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PAGEPAGE4微生物檢測中常用滅菌和消毒方法消毒和滅菌兩個詞在實際使用中常被混用,其實它們的含義是有所不同的。消毒是指應用消毒劑等方法殺滅物體表面和內(nèi)部的病原菌營養(yǎng)體的方法,而滅菌是指用物理和化學方法殺死物體表面和內(nèi)部的所有微生物,使之呈無菌狀態(tài)。物理方法溫度:利用溫度進行滅菌、消毒或防腐,是最常用而又方便有效的方法。高溫可使微生物細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和酶類發(fā)生變性而失活,從而起滅菌作用,低溫通常起抑菌作用。a.利用火焰直接把微生物燒死。此法徹底可靠,滅菌迅速,但易焚毀物品,所以使用范圍有限,只適合于接種針、環(huán)、試管口及不能用的污染物品或?qū)嶒瀯游锏氖w等的滅菌。b.干熱空氣滅菌法:這是實驗室中常用的一種方法,即把待滅菌的物品均勻地放入烘箱中,升溫至160℃,恒溫1小時即可。此法適用于玻璃皿、金屬用具等的滅菌。濕熱滅菌法:在同樣的溫度下,濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好,這是因為一方面細胞內(nèi)蛋白質(zhì)含水量高,容易變性。另一方面高溫水蒸汽對蛋白質(zhì)有高度的穿透力,從而,加速蛋白質(zhì)變性而迅速死亡。巴氏消毒法:有些食物會因高溫破壞營養(yǎng)成分或影響質(zhì)量,如,牛奶、醬油、啤酒等,所以只能用較低的溫度來殺死其中的病原微生物,這樣既保持食物的營養(yǎng)和風味,又進行了消毒,保證了食品衛(wèi)生。該法一般在62℃,30分鐘即可達到消毒目的。此法為法國微生物學家巴斯德首創(chuàng),故名為巴氏消毒法。煮沸消毒法:直接將要消毒的物品放入清水中,煮沸15分鐘,即可殺死細菌的全部營養(yǎng)和1%2%毛巾及解剖用具的消毒。間歇滅菌法:上述兩種方法在常壓下,只能起到消毒作用,而很難做到完全無菌。若采用間歇滅菌的方法,就能殺滅物品中所有的微生物。具體做法是:將待滅菌的物品加熱100℃,15——3037℃2的。此法不需加壓滅菌鍋,適于推廣,但操作麻煩,所需時間長。加壓蒸汽滅菌法:這是發(fā)酵工業(yè)、醫(yī)療保健、食品檢測和微生物學實驗室中最常用的一種滅菌方法。它適用于各種耐熱、體積大的培養(yǎng)基的滅菌,也適用于玻璃器皿、工作服等物品的滅菌。加壓蒸汽滅菌是把待滅菌的物品放在一個可密閉的加壓蒸汽滅菌鍋中進行的,以大量蒸汽使其中壓力升高。由于蒸汽壓的上升,水的沸點也隨之提高。在蒸汽1.055/2121℃微生物(包括:芽孢)在15——20在加壓蒸汽滅菌中,要引起注意的一個問題是,在恒壓之前,一定要排盡滅菌鍋中的冷空氣,否則表上的蒸汽壓與蒸汽溫度之間不具對應關(guān)系,這樣會大大降低滅菌效果。影響滅菌的因素:不同的微生物或同種微生物的不同菌齡對高溫的敏感性不同。多數(shù)微生物121℃,12微生物的數(shù)量多少顯然會影響滅菌的效果,數(shù)量越多,熱死時間越長。c在,則提高抗熱性,pH7的鹽類可能對滅菌產(chǎn)生不同的影響;固體培養(yǎng)基要比液體培養(yǎng)基滅菌時間長。滅菌對培養(yǎng)基成分的影響:a.pH值普遍下降。b.產(chǎn)生混濁或沉淀,這主要是由于一些離子發(fā)生化學反應而產(chǎn)生混濁或沉淀。例如,Ca2+與PO4-3化合,就會產(chǎn)生磷酸鈣沉淀。c.不少培養(yǎng)基顏色加深。d.體積和濃度有所變化。e.輻射利用輻射進行滅菌消毒,可以避免高溫滅菌或化學藥劑消毒的缺點,所以應用越來越廣,目前主要應用在以下幾個方面:接種室、手術(shù)室、食品、藥物包裝室常應用紫外線殺菌。β,γ品,因大量微生物被殺滅,再用冷凍保藏,可使保存期延長。過濾采用機械方法,設(shè)計一種濾孔比細菌還小的篩子,做成各種過濾器。通過過濾,只讓液體培養(yǎng)基從篩子中流下,而把各種微生物菌體留在篩子上面,從而達到除菌的目的。這種滅菌方法適用于一些對熱不穩(wěn)定的體積小

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