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文檔簡介
實驗六細胞吞噬活動的觀察實驗目的(1)通過觀察小鼠巨噬細胞吞噬紅細胞的實驗,了解巨噬細胞對異物吞噬的原理和功能。(2)了解吞噬在機體非特異免疫中的重要作用。(3)掌握小鼠腹腔注射給藥和脫頸椎處死方法。
實驗原理
高等動物體內的巨噬細胞、單核細胞和嗜中性粒細胞,具有吞噬的功能。當病原微生物或其他異物侵入機體時,能招引巨噬細胞,而巨噬細胞又具有趨化性,它通過產生活躍的變形運動,主動向病原體和異物移行聚集,首先把異物吸附在細胞表面,隨之,吸附區(qū)域的細胞膜向內凹陷,伸出偽足包圍異物,并吞入胞質,形成吞噬泡,繼而在細胞質中的初級溶酶體與吞噬泡融合,形成吞噬溶酶體,把病原體殺死,異物消化分解。實驗用品和材料(一)儀器、用具顯微鏡、解剖盤、解剖剪、1ml注射器、吸管、載玻片、蓋玻片(二)材料小鼠(體重20g左右),1%蟾蜍血懸液(三)試劑
6%淀粉肉湯(含0.3%臺盼藍)
方法與步驟1.實驗前2天,每天給小白鼠腹腔注射6%淀粉肉湯(含臺盼藍)1ml。2.實驗時,再往腹腔內注射1ml1%雞紅細胞懸液,并輕揉腹部,使蟾蜍紅細胞懸液分散。3.20~30min后,用脊椎脫臼法處死小鼠(右手抓住鼠尾,用力向后拉,左手拇指與食指同時按住鼠頭,使脊髓與腦髓間斷開致死)。4.迅速剖開腹腔,用未裝針頭的注射器或吸管吸取腹腔液。5.取一張干凈的載玻片,滴一滴腹腔液,蓋上蓋玻片,顯微鏡下檢查。觀察
在高倍鏡下,先分辨清雞紅細胞和巨噬細胞。體積較大圓形或不規(guī)則的細胞,其表面有許多似毛刺狀的小突起(偽足),胞質中有數量不等的藍色顆粒(為吞入的含臺盼藍淀粉肉湯形成的吞噬泡)即為巨噬細胞。變換視野,仔細觀察巨噬細胞吞噬蟾蜍紅細胞的過程。可見有的蟾蜍紅細胞(一至多個)緊貼附于巨噬細胞的表面;有的巨噬細胞已將1至數個紅細胞部分吞入;有的巨噬細胞已吞入1個或幾個紅細胞在胞質中剛剛形成橢圓形的吞噬泡;有的巨噬細胞內的吞噬泡體積縮小,并呈現圓形,這是與初級溶酶體發(fā)生融合,泡內物正在被消化分解。
注意事項1.小鼠腹腔注射時注意不要刺傷內臟。2.腹腔內的細胞濃度過大,可用生理鹽水稀釋。
作業(yè)1.繪圖示出所觀察到的小鼠腹腔巨噬細胞吞
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