卵泡發(fā)育中miRNAs的作用探討,醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)論文

卵泡發(fā)育中miRNAs的作用探討,醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)論文摘要：人們已在卵泡發(fā)育的不同階段和不同細(xì)胞中均檢測(cè)到小RNA(miRNAs)的存在，并在成熟卵泡的卵泡液中也發(fā)現(xiàn)外泌體miRNAs。miRNAs不僅介入調(diào)控正常的卵泡發(fā)育經(jīng)過，其異常調(diào)控可以導(dǎo)致一些卵巢疾病的發(fā)生。為進(jìn)一步系統(tǒng)說明miRNAs對(duì)卵泡發(fā)育的調(diào)控機(jī)制，尋找能夠預(yù)測(cè)卵母細(xì)胞發(fā)育質(zhì)量的外泌體miRNAs,本文從顆粒細(xì)胞發(fā)育、卵母細(xì)胞發(fā)育和激素合成等方面總結(jié)了miRNAs對(duì)卵泡發(fā)育的調(diào)控作用。本文關(guān)鍵詞語:小RNA;卵泡發(fā)育;顆粒細(xì)胞;卵母細(xì)胞;激素合成;Abstract：Inrecentyears,microRNAs(miRNAs)havebeendetectedatdifferentstagesoffolliculardevelopmentandindifferentcellsoffollicles.Extracellularvesicle(EV)-derivedmiRNAshavealsobeendetectedinthefollicularfluidofmaturefollicles.miRNAsparticipateintheregulationofnormalfolliculardevelopment,andtheregulationdisordermayleadtotheoccurrenceofsomeovariandiseases.InordertofurthersystematicallyelucidatetheregulatorymechanismofmiRNAsonfolliculardevelopmentandfindsuitableEV-derivedmiRNAsthatcanpredictoocytedevelopment,wereviewedthefunctionsofmiRNAsinfolliculardevelopmentfromtheperspectivesofgranulosacelldevelopment,oocytedevelopment,andhormonesynthesis.Keyword：microRNAs;folliculardevelopment;granulosacell;oocyte;hormonesynthesis;Fund：SupportedbytheScientificandTechnologicalResearchProjectofJilinProvince(20200201832JC);theHealthResearchProjectfortheTrainingofYoungTalentsofJilinProvince(2021Q047);theScientificandTechnologicalInnovationProjectofJilinCity(202131721);theScientificandTechnologicalResearchProjectsoftheEducationDepartmentofJilinProvinceDuringthe“ThirteenthFive-YearPlan〞Period(JJKH20221065KJ,JJKH20200454KJ);theScientificandTechnologicalDevelopmentProjectofTraditionalChineseMedicineofShandongProvince(2022-0463);UndergraduateTrainingProgramforInnovationandEntrepreneurshipofJilinProvince(dc202252,dc202254);高通量測(cè)序技術(shù)的飛速發(fā)展為研究非編碼RNA提供了極大便利，鑒于非編碼RNA在生殖系統(tǒng)發(fā)育調(diào)控中的重要作用，關(guān)于其調(diào)控機(jī)制的說明也成為當(dāng)前的研究熱門，引起了人們極大的關(guān)注[1,2]。非編碼RNA包括小RNA(microRNAs,miRNAs)、長鏈非編碼RNA(longnon-codingRNAs,IncRNAs)和環(huán)狀RNA(circularRANs,circRNAs)3大類，華而不實(shí)以miRNAs的研究最為廣泛[3]。miRNA于1993年被發(fā)現(xiàn)，是一種內(nèi)源性22～24nt大小的單鏈非編碼RNA[4]。成熟的miRNAs與Argonaute1(AGO1)等其他蛋白質(zhì)一起組成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物(RNA-inducedsilencingcomplex,RISC),miRNA通過其5’端的種子序列與靶mRNA3’非編碼區(qū)(3’UTR)完全或不完全的互補(bǔ)結(jié)合，可以通過辨別靶mRNA的開放閱讀框，將與之結(jié)合的AGO蛋白定位到靶mRNA上，導(dǎo)致靶mRNA降解、基因沉默或翻譯抑制，進(jìn)而調(diào)控靶基因表示出，影響細(xì)胞增殖、分化和凋亡[5,6]。卵泡發(fā)育是一個(gè)高度精到準(zhǔn)確、有序和周期性經(jīng)過，從原始卵泡激活開場(chǎng)，逐步激發(fā)周圍健康小卵泡的生長及優(yōu)勢(shì)卵泡的選擇，并伴隨著一系列卵母細(xì)胞和周圍體細(xì)胞(尤其是顆粒細(xì)胞)的分化。通過生物信息學(xué)分析，Zhang等[7]在優(yōu)勢(shì)卵泡的生長和選擇經(jīng)過中，挑選出15個(gè)介入調(diào)控的miRNAs和139個(gè)相關(guān)的信號(hào)通路。這些miRNAs和相關(guān)的信號(hào)通路調(diào)控卵泡發(fā)育經(jīng)過中的細(xì)胞增殖、分化、激素合成和卵母細(xì)胞的成熟及排卵等一系列重要事件，影響著卵泡發(fā)育的結(jié)局[8,9]。本文總結(jié)了miRNAs在卵巢顆粒細(xì)胞增殖與凋亡、卵母細(xì)胞發(fā)育和激素合成等方面的調(diào)控作用，以期為說明其在生殖發(fā)育機(jī)制和生殖疾病機(jī)理的調(diào)控作用奠定基礎(chǔ)。miRNAs在顆粒細(xì)胞發(fā)育中的調(diào)控作用卵泡發(fā)育經(jīng)過伴隨著顆粒細(xì)胞的快速增殖和分化，顆粒細(xì)胞在卵泡發(fā)育經(jīng)過中起著重要的營養(yǎng)支持作用，可通過旁分泌以及與卵母細(xì)胞間的縫隙連接，為卵母細(xì)胞輸送營養(yǎng)物質(zhì)，調(diào)節(jié)卵母細(xì)胞的生長和成熟，并通過分泌大量性激素維持卵泡的正常功能。因而，顆粒細(xì)胞的正常發(fā)育是卵泡發(fā)育的基礎(chǔ)。研究發(fā)現(xiàn)，顆粒細(xì)胞的增殖和凋亡受多種因素，如生長因子、激素、凋亡蛋白和氧化復(fù)原酶類等的調(diào)控[10,11],而miRNAs則通太多種途徑調(diào)控這些蛋白和激素等物質(zhì)的合成，進(jìn)而調(diào)控顆粒細(xì)胞的發(fā)育[12]。生長因子途徑在顆粒細(xì)胞的生長發(fā)育經(jīng)過中存在著一類重要的生長因子-轉(zhuǎn)化生長因子β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)[13],研究發(fā)現(xiàn)這類生長因子通路受miR-10a和miR-10b調(diào)控[14]。miR-10家族可調(diào)控TGF-β通路中的很多關(guān)鍵基因，如促卵泡激素(follicle-stimulatinghormone,FSH)、纖維母細(xì)胞生長因子9(fibroblastgrowthfactor9,FGF9)、激活素A、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bonemorphogeneticproteins,BMP)4和BMP15的表示出，進(jìn)而影響顆粒細(xì)胞的增殖和分化[14]。miR-125b則通過靶向作用于骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B(bonemorphogeneticproteinreceptor1B,BMPR1B)mRNA,影響B(tài)MPR1B蛋白的表示出，改變Bcl-2/Bax比值[15],誘導(dǎo)顆粒細(xì)胞凋亡。Chi-miR-4110和miR-424/503靶向作用于TGF-β信號(hào)通路中的Smad2和Smad7基因mRNA,促進(jìn)顆粒細(xì)胞凋亡[16,17]。同時(shí)有研究發(fā)現(xiàn)，激活素A的表示出可負(fù)反應(yīng)下調(diào)miR-424/503和miR-10家族的表示出，協(xié)同調(diào)控顆粒細(xì)胞的增殖[17]。且Smad4可以結(jié)合于miR-143的啟動(dòng)子區(qū)，負(fù)反應(yīng)下調(diào)miR-143的表示出，逆轉(zhuǎn)miR-143介導(dǎo)的顆粒細(xì)胞凋亡和卵泡閉鎖[18]。激素受體途徑卵泡刺激素受體(follicularstimulatinghormonereceptor,FSHR)在調(diào)控哺乳動(dòng)物卵泡發(fā)育經(jīng)過中發(fā)揮重要作用。在卵巢卵泡閉鎖經(jīng)過中，F(xiàn)SHR表示出下調(diào)，敲除FSHR可導(dǎo)致顆粒細(xì)胞凋亡和卵泡閉鎖[19],但其詳細(xì)作用機(jī)制尚不明確。通過研究miRNAs在顆粒細(xì)胞發(fā)育中的作用，發(fā)現(xiàn)FSHR是miR-143的重要作用靶點(diǎn)，在卵泡閉鎖期間miR-143的表示出上調(diào)，其通過靶向作用于FSHR,降低了細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子，如蛋白激酶A(proteinkinaseA,PKA)、蘇氨酸蛋白激酶(serine/threoninekinase,AKT)和磷酸化AKT(phosphorylatedAKT,P-AKT)的表示出水平，影響細(xì)胞的代謝活動(dòng)，加速顆粒細(xì)胞凋亡，促進(jìn)卵泡凋亡[18,20]。miRNAs可通過促性腺激素受體途徑介入調(diào)控顆粒細(xì)胞和卵泡的發(fā)育。凋亡因子途徑在卵泡發(fā)育的不同階段，會(huì)有99%以上的卵泡閉鎖退化。卵泡閉鎖主要是由顆粒細(xì)胞凋亡引起的，很多促凋亡因子介入調(diào)控了這一經(jīng)過[21,22],叉頭框轉(zhuǎn)錄因子O1(forkheadboxtranscriptionfactorO1,FoxO1)是華而不實(shí)一類重要的促凋亡調(diào)控因子[23,24]。研究發(fā)現(xiàn)miR-181a可靶向抑制FoxO1的去乙?；赋聊畔⒄{(diào)節(jié)因子1(silentinforma-tionregulator1,SIRT1)的表示出，促進(jìn)FoxO1乙?；?，加強(qiáng)FoxO1表示出，進(jìn)而促進(jìn)顆粒細(xì)胞的凋亡。Zhang等[25]研究發(fā)現(xiàn)，利用過氧化氫處理顆粒細(xì)胞可增加顆粒細(xì)胞中miR-181a的表示出，并通過FoxO1通路促進(jìn)顆粒細(xì)胞的凋亡，但假如敲除miR-181a,則阻止了過氧化氫誘導(dǎo)的顆粒細(xì)胞凋亡?？梢?，miRNAs在顆粒細(xì)胞凋亡和卵巢老化經(jīng)過中起重要的調(diào)控作用。miRNAs在卵母細(xì)胞發(fā)育中的調(diào)控作用在卵泡發(fā)育經(jīng)過中，卵母細(xì)胞逐步具備了完成減數(shù)分裂成熟和支持后續(xù)早期胚胎發(fā)育的能力。卵母細(xì)胞的發(fā)育成熟，受顆粒細(xì)胞增殖和凋亡的調(diào)控。在卵母細(xì)胞發(fā)育的前期，顆粒細(xì)胞快速增殖，為卵母細(xì)胞的生長提供豐富的營養(yǎng)物質(zhì)；但在初級(jí)卵母細(xì)胞完成第1次減數(shù)分裂前，卵母細(xì)胞的發(fā)育已經(jīng)完成，顆粒細(xì)胞在激素和促凋亡因子等作用下，發(fā)生凋亡退化，逐步失去了與卵母細(xì)胞之間的聯(lián)絡(luò)，此時(shí)假如顆粒細(xì)胞凋亡退化異常，將會(huì)影響卵母細(xì)胞完成第1次減數(shù)分裂。近年研究表示清楚，miRNAs表示出于卵泡發(fā)育的不同階段，包括原始卵泡、初級(jí)卵泡、次級(jí)卵泡和成熟卵泡，介入調(diào)控整個(gè)卵泡的發(fā)育和卵母細(xì)胞的成熟經(jīng)過[26]。人們已在卵母細(xì)胞發(fā)育的不同階段發(fā)現(xiàn)了miRNAs表示出形式的差異。Xiong等[27]對(duì)GV期和MⅡ期卵母細(xì)胞進(jìn)行了高通量測(cè)序，結(jié)果顯示：MⅡ期卵母細(xì)胞中有47個(gè)miRNAs表示出上調(diào)，28個(gè)miRNAs表示出下調(diào)，在表示出上調(diào)的let-7i、miR-10b、miR-10c、miR-342、miR-143、miR-146b和miR-148等miRNAs中，miR-342的表示出水平升高了9.25倍。為進(jìn)一步說明這些在GV期和MⅡ期卵母細(xì)胞中差異表示出的miRNAs的調(diào)控作用，Song等[28]研究了7個(gè)差異表示出的miRNAs調(diào)控的信號(hào)通路和靶基因，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：miR-21、miR-27b-3p、miR-10a-5p、miR-10b-5p介入了豬卵母細(xì)胞脂肪酸代謝的調(diào)控，miR-27b-3p調(diào)控著GV期和MⅡ期卵母細(xì)胞中過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisomeproliferator-activatedreceptor-γ,PPARγ)的表示出，在卵母細(xì)胞的體外成熟液中添加PPARγ沖動(dòng)劑，可顯著提高卵母細(xì)胞的成熟率和早期胚胎的發(fā)育能力。在卵母細(xì)胞體外成熟經(jīng)過中，顯微注射miR-130b前體或抑制劑能降低靶基因SMAD5和MSK1的表示出，顯著降低第一極體的排出和卵母細(xì)胞進(jìn)入第二次減數(shù)分裂中期的比例[29];相反miR-130b的過表示出則可明顯增加顆粒細(xì)胞的數(shù)量，促進(jìn)顆粒細(xì)胞增殖，進(jìn)而抑制卵母細(xì)胞成熟[29]。miR-378則在卵泡發(fā)育的早期通過降低BMP15和GDF9的表示出，減弱卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞的互相作用，進(jìn)而降低卵母細(xì)胞成熟率[30]。因而，在卵母細(xì)胞發(fā)育的不同階段，會(huì)遭到不同類型miRNAs的精到準(zhǔn)確調(diào)控，miRNAs的調(diào)控異常將直接影響卵母細(xì)胞成熟和卵巢功能。最近人們?cè)趧?dòng)物和人類卵泡液中檢測(cè)到一類重要物質(zhì)-外泌體miRNAs(extracellularvesiclecontainingmiRNA,EV-miRNAs)[31],該物質(zhì)會(huì)通過細(xì)胞和細(xì)胞之間的傳遞，完成細(xì)胞間的溝通[32]。daSilveira等[33]將含有miRNAs的外泌體添加到卵母細(xì)胞的成熟培養(yǎng)液和早期胚胎的培養(yǎng)液中，顯著提高了胚胎細(xì)胞中bta-miR-631的表示出水平，改變了胚胎中DNA的甲基化和羥甲基化水平，產(chǎn)生了不同的囊胚發(fā)育率。EV-miRNAs介入調(diào)控了卵母細(xì)胞的成熟和支持后續(xù)胚胎發(fā)育能力的獲得。在卵母細(xì)胞成熟經(jīng)過中，卵泡液中miRNAs的表示出隨著雌性年齡和卵泡發(fā)育階段的變化而變化。daSilveira等[34]在青年馬(3～10歲)不同發(fā)育階段的卵泡液中發(fā)現(xiàn)了26個(gè)miRNAs的差異表示出，而在老年馬(20～26歲)不同發(fā)育階段的卵泡液中發(fā)現(xiàn)了55個(gè)miRNAs的差異表示出，這些差異表示出的miRNAs包括miR-23a、miR-222、miR-24、miR-132、miR-320、miR-520c-3p、miR-222和miR-181a等，它們介入調(diào)控著卵泡雌激素合成、FSH循環(huán)水平、TGF-β信號(hào)通路、WNT信號(hào)通路和排卵等經(jīng)過，這些經(jīng)過與卵母細(xì)胞的發(fā)育、卵巢的老化和衰老密切相關(guān)。Diez-Fraile等[35]比擬了年輕女性(31歲)和中老年女性(38歲)卵泡液中EV-miRNAs的表示出，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：miR-21-5p僅在年輕女性的卵泡液中分離到，可靶向作用于TGF-β信號(hào)通路；而miR-134、miR-190b和miR-99b-3p僅在中老年女性卵泡液中發(fā)現(xiàn)，可能與低質(zhì)量的卵母細(xì)胞密切相關(guān)。固然EV-miRNAs的表示出類型和水平在馬和人都存在物種的差異，但它們都介入了調(diào)控卵泡發(fā)育的重要活動(dòng)和重要信號(hào)通路，在卵泡發(fā)育和卵母細(xì)胞成熟中發(fā)揮了重要作用。除此之外研究發(fā)現(xiàn)，EV-miRNAs與MⅡ期卵母細(xì)胞的質(zhì)量密切相關(guān)，其表示出變化影響著體外受精的結(jié)果[36]。Martinez等[37]收集了126名進(jìn)行體外受精女性的卵泡液，分析了卵泡液中EV-miRNAs的表示出水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與正常受精組的卵母細(xì)胞相比，未受精卵母細(xì)胞的卵泡液樣本中Hsa-miR-92a和Hsa-miR-130b的表示出顯著升高；卵泡液中Hsa-miR-888的過度表示出，以及Hsa-miR-214和Hsa-miR-454的表示出下降與D3的胚胎質(zhì)量密切相關(guān)。對(duì)含有成熟卵母細(xì)胞的單個(gè)卵泡的卵泡液進(jìn)行樣本分析發(fā)現(xiàn)，miR-663B在人卵泡液中的表示出水平與活囊胚的構(gòu)成率呈顯著負(fù)相關(guān)[38]。通過胞漿內(nèi)單精子顯微注射研究發(fā)現(xiàn)，來自高水平Hsa-miR-320a和Hsa-miR-197卵泡液的卵母細(xì)胞可獲得高質(zhì)量發(fā)育的胚胎[39]。卵泡液中miRNAs的類型和表示出水平在一定程度上與卵母細(xì)胞的成熟質(zhì)量有關(guān)，而卵母細(xì)胞的發(fā)育質(zhì)量直接決定后期胚胎的發(fā)育狀況。假如miRNAs能成為體外受精后胚胎發(fā)育潛能的客觀評(píng)價(jià)指標(biāo)，將大大提高輔助生殖技術(shù)的成功率，減少多胎的發(fā)生率。miRNAs對(duì)卵泡合成和分泌性激素的調(diào)控作用在卵泡發(fā)育成熟經(jīng)過中分泌多種激素，包括雌激素、孕激素和少量雄激素，這些激素調(diào)控顆粒細(xì)胞的增殖與分化、卵母細(xì)胞的發(fā)育成熟及排卵[40,41]。研究發(fā)現(xiàn)，這些激素的合成受miRNAs調(diào)控，miR-320a可靶向作用于轉(zhuǎn)錄因子RUNX2的3’UTR,通過調(diào)節(jié)CYP11A1和CYP19A1的表示出，加強(qiáng)顆粒細(xì)胞中類固醇激素的合成[42]。雌激素的合成受FSH和促黃體生成激素(luteinizinghormone,LH)的調(diào)控，在顆粒細(xì)胞和卵泡膜細(xì)胞上分別有FSH受體(FSHreceptor,FSHR)和LH受體(LHreceptor,LHR)的表示出。LHRmRNA的穩(wěn)態(tài)水平是通過LHRmRNA結(jié)合蛋白(LHRmRNAbindingprotein,LRBP)控制其降解速度來維持的。Menon等[43]研究顯示，miR-122調(diào)控LRBP的表示出，間接決定了細(xì)胞中LHRmRNA的水平。在排卵前，為應(yīng)對(duì)LH峰的出現(xiàn)，LHRmRNA表示出會(huì)隨著miR-122和LRBP水平的降低而降低。miRNAs根據(jù)卵泡發(fā)育的需要，精到準(zhǔn)確地調(diào)控卵巢激素的合成和分泌。卵泡對(duì)雌激素的合成也受促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotropin-releasinghormone,CRH)信號(hào)通路的調(diào)控，Yu等[44]發(fā)現(xiàn)該調(diào)控通路需要miR-375的參與，CRH通過激活胞內(nèi)PKA-p38MAPK信號(hào)通路，促進(jìn)miR-375表示出，miR-375結(jié)合到特異性蛋白1(specificityprotein1,SP1)mRNA的3’UTR區(qū)，抑制SP1蛋白的表示出，下調(diào)了Cyp19a1轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而抑制了顆粒細(xì)胞中E2的合成。Wang等[45]發(fā)現(xiàn)，miR-764-3p可通過影響類固醇生成因子-1(steroidogenicfactor-1,SF-1)mRNA的穩(wěn)定性，抑制SF-1的表示出，進(jìn)而抑制了SF-1下游的靶基因Cyp19a1的表示出，影響E2的合成。Dai等[46]研究顯示，miR-133b是通過結(jié)合到Foxl2mRNA的3’UTR區(qū)，降低了Foxl2的表示出水平，抑制了Foxl2結(jié)合到類固醇激素合成急性調(diào)節(jié)蛋白(steroidogenicacuteregulatoryprotein,StAR)和Cyp19a1基因的啟動(dòng)子區(qū)，降低了StAR和Cyp19a1的表示出，進(jìn)而影響E2的合成。當(dāng)前人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，不同類型的miRNAs通過不同的信號(hào)通路，精到準(zhǔn)確調(diào)控著卵泡激素的合成，但詳細(xì)哪條通路起了主要作用或是這些通路之間是怎樣互相作用調(diào)控著激素合成還不清楚，尚需進(jìn)一步展開研究。miRNAs對(duì)卵泡發(fā)育障礙性疾病的調(diào)控作用卵泡發(fā)育障礙性疾病是造成雌性/女性不孕的重要原因，也是生殖醫(yī)學(xué)/生殖生物學(xué)的研究重點(diǎn)，越來越多的研究表示清楚，miRNA在常見卵泡發(fā)育障礙性疾病，如多囊卵巢綜合征(polycysticovarysyndrome,PCOS)和卵巢早衰(prematureovarianfailure,POF)中發(fā)揮作用。PCOS的特征是卵巢多囊樣改變、不排卵和高雄激素血癥。Naji等[47]研究發(fā)現(xiàn)，在PCOS患者顆粒細(xì)胞中miR-93和miR-21水平顯著升高，且游離睪酮和游離雄激素指數(shù)與miR-93和miR-21的表示出呈正相關(guān)，miRNA作為雄激素合成通路的中間調(diào)控因子，其異常升高引起了患者的高雄激素血癥。MiR-320a在PCOS患者顆粒細(xì)胞中的表示出顯著下調(diào)，其靶向作用于雌激素合成的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子RUNX2,顯著降低了CYP11A1和CYP19A1的表示出，導(dǎo)致顆粒細(xì)胞中雌激素合成顯著減少[42]。除此之外，在PCOS患者的顆粒細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)了miR-323-3p水平下調(diào)。MiR-323-3p可靶向作用于胰島素樣生長因子1(insulin-likegrowthfactor1,IGF-1)mRNA,抑制IGF-1的表示出，進(jìn)而下調(diào)雄激素受體、抗苗勒氏管激素Ⅱ型受體、細(xì)胞色素P45019A、表皮生長因子受體和鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子GATA-4的表示出水平，導(dǎo)致患者體內(nèi)雌激素合成減少，雄激素水平顯著升高，出現(xiàn)高雄激素血癥[39]。miR-27a-3p則通過作用于cAMP反響元件結(jié)合蛋白1,下調(diào)Cyp19a1的表示出，導(dǎo)致雄激素和雌激素表示出水平失調(diào)，促進(jìn)了顆粒細(xì)胞的凋亡[48]。因而，顆粒細(xì)胞miRNA調(diào)控紊亂，將會(huì)引起激素失調(diào)，顆粒細(xì)胞凋亡，與PCOS的發(fā)生密切相關(guān)。POF是指卵巢功能衰竭、卵巢中卵母細(xì)胞數(shù)量顯著減少所導(dǎo)致的40歲之前閉經(jīng)的現(xiàn)象，其特點(diǎn)是顆粒細(xì)胞功能紊亂、雌激素水平降低，促性腺激素水平升高，但詳細(xì)發(fā)生機(jī)制尚不清楚。Chen等[49]在POF患者血漿和卵巢顆粒細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)miR-146a的表示出顯著升高，miR-146a可靶向調(diào)控白細(xì)胞介素受體相關(guān)激酶和腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6的表示出，通過caspase級(jí)聯(lián)反響促進(jìn)顆粒細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致卵泡閉鎖。Cho等[50]研究發(fā)現(xiàn)，miR-146a單核苷酸多態(tài)性會(huì)改變FOXO3、FOXL2和CCND2的mRNA水平，使其靶基因表示出異常，進(jìn)而導(dǎo)致顆粒細(xì)胞功能紊亂，卵巢卵泡發(fā)育缺陷。MiR-938可靶向結(jié)合到促性腺激素釋放激素受體(gonadotropin-releasinghormonereceptor,GnRHR)mRNA上，調(diào)控著促性腺激素的循環(huán)水平，進(jìn)而影響卵巢卵泡發(fā)育。miR-938GA多態(tài)性可引起GnRHR表示出的異常調(diào)控，造成卵泡發(fā)育受阻，出現(xiàn)POF[51]。當(dāng)前已發(fā)現(xiàn)多種miRNA介入了POF發(fā)生的調(diào)控，這些miRNAs作為POF的診斷、靶向治療或預(yù)后標(biāo)志物的選擇具有潛在的應(yīng)用價(jià)值，對(duì)于說明POF的發(fā)生機(jī)制也是至關(guān)重要。將來瞻望隨著對(duì)miRNAs研究的不斷深切進(jìn)入，人們逐步認(rèn)識(shí)到miRNAs作為細(xì)胞活動(dòng)的關(guān)鍵調(diào)控分子，不管是在正常生理狀態(tài)還是病理狀態(tài)下都廣泛表示出，其調(diào)控卵泡細(xì)胞的增殖、分化和凋亡，影響卵巢正常的生理和病理經(jīng)過，將來需要進(jìn)一步說明其在卵泡發(fā)育中的調(diào)控機(jī)制。miRNAs具有高度保守性和穩(wěn)定性，因而進(jìn)一步挖掘miRNAs在生殖領(lǐng)域作為檢測(cè)標(biāo)志物的研究，以其進(jìn)行卵巢疾病的診斷和治療并作為輔助生殖技術(shù)選擇優(yōu)質(zhì)卵母細(xì)胞和胚胎的客觀標(biāo)準(zhǔn)，將對(duì)篩查和治療卵巢疾病、提高受孕率和減少多胎發(fā)生率都具有重要意義。以下為參考文獻(xiàn)[1]徐源,孫鐵成,張愛玲,等卵巢miRNA研究進(jìn)展[J]畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),2020,45(4):509-516.DOl:10.11843/jissn.0366-6964.2020.04.001.[2]馬亞仙，何明靜,程冉,等.MicroRNA與多囊卵巢綜合征發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展[J]實(shí)用婦產(chǎn)科雜志,2021,32(3)-177-180DOI:CNKI:SUN:SFCZ0.2021-03-011.[3]郭倩，朱寧，卜萌萌,等基于微小RNA架構(gòu)的新型隨機(jī)短發(fā)夾RNA文庫構(gòu)建([J].中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào),2021,39(4):518-524.D0l:10381jissn.1000-503X.2021.04.010.[4]SempereLF.Celebrating25yearsofmicroRNAresearch.fromdiscoverytoclinicalapplication[J]IntJMolSci,2022,20(8);1987-1996.DOl:10.3390/jmns20081987.[5]能霞輝,陳梅紅MicroRNA介入的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[J].醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志，2007,4(4):367-370.DOl:10.3870/jissn.1672-8009.2007.04.022.[6]LiLS,SongYL,ShiXR,etal.ThelandscapeofmiRNAeditinginanimalsanditsimpactonmiRNAbiogenesisandtargeting[J].GenomeRes,2021,28(1):132-143.DOl:10.1101/gr.224386.117.[7]ZhangBY,ChenL,FengGD,etal.MicroRNAmediatingnetworksingranulosacellsassociatedwithovarianflliculardevelopment[J].BiomedResInt,2021,7:4585213.DOl:10.1155/2021/4585213.[8]YerushalmiGM,Salmon-DivonM,YungY,etal.CharacterizationofthemiRNAregulatorsofthehumanovulatorycascade[J].SciRep,2021,8(1):15605.DOl:10.1038/s41598-018-33807-y.[9]DonadeuFX,MohammedBT,loannidisJAmiRNAtargetnetworkputativelyinvolvedinfllicularatresia[J].DomestAnimEndocrinol,2021.58(1):76-83.DOl:10.1016/jdomaniend.2021.08.002.[10]屠豪炎,雷小燦,霍鵬,等卵泡發(fā)生經(jīng)過中能量代謝需求及調(diào)控機(jī)制的研究進(jìn)展[J]中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào),2022.,41(3)-.408-414.DOI:10.3881/jissn.1000-503X10774.[11]GuoJ,ZhangT,GuoYS,etal.Oocytestage-specificeffectsofMTORdeterminegranulosacellfateandoocytequalityinmice[J].ProcNatlAcadSciUSA,2021,115(23):E5326-E5333.D0l:10.1073/pnas.1800352115.[12]ZhangJB,XuYX.,LiuHL,etal.MicroRNAsinovarianfllicularatresiaandgranulosacellapoptosis[J].ReprodBiolEndocrinol,2022,17(1):9.D0l:10.1186/s12958-018-0450-y.[13]DuX,PanZX.LiuHL,etal.SMAD4feedbackregulatesthecanonicalTGF-βsignalingpathwaytocontrolgranulosacellapoptosis[J].CellDeathDis,2021,9(2)-151.DOl:10.1038/s41419-017-0205-2.[14]TuJJ,YangYZ,AlbertCHH,etal.ConservedmiR-10familyrepressesproliferationandinducesapoptosisinovariangranulosaels[J].SciRep,.2021,7:41304.DOl:10.1038/srep41304.[15]YaoYL,NiuJQ,SizhuSL,etal.MicroRNA-125bregulatesapoptosisbytargetingbonemorphogeneticproteinreceptor1Binyakgranulosacells[J].DNACellBiol,2021,37(11):878-887.DOI:10.1089/dna20214354.[16]AnXP,SongYX,HouJX,etal.Chi-miR-4110promotesgranulosacellapoptosisbytargetingSma-AndMad-relatedprotein2(Smad2)inthecaprineovary[J].PLoSOne,2021,12(7):e0181162.DOl:10.1371/journal.pone0181162.[17]PandeHO,TesfayeD,HoelkerM.etal.MicroRNA-424/503clustermembersregulatebovinegranulosacellproliferationandcellcycleprogressionbytargetingSMAD7genethroughactivinsignallingpathway[J.JOvarianRes,2021,11(1):34.D0l:10.1186/s13048-018-0410-3.[18]DuX,ZhangLF,LiXY,etal.TGF-βsignalingcontrolsFSHRsignaling-reducedovariangranulosacellapoptosisthroughtheSMAD4/miR-143axis[J].CellDeathDis,2021,7(11):e2476..DOl:10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