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尿液干化學(xué)檢測(cè)(一)檢驗(yàn)?zāi)康囊约霸u(píng)估健康狀態(tài)。(二)測(cè)定方法以及體系pH值等??焖倜舾械母苫瘜W(xué)試帶技術(shù)和自動(dòng)化分析技術(shù)在尿液檢查中得到普遍應(yīng)用(三)檢測(cè)原理及干擾因素半定量檢測(cè)。葡萄糖檢測(cè)8.8mml/L[O干擾因素:本實(shí)驗(yàn)對(duì)葡萄糖豹檢測(cè)是特異性的,大量維生素c高比重堿性尿,亦可造成糖檢出偏低,使低糖濃度尿呈陰性。膽紅素檢測(cè)原理:直接膽紅素在酸性條件下與二氯苯胺重氮鹽偶聯(lián),生成偶氮染料。干擾因素:標(biāo)本必須新鮮,以免膽紅素在陽光照射下成為膽綠素;尿液中含高濃度維生素C3.酮體檢測(cè)原理:乙酰乙酸、丙酮在堿性條件下與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng).生成紫紅色化合物。干擾因素:尿液必須新鮮,及時(shí)送檢.以免因酮體的揮發(fā)或分解出現(xiàn)假陰性結(jié)果和結(jié)果偏低;4.比重檢測(cè)(MXMNa干擾因素:當(dāng)尿中含有蛋白質(zhì)(1g/L一7.5g/L)時(shí)可使比重讀數(shù)偏高。5.潛血檢測(cè)成鄰甲聯(lián)苯胺,出現(xiàn)顏色變化。干擾因素:檢法有差異;(3)大量維生素c酸堿度:采用酸堿指示劑法(1)原理:尿液酸度即尿的pH食的條件下尿液pH46~8。pHpHpH值近似值。干化學(xué)試帶的測(cè)試模塊中含甲基紅和溴麝香草酚藍(lán),兩種指示劑適量配合可測(cè)試尿液酸堿度。(2pHpH值較低,而進(jìn)食蔬菜多時(shí)尿pH6泌多量鹽酸以助于消化,為保證有足夠的氫離子,和氯離子進(jìn)入消化液,則尿液泌H-減少和cL-的重吸收增加,而使尿pH變慢,體內(nèi)酸性代謝產(chǎn)物可使尿pHpH值。細(xì)菌繁殖尿樣可影響pHpH10。表10影響尿液pH值常見因素表影響因素酸性尿液堿性尿液腎功能腎小球?yàn)V過增加,腎小管保堿能力正常腎小球?yàn)V過正常,腎小管保存堿能力喪失食物肉類含硫、磷及混合性食物蔬菜、水果、含鉀、鈉生理活動(dòng)劇烈運(yùn)動(dòng)、大汗、應(yīng)激狀態(tài)、饑餓飯后、消化高潮疾病酸中毒、腎炎、糖尿病、饑餓狀態(tài)、尿堿中毒、膀胱炎、腎盂腎炎、尿路草酸鹽、酸鹽或胱氨酸結(jié)石磷酸鹽或碳酸鹽結(jié)石藥物氯經(jīng)鈣、氯化銨、氯化鉀、稀鹽酸等小蘇打、碳酸鉀、碳酸鎂、枸櫞酸鈉、酵母制劑等其他尿內(nèi)含酸性磷酸鹽尿內(nèi)混入多量膿、血、細(xì)菌污染、分解尿素等方法學(xué)評(píng)價(jià)。目前多采用甲基紅與溴麝香草酚藍(lán)適量配合制成pH值試紙墊,以儀器自動(dòng)化檢測(cè).來反映尿pH值為5~9的變異范圍,基本能滿足臨床對(duì)尿pH值測(cè)定的需要。蛋白質(zhì)檢測(cè)pHpHpH同批號(hào)試劑帶顯色有差異,因此應(yīng)強(qiáng)調(diào)采用經(jīng)嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化的試帶。干擾因素:對(duì)于高度緩沖的堿性尿.有可能得到假58.尿膽原檢測(cè)原理:尿膽原在強(qiáng)酸性條件下,與重氮鹽偶聯(lián)生成紫紅色染料。干擾因素:尿液中一些內(nèi)源性物質(zhì)如膽色素原、吲哚、膽紅素等可使尿膽原檢查結(jié)果出現(xiàn)假陽性;亞硝酸鹽檢測(cè)3素影響:干擾因素:(2)食物中是否含有硝酸鹽;(34反之可能呈陰性結(jié)果。標(biāo)本放置過久或污染細(xì)菌可呈假陽性。白細(xì)胞檢測(cè)原理:采用白細(xì)胞酯酶法。吡咯酚酯在中性粒細(xì)胞中酯酶的水解作用下,產(chǎn)生游離酚,游離酚與苯基重氮鹽偶聯(lián),生成紫紅色偶氮染料。干擾因素(2)此法只能測(cè)中性粒細(xì)胞,不能與單核細(xì)胞等反應(yīng)。尿液中污染甲醛或含有高濃度膽紅素或使用某些藥物時(shí),可產(chǎn)生陰性結(jié)果。的測(cè)試結(jié)果60mg/d1(5mg/d1)也可能出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。抗壞血酸檢測(cè)原理:采用還原法??箟难峋哂?,2一烯二醇還原性基團(tuán),在堿性條件巾,將氧化態(tài)藍(lán)色的2,6一二氯酚靛酚染料還原為無色的2,6一二氯二對(duì)酚胺。干擾因素:當(dāng)尿中含有氧化劑時(shí)(如高錳酸鉀、次氯酸鹽等)會(huì)影響本檢驗(yàn)的靈敏度(見表。檢測(cè)項(xiàng)目檢測(cè)項(xiàng)目反應(yīng)原理靈敏度參考范圍干擾因素假陽性假陰性標(biāo)本久置后,細(xì)菌繁殖或CO2丟失,pH值↑試帶浸尿時(shí)間過長,pH↓pHpH3,高濃度青霉素,聚乙烯吡咯酮等藥物,季 高鹽,球蛋白、本周蛋銨類消毒劑 等非電解質(zhì)蛋白葡萄糖(GLU)葡萄糖氧化酶法250mg/L陰性過氧化物、強(qiáng)氧化劑污染VitC、乙酰乙酸,L-多pH酸堿度(pH值)酸堿指示劑法4.5~9.0對(duì)白蛋白敏感4.6~8.0蛋白pH值指示劑蛋(70~100mg/L),對(duì)陰(PRO)白質(zhì)誤差法球蛋白、黏蛋白、本周蛋白敏感性差性乙酰乙酸:50~100mg/L;酮體亞硝酸基鐵氰丙酮:400~陰(KET)化鈉法700mg/L;與性β-羥丁酸不反應(yīng)酶法性呋喃類藥蛋白、慶大霉素1.0多聚電解質(zhì)中H+03解離量與離子 1.010~1.030~電解質(zhì)性尿蛋白致SG↑堿性尿致SG↓濃度相關(guān)1.03苯丙酮、L-多巴代謝物苯丙酮、L-多巴代謝物β舊尿隱血過氧化物酶法(BLD)Hb0.3~0.5mg/L;RBC<10/ul陰性肌紅蛋白、易熱性觸酶、氧化劑和菌尿VitC、蛋白尿、糖尿膽紅素(BIL)偶氮法5mg/L尿膽原(UBG)偶氮法或Ehrich10mg/L陰性陰性或弱陽性吩噻嗪類藥物VitC、亞硝酸鹽、光照膽紅素、吲哚亞硝酸鹽、光照、重氮藥物亞硝酸鹽(NIT)偶氮法0.5~0.6mg/L陰性陳舊尿、亞硝酸鹽或偶氮試劑污染、食物硝酸鹽含量豐富pH5,尿量過多、食物硝酸鹽含量過低、尿在膀胱內(nèi)停留<4小時(shí)、非含硝酸鹽還原酶細(xì)菌感染、VitC、亞硝酸鹽白細(xì)胞(LEU/WBC)中性粒細(xì)胞酯陰甲醛、氧化劑、膽紅素、以淋巴或單核細(xì)胞為主、25ul比密(SG)維生素C(VitC)酸性環(huán)境中還原染料50mg/L陰性巰基化合物、胱氨酸、內(nèi)源性酚堿性尿標(biāo)本采集:見標(biāo)本采集手冊(cè)。210ml2(五)設(shè)備和試劑設(shè)備。尿液分析儀,尿液分析儀通常由機(jī)械系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、電路系統(tǒng)三部分組成。試劑。與尿液分析儀配套試紙條,在25±5℃干燥環(huán)境內(nèi)貯存。試帶以濾紙為載體,將各種括碘酸鹽層和試劑層,碘酸鹽層可破壞Vitc等干擾物質(zhì),試劑層與尿液所測(cè)定物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反最后一層選取尿液不浸潤的塑料片作為支持體。有些試帶無碘酸鹽層,但相應(yīng)增加了1塊檢測(cè)Vitc的試劑塊,以進(jìn)行某些項(xiàng)目的校正。不同型號(hào)的尿液分析儀使用其配套的專用試帶。且測(cè)試項(xiàng)目試劑塊的排列順序是不相同的在。8℃(2)每周對(duì)尿液分析儀做維護(hù)保養(yǎng)。(3)每月應(yīng)進(jìn)行尿液分析儀之間比對(duì),取當(dāng)日新鮮尿液陽性標(biāo)本4比對(duì)報(bào)告留檔。(六)檢測(cè)步驟(18~25℃),干),用尿液分析儀測(cè)試。儀器操作步驟見使用說明書.原始測(cè)定數(shù)據(jù)應(yīng)粘貼留檔保存。審核者。(七)結(jié)果報(bào)告(八)注意事項(xiàng)不得使用超過效期或變質(zhì)的試紙條;試紙的變質(zhì)會(huì)使反應(yīng)區(qū)的顏色變淺或變深。能使用一次。為保護(hù)試劑的反應(yīng)活性必須隔絕周圍環(huán)境中的潮氣、光和熱。不要觸摸試紙條的反應(yīng)區(qū),避免陽光直射。狀態(tài)、人員操作等,糾正后,室內(nèi)質(zhì)控合格,方可檢測(cè)臨床標(biāo)本。(九)質(zhì)量控制分析前的質(zhì)量控制正確留取標(biāo)本,并在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)進(jìn)檢,運(yùn)輸時(shí)應(yīng)避免陽光直射。vitc等);標(biāo)本久置,葡萄糖被細(xì)菌或細(xì)胞酶分解,可引起假陰性。了解檢驗(yàn)對(duì)象可能影響尿化學(xué)檢測(cè)的進(jìn)食及使用藥物的情況。2腐劑并冷藏保存。注意準(zhǔn)確有效地標(biāo)記尿標(biāo)本。分析中的質(zhì)量控制(1)用尿液質(zhì)控品(陰性和陽性)監(jiān)控儀器的工作狀態(tài);(2)嚴(yán)格、規(guī)范、正確的實(shí)驗(yàn)操作;(3)應(yīng)使用與尿液分析儀配套的專用試帶,注意試帶的效期,注意防潮,避免變色后干擾實(shí)驗(yàn)。分析后的質(zhì)量控制分析檢驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)性,如有不符應(yīng)及時(shí)復(fù)檢,如表12表12檢驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)性分析化學(xué)分析結(jié)果潛血陰性潛血陽性WBC陽性
鏡檢結(jié)果RBCWBCRBCWBCRBC
可能原因藥物或其他物質(zhì)RBC破碎藥物干擾或慢性炎癥其他物質(zhì)干擾出現(xiàn)假陽性其他物質(zhì)干擾出現(xiàn)假陰性有關(guān)而造成的假陽性。糖尿病檢驗(yàn)對(duì)象尿糖檢測(cè)陰性,而VitC含量很高,會(huì)出現(xiàn)假陰性。檢測(cè)結(jié)果有異議時(shí)應(yīng)了解檢驗(yàn)對(duì)象可能影響尿化學(xué)檢測(cè)的進(jìn)食和用藥情況。尿化學(xué)分析結(jié)果與鏡檢不一致,應(yīng)進(jìn)一步查明原因。參考范圍的認(rèn)可:尿干化學(xué)分析儀檢測(cè)白細(xì)胞、紅細(xì)胞出現(xiàn)“假陰性”時(shí),應(yīng)以鏡檢為準(zhǔn);c(十)生物參考區(qū)間及臨床意義pH值:隨機(jī)尿pH4.6~8.0,正常尿液可呈弱酸性。肉食者多為酸性.蔬菜水果2.比重:成人:1.003l.030;新生兒:l.002~l.004。時(shí)比重增高,常見于糖尿病;有價(jià)值,慢性腎功能不全呈低比重尿。炎、尿道炎等;急性腎小球腎炎也可出現(xiàn)短期的白細(xì)胞尿。腎結(jié)核、腫瘤,腎移植后有排斥反應(yīng)者,成年婦女生殖系統(tǒng)有炎癥時(shí)都可出現(xiàn)白細(xì)胞。潛血:陰性。增加常見于腎小球腎炎、泌尿系結(jié)石、結(jié)核或惡性腫瘤。蛋白質(zhì):陰性。病理性蛋白尿:可分為腎前性、腎性及腎后性蛋白尿。道的炎癥、腫瘤、結(jié)石等。亞硝酸鹽:陰性。陽性多見于由大腸埃希菌引起的尿路感染。糖及精神激動(dòng)等也可致陽性反應(yīng)。服用大量維生素c尿酮體:陰性。正常尿液中不含酮體;嚴(yán)重未治療的糖尿病檢驗(yàn)對(duì)象可呈強(qiáng)陽性反應(yīng);妊?劇吐、長期饑餓、營養(yǎng)不良、劇烈運(yùn)動(dòng)后也可呈陽性反應(yīng)。對(duì)象的尿中,一般不見膽紅素。20性黃疸。屎膽原增加常見于溶血性疾患及肝實(shí)
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