DNA粗提取與鑒定 【知識(shí)建構(gòu)+點(diǎn)播拓展】 高考生物一輪復(fù)習(xí) (新高考專用)_第1頁(yè)
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備戰(zhàn)2023高考微專題31DNA粗提取與鑒定(2022山東高考T13)關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn),下列說法錯(cuò)誤的是()A.過濾液沉淀過程在4℃冰箱中進(jìn)行是為了防止DNA降解

B.離心研磨液是為了加速DNA的沉淀

C.在一定溫度下,DNA遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色

D.粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)【解答】解:A、過濾液沉淀過程在4℃冰箱中進(jìn)行可以使酶的活性降低,可以防止DNA降解,A正確;B、離心研磨液是為了加速細(xì)胞膜、細(xì)胞器、一些較大雜質(zhì)等的沉淀,B錯(cuò)誤;C、在一定溫度下,DNA遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色,C正確;D、粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì),D正確。B【高考再現(xiàn)】(1)DNA的溶解性①DNA在NaCl溶液中溶解性DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同。利用這一特點(diǎn),選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離的目的。DNA在NaCl溶液中的溶解度曲線②DNA在酒精中的溶解性DNA不溶于酒精(特別是95%的冷酒精),但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。0.14mol/LNaCl濃度01.提取原理(2)DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性

能水解蛋白質(zhì),但對(duì)DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受___________的高溫,而DNA在______以上才會(huì)變性。洗滌劑能瓦解_______,但對(duì)DNA沒有影響。蛋白酶60~80℃80℃細(xì)胞膜4.DNA鑒定的方法在__________的條件下,DNA遇二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)_______。注意:二苯胺試需要_____________。沸水浴藍(lán)色現(xiàn)配現(xiàn)用能用甲基綠嗎?1、實(shí)驗(yàn)材料選擇豬肝菜花(花椰菜)香蕉雞血哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞獼猴桃洋蔥豌豆菠菜在培養(yǎng)基中培養(yǎng)的大腸桿菌選擇原則:原則上,凡是含有DNA的生物材料都可以考慮,但是,選用DNA含量相對(duì)較高的生物組織,成功的可能性更大。××38條染色體78條染色體58條染色體16條染色體14條染色體12條染色體33條染色體18條染色體02.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)案例.雞血細(xì)胞的DNA粗提取與鑒定①制備雞血細(xì)胞液思考:加入檸檬酸鈉的作用是什么?防止血液凝固②破碎細(xì)胞,釋放核物質(zhì)思考:A是什么試劑,作用是什么?A試劑蒸餾水,使細(xì)胞吸水脹破,釋放核物質(zhì)。③溶解核內(nèi)DNA,析出DNA思考:B和C是什么試劑,作用是什么?B是2mol/L的NaCl溶液,溶解核物質(zhì)中的DNA。C是蒸餾水,降低NaCl的濃度,從而降低DNA的溶解度,使DNA析出。C試劑B試劑D試劑是什么,其作用是什么?④再次溶解并析出DNAD試劑95%的冷酒精,DNA不溶于酒精,使DNA析出,同時(shí)除去能溶于酒精中雜質(zhì)。析出DNA⑤DNA的鑒定沸水?、僭恝谌绾卧O(shè)置對(duì)照?對(duì)照組:一定量的2mol/L的NaCl溶液實(shí)驗(yàn)組:等量的2mol/L的NaCl+DNA溶液③預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)照組無顏色變化,實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)藍(lán)色。DNA+二苯胺藍(lán)色雞血細(xì)胞DNA粗提取的過程總結(jié)雞血細(xì)胞DNA粗提取的過程總結(jié)溶解到2mol/L的NaCl溶液中,二苯胺沸水浴檢測(cè)為什么反復(fù)地溶解與析出DNA,能夠去除雜質(zhì)?(去除濾液中的雜質(zhì))(進(jìn)一步提純)

用高濃度的鹽溶液溶解DNA,能除去不能溶解在其中的雜質(zhì);用低濃度的鹽溶液和酒精使DNA析出,能除去溶解在其中的雜質(zhì)。因此,通過反復(fù)溶解于析出DNA,就能夠除去DNA中的雜質(zhì)。①制備雞血細(xì)胞液②破碎細(xì)胞,釋放核物質(zhì)③溶解核內(nèi)DNA,析出DNA④再次溶解并析出DNA⑤DNA的鑒定03.總結(jié)分析(1)兩次加入蒸餾水次數(shù)目的第一次使雞血細(xì)胞吸水漲破第二次稀釋NaCl溶液,使DNA逐漸析出03.總結(jié)分析(去除濾液中的雜質(zhì))(進(jìn)一步提純)①制備雞血細(xì)胞液②破碎細(xì)胞,釋放核物質(zhì)③溶解核內(nèi)DNA,析出DNA④再次溶解并析出DNA⑤DNA的鑒定此實(shí)驗(yàn)過程中有幾次使用蒸餾水?幾次析出DNA?幾次用到NaCl溶液??jī)纱问褂谜麴s水兩次析出DNA三次用到NaCl溶液03.總結(jié)分析(2)兩次析出DNA次數(shù)方法第一次加蒸餾水,降低NaCl的濃度,從而降低DNA的溶解度,使DNA析出。第二次加95%的冷酒精,DNA不溶于酒精,使DNA析出。03.總結(jié)分析(3)三次使用NaCI溶液次數(shù)目的第一次溶解DNA,析出蛋白質(zhì)等雜質(zhì)第二次使DNA再溶解,為了獲得含雜質(zhì)較少的DNA第三次溶解DNA,以便DNA與二苯胺反應(yīng),用于DNA的鑒定。03.總結(jié)分析A

下列利用菜花進(jìn)行“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是()A.采用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA的方法可去除部分雜質(zhì)B.在切碎的菜花中加入一定量的洗滌劑和食鹽,在充分研磨、過濾后棄去濾液C.用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L,用單層濾紙過濾取析出物D.將白色絲狀物溶解在NaCl溶液中,加入二苯胺試劑后振蕩,觀察顏色變化【思維提升練習(xí)】B

某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行”DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)”,操作錯(cuò)誤的是()A.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNAB.加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨C

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