第05章-血細(xì)胞分析儀

Clinicallaboratorymedicine臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)教研室郝艷梅1血細(xì)胞分析儀教學(xué)要求掌握血細(xì)胞分析儀的概念、庫(kù)爾特原理。熟悉聯(lián)合檢測(cè)型血細(xì)胞分析儀器的檢測(cè)原理，網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)原理，血紅蛋白檢測(cè)原理、儀器性能評(píng)價(jià)和維護(hù)。了解血細(xì)胞分析儀的分類(lèi)、基本結(jié)構(gòu)、常見(jiàn)故障和排除及進(jìn)展。第五章臨床血液常規(guī)檢驗(yàn)儀器P632第一節(jié)血細(xì)胞分析儀學(xué)習(xí)內(nèi)容一、血細(xì)胞分析儀的分型二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)四、血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)與評(píng)價(jià)五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)及常見(jiàn)故障六、血細(xì)胞分析儀的進(jìn)展七、思考題3自動(dòng)化血細(xì)胞分析儀由于操作簡(jiǎn)便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確及精密度高，少量血液就可完成多項(xiàng)參數(shù)的分析，為臨床醫(yī)學(xué)提供了更多的診斷信息，現(xiàn)正逐漸取代傳統(tǒng)的顯微鏡計(jì)數(shù)法而被廣泛應(yīng)用。血常規(guī)化驗(yàn)單

4顯微鏡計(jì)數(shù)法:速度慢、精密度不高，但是“金標(biāo)準(zhǔn)”不同種類(lèi)細(xì)胞的細(xì)胞大小、胞漿中顆粒大小和性質(zhì)、核形態(tài)、核漿比例等不同。？5一、血細(xì)胞分析儀的分型血細(xì)胞分析儀(Bloodcellanalyzer,BCA)是指對(duì)一定體積全血內(nèi)血細(xì)胞數(shù)量和異質(zhì)性進(jìn)行自動(dòng)分析的臨床檢驗(yàn)常規(guī)儀器；主要功能是血細(xì)胞計(jì)數(shù)、WBC分類(lèi)、Hb測(cè)定、相關(guān)參數(shù)計(jì)算等。又稱(chēng)血液細(xì)胞分析儀、血液分析儀、血球儀、血球計(jì)數(shù)儀63血細(xì)胞分析儀分型⒈按自動(dòng)化程度：

半自動(dòng)、全自動(dòng)⒉按檢測(cè)原理：

電阻抗型、激光型、聯(lián)合檢測(cè)型等。⒊按對(duì)白細(xì)胞的分類(lèi)水平：二分群、三分群、五分類(lèi)、五分類(lèi)+Ret等；血細(xì)胞分析流水線(xiàn)。7血細(xì)胞分析流水線(xiàn)①一臺(tái)或多臺(tái)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀②機(jī)器人(完成條碼識(shí)別、開(kāi)蓋混勻等)③單臺(tái)或多臺(tái)推片染色儀④軌道⑤計(jì)算機(jī)8檢測(cè)原理電學(xué)光學(xué)電阻抗法射頻電導(dǎo)法激光散射法分光光度法染色非染色二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理RBC、PLT計(jì)數(shù)、低檔次儀器WBC計(jì)數(shù)：→應(yīng)用庫(kù)爾特檢測(cè)原理(微粒子電阻抗血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理)五分類(lèi)和高檔次儀器：→大多應(yīng)用以流式技術(shù)為主的聯(lián)合檢測(cè)原理Hb檢測(cè)：→多使用光電比色原理9血細(xì)胞與等滲的電解質(zhì)溶液相比為相對(duì)的不良導(dǎo)體血細(xì)胞電阻值大于稀釋液的電阻值。1.電阻抗型血細(xì)胞分析儀檢測(cè)原理（一）血細(xì)胞分析儀的細(xì)胞計(jì)數(shù)原理-+10※Coulter原理：在由外電極、內(nèi)電極和電解質(zhì)稀釋液組成的電路上→懸浮在電解質(zhì)稀釋液中的血細(xì)胞經(jīng)負(fù)壓吸引通過(guò)檢測(cè)器的微孔時(shí)→產(chǎn)生短暫的電阻增大變化→形成電壓脈沖信號(hào)→并經(jīng)計(jì)算機(jī)處理→脈沖數(shù)被轉(zhuǎn)化為細(xì)胞數(shù)，脈沖信號(hào)幅度則與細(xì)胞體積大小呈正相關(guān)。U=ⅠR116血液中各種血細(xì)胞的體積不同，WBC體積范圍120～1000fl，RBC在85～95fl，PLT在2～30fl,血細(xì)胞計(jì)數(shù)便是利用它們的體積及數(shù)量不同。為未加入溶血素前體積體積不同，脈沖大小不同，WBC最大，RBC次之，PLT最小。各種不同大小細(xì)胞產(chǎn)生的脈沖信號(hào)分別通過(guò)：放大、閾值調(diào)節(jié)和甄別、整形、計(jì)數(shù)得出各種細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。12※脈沖信號(hào)和細(xì)胞體積直方圖的關(guān)系7橫坐標(biāo)為血細(xì)胞體積大小縱坐標(biāo)為不同體積細(xì)胞的相對(duì)頻率。13實(shí)際進(jìn)行血細(xì)胞分析時(shí)：WBC為一個(gè)檢測(cè)器。RBC和PLT為一檢測(cè)器。1435－9090－160160－450-+（1）白細(xì)胞的檢測(cè)細(xì)胞懸液加溶血素后送入白細(xì)胞檢測(cè)器。小細(xì)胞群中間細(xì)胞群大細(xì)胞群15第一群：小細(xì)胞區(qū)，主要是LC，體積在35-90fl;第二群：?jiǎn)蝹€(gè)核細(xì)胞區(qū)，也稱(chēng)為中間細(xì)胞群，體積在90-160fl，包括MC、Eos、Bas、核左移白細(xì)胞、原始或幼稚階段白細(xì)胞；第三群：大細(xì)胞區(qū)，主要是NC，體積在160fl以上。淋巴嗜堿單核嗜酸中性粒細(xì)胞16提示：原始、幼稚白細(xì)胞增多提示：LC減少和NC增多提示：LC增多和NC減低提示：中間細(xì)胞群增多用顯微鏡人工復(fù)檢17（2）紅細(xì)胞和血小板的檢測(cè)

紅細(xì)胞和血小板共用一個(gè)檢測(cè)器（小孔管）。-+18CPU對(duì)血小板和紅細(xì)胞分布圖進(jìn)行判斷正常人紅細(xì)胞體積和血小板體積間有一個(gè)明顯界限，血小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確容易。19fL當(dāng)血細(xì)胞懸液中含有異常血細(xì)胞（如小RBC）時(shí)，劃分界限不清。為使PLT計(jì)數(shù)有較高的準(zhǔn)確性，計(jì)算機(jī)對(duì)PLT和RBC分布圖進(jìn)行判斷，將PLT計(jì)數(shù)的上限閾值判定線(xiàn)放在RBC和PLT分布圖交叉部分的最低處計(jì)數(shù)。20紅細(xì)胞和血小板檢測(cè)的直方圖21紅細(xì)胞直方圖小RBC且大小不均

β-地中海貧血MCV↓RDW↑MCV↓RDW-紅細(xì)胞分布寬度（RDW）22大RBC且大小不均MCV↑RDW↑23血小板直方圖細(xì)胞碎片的影響24用顯微鏡人工復(fù)檢25262.聯(lián)合檢測(cè)型血細(xì)胞分析儀檢測(cè)原理前鞘流后鞘流檢測(cè)窗聯(lián)合分類(lèi)技術(shù)是以流式技術(shù)為基礎(chǔ)再聯(lián)合使用電阻抗、射頻和電導(dǎo)、激光散射、細(xì)胞化學(xué)染色等多項(xiàng)技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分析，并綜合分析檢測(cè)數(shù)據(jù)，從而得出較為準(zhǔn)確的五分類(lèi)結(jié)果。共有特點(diǎn)是：均使用了鞘流技術(shù)。將經(jīng)試劑稀釋、染色、球形化的細(xì)胞懸液注入鞘液流中央，單個(gè)細(xì)胞隨懸液和鞘液流兩股液流整齊排列，以恒定流速定向通過(guò)石英毛細(xì)管。NC、LC、MC、Eos、Bas、異常細(xì)胞27Volumeconductivitylightscatter,VCS①電阻抗技術(shù)：檢測(cè)細(xì)胞體積和數(shù)量。(1)容量、電導(dǎo)、光散射聯(lián)合檢測(cè)原理每個(gè)細(xì)胞接受三維分析，定義到三維散點(diǎn)圖的相應(yīng)位置。

28射頻電導(dǎo)：射頻電流，每秒變化大于1萬(wàn)次的高頻交流電磁波，能通過(guò)細(xì)胞膜。細(xì)胞膜對(duì)高頻電流具有傳導(dǎo)性，當(dāng)電流通過(guò)細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的理化組份可使電流的傳導(dǎo)性產(chǎn)生變化。②電導(dǎo)性(conductivity，C)：采用高頻電磁探針，測(cè)量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，細(xì)胞內(nèi)核漿比例、胞質(zhì)顆粒的大小和密度，從而區(qū)別體積完全相同而性質(zhì)不同的兩個(gè)細(xì)胞。29激光散射：激光束能穿透細(xì)胞，細(xì)胞因本身的各種特性(細(xì)胞內(nèi)核分葉狀況和胞漿中的顆粒情況)可阻擋或改變激光束的方向，產(chǎn)生與細(xì)胞特征相應(yīng)的各種角度的散射光。低角度散射光：前向散射光，反映細(xì)胞的數(shù)量和體積大小。③高角度散射光：側(cè)向散射光，反映細(xì)胞內(nèi)核分葉狀況和胞漿中的顆粒等情況，可以區(qū)分出顆粒特性不同的細(xì)胞群體。

光散射(scatter，S)30儀器根據(jù)細(xì)胞體積、傳導(dǎo)性和光散射的不同，綜合分析三種檢測(cè)方法的測(cè)定數(shù)據(jù)，定義到三維散點(diǎn)圖的相應(yīng)位置，全部單個(gè)細(xì)胞在散點(diǎn)圖上形成了不同的細(xì)胞群落圖→得出WBC分類(lèi)值。使用VCS技術(shù)后，每個(gè)細(xì)胞通過(guò)檢測(cè)區(qū)時(shí)，接收三維分析，不同的細(xì)胞在細(xì)胞體積、表面特征、內(nèi)部結(jié)構(gòu)等方面完全一致的幾率很小。各類(lèi)白細(xì)胞在VCS三維空間中的分布特點(diǎn)31立體散點(diǎn)圖平面散點(diǎn)圖32原理是一定體積的全血標(biāo)本用鞘流液按適當(dāng)比例稀釋。WBC內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài)，在水動(dòng)力系統(tǒng)的作用下，樣本被集中為一個(gè)直徑為30μm的小股液流，該液流將稀釋細(xì)胞單個(gè)排列，因是單個(gè)通過(guò)激光束，故在各個(gè)方向都有其散射光?？梢詮乃膫€(gè)角度測(cè)定散射光的密度：

（2）多角度激光散射、電阻抗聯(lián)合檢測(cè)原理

33測(cè)定細(xì)胞大小和數(shù)量測(cè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和核質(zhì)復(fù)雜性測(cè)細(xì)胞內(nèi)部顆粒和分葉狀況成分10°散射90°去偏振散射光顆?？梢詫⒋怪苯嵌鹊钠窦す庀竦奶匦裕瑓^(qū)別NC和EOS34基于WBC大小、折射率、核形、核漿比值、以及顆粒性質(zhì)等，均可影響不同角度下的散射光強(qiáng)度。不同WBC在以上幾個(gè)方面完全一致的幾率很小，從而對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)。0°和90°垂直光散射強(qiáng)度：分為單核（LC、MC、Bas）和多個(gè)核（NC、Eos）90°垂直光散射和90°消偏振光散射強(qiáng)度:

區(qū)分NC和Eos0°和10°光散射強(qiáng)度:

LC、MC、Bas3536這類(lèi)儀器是應(yīng)用激光散射與細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)計(jì)數(shù)。（3）光散射與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合檢測(cè)原理37①激光與過(guò)氧化物酶檢測(cè)通道：不同白細(xì)胞的過(guò)氧化物酶活性不同，從強(qiáng)到弱依次為：EOS、NC、MC，而LC和Bas則無(wú)。因此，細(xì)胞經(jīng)過(guò)氧化物酶染色后，胞質(zhì)內(nèi)即出現(xiàn)細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)，以X軸為吸光率（酶反應(yīng)強(qiáng)度），Y軸為光散射（細(xì)胞大?。╋@示檢測(cè)結(jié)果，每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的這2個(gè)信號(hào)可定位在細(xì)胞散點(diǎn)圖上。由于LC和Bas均無(wú)過(guò)氧化物酶活性，儀器獲得白細(xì)胞4個(gè)亞群(EOS、NC、MC、LC+Bas)。細(xì)胞大小酶反應(yīng)強(qiáng)度單細(xì)胞38酶反應(yīng)強(qiáng)度細(xì)胞體積大小39

②Bas細(xì)胞檢測(cè)通道：該通道可進(jìn)一步區(qū)分LC和Bas

。Bas利用“時(shí)間差”與紅細(xì)胞/血小板使用共同的檢測(cè)通道。當(dāng)血液進(jìn)入Bas通道時(shí)（此時(shí)RBC、PLT已檢測(cè)完畢），血液與酸性表面活性劑反應(yīng)，RBC被溶解，除Bas外，其他所有WBC膜均被破壞，胞質(zhì)溢出，僅剩裸核。40圖3-13嗜堿粒細(xì)胞通道試劑反應(yīng)示意圖41激光照射Bas后，產(chǎn)生散射光的變化，形成二維細(xì)胞圖。完整的Bas呈高狹角散射，定位于圖的上半部，裸核位于圖下半部。42（4）電阻抗、射頻與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合檢測(cè)原理這類(lèi)儀器是利用電阻抗、射頻這一成熟細(xì)胞計(jì)數(shù)技術(shù)結(jié)合細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，通過(guò)4個(gè)不同的檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)白細(xì)胞、幼稚細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)和計(jì)數(shù)。①LC、MC和粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)：②EOS細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng):

血液與特殊溶血?jiǎng)┗旌?，留完整的EOS，電阻抗原理計(jì)數(shù)。③Bas細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)：④幼稚細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)：IMI（immaturemyeloidinformation）未成熟細(xì)胞信息43RF:射頻電流DC:直流電細(xì)胞大小的信息細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)信息電阻抗與射頻法白細(xì)胞分類(lèi)檢測(cè)散點(diǎn)圖①淋巴、單核和粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)44幼稚細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)原理45（5）網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)原理RET中嗜堿性物質(zhì)RNA，在活體狀態(tài)下與特殊的熒光染料結(jié)合。熒光強(qiáng)度與RNA含量成正比。用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)

RET大小和RNA含量及Hb的含量。反應(yīng)前反應(yīng)后RET等與試劑反應(yīng)前后的變化熒光(RNA)強(qiáng)度前向散射光46熒光(RNA)強(qiáng)度ReticulocytesPLTRBC高熒光強(qiáng)度低熒光強(qiáng)度中熒光強(qiáng)度WBC前向散射光(細(xì)胞大小)血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度分類(lèi)47將血液充入到含特殊試劑（抗凝劑、熒光染料）的毛細(xì)管內(nèi)專(zhuān)用離心機(jī)上離心，儀器根據(jù)血中各種血細(xì)胞成份的比重不同分層亦不同的原理，血細(xì)胞被吖啶橙染色后，各層細(xì)胞會(huì)有明顯的顏色差異，然后將毛細(xì)管放在特殊的判讀機(jī)上對(duì)不同細(xì)胞層進(jìn)行比對(duì)定量分析。計(jì)算機(jī)綜合信息處理，得到紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、血小板、血紅蛋白等參數(shù)。3.干式離心分層型血細(xì)胞分析儀的細(xì)胞計(jì)數(shù)原理(了解)48(二)血紅蛋白測(cè)定原理采用光電比色原理當(dāng)液體性質(zhì)和厚度固定后，則吸光度與液體物質(zhì)濃度成正比血細(xì)胞懸液中加入溶血?jiǎng)┖?，RBC溶解釋放出Hb，后者與溶血?jiǎng)┲杏嘘P(guān)成分結(jié)合形成Hb衍生物，進(jìn)入Hb測(cè)試系統(tǒng)特定波長(zhǎng)(530～550nm)下進(jìn)行光電比色，吸光度值與所含Hb含量成正比，經(jīng)儀器計(jì)算顯示Hb濃度。儀器Hb校正必須以HiCN值為準(zhǔn)。49血細(xì)胞分析儀基本流程P7050基本結(jié)構(gòu)機(jī)械系統(tǒng)電學(xué)系統(tǒng)血細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)血紅蛋白測(cè)定系統(tǒng)計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)(實(shí)驗(yàn)課)51(一)機(jī)械系統(tǒng)(實(shí)驗(yàn)課)包括機(jī)械裝置（如全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀有：進(jìn)樣針、分血器、稀釋器、混勻器、定量裝置等）和真空泵，以完成樣本的定量吸取、稀釋、傳送、混勻，以及將樣本移入各種參數(shù)的檢測(cè)區(qū)。兼有清洗管道和排除廢液的功能。52(二)電學(xué)系統(tǒng)

包括主電源、電壓元器件、控溫裝置、自動(dòng)真空泵電子控制系統(tǒng)，以及儀器的自動(dòng)監(jiān)控、故障報(bào)警和排除等(實(shí)驗(yàn)課)53國(guó)內(nèi)常用的血細(xì)胞分析儀，使用的檢測(cè)技術(shù)可分為電阻抗檢測(cè)技術(shù)和流式光散射檢測(cè)技術(shù)兩大類(lèi)(三)血細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)-+1.電阻抗檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)器：儀器配兩個(gè)小孔管，一個(gè)小孔管的微孔直徑約為80um，用來(lái)測(cè)定RBC和PLT；另一個(gè)小孔管的微孔直徑約為100um，用來(lái)測(cè)定WBC總數(shù)及分類(lèi)計(jì)數(shù)。54(檢測(cè)器)電阻抗檢測(cè)系統(tǒng)5556重疊損失補(bǔ)償理想情況是細(xì)胞一個(gè)個(gè)的通過(guò)小孔，但是孔的直徑100um，所以在實(shí)際操作過(guò)程中，會(huì)存在兩個(gè)、三個(gè)甚至更多細(xì)胞，一同或前后尾隨進(jìn)入小孔的可能性，這種情況雖然產(chǎn)生脈沖，脈沖幅度比單個(gè)細(xì)胞要高，但它只能產(chǎn)生一個(gè)信號(hào)脈沖，使計(jì)數(shù)有所丟失，這種現(xiàn)象稱(chēng)為重疊損失。(三)血細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)57細(xì)胞A細(xì)胞B檢測(cè)脈沖檢測(cè)脈沖58重疊校正規(guī)律：計(jì)算值在8000以下時(shí)不校正，計(jì)數(shù)值在8000～38000時(shí)，每計(jì)數(shù)1000個(gè)，補(bǔ)充100個(gè)，即在這個(gè)范圍內(nèi)，計(jì)數(shù)電路每計(jì)900個(gè)便向千位進(jìn)1，在38000以上時(shí)，每計(jì)數(shù)1000個(gè)補(bǔ)充200個(gè)，即在38000以上，計(jì)數(shù)器每計(jì)數(shù)800個(gè)向千位進(jìn)1。592.流式光散射檢測(cè)系統(tǒng)流式光散射檢測(cè)技術(shù)：由激光光源、檢測(cè)裝置和檢測(cè)器、放大器、甄別器、閾值調(diào)節(jié)器、檢測(cè)計(jì)數(shù)系統(tǒng)和自動(dòng)補(bǔ)償裝置組成激光光源散射光檢測(cè)器光電倍增管熒光檢測(cè)器鞘流形式的裝置檢測(cè)裝置(三)血細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)60(四)血紅蛋白測(cè)定系統(tǒng)

由光源、透鏡、流動(dòng)比色池、濾光片和光電傳感器等組成。光源燈透鏡狹縫流動(dòng)比色皿半透反射鏡濾光片540nm光電池樣品信號(hào)A濾光片690nm光電池參考信號(hào)B61(五)計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)①計(jì)算機(jī)中的微處理器(MPU)-中央處理單元(CPU)：算術(shù)邏輯部件、寄存器、控制部件、內(nèi)部總線(xiàn)、存儲(chǔ)器、輸入/輸出電路。輸入/輸出電路是CPU和外部設(shè)備之間交換信息的接口。②外部設(shè)備：顯示器、鍵盤(pán)、磁盤(pán)、打印機(jī)等。鍵盤(pán)通過(guò)控制電路與內(nèi)置電腦相連?？刂撇僮鞴δ苕I有：電源開(kāi)關(guān)POWER樣品號(hào)鍵SAMPLE選擇鍵SELECT自動(dòng)/手動(dòng)選擇鍵AUTO/MANUAL重復(fù)鍵REPEAT計(jì)數(shù)鍵COUNT打印鍵PRNT進(jìn)給鍵FEED輸入鍵ENTER清除鍵CLEAR清洗鍵CLEAN62四、血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)與評(píng)價(jià)1.測(cè)試參數(shù)：16-46個(gè)不等2.細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析：直方圖、WBC分類(lèi)、幼稚細(xì)胞提示、RET計(jì)數(shù)分析。無(wú)論多么先進(jìn)的血細(xì)胞分析儀，進(jìn)行細(xì)胞分類(lèi)都只是一種過(guò)篩手段，并不能完全取代人工鏡檢分類(lèi)。（一）儀器的性能指標(biāo)P70結(jié)果異常、圖異常、儀器報(bào)警時(shí)要考慮人工復(fù)檢。633.測(cè)試速度：40-150個(gè)/小時(shí)4.樣本量：20-250ul

采血量夠、無(wú)凝塊、無(wú)棉纖維、無(wú)溶血等；EDTA-K2抗凝，儲(chǔ)存室溫2h內(nèi)；最好用真空采血管。5.工作條件與基本功能見(jiàn)表5-1P71環(huán)境溫度18-25℃。提供中文報(bào)告、異常報(bào)警、有與實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)(LIS)鏈接功能。6.技術(shù)要求。見(jiàn)表5-2、3、4P71（一）儀器的性能指標(biāo)64（二）血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià)1.精密度：

指重復(fù)測(cè)定中各次試驗(yàn)結(jié)果彼此接近的程度。用高、中、低值新鮮全血各10份進(jìn)行評(píng)價(jià)。用標(biāo)準(zhǔn)差(SD)或變異數(shù)(CV)表示。2.攜帶污染率：

指含量高的樣本對(duì)含量低的樣本所產(chǎn)生的影響。取高低2個(gè)樣品標(biāo)本，先測(cè)定高值樣品3次(H1,H2,H3)，隨時(shí)測(cè)定低值樣品3次(L1,L2,L3)。攜帶污染率=（L1-L3)/（H3-L3）×100％。P72653.總重復(fù)性：包括了重復(fù)測(cè)定的隨機(jī)誤差和攜帶污染雙重變異因素。隨機(jī)取標(biāo)本20份，常規(guī)分別測(cè)定即刻的RBC，WBC，Hb及放置2h，4h后的數(shù)值。分別測(cè)定RBC、WBC、Hb的重復(fù)試驗(yàn)變異數(shù)(CV)。P72（二）血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià)4.線(xiàn)性范圍：

是測(cè)試物濃度的變化與試驗(yàn)結(jié)果成線(xiàn)性關(guān)系的一段。越寬越好。至少應(yīng)包括正常范圍及常見(jiàn)的病理范圍。665.白細(xì)胞分類(lèi)的評(píng)價(jià)：①重復(fù)性：多次測(cè)定同一份血液能否得到非常近似的結(jié)果。②準(zhǔn)確性：與顯微鏡下分類(lèi)結(jié)果的相關(guān)程度。

③對(duì)異常細(xì)胞的靈敏度：觀察外周血存在異常細(xì)胞，儀器是否能檢出。P72（二）血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià)67（三）血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)

出廠(chǎng)前已經(jīng)過(guò)廠(chǎng)方技術(shù)鑒定合格，但由于運(yùn)輸振動(dòng)或因故障維修后或長(zhǎng)時(shí)間停用后再啟用等原因，以及正常使用半年以上或認(rèn)為有必要時(shí)，都必須對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)及性能測(cè)試，這對(duì)了解儀器性能，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，確保檢驗(yàn)質(zhì)量有重要意義。

一般要求專(zhuān)人保養(yǎng)，按說(shuō)明書(shū)要求用廠(chǎng)家的配套校準(zhǔn)物進(jìn)行校準(zhǔn)。68五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見(jiàn)故障排除（一）儀器的維護(hù)血細(xì)胞分析儀屬高精密儀器，應(yīng)有專(zhuān)人負(fù)責(zé)，按儀器廠(chǎng)家的的要求進(jìn)行日保養(yǎng)、周保養(yǎng)、月保養(yǎng)及年終的大保養(yǎng)，并建立儀器保養(yǎng)和維修檔案。同時(shí)要做好：檢測(cè)器、液路和機(jī)械傳動(dòng)部分的維護(hù)。(實(shí)驗(yàn)課)691.檢測(cè)器的維護(hù)①采血順利；②防止纖維絲堵孔③計(jì)數(shù)期間，及時(shí)按“反沖”鍵，沖掉沉積變性的蛋白質(zhì)。檢測(cè)器④關(guān)機(jī)前對(duì)檢測(cè)器的微孔進(jìn)行清理沖洗，并把其浸泡在清洗劑中。⑤定期卸下檢測(cè)器，用5%次氯酸鈉浸泡清洗。702.液路的維護(hù)五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見(jiàn)故障排除使用含蛋白酶的清潔液浸泡一夜，再用稀釋液反復(fù)沖洗干凈管道后使用。儀器長(zhǎng)期不用時(shí)，液路洗后，按數(shù)次計(jì)數(shù)鍵，充滿(mǎn)去離子水。稀釋液導(dǎo)管、清洗液導(dǎo)管、溶血?jiǎng)?dǎo)管等，防止細(xì)微雜質(zhì)引起的計(jì)數(shù)誤差。713.機(jī)械傳動(dòng)部位的維護(hù)五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見(jiàn)故障排除清理灰塵和污物，加潤(rùn)滑油，防止機(jī)械疲勞和磨損。72（二）常見(jiàn)故障排除有自我診斷功能，有故障發(fā)生時(shí)，內(nèi)置電腦的錯(cuò)誤檢查功能顯示出“錯(cuò)誤信息”，并伴有報(bào)警聲。五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見(jiàn)故障排除731.開(kāi)機(jī)時(shí)的常見(jiàn)故障。

①開(kāi)機(jī)指示燈及顯示屏不亮→檢查電路。②“RBC或WBC吸液錯(cuò)誤”→提供稀釋液、正確連接進(jìn)液管。2.測(cè)試過(guò)程中常見(jiàn)的錯(cuò)誤信息

①“堵孔”：檢測(cè)器的微孔堵塞是影響檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性最常見(jiàn)的原因。常見(jiàn)原因：儀器長(zhǎng)時(shí)間不用、棉纖維、抗凝不充分、蛋白沉積、灰塵等。主要處理方法：按CLEAN鍵清洗。②其他：“氣泡”、“流動(dòng)比色池”、“噪聲”