臨床輸血前免疫血液學(xué)檢查

10臨床輸血前免疫血液學(xué)檢查一、輸血前檢查的目的和要求存活，無(wú)不良反響，從而到達(dá)安全、有效輸血的目的。二、輸血前檢查的內(nèi)容輸血前檢查的內(nèi)容包括如下幾個(gè)方面：患者的病史和標(biāo)本等的檢查、核對(duì)及處理。ABO和Rh血型鑒定。不規(guī)章抗體的篩選和鑒定。穿插協(xié)作試驗(yàn)。血小板輸注前的抗體檢查和協(xié)作試驗(yàn)。穿插配血結(jié)果的報(bào)告和發(fā)血。(一)受血者的病史和標(biāo)本等檢查、核對(duì)及處理病史資料和信息問題。標(biāo)本的要求要求不超過3患者使用右旋糖酐等治療，應(yīng)留意將紅細(xì)胞作洗滌。(二)受血者和供血者ABO和Rh定型ABO定型 僅在室溫進(jìn)展。定型方法：正、反定型的試管離心方法目前仍被認(rèn)為是最可信任的ABO定型方法。1)定型試劑：有些ABO血型診斷試劑是以人的血清會(huì)聚而制成的，但必需具備以下條件：第一，高效價(jià)(1：128)的IgM抗A或抗B。其次，具較好的親和性并不含冷凝集素。第毒滅活。另外一些ABO定型試劑是由來(lái)自培育細(xì)胞株的單克隆抗體所制成。AIA1抗AB抗血清，以避開錯(cuò)誤地把弱反響性A或B型紅細(xì)胞分類為O型。一般抗AB試劑對(duì)Ax型紅細(xì)胞可增加凝集反響的強(qiáng)度。ABO定型試驗(yàn)中的常見問題：造成這種正反定型不全都的緣由主要有：技術(shù)和治理錯(cuò)誤：這是ABO定型中產(chǎn)生特別結(jié)果的主要緣由，包括：標(biāo)本或試劑搞錯(cuò)；劑；結(jié)果記錄或推斷錯(cuò)誤；細(xì)胞與血清間比例不適當(dāng)。血清特別：血清蛋白引起緡錢狀形成，影響反定型結(jié)果。紅細(xì)胞致敏：受免疫球蛋白致敏的紅細(xì)胞，在含高蛋白介質(zhì)的試劑中，可發(fā)生凝集。ABO亞型的檢查中，A、B抗原可能為弱抗原，難以檢出。近期輸血：試驗(yàn)前曾輸入過其它ABO血型不全都的血液，使血液標(biāo)本成為混合血型的紅細(xì)胞懸液，定型時(shí)顯示“混合外觀凝集”現(xiàn)象。現(xiàn)象。ABO血型系統(tǒng)的抗原性可受到抑制，檢出困難。紅細(xì)胞多凝集現(xiàn)象：紅細(xì)胞因遺傳或獲得性的外表特別，發(fā)生多凝集現(xiàn)象。獲得性B：由于革蘭陰性桿菌的作用，紅細(xì)胞可獲得“類B”的活性。血型特異性物質(zhì)過高：一些卵巢囊腫病例，血型物質(zhì)的濃度很高，可中和抗A和抗B定型試劑，要得到正確的正定型結(jié)果，必需洗滌紅細(xì)胞屢次。清中含有所輸供體供給的抗A或抗B抗體，造成反定型錯(cuò)誤。導(dǎo)致緡錢狀形成，造成假凝集現(xiàn)象。ABO血型抗體以外的不規(guī)章抗體，與試劑紅細(xì)胞上其他血型抗原系統(tǒng)的抗原起反響。低丙種球蛋白血癥：低丙種球蛋白血癥(丙種球蛋白量減低)病例，可能會(huì)因免疫球蛋白水平下降而使血清定型時(shí)不凝集或弱凝集反響。藥物等因素：藥物、右旋糖醉及靜脈注射某些造影劑可引起紅細(xì)胞凝集或類似凝集。的老人，試驗(yàn)時(shí)可消滅特別的結(jié)果。過失。Rh(D)定型和定型試驗(yàn)中應(yīng)留意的問題D抗原〔IgG抗D和IgM抗D〕。(1)導(dǎo)致Rh血型鑒定可能消滅假陽(yáng)性的緣由：受檢細(xì)胞已被免疫球蛋白致敏，或標(biāo)本血清中含有引起紅細(xì)胞凝集的因子。受檢細(xì)胞與抗血清孵育的時(shí)間過長(zhǎng)，含高蛋白的定型試劑會(huì)引起緡錢狀形成。標(biāo)本抗凝不當(dāng)，受檢過程中消滅凝血或小的纖維蛋白凝塊，誤判為陽(yáng)性。定型血清中含有事先未被檢測(cè)的其它特異性抗體，造成假陽(yáng)性定型結(jié)果。多凝集細(xì)胞造成定型的假陽(yáng)性。(2)可能消滅假陰性的緣由受檢細(xì)胞懸液濃度太高，與抗血清比例失調(diào)。漏加或錯(cuò)加定型血清。定型血清的使用方法錯(cuò)誤，沒有按說(shuō)明書進(jìn)展。離心后重懸細(xì)胞扣時(shí)，搖動(dòng)用力過度，搖散微弱的凝集。(3)弱D型(Du型)血型及其鑒定：Du型抗原是RhO(DD試劑不產(chǎn)生直接凝集反響Rh陰性結(jié)認(rèn)為該被檢者為Rh陰性，否則，只要有一批為陽(yáng)性，則可認(rèn)為是Du型。弱D型(Du型)的臨床意義D陽(yáng)性細(xì)胞抗原弱，但輸給Rh陰性的受血者后，自然有免疫產(chǎn)生抗D的可能。同時(shí)假設(shè)承受RhDu型人也有可能產(chǎn)生抗DDu型歸類為Rh陽(yáng)性，作為受血者Du型者歸類為Rh陰性者。1.目的和原則所謂不規(guī)章抗體是指抗A和抗B以外的血型抗體。確認(rèn)及鑒定臨床上具有意義的抗體，避開一些可能的狀況而造成病情的延誤。以覺察在37℃中有反響的抗體。2.抗體篩選和鑒定技術(shù)2或3個(gè)人份的OK、k、Le、Fya、Fyb、Jka、Jkb，條件缺乏的試驗(yàn)室不肯定具備Lua、V、Cw、Kpa、Jsa類的抗原?？贵w篩選試驗(yàn)不肯定能檢出全部臨床意義的抗體，一些抗低頻率抗原的抗體或有劑量用敏感度更高的技術(shù)做檢查。要內(nèi)容：自身細(xì)胞檢查：觀看患者(受者)的血清與患者(受者)自身細(xì)胞的反響狀況，確定血清內(nèi)是否有自身抗體或自身抗體和同種抗體二者同時(shí)存在。體的特異性。試劑譜細(xì)胞一般是由8--16個(gè)人的血型的O型紅細(xì)胞配套組成，具有各種不同的抗不同特異性的抗體當(dāng)患者體內(nèi)的同種抗體有二種或二種以上時(shí)，可承受吸取放散試驗(yàn)。低離子強(qiáng)度介質(zhì)法(Liss)、聚凝胺(Polybrene)法及凝膠法等各種技術(shù)，再結(jié)合吸取、放散等血清學(xué)手段，對(duì)抗體的特異性作分析。進(jìn)展了解，再分析反響結(jié)果。確定抗體特異性時(shí)可以綜合運(yùn)用以下的資料：觀看受檢血清與每個(gè)試劑譜細(xì)胞的反響結(jié)果。觀看受檢血清與其自身細(xì)胞的反響結(jié)果。觀看受檢血清與酶處理細(xì)胞的反響結(jié)果。一些抗體的特異性與反響介質(zhì)直接相關(guān)。有否溶血現(xiàn)象。在陽(yáng)性反響的細(xì)胞中，反響強(qiáng)度有否不同，是否消滅劑量效應(yīng)。(四)具有自身抗體的患者血清學(xué)檢查患者血清中存在的不規(guī)章抗體可分為兩類:一類是同種抗體，另一類是自身抗體。自身抗體又可分為冷自身抗體和溫自身抗體兩類。1、患者血清中存在自身抗體的幾種狀況及其對(duì)血清學(xué)試驗(yàn)的影響冷自身抗體冷自身抗體是較常見的一種自身抗體，通常是IgM型的抗體，能在鹽水介質(zhì)中和自身環(huán)境下才能和自下(例如4℃)與自身細(xì)胞反響。因此，盡管大多數(shù)人的血清中都存在冷自身抗體，但在體內(nèi)溫度下，不會(huì)和自身細(xì)胞發(fā)生反響，也不會(huì)造成任何不良影響。在罕見的病理狀況下，患者的血清中存在極高效價(jià)的冷自身抗體，而且，在相對(duì)較檢查造成很大影響，有時(shí)也對(duì)輸血造成肯定的影響。溫自身抗體37℃條件下能和自身紅細(xì)胞反響的抗體。當(dāng)患者血清中含有溫自身抗體時(shí)，患者一般均有些貧血或溶血病癥。溫自身抗體可分為兩類:大多數(shù)狀況下為lgG類溫自身抗體，極少數(shù)狀況下也會(huì)存在IgM性質(zhì)的溫自身抗體。患者血清里存在溫自身抗體，實(shí)際上將難以獲得在血清學(xué)上相協(xié)作的輸血。但這種狀況抗體。2、自身抗體的處理和相關(guān)血清學(xué)檢查冷自身抗體的血清學(xué)檢查當(dāng)疑心患者血清中存在冷自身抗體時(shí)，可進(jìn)展以下必要的檢查:(22℃左右)條件下和任何紅細(xì)胞都不發(fā)生反響，則可以認(rèn)為該抗體無(wú)臨床意義，不需要做進(jìn)一步的檢測(cè)。假設(shè)患者血清在室溫下和自身紅細(xì)胞反響，首先應(yīng)確認(rèn)抗體的冷反響性抗體特性可37℃水浴和4℃37℃完全散開而在4℃明顯增加時(shí)，可以認(rèn)為該抗體是冷反響性抗體。4℃進(jìn)展吸取試驗(yàn)。在患者近期曾輸過血或沒有足夠的紅細(xì)胞等狀況下，冷自身抗體吸取試驗(yàn)難以進(jìn)展溫自身抗體的血清學(xué)檢查IgG往往為陽(yáng)性，同時(shí)血清中的抗體在鹽水介質(zhì)中并不和自身或試劑紅細(xì)胞反響。血清中是否存在溫自身抗體在患者血清中消滅溫自身抗體。自身吸取法排解同種抗體可用自身吸取法測(cè)定同種抗體。37℃反響30min左右，檢測(cè)自身吸取是否完全。當(dāng)吸取上清液與被徹底去除了自身抗體的自身細(xì)胞不反響，則證明自身吸取已完全，可以進(jìn)一步進(jìn)展同種抗體的檢測(cè)。異體細(xì)胞吸取法排解同種抗體用異體細(xì)胞可以吸取自身抗體，但異體細(xì)胞也能吸取可能存在的同種抗體。的稀釋，以排解自身抗體的干擾，確定同種抗體特異性?！参濉炒┎迮溲囼?yàn)1、穿插配血試驗(yàn)原則和方法原則要性，如同在輸血前必需再次確認(rèn)受血者和獻(xiàn)血者ABO血型必需相容。但是為保證安全輸血，受血者和獻(xiàn)血者只是ABO血型相容還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，必需保證受血者血清中沒有即刻或遲發(fā)性地凝集和/或溶解所輸入的紅細(xì)胞的抗體。不管是IgM或IgG抗體，都可能在體內(nèi)溶解或溶解受血者紅細(xì)胞的抗體。總之，輸血前，必需進(jìn)展穿插配血試驗(yàn)，穿插配血試驗(yàn)包括主側(cè)穿插和次側(cè)穿插配血。應(yīng)留意:〔1〕用于穿插配血的病人(受血者)血液標(biāo)本應(yīng)當(dāng)是剛剛抽取的穎血，而不是病人的陳(2)應(yīng)留意不能用玻片血凝試驗(yàn)進(jìn)展穿插配血，要用試管法。(4)紅細(xì)胞濃度一般是2%－5%紅細(xì)胞生理鹽水懸液。鹽水穿插配血試驗(yàn)出IgM類抗體所致受血者和獻(xiàn)血者血型不相容。人體內(nèi)IgM類血型抗體最主要是ABO血型系統(tǒng)抗體。穿插配血試驗(yàn)必需確認(rèn)受血者和獻(xiàn)血者ABO血型相容，但臨床上最常見的遲發(fā)型輸血反響是由于ABO血型以外的其它血型(如Rh血型)IgG類抗體導(dǎo)致血型不相容。IgG類抗體所致血型不相容在鹽水穿插配血試驗(yàn)中不消滅凝集，不能直接檢出。檢測(cè)不完全抗體的穿插配血試驗(yàn)只要病人(受血者)有輸血史、妊娠史或者病人血清已檢出有臨床意義抗體，只進(jìn)展鹽抗體的檢測(cè)和確定試驗(yàn)同時(shí)進(jìn)展。2、抗體篩檢和穿插配血試驗(yàn)結(jié)果分析抗體篩檢陰性，穿插配血相容ABO血型抗體，檢測(cè)不出來(lái)具有臨床意義的IgG抗體，因此，只用鹽水直接凝集試驗(yàn)穿插配血，對(duì)體內(nèi)可能有血型免疫抗體的病人再以抗球蛋白試驗(yàn)進(jìn)展確定檢測(cè)，均呈陰性，才能保證待輸?shù)难褪苎哐拖嗳??？贵w篩檢陰性，鹽水直接離心穿插配血不相容(1)獻(xiàn)血者紅細(xì)胞是ABO血型不相容。A1存在于A2或AA個(gè)體血清中。抗體篩檢陰性，酶試驗(yàn)、抗球蛋白穿插配血試驗(yàn)等不相容球蛋白穿插配血試驗(yàn)中消滅不相容。受血者血清抗體活性很弱，則抗體篩檢試驗(yàn)呈陰性。(3)抗體與低頻率抗原反響。人群中大約1%的未經(jīng)選擇的血清可能含有某些低頻率抗原的抗體。對(duì)鹽水直接凝集為陰性者，連續(xù)做酶試驗(yàn)和抗球蛋白試驗(yàn)，以免漏檢IgG類抗體，這樣做更為牢靠且極有必要。抗體篩檢陽(yáng)性，穿插配血相容異性抗體可能是其緣由。自身抗-H。O型紅細(xì)胞有大量H抗原，而A1和AS細(xì)胞則有很少。含有自身抗-H的血清可能凝集全部O型篩檢試劑紅細(xì)胞，但是不凝集Al和AS獻(xiàn)血者紅細(xì)胞。大多數(shù)看來(lái)是抗-H的抗體實(shí)際上是抗-IH。這些抗體常是只在室溫下發(fā)生反響，無(wú)臨床意義。-LebH?？?LebH常常只在室溫下反響，但可能由抗球蛋白試驗(yàn)檢出。合?？贵w篩檢陽(yáng)性，穿插配血不相容同種異體抗體，自身抗體，與試劑紅細(xì)胞的不適當(dāng)反響和“錢串狀“紅細(xì)胞形成都可能輸血前查清楚。同種異體抗體存在，自身比照呈陰性。當(dāng)存在不規(guī)章同種異體抗體時(shí)，該抗體篩檢試驗(yàn)常常是陽(yáng)性的，但是該抗原頻率影響以首先用抗體試劑篩檢獻(xiàn)血者紅細(xì)胞抗原，再選擇其為陰性的血液作穿插配血。的最有保證的來(lái)源。假設(shè)必要，可以查詢稀有血型檔案?！?〕存在同種異體抗體，自身比照陽(yáng)性。2－3個(gè)月內(nèi)已經(jīng)承受了輸血的病人體內(nèi)同種異體抗體可引起自身比照細(xì)胞陽(yáng)性。病人血清中同種異體抗體可能和輸入的獻(xiàn)血員紅細(xì)胞反響。局部紅細(xì)胞與抗體反響，格外低，只有抗原陽(yáng)性紅細(xì)胞經(jīng)吸取一放散試驗(yàn)來(lái)鑒定有此抗體。(4)溫反響自身抗體也能引起難以確定的陽(yáng)性反響“錢串狀“紅細(xì)胞形成引起非真實(shí)的陽(yáng)性結(jié)果。一般常常是在光鏡下鑒定，細(xì)胞積聚呈硬幣積存成串狀態(tài)。/或相容試驗(yàn)的陽(yáng)性結(jié)果。(五)血小板輸注前的檢查配血隨著成分輸血的廣泛開展和應(yīng)用，以及血液成分保存技術(shù)的提高，單采血小板的輸注量已逐年上升。然而隨之而來(lái)的因血小板輸血反響及輸注無(wú)效成為臨床上極為突出的問型是目前行之有效的方法。血小板抗體檢查血小板的自身免疫和同種免疫是產(chǎn)生血小板輸血反響和輸注無(wú)效的有效的血小板輸注。血小板外表和自身抗體檢查：血小板同種抗體檢查：血小板穿插配血：臨床輸血中，一旦覺察血小板輸血反響或輸注無(wú)效，則必需馬上查找協(xié)作性輸注。1、根本要求輸血記錄要包括受血者姓名等根本資料，每一獻(xiàn)血者(或每一袋待輸血)鑒別編碼；ABO試驗(yàn)覺察和結(jié)果。發(fā)出每一袋血液之前，血庫(kù)工作人員必需做到:類和結(jié)果；假設(shè)在穿插配血前血液要發(fā)出，必需具體說(shuō)明和標(biāo)記。檢查血液失效期，避開發(fā)出過期的血。結(jié)果。以固定程序記錄發(fā)、收血的工作人員名字(簽名)，血液發(fā)出的時(shí)間和日期。。2、輸血前選擇血液ABO血型相容的血液。只要是輸給病人的血液成分中有等于或多于5mL的紅細(xì)胞，該紅細(xì)胞必需與病人(受血者)血漿相容。RhD血，以避開被RhD抗原免疫。假設(shè)已盡了最大努力，還是找不到ABO相容