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專題三植物的組織培育技術(shù)課題2月季的花藥培育秋水仙素處理花藥離體培育單倍體育種AABB×aabbPAaBbF1AAbbABAbaBab單倍體植株AABBAAbbaaBBaabb原理:細(xì)胞的全能性植株矮小,高度不育月季(Rosachinensis
Jacq.)玫瑰(Rosarugosa
Thunb.)一年多生,花朵較大,花莖光滑、莖上刺少而粗,香味寡淡,果實(shí)圓形。一年一生,花朵較小,花莖有剛毛、莖上刺多而小,香味濃郁,果實(shí)扁圓形。被子植物:種子有果皮和種皮包被的植物。被子植物和裸子植物裸子植物:種子沒有果皮,但有種皮包被的植物。實(shí)例:向日葵、梨、月季等開花并結(jié)果的植物。實(shí)例:松、杉、柏等。花的結(jié)構(gòu)花絲:輸送養(yǎng)分花藥:囊狀結(jié)構(gòu),內(nèi)有很多花粉(細(xì)胞)2、花粉母細(xì)胞(小孢子母細(xì)胞)
花粉(未成熟)
即:?jiǎn)伪扼w的生殖細(xì)胞3、發(fā)育階段:四分體時(shí)期、單核期、雙核期(一)被子植物的花粉發(fā)育1、雄蕊基礎(chǔ)學(xué)問減數(shù)分裂花粉管細(xì)胞核生殖細(xì)胞核花粉發(fā)育過程圖小孢子母細(xì)胞花粉母細(xì)胞4個(gè)小孢子減數(shù)分裂
小孢子四分體時(shí)期單核居中期單核靠邊期雙核期有絲分裂2個(gè)精子有絲分裂養(yǎng)分細(xì)胞單核期生殖細(xì)胞1花粉母細(xì)胞(2n)4個(gè)小孢子(小孢子四分體)(n)減分有分1個(gè)花粉管細(xì)胞核(n)1個(gè)生殖細(xì)胞核(n)有分2個(gè)精子單核居中期(n)單核靠邊期(n)即4個(gè)單倍體細(xì)胞雙核期單核期花粉發(fā)育過程基因型相同雌蕊的結(jié)構(gòu)(二)產(chǎn)生花粉植株(單倍體植株)的兩種途徑花粉花粉胚狀體愈傷組織叢芽生根移栽脫分化分化再分化誘導(dǎo)脫分化說明:兩種途徑之間并沒有確定的界限,主要取決于培育基中激素的種類及其濃度的配比?;A(chǔ)學(xué)問花粉花粉胚狀體愈傷組織叢芽生根移栽脫分化分化再分化誘導(dǎo)脫分化基礎(chǔ)學(xué)問胚狀體(體細(xì)胞胚或花粉胚)組織培育過程中,某些離體的體細(xì)胞或花粉細(xì)胞轉(zhuǎn)變成的與胚特殊相像的結(jié)構(gòu)。(也具有胚芽、胚根、胚軸等結(jié)構(gòu))胚狀體的發(fā)育過程和正常胚類似。(二)產(chǎn)生花粉植株(單倍體植株)的兩種途徑(三)影響花藥培育的因素1、材料的選擇
此外,親本生長(zhǎng)條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等2、培育基的組成
從花藥所處時(shí)期看:從花粉發(fā)育時(shí)期看:從花蕾開放程度看:初花期(花期早期)的花藥單核期(單核靠邊期)的花粉完全未開放的花蕾為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來困難?想一想為什么選擇完全未開放的花蕾作花藥離體培育的材料?花瓣松動(dòng),微生物可能侵入到花藥,給消毒帶來困難。2、含菌少、易消毒1、可選擇到單核期的花藥試驗(yàn)操作1、材料的選取2、材料的消毒3、接種和培育4、鑒定和篩選1、材料選取通過鏡檢確定花粉是否處于適宜的發(fā)育期:最常用的方法:醋酸洋紅法(將細(xì)胞核染成紅色)某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色:焙花青-鉻礬法,將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。從花藥的時(shí)期看:從花粉發(fā)育期看:從花蕾開程度看:選擇適宜的月季花藥初花期的花藥單核期的花粉完全未開放的花蕾2、材料的消毒花蕾(70%酒精)約30s(無菌水)清洗(無菌吸水紙)吸干水分(0.1%氯化汞溶液)(無菌水)沖洗提示:用于培育花藥的花蕾,外面有花萼、花瓣疼惜,通常處于無菌狀態(tài),所以只需將整個(gè)花蕾消毒即可。思索:月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒相比,二者有何不同?在酒精消毒前,花藥不須要預(yù)先用流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗。在無菌條件下除去花蕾的萼片和花瓣,取出花藥b、要徹底去除花絲取出花藥后立刻接種于培育基上,每瓶接種花藥7-10個(gè)。①剝?nèi)』ㄋ巃、盡量不損傷花藥②接種留意:3、接種和培育溫度限制在25℃左右,不須要光照。幼小植株形成后才須要光照。③培育培育20-30天后,花藥分裂形成愈傷組織或胚狀體若形成胚狀體:一個(gè)花藥會(huì)產(chǎn)生大量幼小植株,必需盡快將幼小植株分開,分別移植到新的培育基上。若形成愈傷組織:應(yīng)剛好將愈傷組織轉(zhuǎn)移到分化培育基上,以便進(jìn)一步分化出再生植株在花藥培育中,特殊是通過愈傷組織形成的花粉植株,染色體組的數(shù)目常常會(huì)發(fā)生變更。(主要緣由是養(yǎng)分核和生殖核融合造成的)4、鑒定和篩選菊花組織培育與月季花藥離體培育的比較比較項(xiàng)目菊花組織培養(yǎng)月季花藥離體培養(yǎng)原理植物激素染色體倍性的鑒定材料培養(yǎng)結(jié)果
細(xì)胞的全能性體細(xì)胞花藥(花粉)正常植株單倍體植株不必添加須要添加不須要須要Thanks!
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