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醫(yī)學實驗動物學第二章實驗動物質量控制目錄微生物控制標準化2遺傳控制標準化1實驗動物環(huán)境和設施3營養(yǎng)控制標準化4第二節(jié)微生物控制標準化東北農業(yè)大學28名師生感染布魯氏菌病2010年12月19日下午,“羊活體解剖學實驗”;2011年1月,王永杰連續(xù)高燒很多天了。由于是冬天,感冒發(fā)燒也屬正常,所以他沒有警覺。經過吃藥、打針等治療后,他終于有些好轉,卻總覺得不是那么舒服。2011年3月開學,發(fā)現(xiàn)癥狀一樣的同學有好幾個?!伴_學時,一位姓王的同學被其母親背到了學校,他因為關節(jié)疼痛已無法行走?!弊罱K查出,共5個班級28人被感染布魯氏菌病,其中包括27名學生、1名老師?!安剪斒暇∵€屬于《職業(yè)病范圍和職業(yè)病患者處理辦法》規(guī)定的乙類職業(yè)病。我們查過法律法規(guī),許多行業(yè)對布魯氏菌病患者都有著嚴格的限制。原因:1、使用未經檢疫的動物;

2、未切實按照標準的實驗規(guī)范執(zhí)行。第二節(jié)微生物控制標準化引起實驗動物的疾病和死亡干擾實驗結果如:仙臺病毒感染B、T淋巴細胞對抗原反應減弱,增加干擾素產量,減少血清第三補體因子(C3)水平;小鼠肝炎病毒感染網狀內皮系統(tǒng)的吞噬細胞活性、淋巴細胞的細胞毒活性被抑制,誘導血清天冬氨酸轉氨酶AST、丙氨酸轉氨酶ALT等肝酶。人獸共患病影響生物制品的質量進行微生物控制的原因第二節(jié)微生物控制標準化實驗動物生物材料寵物工作人員材料和設備污染源和傳播途徑第二節(jié)微生物控制標準化微生物學分類——按照國標GB14922.2-2011《實驗動物微生物學等級及檢測》普通級動物清潔級動物無特定病原體級動物無菌級動物第二節(jié)微生物控制標準化微生物學分類第二節(jié)微生物控制標準化普通級動物conventionalanimal,CV定義:不攜帶規(guī)定的人獸共患疾病原和動物烈性傳染病病原的實驗動物。

常用普通級動物:豚鼠、地鼠、兔、犬、豬、猴第二節(jié)微生物控制標準化布魯桿菌第二節(jié)微生物控制標準化清潔級動物cleananimal,CL定義:除普通級動物應排除的病原外,不攜帶對動物危害大和對科學研究干擾大的病原的實驗動物。

根據(jù)我國國情自行設定的等級動物。必須來源于SPF動物或無菌動物,飼養(yǎng)在半屏障系統(tǒng)中。一般針對小動物而言,如大鼠、小鼠、地鼠、豚鼠、兔等。第二節(jié)微生物控制標準化無特定病原體級動物,SPFspecificpathogenfreeanimal定義:除清潔級動物應排除的病原外,不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學實驗干擾大的病原的實驗動物。標準的實驗動物必須來源無菌動物或悉生動物常用SPF級動物:大鼠、小鼠第二節(jié)微生物控制標準化無菌級動物germfreeanimal,GF定義:無可檢出的一切生命體的實驗動物。同屬四級動物的還有:悉生動物,將無菌動物體內植入已知微生物的實驗動物;根據(jù)植入的菌種數(shù),可將其分為單菌、雙菌、三菌和多菌動物。通過子宮切術術、剖腹產術、胚胎移植等方式獲得。但偶爾會發(fā)現(xiàn)有微生物存在,為經過胎盤傳播或通過其他途徑(垂直感染)在妊娠中傳給子代。原籍菌群丟失,表現(xiàn)出多樣的形態(tài)學和生理學“異?!?。如盲腸明顯增大,腸壁更薄弱。第二節(jié)微生物控制標準化實驗動物微生物等級與飼養(yǎng)設施要求隔離器屏障系統(tǒng)第二節(jié)微生物控制標準化潔凈度(cleanliness):潔凈環(huán)境內單位體積空氣中含大于或等于某一粒徑的懸浮粒子的允許統(tǒng)計數(shù)空氣潔凈度等級(N)大于或等于表中粒徑的最大濃度限值(pc/m3)0.5μm1μm5μm12433584(十級)352835(百級)3520832296(千級)3520083202937(萬級)3520008320029308(十萬級)3520000832000293009(百萬級)352000008320000293000國家標準GB50073-2001第二節(jié)微生物控制標準化微生物質量監(jiān)測(一)監(jiān)測方法:病毒學:細菌學:真菌學:寄生蟲學:第二節(jié)微生物控制標準化病毒學常用監(jiān)測方法:血清學檢查和病原菌檢查血清學檢查病原菌檢查適用于各級各類實驗動物的經常性檢查和疫情普查適用于動物群中有疾病流行,需要檢出病毒或確診病毒存在第二節(jié)微生物控制標準化細菌學:病原菌的分離與培養(yǎng)

部分病原菌,已有血清學檢查的報道,但建議結合分離培養(yǎng)結果最后做出診斷,如鼠傷寒沙門氏菌等;有時需要結合病理檢查結果最后做出診斷,如泰澤氏菌第二節(jié)微生物控制標準化真菌學:分離培養(yǎng)法結合菌落特點和鏡下染色檢查可進行種屬鑒定,有時還需借助于生化反應結果和免疫學方法進行,最終做出診斷。第二節(jié)微生物控制標準化寄生蟲學:體外寄生蟲(節(jié)肢動物):

肉眼觀察、透明膠紙腸道寄生蟲:采集動物糞便,肉眼觀察血液寄生蟲采血,鏡檢組織內寄生蟲

感染部位組織壓片、切片檢查第二節(jié)微生物控制標準化微生物質量監(jiān)測(二)接種與治療:通常接種限于大動物,如犬、猴等。治療可能會干擾實驗結果。

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