動物病理生理學實驗設計之肝性黃疸

肝性黃疸組員：-查資料-制作-解說實驗目的實驗原理實驗方法56實驗器材與藥品實驗動物實驗結(jié)果預測實驗目的實驗原理實驗方法56實驗器材與藥品實驗動物實驗結(jié)果預測實驗目的·復制肝性黃疸病理模型·了解膽色素代謝的變化·觀察黃疸的表現(xiàn)實驗原理·黃疸（jaundice）:在正常的動物機體內(nèi)，膽紅素的生成、結(jié)合和排泄三個主要環(huán)節(jié)上保持著動態(tài)平衡，但當其中任何一個環(huán)節(jié)發(fā)生障礙，都會使膽紅素在血清中濃度升高，造成高膽紅素血癥，使機體的皮膚、粘膜、鞏膜、體液及實質(zhì)器官發(fā)生黃染的病理過程?！つ懠t素在肝內(nèi)的代謝過程，包括肝細胞對血液內(nèi)膽紅素的攝取、結(jié)合和排泄三個相互銜接的過程，由肝臟對膽色素的處理能力下降所引起的黃疸稱為肝性黃疸（hepaticjaundice），此類黃疸的發(fā)生于肝功能障礙有關?！ば律顾啬芤种艬GT（膽紅素葡萄糖醛基轉(zhuǎn)移酶）活性、阻礙酯化的進行，使肝細胞對膽紅素轉(zhuǎn)化障礙，導致（肝性）黃疸。實驗動物體重相仿的小白鼠2只·5ml注射器、試管、試管架、離心管、離心機、移液管、一般手術器材

·150mg新生霉素、生理鹽水、重氮試劑、95%酒精、各種濃度重鉻酸鉀溶液標準管實驗器材與藥品·實驗前處理及病理模型復制·實驗檢查實驗方法（1）實驗前兩天給小鼠禁水（2）實驗前一天將0.1g新生霉素溶100ml水中并將其加入實驗組小鼠的飲水，對照組小鼠回復正常飲水。

（3）實驗前一天將50mg新生霉素溶于5ml水中配成新生霉素溶液，給實驗組小鼠注射兩次，每次1ml，剩余保存留用。對照組小鼠注射等量的生理鹽水。

（4）給實驗小鼠注射1ml新生霉素溶液，造成肝細胞損傷。對照組小鼠注射等量的生理鹽水。

實驗前處理及病理模型復制（1）觀察記錄動物的一般狀態(tài)和鞏膜，口腔黏膜，耳及皮膚的顏色。

（2）摘除眼球采血1-1.5ml，放入干燥離心管內(nèi)，凝血后離心（2000/分），分離血清，進行膽紅素定性和黃疸指數(shù)檢查。

實驗檢查·原理

膽紅素與重氮試劑作用發(fā)生重氮反應，形成紅色的重氮膽紅素。因血漿中的結(jié)合膽紅素可以溶于水，與重氮試劑作用后呈現(xiàn)紅色，稱為直接反應陽性；游離膽紅素因不能與重氮試劑直接作用，故呈陰性反應，但加乙醇后游離膽紅素則能與重氮試劑作用，呈現(xiàn)陽性反應，稱為間接反應陽性。膽紅素定性一凡登白實驗·方法取血清0.2ml放入小試管內(nèi)，沿管壁加入新配制的重氮試劑0.5ml，立即計時和進行觀察。若在30s-10min內(nèi)試劑與血清交界處出現(xiàn)紫紅色環(huán)，為直接反應陽性；若經(jīng)10min仍不顯色，而加入95%酒精0.2ml后才顯色者，則為間接反應陽性。膽紅素定性一凡登白實驗·重氮試劑配制甲液：取對-氨苯磺酸1g，濃鹽酸15ml，加蒸餾水至1000ml。乙液：取50%亞硝酸鈉液（亞硝酸鈉25g，加蒸餾水至50ml時，置冰箱中保存）0.5ml，再加蒸餾水50ml，此液可用1周。臨用前，取甲液5ml，加乙液0.15ml混合，在3h內(nèi)有效。。膽紅素定性一凡登白實驗·原理血清黃色的深淺與膽紅素含量有關。臨床檢驗規(guī)定0.01%重鉻酸鉀溶液的色度作為黃疸指數(shù)1，將血清用生理鹽水稀釋，肉眼觀察其黃色深度與0.01%重鉻酸鉀溶液相當時，血清的稀釋倍數(shù)即為該血清的黃疸指數(shù)。

黃疸指數(shù)測定·方法取血清0.1ml置于小試管內(nèi)，所用試管應與標準管口徑及厚度一致，用1ml吸管吸取生理鹽水溶液稀釋血清，當與某一標準管的顏色相同時，計量所用生理鹽水毫升數(shù)，再按公式求出黃疸指數(shù)單位：

所用生理鹽水毫升數(shù)+0.1黃疸指數(shù)=×標準管單位0.1

黃疸指數(shù)測定·

黃疸指數(shù)標準管制備

0.1%重鉻酸鉀溶液：精確稱取重鉻酸鉀（A.R.）0.1g，置于100ml容量瓶內(nèi)，加蒸餾水約90ml使其溶解，加濃硫酸0.1ml，再加蒸餾水至100ml。取10ml試管10只，按下表操作：黃疸指數(shù)測定黃疸指數(shù)123456789100.1%重鉻酸鉀溶液（ml）12345678910蒸餾水（ml）9876543210各管混合后，分別吸取和裝入10只內(nèi)徑（不超過1cm）與厚度相同的無色的小試管內(nèi)，密封管口，標明黃疸指數(shù)，備用。（1）實驗組