微生物基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)

微生物基礎(chǔ)知識(shí)一、微生物簡(jiǎn)介二、微生物的分布三、微生物的作用及危害四、微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)五、微生物污染及消毒滅菌六、GMP與微生物一、微生物簡(jiǎn)介1、微生物的定義（microorganism,microbe）:

微生物是存在于自然界中的個(gè)體微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼看不見(jiàn)，必須借助于顯微鏡才能看清它們外形的一群低等的、原始的微小生物，如細(xì)菌。2、微生物的分類按其結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成可分為:★原核類:僅有原始核質(zhì)，無(wú)核仁或核膜，細(xì)胞器很不完善。如細(xì)菌、放線菌、支原體、立克次氏體。

★真核類:細(xì)胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體，細(xì)胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌）、原生動(dòng)物、藻類★非細(xì)胞類:體積微小，能通過(guò)除菌過(guò)濾器。如病毒和朊病毒按其致病性可分為:★病原性微生物：有致病性★非病原性微生物：無(wú)致病性3.微生物的五大特點(diǎn)：①個(gè)體小，面積大：小于0.1mm。肉眼不可見(jiàn)。②分布廣,種類多（10萬(wàn)多種）

：自然界中到處都有，如水、空氣、土壤等,

土壤中的數(shù)量最多。③代謝強(qiáng)，轉(zhuǎn)化快：發(fā)酵乳糖的細(xì)菌在1小時(shí)內(nèi)可分解其自重1000～10000倍的乳糖；產(chǎn)朊假絲酵母合成蛋白質(zhì)的能力比食用公牛強(qiáng)10萬(wàn)倍④生長(zhǎng)旺，繁殖快：微生物有驚人的繁殖速度，大多數(shù)微生物幾十分鐘內(nèi)就可以繁殖一代⑤適應(yīng)性強(qiáng)，易變異（耐藥性產(chǎn)生的原因）二、微生物的分布1.微生物在自然界的分布：土壤：是微生物生活的最適環(huán)境，土壤中的微生物又可分為如下幾類：

細(xì)菌：占土壤微生物總數(shù)的70%~90%。

放線菌：占土壤中微生物含量的5%~30%。

霉菌：主要生活在靠近地面的土壤中，在通氣良好的土壤中，霉菌數(shù)量很多。

酵母菌：普通土壤中酵母菌含量很少。水：僅次于土壤的微生物分布、定居的第二場(chǎng)所，90%為革蘭氏陰性菌，主要有假單胞菌、黃桿菌等?？諝猓嚎諝庵械奈⑸镏饕獊?lái)源于帶有微生物菌體及孢子的灰塵（這類微生物大多數(shù)是腐生性的，）還來(lái)源于人和動(dòng)物，它們大多數(shù)是通過(guò)呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，懸浮在大氣中。2.微生物在人體中的分布：在正常人體皮膚、粘膜及外界相通的各種腔道（如口腔、鼻咽腔、腸道和泌尿道）等部位，存在著對(duì)人體無(wú)害的微生物群.

部位

常見(jiàn)菌種皮膚

表皮葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌、綠膿桿菌、恥垢桿菌等口腔

鏈球菌（甲型或乙型）、乳酸桿菌、螺旋體、梭形桿菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏

球菌、類白喉?xiàng)U菌胃

正常一般無(wú)菌腸道

類桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、厭氧性鏈球菌、糞鏈球

菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸桿菌、變形桿菌、破

傷風(fēng)桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌等鼻咽腔

甲型鏈球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感桿菌、乙型鏈

球菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等眼結(jié)膜

皮表葡萄球菌、結(jié)膜干燥桿菌、類白喉?xiàng)U菌等人體中的微生物三、微生物的作用及危害

1.微生物的作用絕大多數(shù)微生物對(duì)人和動(dòng)物是有益的。微生物已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、釀造、化工、制革、石油等行業(yè)，發(fā)揮了越來(lái)越重要的作用。例如與我們?nèi)粘Ｉ蠲芮邢嚓P(guān)的如酸奶、酒類、抗生素、疫苗等。2.微生物的危害微生物中也有一部分能引起人及動(dòng)、植物發(fā)生病害，如人類的許多傳染病，如傷寒、結(jié)核、病毒性肝炎，鼠疫等。從藥品生產(chǎn)的而言，微生物對(duì)藥品的原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品的污染是造成生產(chǎn)失敗、成品不合格的重要因素。

四、微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)

（一）、細(xì)菌

細(xì)菌是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌，以二分裂方式無(wú)性繁殖的原核微生物，分布廣泛。細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)

（1）球菌多數(shù)球菌直徑在1微米左右，外觀呈球形或近似球形。常見(jiàn)的有雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等。（2）桿菌形態(tài)多數(shù)呈直桿狀，也有的菌體稍彎，多數(shù)呈分散存在，也有的呈鏈狀排列，分為棒狀桿菌、鏈狀桿菌、球桿菌等。（3）螺形菌菌體彎曲，呈弧形或螺旋形。如幽門螺桿菌。

細(xì)菌雖小，仍具有一定的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)是細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)。

葡萄球菌

乳酸桿菌

淡水中的螺旋菌大腸菌群大腸菌群為人和動(dòng)物腸道中的常居菌，在一定條件下可引起腸道外感染。生存環(huán)境大腸菌群在自然界中分布廣泛，在15—46℃均可生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)溫度為37℃。在水和土壤中大量存在，對(duì)自然環(huán)境有較強(qiáng)的抵抗力。主要污染的食品是肉類、水產(chǎn)品、蔬菜等。85℃熱水1~3分鐘滅菌。300ppm次氯酸納溶液1~3分鐘內(nèi)殺滅本菌。

大腸桿菌金黃色葡萄球菌在自然界中分布廣泛，空氣、水、地面、物體表面、人和動(dòng)物的體表、粘膜等處均有存在。食品藥品中生長(zhǎng)有金黃色葡萄球菌，是食品藥品衛(wèi)生的一種潛在危險(xiǎn)，因?yàn)榻瘘S色葡萄球菌可以產(chǎn)生腸毒素，食后能引起食品中毒。金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌

繁殖條件

金黃色葡萄球菌能在12~45℃生長(zhǎng)繁殖，最適生長(zhǎng)溫度為37℃，特征

傷口化膿的地方、口、鼻子等處繁殖；污染來(lái)源于手指的可能性很高；產(chǎn)生的毒素，非常耐熱；預(yù)防：

手指處有傷口、化膿口的人，不要直接接觸產(chǎn)品；徹底對(duì)手指進(jìn)行洗凈消毒，佩戴手套，要戴帽子、戴口罩；殺滅條件加熱80℃30分鐘才能殺死，煮沸可迅速使它死亡金黃色葡萄球菌沙門氏菌沙門氏菌常在動(dòng)物中廣泛傳播，人的沙門氏菌感染也非常普遍。世界上沙門氏菌的食物中毒占首位，因此，檢查食品藥品中的沙門氏菌非常重要。生存環(huán)境

沙門氏菌在水中不易繁殖，但可生存2—3周，冰箱中可生存3—4個(gè)月，在—25℃可存活10個(gè)月，在自然環(huán)境的糞便中可存活1—2個(gè)月。繁殖條件沙門氏菌最適繁殖溫度為37℃，在20℃以上即能大量繁殖，因此，低溫儲(chǔ)存食品是一項(xiàng)重要預(yù)防措施。污染渠道沙門氏菌的來(lái)源主要是患病的人和動(dòng)物，及人和動(dòng)物的帶菌者，其中在肉類中最為多見(jiàn)。殺滅條件沙門氏菌對(duì)熱及外界環(huán)境的抵抗力屬于中等，

60℃20—30分鐘

75℃5分鐘即被殺死，

100℃立即被殺死。沙門氏菌沙門志賀菌（二）、真菌真菌是一類有細(xì)胞壁，無(wú)葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數(shù)為單細(xì)胞，多數(shù)為多細(xì)胞，能進(jìn)行無(wú)性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生物。真菌包括單細(xì)胞與多細(xì)胞兩類。單細(xì)胞真菌呈圓形或卵圓形，稱為酵母菌；多細(xì)胞真菌由菌絲和孢子組成，并交織成團(tuán)，稱絲狀菌或霉菌。真菌生長(zhǎng)的最適的溫度為22～28℃，最適的pH值為4～6。其繁殖能力強(qiáng)，但生長(zhǎng)速度比細(xì)菌慢，常需1-4周才形成菌落。真菌對(duì)熱的抵抗力不強(qiáng)，一般加熱60~70℃1小時(shí)即被殺死，但對(duì)干燥、日光、紫外線和一些化學(xué)消毒劑有抵抗力，但對(duì)2.5％碘酒、10％甲醛則較敏感。霉菌各種病原真菌的菌落青霉的菌落青霉的菌落酵母鏡檢圖片（三）、病毒病毒屬非細(xì)胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，可在人、動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的微生物，它僅有一種核酸（DNA或RNA）作其遺傳物質(zhì)。病毒必須在宿主活細(xì)胞內(nèi)寄生，依靠細(xì)胞提供的能量、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及生物大分子合成機(jī)制，完成病毒的復(fù)制過(guò)程。病毒與人類的關(guān)系極為密切，人類的傳染病約75％是由病毒引起的。有些病毒傳染性強(qiáng)，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。病毒五、微生物污染及消毒滅菌1.藥品微生物污染：藥品微生物污染：微生物的產(chǎn)生、附著而給藥品帶來(lái)不良影響。藥品的微生物污染也稱染菌。污染藥品的細(xì)菌：常見(jiàn)污染藥品的細(xì)菌是一些生命力較強(qiáng)的細(xì)菌，如：葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、枯草桿菌及一些霉菌，抵抗力弱的細(xì)菌一般不易造成污染。藥品的微生物污染源：空氣、水、廠房與設(shè)備、藥品生產(chǎn)用原輔料、包裝材料、昆蟲(chóng)、生產(chǎn)操作人員等2.消毒與滅菌消毒：殺死物體上病源微生物的方法，并不一定能殺死細(xì)菌的芽胞。消毒所用的試劑稱為消毒劑。滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細(xì)菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌：抑制體內(nèi)或體外細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖。常用的抑菌劑為各種抗生素，可抑制細(xì)菌的繁殖。防腐：防止或抑制體外細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法，細(xì)菌一般不死亡。同一種化學(xué)藥品在高濃度時(shí)為消毒劑，低濃度時(shí)常為防腐劑。無(wú)菌：不存在活的細(xì)菌。防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)，為無(wú)菌操作。3、常用的消毒滅菌法：物理滅菌法和化學(xué)消毒法物理滅菌方法熱力滅菌法輻射殺菌法濾過(guò)除菌法超聲波殺菌法干燥與低溫抑菌法熱力滅菌法：使蛋白質(zhì)、酶及核酸永久性破環(huán)，細(xì)胞膜溶解，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的死亡。①干熱滅菌法：采用灼燒或干熱空氣滅菌。常用方式是把待滅菌的物品均勻的放入烘箱，升溫至160℃，恒溫1h。此方法適合玻璃皿，金屬用具的滅菌。②濕熱滅菌法—利用熱蒸汽殺死微生物。相同條件下，濕熱滅菌效果比干熱滅菌效果好。這是因?yàn)橐环矫婕?xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)含水量高，容易變性，另一方面高溫水蒸氣對(duì)蛋白質(zhì)有高度的穿透力，從而加速蛋白質(zhì)變性，死亡。高壓蒸汽滅菌：濕熱滅菌法的一種。高壓蒸汽滅菌是最可靠、最適用、最廣泛的滅菌方法。

輻射滅菌法：是采用輻射進(jìn)行滅菌消毒。包括可見(jiàn)光、紅外線、紫外線、X射線和γ射線等。紫外線：波長(zhǎng)200-300nm的紫外線具有殺菌作用，265~266nm波段殺菌能力最前。紫外線穿透物質(zhì)的能力差，一般用于空氣及物體表面消毒。電離輻射：高速電子、X射線、γ射線，適用于不耐熱物品的滅菌，常用于藥品和醫(yī)療用品的滅菌。微波：波長(zhǎng)1mm~1m。濾過(guò)除菌法用物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌除去,以達(dá)到除菌目的。濾菌器含有微細(xì)小孔≤0.22微米,只允許液體或氣體通過(guò),而大于孔徑的細(xì)菌等顆粒不能通過(guò)。適用范圍：血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌?；瘜W(xué)消毒法法：一般化學(xué)藥劑無(wú)法殺死所有的微生物，而只能殺死其中的病原微生物，所以是消毒的作用，而不是滅菌的作用。消毒劑：能迅速殺滅病原微生物的藥物。防腐劑：能抑制或阻止微生物生長(zhǎng)繁殖的藥物。消毒劑、防腐劑沒(méi)有選擇性，對(duì)一切活細(xì)胞都有毒性，不僅能殺死或抑制病原微生物，而且對(duì)人體組織細(xì)胞也有損傷作用，所以常用于器械，體表、環(huán)境的消毒。常用的化學(xué)消毒劑有：來(lái)蘇水、碘酒、酒精等類別作用機(jī)制常用種類用途酚類蛋白變性，細(xì)胞膜損傷石炭酸地面、器具表面、皮膚消毒醇類蛋白變性75％酒精皮膚、體溫計(jì)消毒氧化劑氧化、蛋白沉淀二氧化氯地面、器具表面、皮膚消毒過(guò)氧乙酸、碘酒塑料、玻璃器材、皮膚消毒重金屬鹽氧化、蛋白酶變性紅汞、硫柳汞皮膚、粘膜、小創(chuàng)傷消毒表面活性劑蛋白變性細(xì)胞膜損傷0.1％新潔爾滅地面、器具表面、皮膚消毒

化學(xué)滅菌法常用消毒劑種類和用途：在藥品生產(chǎn)中，由于受到各種要素（制藥廠房環(huán)境的空氣、制藥用水、操作人員、物料、設(shè)備等）的影響，都可能導(dǎo)致藥品的微生物污染。因此，GMP對(duì)各種要素都提出了防止污染的基本要求。中國(guó)藥典微生物限度檢查法規(guī)定的檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)和控制菌檢查。防止微生物污染的措施：①了解污染源、杜絕污染途徑②潔凈區(qū)潔凈技術(shù)的的應(yīng)用及衛(wèi)生管理③制藥用水的質(zhì)量控制④進(jìn)行微生物限度檢查，控制藥品質(zhì)量六、GMP與微生物傳播污染的五大媒介空氣水表面人物料傳播污染的五大媒介－空氣

空氣：空氣并不是產(chǎn)生污染的介質(zhì)，但它是污染的危險(xiǎn)攜帶者。充滿微生物的塵埃和水滴就是通過(guò)空氣作為侵襲我們產(chǎn)品的媒介而成為重要的污染源的。當(dāng)我們談話、咳嗽和打噴嚏時(shí)，被污染了的水滴正是不斷地從我們的呼吸道中放入我們的工作場(chǎng)所。塵埃微粒正是通過(guò)空氣流不間斷地在我們整個(gè)藥廠范圍循環(huán)運(yùn)行著。在藥品生產(chǎn)中，減少空氣中微生物數(shù)量的方法有多種，常用的有以下3種方法：①空氣潔凈技術(shù)采用的過(guò)濾方法過(guò)濾是最常用的方法。過(guò)濾介質(zhì)種類很多，例如：纖維素、玻璃棉或人造纖維等?？諝鈨艋b置可用于整個(gè)房間如無(wú)菌操作室，也可只限于操作區(qū)域局部如超凈工作臺(tái)。②化學(xué)消毒方法采用消毒劑作用于室內(nèi)空氣和物體表面。③紫外線照射方法采用紫外線對(duì)室內(nèi)空氣進(jìn)行照射。傳播污染的五大媒介－水

水：從理論上來(lái)講，微生物在純水中是不能生長(zhǎng)的。但是，所有的各類水，不管怎樣仔細(xì)地蒸溜或過(guò)濾，總會(huì)含有一定量的可溶性有機(jī)物和鹽類。正是這些可溶性的物質(zhì)可被微生物利用作為它們生長(zhǎng)的養(yǎng)料源泉。在生產(chǎn)過(guò)程中，水是應(yīng)用最廣泛的原料之一。這就是為什么我們藥廠的衛(wèi)生規(guī)程不僅必須仔細(xì)地控制用于生產(chǎn)過(guò)程的水，而且要控制好如何正確地用水來(lái)清洗我們的設(shè)備。

傳播污染的五大媒介－表面

表面包括：天花板、墻壁、地面、設(shè)備、容器、工具或桌子；由于空氣中的濕度，所有表面都包上一層含水的薄膜。這層薄膜由于靜電吸引而飽含塵埃微粒，有很多時(shí)候，表面還覆蓋一層油狀物質(zhì)，此層油膜易受到塵粒污染。表面因塵埃微粒和微生物由空氣傳播的回降而受到污染。

制藥企業(yè)生產(chǎn)車間的廠房，庫(kù)房及實(shí)驗(yàn)室都必須清潔整齊。建筑物表面不透水，光滑平整、無(wú)裂縫、接口嚴(yán)密、無(wú)顆粒物脫落，并能耐受清洗和消毒。設(shè)備、管道應(yīng)易于拆卸、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，便于清潔消毒。特別是藥品生產(chǎn)過(guò)程中使用的容器，包括內(nèi)包裝容器，都應(yīng)進(jìn)行清洗和消毒。傳播污染的五大媒介－人

人員的發(fā)菌量潔凈室內(nèi)當(dāng)工作人員穿無(wú)菌服時(shí)，靜止時(shí)的發(fā)菌量為10～300cfu/(min·人)，軀體一般活動(dòng)時(shí)的發(fā)菌量為150～1000cfu(min·人)，快步行走時(shí)的發(fā)菌量為900～2500cfu(min·人)；穿平常衣服時(shí)發(fā)菌量為3300～62000cfu(min·人)；有口罩發(fā)菌量：無(wú)口罩發(fā)菌量為(1:7)～(1:14)；咳嗽一次的發(fā)菌量為70～700cfu，噴嚏一次的發(fā)菌量為4000～60000cfu。人員污染的途徑1、人的頭發(fā)和皮膚2、水滴3、衣著4、化妝品和珠寶手