姜黃素的提取

姜黃中姜黃素的提取

－－索氏提取法

一、實驗目的

1.掌握用索氏提取法提取姜黃浸膏的原理及操作。2.熟悉重量分析的基本步驟。關鍵控制點：1.正確的選擇溶劑；2.抽提管中樣品的裝樣是否保持虹吸正常；3.抽提的次數(shù)與間隔時間會影響提取效果；難點：1.定量檢測時原料及成品的干燥稱量；2.溶劑的正確回收；二、實驗原理姜黃素能溶于脂溶性有機溶劑。本實驗利用能溶于脂溶性溶劑這一特性，用脂溶性溶劑將姜黃素提取出來，借蒸發(fā)除去溶劑后稱量。整個提取過程均在索氏提取器中進行，通常使用的脂溶性溶劑為乙醚，或沸點為30℃～60℃的石油醚、二氯甲烷、乙醇等。用此法提取的脂溶性物質(zhì)除姜黃素外，還有脂肪、游離脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等，故稱為“浸膏”。同時，樣品中結合狀態(tài)的脂類（主要是脂蛋白）不能直接提取出來，所以該法又稱為游離脂類定量測定法。

索氏抽提法測定脂肪最大的不足是耗時過長，如能將樣品先回流1～2次，然后浸泡在溶劑中過夜；次日再繼續(xù)抽提，則可明顯提高提取率?；蚋挠妹藁ù鏋V紙。用棉花墊底后直接裝樣虹吸。三、實驗器材

1.電子天平。操作指南：調(diào)整水平度，插上電源，啟動“ON/OFF”開關，按一下回零擋“TARE”，使屏幕上顯示0.0000。推開玻璃門，輕輕將樣品置于稱量盤上，關上玻璃門，待屏幕上顯示的數(shù)字穩(wěn)定后記錄下來，即為樣品的重量（g）。注意，每次稱量前都必須按一下回零擋“TARE”，使屏幕上顯示0.0000。稱量室內(nèi)尤其是稱量盤上必須保持清潔、干燥；若有藥品撒落，立即用軟毛刷清理干凈。

2.HH-2型數(shù)顯恒溫水浴鍋

操作指南：調(diào)整水平度，插上電源，啟動“3.101C-3型電熱鼓風干燥箱操作指南：插上電源插頭，按下綠按鈕（電源開關）和黃按鈕（鼓風開關），將“設定/測量”按鈕置于設定擋，調(diào)節(jié)“溫度設定”旋鈕，使顯示器中的數(shù)字為所需的溫度，再將“設定/測量”按鈕置于測量擋，此時顯示器中的數(shù)字表示烘箱內(nèi)的實際溫度。將加熱旋鈕（一共有3個）打到適當?shù)膿跷唬嫦溟_始加熱。此時綠燈亮，當溫度達到所設定值時，紅燈亮，烘箱停止加熱。以后烘箱會一直通過不斷的加熱-停止過程來保持恒溫，紅綠燈也會相應地交替閃亮。請注意，本實驗由于設定溫度為120℃，故在取出被烘干物品時，請戴上手套。4.索氏提取儀由冷凝管、抽提管和平底燒瓶三個部件組成，通過標準磨口相對接。安裝裝置：用鐵架臺、２只十字夾、２只燒瓶夾、２根乳膠管和１套索氏提取儀來安裝裝置。注意按照由下而上的順序來安裝。固定點分別是平底燒瓶的頸部和提取管的頸部，索氏提取儀的高度以平底燒瓶的瓶頸略高于恒溫水浴鍋的液面為宜。注意：用燒瓶夾夾玻璃儀器時，要先用手找好感覺，不能太緊（否則會夾破）也不能太松（否則會打滑而導致索氏提取儀的標準磨口接口漏氣）。

5.其它器材：不銹鋼鑷子、藥勺、濾紙、鐵架臺、十字夾、燒瓶夾、手套、乳膠管。四、實驗試劑稱取10—20克樣品。將樣品在80℃～100℃電熱鼓風干燥箱內(nèi)烘去水分，一般烘4h，烘干時要避免過熱。樣品顆粒不宜太大，一般要在研缽中研碎樣品。樣品若是液體，應將一定體積的樣品滴在濾紙上，在60℃～80℃電熱鼓風干燥箱內(nèi)烘干后，再進行實驗。乙醇五、實驗操作準備工作：將恒溫水浴鍋的水溫事先加熱（80℃）。務必保證提取管和燒瓶內(nèi)干燥、潔凈；若否，將其洗凈并置于干燥箱內(nèi)120℃烘干。折濾紙斗：取一張?11cm的濾紙，折成筒狀，再將其一端折起來封死，便做成了濾紙斗。稱樣：取干燥的姜黃粉作為實驗樣品。將濾紙斗在電子天平上稱重，然后用藥勺取樣品裝入濾紙斗中，把濾紙斗的開口處折起來封死；防止樣品泄出濾紙斗。調(diào)整濾紙斗的高度，使其放在抽提管中時略低于虹吸管的上彎頭處。將裝好樣品的濾紙斗放在電子天平上稱重，兩質(zhì)量之差即為樣品的質(zhì)量。提?。簩⑺魇咸崛x從下至上安裝。首先安裝好燒瓶，并調(diào)整其高度，使其剛好能浸入水浴鍋中的水中。將裝置從水浴鍋的水中取出，繼續(xù)安裝提取管，把裝有樣品的濾紙斗放入提取管內(nèi)，向提取管中緩緩倒入乙醇直至液面達到虹吸管上彎頭部，正好虹吸一次；再向提取管中倒入乙醇，使其液面達到第一次液面的一半。用乳膠管將冷凝管與自來水管相連，將冷凝管安裝到提取管上，檢查一下，確保所有接口均對接完好（不漏氣，不打滑）。輕輕打開自來水（冷凝用），將索氏提取儀整個裝置放入恒溫水浴鍋中加熱提取（水溫90℃左右。提取時間2～4h，約虹吸20次以上，記錄每次虹吸所需的時間和虹吸次數(shù)。附注：若要將樣品的姜黃素提取完全，提取時間至少為12h以上。由于實驗時間的限制，我們的提取率只能達到90％左右。

回收乙醇：提取2h后，當乙醇在提取管中的液面即將達到虹吸管的上彎頭處時，從水浴鍋中取出索氏提取儀裝置，讓乙醇虹吸而流入瓶中，取下回流管，取出濾紙桶及姜黃粉，繼續(xù)放入恒溫水浴鍋中加熱回收乙醇（取下平底燒瓶，回收提取管中的乙醇）直至冷凝管下端無乙醇滴下，表明平底燒瓶中的乙醇已經(jīng)蒸干。注意：必須蒸干后才能放入干燥箱烘干，否則會引起火災。稱量粗浸膏質(zhì)量：將平底燒瓶放入120℃的電熱鼓風干燥箱中烘15min，取出冷卻后稱重（須戴手套，以免燙傷）。添加適量乙醇溶解后加入適量硅膠粉，將燒瓶放入熱水中讓乙醇蒸發(fā)，到處干粉。再將平底燒瓶用洗滌劑洗凈，于120℃的電熱鼓風干燥箱中烘干（約15min），取出冷卻后稱重，兩者的質(zhì)量之差就是粗浸膏的質(zhì)量。

清潔

從提取管中取出濾紙斗，清洗提取管，整理好桌面上的儀器和試劑，并注意清潔自己的操作臺，請老師驗收。

計算

樣品粗浸膏的含量（%）=（粗浸膏的質(zhì)量/樣品的質(zhì)量）*100%

索氏提取儀示意圖記錄與計算匯總虹吸次數(shù)12345678910…虹吸時間濾紙斗質(zhì)量（g）

濾紙斗+樣品質(zhì)量（g）

樣品質(zhì)量（g）

燒瓶+粗浸膏質(zhì)量（g）

燒瓶質(zhì)量（g）

粗浸膏質(zhì)量（g）

虹吸時間（min）

提取次數(shù)樣品中粗浸膏的含量（%）

計算公式X=[(m1-m2)/m]×100式中：X----樣品中粗脂肪的質(zhì)量分數(shù),%;m----樣品的質(zhì)量,g;m0---脂肪燒瓶的質(zhì)量,g;m1---脂肪和脂肪燒瓶的質(zhì)量,g.樣品的質(zhì)量m/g脂肪燒瓶的質(zhì)量m0/g脂肪和脂肪燒瓶的質(zhì)量m1/g第一次第二次第三次恒重值思考題1.簡述索氏抽提器的提取原理及應用范圍？2.潮濕的樣品可否采用乙醚直接提??？為什么？答：不可以，乙醚會溶解水，把水帶入脂層中，會影響乙醚的滲透與提取效果。3.使用乙醚作脂肪提取溶劑時，應注意的事項有哪些？為什么？答：乙醚是易燃，易爆物質(zhì)，應注意通風并且不能有火源。乙醚若放置時間過長，會產(chǎn)生過氧化物。過氧化物不穩(wěn)定，當蒸餾或干燥時會發(fā)生爆炸，故使用前應嚴格檢查，并除去過氧化物。檢查方法：取5mL乙醚于試管中，加KI(100g/L)溶液1mL，充分振搖1min。靜置分層。若有過氧化物則放出游離碘，水層是黃色（或加4滴5g/L淀粉指示劑顯藍色），則該乙醚需處理后使用。去除過氧化物的方法：將乙醚倒入蒸餾瓶中加一段無銹鐵絲或鋁絲，收集重蒸餾乙醚。4.影響萃取的萃取效率的因素？答：物質(zhì)的性質(zhì)、物料與溶劑的比例、時間、溫度、濃度、萃取劑與被萃取物的溶解度差值等因素有關。5.為什么包裝試樣的濾紙的上部不能高于索氏提取器支管的頂部？6.索氏法測脂肪的注意事項？答：實樣品應干燥后研細，裝樣品的濾紙筒一定要緊密，不能往外漏樣品；實驗過程中不能接觸明火；樣品含水量較低時可選