地貧篩查技術規(guī)范

附件1：地中海貧血產(chǎn)前診斷技術規(guī)范地中海貧血(以下簡稱地貧)是一種由珠蛋白基因缺失或突變導致肽鏈合成障礙而引起的溶血性貧血，是我省發(fā)病率最高的人類單基因遺傳病之一。為規(guī)范我省地貧產(chǎn)前診斷技術的應用，特制定本技術規(guī)范。一、地貧產(chǎn)前篩查（一）基本要求1開展地貧產(chǎn)前篩查技術服務的醫(yī)療保健機構（以下簡稱產(chǎn)前篩查機構）合《廣東省開展產(chǎn)前篩查技術服務的基本條件》；2、地貧產(chǎn)前篩查機構應與具有產(chǎn)前診斷技術服務資質(zhì)的醫(yī)療保健機構（以下簡稱產(chǎn)前診斷機構）建立工作聯(lián)系，并納入產(chǎn)前診斷質(zhì)量控制體系。產(chǎn)前診斷機構應對產(chǎn)前篩查機構進行技術指導和質(zhì)量管理。（二）技術規(guī)范。1、地貧產(chǎn)前初篩。在地貧高發(fā)地區(qū)，凡未做過地貧篩查的孕婦應建議其進行地貧篩查。地貧的初步篩查應推廣使用血液紅細胞指數(shù)(MCV,MCH)等適宜技術。對紅細胞指數(shù)下降的，應書面建議進一步做地貧產(chǎn)前篩查，并按規(guī)定轉(zhuǎn)診。不具備紅細胞指數(shù)檢查條件的醫(yī)療保健機構，應書面建議當事人到有條件的醫(yī)療保健機構進行該項目檢查，或采用其他方法進行篩查。2、地貧產(chǎn)前篩查。對產(chǎn)前檢查和血液紅細胞指數(shù)初篩發(fā)現(xiàn)的地貧可疑孕婦，應采用血紅蛋白（Hb）電泳技術或/和高效液相色譜(HPLC)技術作進一步篩查，對檢測結(jié)果為HbA2降低或臨界值的，則再作血清鐵測定。Hb提供地貧相關的產(chǎn)前咨詢及必要的轉(zhuǎn)診服務。3、產(chǎn)前篩查報告。產(chǎn)前篩查報告包括實驗室檢測結(jié)果和遺傳咨詢指導意見兩部分。實驗室檢測結(jié)果應包括產(chǎn)前篩查所選用的試驗名稱、參考范圍、測定結(jié)果。遺傳咨詢指導應包括是否存在α-或β-地貧的可能性及相應的進一步檢查建議等。實驗室檢測結(jié)果應由經(jīng)培訓的專業(yè)技術人員或?qū)嶒炇抑鞴軓秃撕?，才能簽發(fā)。產(chǎn)前篩查報告應當由副高以上職稱的產(chǎn)前篩查技術培訓合格的執(zhí)業(yè)醫(yī)師復核后，才能簽發(fā)。產(chǎn)前篩查報告由2名以上經(jīng)培訓的執(zhí)業(yè)醫(yī)師簽發(fā)。4、產(chǎn)前篩查后高風險對象的處理原則。指導；是否實施產(chǎn)前診斷，應嚴格遵循知情選擇原則。處理。對產(chǎn)前篩查結(jié)果為高風險的孕婦應進行隨訪。5、產(chǎn)前篩查質(zhì)量控制體系。合《廣東省開展產(chǎn)前篩查技術服務的基本條件》；部門準許的臨床生化檢驗用正式產(chǎn)品(含國產(chǎn)和進口試劑產(chǎn)品)。購置試劑要記錄如下信息：購買日期，批號，數(shù)量，有效期，驗收人，保存條件，存放地點等;質(zhì)量控制:考評制度。并接受與其建立工作聯(lián)系的產(chǎn)前診斷機構的技術指導和質(zhì)量控制。二、地貧產(chǎn)前診斷（一）基本要求。1術服務的基本條件》;21人員應接受過規(guī)范的技術培訓并取得技術合格證。（二）技術規(guī)范。1、主要技術操作及其技術規(guī)范。實施單位可根據(jù)自身條件采取以下相應技術：DNADNA從胎兒的羊水細胞、血細胞或絨毛膜組織，或從胎兒雙親和先證者的外周血（2-4ml）DNADNA樣品需嚴格記錄，保證測試用量和備份保存。α-α-地貧（主要有--SEA、-α3.7和-α4.2三種類型）PCRα-地貧（HbConstantSpring[α2，CD142TAA→CAA],HbQuongSze[α2,CD125CTG→CCG]等六種類型）的分子診斷，推薦采用反向點雜交(RDB)技術。在進行胎兒水腫綜合征高風險胎兒的產(chǎn)前診斷時,有必要，可采用其它分子診斷技術進一步確診。此外，還可采用以下二種非分子診斷的其他技術：（A）HbHbBart’sHbH含量輔助診斷；（B）用胎兒超聲診斷測定心胸比值等跟蹤輔助診斷。β-β-地貧的分子診斷,RDB技β-地貧突變：CDs41-42(-TCTT)，IVS-2-654(C>T)，TATAbox-28(A>G)，CD17(A>T)，CDs71-72(+A)，CD26(G>A)，IVS-1-5(G>C),TATAbox-29(A>G),CD43(G>T)和CDs27-28(+C)。對于有條件的實驗室，也可采用其它具有嚴格質(zhì)量控制體系的分子診斷技術進行β-地貧的分子診斷。α-地貧基因（-α3.7和-α4.2）也α-地貧類型，-α3.7和-α4.2這二種靜止型地貧基因與東南亞型缺失—SEAHbH病。HbH病高風險家庭的遺傳咨詢和診斷是不可忽視。由于在成人血樣中缺乏可靠的針對-α3.7和-α4.2PCRDNA分子診斷技術進行產(chǎn)前篩查。其他類型血紅蛋白病的診斷:目前已知的本地區(qū)其他類型血紅蛋白病主要βd-HPFHβ-珠蛋白基因大片段缺失所PCRHb（HbQHbE）α-β-DNA序列分析技術檢測樣品的基α-β-地貧的新突變發(fā)現(xiàn)時，可根據(jù)技術研究進展增補適宜的診斷技術。2、地貧產(chǎn)前診斷指征和時機。(1)地貧產(chǎn)前診斷指征：①曾生育過重型或中間型α或β地貧患兒的夫婦；ααβα地貧攜帶者；③夫婦雙方均為β地貧攜帶者。(2)產(chǎn)前診斷的時機:248周～11周進16周～2118周24周進行。3、醫(yī)學診斷報告。驗室檢測結(jié)果應包括所采用的技術、檢測的范圍、α-β-(βd-HPFH)突變基因型。遺傳咨詢指導應包括對診斷結(jié)果的醫(yī)學指導意見，以及對結(jié)果不確定性的解釋等。實驗室檢測結(jié)果由實驗室操作者填寫并簽名、經(jīng)實驗室主管復核后才能發(fā)出。產(chǎn)前診斷報告由2名以上經(jīng)資格認定的執(zhí)業(yè)醫(yī)師簽發(fā)。4、地貧遺傳咨詢。地貧產(chǎn)前診斷須在當事人接受遺傳咨詢和知情同意的情況下實施。對胎兒確診為重型α-或β-地貧的，應由遺傳咨詢醫(yī)師向當事人提供遺傳咨詢，在當事人知情同意和自主選擇的情況下，可以終止妊?。5、地貧產(chǎn)前診斷隨訪。對進行了產(chǎn)前診斷的孕婦應進行隨訪。在條件許可時，應盡可能采集到胎兒血樣或組織,用于進一步驗證產(chǎn)前診斷的結(jié)果。6、質(zhì)量控制體系。貧分子診斷實驗室必須取得相應的從業(yè)技術資質(zhì)；許的臨床生化檢驗用正式產(chǎn)品(含國產(chǎn)和進口試劑產(chǎn)品)。購置試劑要記錄如下信息：購買日期，批號，數(shù)量，有效期，驗收人，保存條件，存放地點信息：購買日期，批號，數(shù)量，有效期，驗收人，保存條件，存放地點等；(3)質(zhì)量控制體系及其制度：分子診斷的操作須在符合規(guī)定的分子診斷實驗PCR擴增試驗的各項防污染規(guī)定，必要時，需采用基于微衛(wèi)星分析的分子診