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熒光定量PCR反應(yīng)體系配制原液
110-110-210-310-410-5每管預(yù)先加入90μl超純水10μl10μl10μl10μl10μl模板梯度稀釋反應(yīng)體系如下:蒸餾水8.5μl59.5μlSYBR?GreenRealtime
PCRMasterMix341F(50ng/μl)1μl7μl783R(50ng/μl)1μl7μl樣品溶液2μl分別加Total25μl12.5μl1個(gè)體系7個(gè)體系87.5μl
反應(yīng)程序:94℃1分鐘94℃30秒55℃30秒72℃30秒72℃5分鐘40個(gè)循環(huán)72℃到95℃,每升高0.5℃,檢測(cè)一次熒光信號(hào),繪制熔解曲線注意事項(xiàng):反應(yīng)體系在冰上
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