人紅細(xì)胞抗原的抗體。病人與供血者的ABO血型不相合。病人的紅細(xì)胞已經(jīng)包被了抗體，直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。主側(cè)配血不相符原因分析（一）現(xiàn)象

可能原因解決方案主側(cè)：＋病人或供血者ABO錯(cuò)誤重新定型自身：—病人血清可能含ABO抗體檢查病人亞型、輸血/移植史抗體篩選：—病人血清中有抗體，但篩選對(duì)病人血清進(jìn)行抗體鑒定細(xì)胞上無(wú)相應(yīng)抗原供血者紅細(xì)胞直接抗球蛋白檢查供血者直接抗球蛋白試驗(yàn)試驗(yàn)陽(yáng)性

主側(cè)配血不相合原因的分析（二）現(xiàn)象可能原因解決方案主側(cè)：＋自身：—抗體篩選：+病人血清中的同種抗體與供血者紅細(xì)胞上相應(yīng)抗原反應(yīng)病人血清進(jìn)行抗體鑒定選擇無(wú)對(duì)應(yīng)抗原的血主側(cè)：＋自身：＋抗體篩選：+病人血清中可能同時(shí)存在自身抗體和同種抗體病人血清不正常白蛋白/球蛋白比例不正常使用血漿擴(kuò)容物樣本被污染對(duì)病人血清自身吸收及體鑒定，用吸收后血清配血鹽水添加法解決緡錢(qián)凝集抽取新樣本使用新器具溫型自家溶貧病人的配血對(duì)WAIHA病人最好避免輸血，必須輸血時(shí)，應(yīng)給以維持足夠攜氧能力的最少量的紅細(xì)胞。由于找不到血清學(xué)配合的血液，確實(shí)存在著由伴隨的同種抗體引起嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)的危險(xiǎn)。因此除非病人的生命處在危險(xiǎn)中，否則應(yīng)該盡量避免輸血。在交