臨床微生物標(biāo)本采集方法課件

臨床微生物標(biāo)本采集方法臨床微生物標(biāo)本采集方法1一導(dǎo)管尖培養(yǎng)標(biāo)本采集物品準(zhǔn)備：無菌試管、標(biāo)本標(biāo)簽、無菌剪刀、無菌手套一導(dǎo)管尖培養(yǎng)標(biāo)本采集物品準(zhǔn)備：無菌試管、標(biāo)本標(biāo)簽2操作者進(jìn)行衛(wèi)生消毒，戴帽子、外科口罩戴無菌手套，將拔除的中央導(dǎo)管用無菌剪刀剪長(zhǎng)約5CM，導(dǎo)管尖端放入無菌試管內(nèi)。操作者進(jìn)行衛(wèi)生消毒，戴帽子、外科口罩戴無菌手套，將拔除的中央3脫手套，洗手，標(biāo)本及時(shí)送檢脫手套，洗手，標(biāo)本及時(shí)送檢4二、留置導(dǎo)尿管患者中段尿培養(yǎng)標(biāo)本采集二、留置導(dǎo)尿管患者中段尿培養(yǎng)標(biāo)本采集5物品準(zhǔn)備：治療車、速干手消毒劑、治療方盤內(nèi)有蓋培養(yǎng)試管1支、打火機(jī)一支、無菌手套一副、0.5%碘伏消毒液棉球（置換藥碗內(nèi)）數(shù)個(gè)、無菌鑷子1個(gè)、彎盤1個(gè)、酒精燈1盞（A）物品準(zhǔn)備：治療車、速干手消毒劑、治療方盤內(nèi)有蓋培養(yǎng)試管1支、6操作人員準(zhǔn)備：著裝規(guī)范（衛(wèi)生手消毒、帽子、口罩、口罩、）;患者準(zhǔn)備：確認(rèn)患者（核對(duì)姓名、床號(hào)、腕帶），導(dǎo)尿管已夾住操作人員準(zhǔn)備：著裝規(guī)范（衛(wèi)生手消毒、帽子、口罩、口罩、）;7松開患者導(dǎo)尿管，棄其前段尿液松開患者導(dǎo)尿管，棄其前段尿液8使用0.5%碘伏溶液棉球消毒導(dǎo)尿管的采樣部位臨床微生物標(biāo)本采集方法課件9操作者用速干手消毒劑手消毒后戴無菌手套，使用無菌注射器斜刺入導(dǎo)尿管的采樣部位抽取10-20ml尿液，退出注射器操作者用速干手消毒劑手消毒后戴無菌手套，使用無菌注射器斜刺入10

協(xié)助者點(diǎn)燃酒精燈，用燃燒法消毒試管管口和蓋子協(xié)助者點(diǎn)燃酒精燈，用燃燒法消毒試管管口和蓋子11將注射器內(nèi)尿液注入試管（避免污染）將注射器內(nèi)尿液注入試管（避免污染）12協(xié)助者再次用燃燒法消毒試管管口和蓋子，隨即蓋緊試管（標(biāo)本不得倒置，以免污染），熄滅酒精燈，貼好檢驗(yàn)單標(biāo)簽協(xié)助者再次用燃燒法消毒試管管口和蓋子，隨即蓋緊試管（標(biāo)本不得13清理好用物，手衛(wèi)生，尿標(biāo)本及時(shí)送檢清理好用物，手衛(wèi)生，尿標(biāo)本及時(shí)送檢14注意事項(xiàng)1、采集指征：懷疑有尿路感染時(shí)，應(yīng)考慮做尿培養(yǎng)。2、采集時(shí)機(jī)：抗菌藥物使用之前，留置導(dǎo)尿管者須夾管30min以上。3、采樣部位：應(yīng)選擇尿管采樣口或靠近尿道的導(dǎo)尿管管壁。4、采樣部位的消毒：使用0.5%碘伏液棉球沿采樣點(diǎn)由內(nèi)而外消毒，每個(gè)棉球只使用一次。5、無菌物品需檢查包裝和有效期，確保合格。6、采樣過程中避免污染。注意事項(xiàng)1、采集指征：懷疑有尿路感染時(shí)，應(yīng)考慮做尿培養(yǎng)。15三、開放性傷口培養(yǎng)標(biāo)本采集臨床微生物標(biāo)本采集方法課件16物品準(zhǔn)備物品準(zhǔn)備17用生理鹽水徹底沖洗傷口用生理鹽水徹底沖洗傷口18用拭子深入傷口基底部或傷口與正常組織邊緣處采集兩個(gè)標(biāo)本，分別用于革蘭染色和培養(yǎng)用拭子深入傷口基底部或傷口與正常組織邊緣處采集兩個(gè)標(biāo)本，分別19將用于革蘭染色的標(biāo)本置于無菌標(biāo)本杯中將用于革蘭染色的標(biāo)本置于無菌標(biāo)本杯中20將用于培養(yǎng)的標(biāo)本置于需氧運(yùn)送培養(yǎng)基中，密閉保存將用于培養(yǎng)的標(biāo)本置于需氧運(yùn)送培養(yǎng)基中，密閉保存21分別標(biāo)注患者及標(biāo)本信息，30min內(nèi)送檢，否則置4℃冰箱冷藏，24h內(nèi)送檢分別標(biāo)注患者及標(biāo)本信息，30min內(nèi)送檢，否則置4℃冰箱冷藏22四、使用中紫外線燈輻照度值測(cè)定法四、使用中紫外線燈輻照度值測(cè)定法23方法：紫外線強(qiáng)度照射指示卡測(cè)定法物品準(zhǔn)備：標(biāo)尺、紫外線強(qiáng)度照射指示卡方法：紫外線強(qiáng)度照射指示卡測(cè)定法物品準(zhǔn)備：標(biāo)尺、紫外線強(qiáng)度照24放好標(biāo)尺，開啟紫外線燈放好標(biāo)尺，開啟紫外線燈25開啟紫外線燈5min后，將指示卡置于紫外線燈下垂直距離1m處，有圖案一面朝上開啟紫外線燈5min后，將指示卡置于紫外線燈下垂直距離1m處26照射1min后，關(guān)掉紫外線燈，觀察指示卡色塊的顏色，進(jìn)行結(jié)果判定。將指示卡色塊的顏色與“燈管強(qiáng)度90uW/CM2”、“燈管強(qiáng)度70uW/CM2”標(biāo)準(zhǔn)色塊進(jìn)行比較，判定測(cè)定結(jié)果照射1min后，關(guān)掉紫外線燈，觀察指示卡色塊的顏色，進(jìn)行結(jié)果27五、消毒劑染菌量采樣五、消毒劑染菌量采樣28用物準(zhǔn)備：碘伏、含9ml中和劑試管、無菌注射器、酒精燈、手消毒劑、記號(hào)筆用物準(zhǔn)備：碘伏、含9ml中和劑試管、無菌注射器、酒精燈、手消29手消毒：按六步洗手法搓揉至干燥手消毒：按六步洗手法搓揉至干燥30消毒試管口：將試管放在酒精燈上旋轉(zhuǎn)進(jìn)行消毒，此為重要步驟。消毒試管口：將試管放在酒精燈上旋轉(zhuǎn)進(jìn)行消毒，此為重要步驟。31無菌法取注射器無菌法取注射器32用無菌注射器抽取使用中的消毒劑1ml用無菌注射器抽取使用中的消毒劑1ml33將抽取的消毒劑注入含9ml中和劑的試管內(nèi)，注意不接觸試管口將抽取的消毒劑注入含9ml中和劑的試管內(nèi)，注意不接觸試管口34再次用酒精燈消毒試管口再次用酒精燈消毒試管口35將消毒劑與中和劑振蕩充分混勻?qū)⑾緞┡c中和劑振蕩充分混勻36用記號(hào)筆在試管壁編寫號(hào)碼，送檢用記號(hào)筆在試管壁編寫號(hào)碼，送檢37備注：中和劑的選擇：1、醇類與酚類消毒劑用普通營(yíng)養(yǎng)肉湯中和。2、含氯消毒劑、含碘消毒劑和過氧化物消毒劑用含0.1%硫代硫酸鈉中和劑。3、氯與定、季銨鹽類消毒劑用含0.3%吐溫-80和0.3卵磷脂的中和劑。4、醛類消毒劑用含0.3%甘氨酸中和劑。5、含有表面活性劑的各種復(fù)方消毒劑可在中和劑中加入吐溫-80到0.3%，也可使用經(jīng)該消毒劑消毒效果監(jiān)測(cè)的中和劑鑒定試驗(yàn)確定的中和劑。備注：中和劑的選擇：38六、潔凈手術(shù)室空氣沉降菌采樣臨床微生物標(biāo)本采集方法課件39一、采樣前準(zhǔn)備1、當(dāng)日術(shù)畢，按常規(guī)對(duì)手術(shù)間所有物表及地面進(jìn)行濕式清潔和擦拭。2、檢查凈化空調(diào)系統(tǒng)運(yùn)作是否正常，當(dāng)日完成手術(shù)間清潔后，調(diào)節(jié)空調(diào)系統(tǒng)處于待機(jī)狀態(tài)，次晨打開系統(tǒng)運(yùn)行30min。自凈后采樣。一、采樣前準(zhǔn)備40二、采用平板沉降法1、采樣時(shí)間:在凈化空調(diào)開啟30min進(jìn)行采樣，采樣時(shí)潔凈手術(shù)室大門應(yīng)保持關(guān)閉，以維持手術(shù)室正壓狀態(tài)和潔凈度。2、采樣護(hù)士準(zhǔn)備：在采樣前應(yīng)洗手（或手消毒）戴口罩，帽子，穿無菌衣。操作時(shí)應(yīng)輕穩(wěn)，避免污染培養(yǎng)皿。二、采用平板沉降法413、采樣方法：把瓊脂平板放在室內(nèi)各采樣點(diǎn)，采樣時(shí)把平板蓋打開扣放于平板少許邊沿上，同時(shí)培養(yǎng)皿下墊滅菌療巾，暴露30min后，蓋上平板蓋，并作好手術(shù)間標(biāo)志及平板上注明手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)，固定培養(yǎng)皿，放指定容器內(nèi)。防再次污染。3、采樣方法：424、采樣順序：采樣時(shí)平板應(yīng)從科室最靠?jī)?nèi)的房間放置，依次向外布放，每個(gè)手術(shù)間也是從最靠里的位置放置平板，最后放置最靠門的采樣點(diǎn)。采樣點(diǎn)分布均勻，收取平板順序相反。4、采樣順序：435、布點(diǎn)要求：百級(jí)手術(shù)間，手術(shù)區(qū)（手術(shù)臺(tái)兩側(cè)0.9m以內(nèi)，兩端0.4m內(nèi)）呈對(duì)角線，東南西北中5點(diǎn)，周邊區(qū)（距墻1m，每邊2個(gè)）8點(diǎn)，共需13個(gè)培養(yǎng)皿；千級(jí)手術(shù)間，手術(shù)區(qū)（手術(shù)臺(tái)兩側(cè)0.6m以內(nèi)，兩端0.4m以內(nèi)）呈單角線3點(diǎn)，周邊區(qū)（距1機(jī)，長(zhǎng)邊2個(gè)，短邊1個(gè)）6點(diǎn)，共需9個(gè)培養(yǎng)皿；萬級(jí)手術(shù)間:手術(shù)區(qū)（手術(shù)臺(tái)4邊，0.4m以內(nèi)）呈對(duì)角線3點(diǎn)，周邊區(qū)（距離1m每邊1個(gè)）4點(diǎn)，共需7個(gè)培養(yǎng)皿。檢測(cè)時(shí)可做一次空白對(duì)照和模擬操作。模擬操作將一個(gè)對(duì)照皿打開后立即封蓋，兩個(gè)對(duì)照結(jié)果必須為陰性，整個(gè)操作過程應(yīng)符合無菌要求。5、布點(diǎn)要求：446、采樣高度：潔凈手術(shù)間的手術(shù)區(qū)采樣高度為0.8-1.2m,周邊區(qū)在地面或0.8m采樣，與《醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范》要求高度相符。6、采樣高度：457、培養(yǎng)條件：采樣后的培養(yǎng)基按要求送至化驗(yàn)室（細(xì)菌定）在37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)，24h觀察結(jié)果。7、培養(yǎng)條件：468、判斷結(jié)果：（1）百級(jí)潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)小于0.2cfu/30min,周邊區(qū)小于0.4cfu/30min（2）千級(jí)潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)小于0.75cfu/30min,周邊區(qū)小于1.5cfu/30min。（3）萬級(jí)潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)小于2cfu/30min,周邊小于4cfu/30min.（4）普通手術(shù)間小于5cfu/30min.8、判斷結(jié)果：47百級(jí)手術(shù)間百級(jí)手術(shù)間48千級(jí)手術(shù)間千級(jí)手術(shù)間49萬級(jí)手術(shù)間萬級(jí)手術(shù)間50十萬級(jí)手術(shù)間十萬級(jí)手術(shù)間51注意事項(xiàng)：1、平皿的取送與放置方法：拿取平皿時(shí)，大在下，小在上，采樣時(shí)要大在上，小在下，大的斜蓋在小的平皿上，不能兩個(gè)平皿同時(shí)向上。2、在化驗(yàn)單上注明平皿暴露時(shí)間。注意事項(xiàng)：52七、非潔凈環(huán)境空氣沉降菌采樣臨床微生物標(biāo)本采集方法課件53待測(cè)房間準(zhǔn)備，靜止至少10min待測(cè)房間準(zhǔn)備，靜止至少10min54物品準(zhǔn)備物品準(zhǔn)備55根據(jù)待測(cè)房間面積大小，按GB15982要求放置培養(yǎng)皿田根據(jù)待測(cè)房間面積大小，按GB15982要求放置培養(yǎng)皿田56暴露時(shí)間產(chǎn)房.導(dǎo)管房.新生兒.重癥監(jiān)護(hù)室.器官移植房.血液病病區(qū).燒傷病房:15min普通病房:5min暴露時(shí)間57從里到外逐個(gè)打開培養(yǎng)皿蓋，扣放于平皿旁（注：手、頭等嚴(yán)禁從培養(yǎng)基上方越過）從里到外逐個(gè)打開培養(yǎng)皿蓋，扣放于平皿旁（注：手、頭等嚴(yán)禁從培58暴露規(guī)定時(shí)間后，按打開反方向蓋上平皿蓋，及時(shí)送檢暴露規(guī)定時(shí)間后，按打開反方向蓋上平皿蓋，及時(shí)送檢59八、物體表面采樣醫(yī)院物體表面采樣的對(duì)象：一切與醫(yī)療活動(dòng)相關(guān)的物體表面均可以作為采樣的對(duì)象：治療臺(tái)、治療車、器械車、器械臺(tái)、麻醉機(jī)、新生兒暖箱、診療儀器、床頭柜、床尾桌、監(jiān)護(hù)儀按鈕、血壓器袖帶、聽診器、床欄、遙控器、門把手、電腦鍵盤、鼠標(biāo)、電話機(jī)、病歷夾等。八、物體表面采樣醫(yī)院物體表面采樣的對(duì)象：60采樣時(shí)間：常規(guī)：消毒處理后進(jìn)行采樣暴發(fā)流行：未處理表面，隨機(jī)采樣采樣面積：常規(guī):＜100cm2時(shí)，全部表面；≥100cm2時(shí)取100cm2。暴發(fā)流行：不限，盡可能多采。采樣時(shí)間：61九、衛(wèi)生手消毒效果采樣臨床微生物標(biāo)本采集方法課件62醫(yī)務(wù)人員手采樣的意義：1、引起醫(yī)源性感染的因素很多，醫(yī)務(wù)人員手可以充當(dāng)醫(yī)源性感染的媒介，手的微生物污染是造成醫(yī)院感染的最直接的傳播途徑，由于醫(yī)務(wù)人員的手傳播的細(xì)菌而造成的醫(yī)院感染約占30%。因此醫(yī)護(hù)人員做好手的清潔消毒是控制醫(yī)院感染的重要措施之一。2.促進(jìn)醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生的依從性。3.進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查。醫(yī)務(wù)人員手采樣的意義：63物品準(zhǔn)備物品準(zhǔn)備64酒精燈外焰燒灼采樣試管管口，用無菌棉簽蘸取中和試劑酒精燈外焰燒灼采樣試管管口，用無菌棉簽蘸取中和試劑65被檢者衛(wèi)生手消毒后，雙手五指并攏，用棉拭子在一手曲面從指跟到指端往返涂擦2遍，涂擦過程中同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子；同法采集另一只手被檢者衛(wèi)生手消毒后，雙手五指并攏，用棉拭子在一手曲面從指跟到66取無菌剪刀，酒精燈外焰燒灼采樣試管管口取無菌剪刀，酒精燈外焰燒灼采樣試管管口67剪去棉拭子手接觸部分投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)；酒精燈外焰燒灼試管管口后蓋上瓶蓋剪去棉拭子手接觸部分投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管68十、外科手消毒效果采樣臨床微生物標(biāo)本采集方法課件69物品準(zhǔn)備：無菌棉拭子、試管架、含中和劑的無菌洗脫液、滅菌剪刀、酒精燈、打火機(jī)、采樣單、采樣記號(hào)筆、手消毒劑物品準(zhǔn)備：無菌棉拭子、試管架、含中和劑的無菌洗脫液、滅菌剪刀70被檢者著裝規(guī)范，外科手消毒后保持雙手位于胸前并高于肘部臨床微生物標(biāo)本采集方法課件71取無菌棉簽2根浸蘸含相應(yīng)中和劑的洗脫液臨床微生物標(biāo)本采集方法課件72一根棉簽，涂擦一手五指曲面，從指跟開始至指端，每指跟到指端往返轉(zhuǎn)動(dòng)涂擦2次，一個(gè)手涂擦面積約30c㎡；另一只手同樣涂擦臨床微生物標(biāo)本采集方法課件73剪去棉簽手接觸部位，兩個(gè)棉簽投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)臨床微生物標(biāo)本采集方法課件74試管塞用酒精燈燙后塞住試管口臨床微生物標(biāo)本采集方法課件75在試管上標(biāo)記被檢者姓名、采樣時(shí)間臨床微生物標(biāo)本采集方法課件76填寫手衛(wèi)生消毒效果檢測(cè)申請(qǐng)單，及時(shí)送檢臨床微生物標(biāo)本采集方法課件77謝謝觀看謝謝觀看78臨床微生物標(biāo)本采集方法臨床微生物標(biāo)本采集方法79一導(dǎo)管尖培養(yǎng)標(biāo)本采集物品準(zhǔn)備：無菌試管、標(biāo)本標(biāo)簽、無菌剪刀、無菌手套一導(dǎo)管尖培養(yǎng)標(biāo)本采集物品準(zhǔn)備：無菌試管、標(biāo)本標(biāo)簽80操作者進(jìn)行衛(wèi)生消毒，戴帽子、外科口罩戴無菌手套，將拔除的中央導(dǎo)管用無菌剪刀剪長(zhǎng)約5CM，導(dǎo)管尖端放入無菌試管內(nèi)。操作者進(jìn)行衛(wèi)生消毒，戴帽子、外科口罩戴無菌手套，將拔除的中央81脫手套，洗手，標(biāo)本及時(shí)送檢脫手套，洗手，標(biāo)本及時(shí)送檢82二、留置導(dǎo)尿管患者中段尿培養(yǎng)標(biāo)本采集二、留置導(dǎo)尿管患者中段尿培養(yǎng)標(biāo)本采集83物品準(zhǔn)備：治療車、速干手消毒劑、治療方盤內(nèi)有蓋培養(yǎng)試管1支、打火機(jī)一支、無菌手套一副、0.5%碘伏消毒液棉球（置換藥碗內(nèi)）數(shù)個(gè)、無菌鑷子1個(gè)、彎盤1個(gè)、酒精燈1盞（A）物品準(zhǔn)備：治療車、速干手消毒劑、治療方盤內(nèi)有蓋培養(yǎng)試管1支、84操作人員準(zhǔn)備：著裝規(guī)范（衛(wèi)生手消毒、帽子、口罩、口罩、）;患者準(zhǔn)備：確認(rèn)患者（核對(duì)姓名、床號(hào)、腕帶），導(dǎo)尿管已夾住操作人員準(zhǔn)備：著裝規(guī)范（衛(wèi)生手消毒、帽子、口罩、口罩、）;85松開患者導(dǎo)尿管，棄其前段尿液松開患者導(dǎo)尿管，棄其前段尿液86使用0.5%碘伏溶液棉球消毒導(dǎo)尿管的采樣部位臨床微生物標(biāo)本采集方法課件87操作者用速干手消毒劑手消毒后戴無菌手套，使用無菌注射器斜刺入導(dǎo)尿管的采樣部位抽取10-20ml尿液，退出注射器操作者用速干手消毒劑手消毒后戴無菌手套，使用無菌注射器斜刺入88

協(xié)助者點(diǎn)燃酒精燈，用燃燒法消毒試管管口和蓋子協(xié)助者點(diǎn)燃酒精燈，用燃燒法消毒試管管口和蓋子89將注射器內(nèi)尿液注入試管（避免污染）將注射器內(nèi)尿液注入試管（避免污染）90協(xié)助者再次用燃燒法消毒試管管口和蓋子，隨即蓋緊試管（標(biāo)本不得倒置，以免污染），熄滅酒精燈，貼好檢驗(yàn)單標(biāo)簽協(xié)助者再次用燃燒法消毒試管管口和蓋子，隨即蓋緊試管（標(biāo)本不得91清理好用物，手衛(wèi)生，尿標(biāo)本及時(shí)送檢清理好用物，手衛(wèi)生，尿標(biāo)本及時(shí)送檢92注意事項(xiàng)1、采集指征：懷疑有尿路感染時(shí)，應(yīng)考慮做尿培養(yǎng)。2、采集時(shí)機(jī)：抗菌藥物使用之前，留置導(dǎo)尿管者須夾管30min以上。3、采樣部位：應(yīng)選擇尿管采樣口或靠近尿道的導(dǎo)尿管管壁。4、采樣部位的消毒：使用0.5%碘伏液棉球沿采樣點(diǎn)由內(nèi)而外消毒，每個(gè)棉球只使用一次。5、無菌物品需檢查包裝和有效期，確保合格。6、采樣過程中避免污染。注意事項(xiàng)1、采集指征：懷疑有尿路感染時(shí)，應(yīng)考慮做尿培養(yǎng)。93三、開放性傷口培養(yǎng)標(biāo)本采集臨床微生物標(biāo)本采集方法課件94物品準(zhǔn)備物品準(zhǔn)備95用生理鹽水徹底沖洗傷口用生理鹽水徹底沖洗傷口96用拭子深入傷口基底部或傷口與正常組織邊緣處采集兩個(gè)標(biāo)本，分別用于革蘭染色和培養(yǎng)用拭子深入傷口基底部或傷口與正常組織邊緣處采集兩個(gè)標(biāo)本，分別97將用于革蘭染色的標(biāo)本置于無菌標(biāo)本杯中將用于革蘭染色的標(biāo)本置于無菌標(biāo)本杯中98將用于培養(yǎng)的標(biāo)本置于需氧運(yùn)送培養(yǎng)基中，密閉保存將用于培養(yǎng)的標(biāo)本置于需氧運(yùn)送培養(yǎng)基中，密閉保存99分別標(biāo)注患者及標(biāo)本信息，30min內(nèi)送檢，否則置4℃冰箱冷藏，24h內(nèi)送檢分別標(biāo)注患者及標(biāo)本信息，30min內(nèi)送檢，否則置4℃冰箱冷藏100四、使用中紫外線燈輻照度值測(cè)定法四、使用中紫外線燈輻照度值測(cè)定法101方法：紫外線強(qiáng)度照射指示卡測(cè)定法物品準(zhǔn)備：標(biāo)尺、紫外線強(qiáng)度照射指示卡方法：紫外線強(qiáng)度照射指示卡測(cè)定法物品準(zhǔn)備：標(biāo)尺、紫外線強(qiáng)度照102放好標(biāo)尺，開啟紫外線燈放好標(biāo)尺，開啟紫外線燈103開啟紫外線燈5min后，將指示卡置于紫外線燈下垂直距離1m處，有圖案一面朝上開啟紫外線燈5min后，將指示卡置于紫外線燈下垂直距離1m處104照射1min后，關(guān)掉紫外線燈，觀察指示卡色塊的顏色，進(jìn)行結(jié)果判定。將指示卡色塊的顏色與“燈管強(qiáng)度90uW/CM2”、“燈管強(qiáng)度70uW/CM2”標(biāo)準(zhǔn)色塊進(jìn)行比較，判定測(cè)定結(jié)果照射1min后，關(guān)掉紫外線燈，觀察指示卡色塊的顏色，進(jìn)行結(jié)果105五、消毒劑染菌量采樣五、消毒劑染菌量采樣106用物準(zhǔn)備：碘伏、含9ml中和劑試管、無菌注射器、酒精燈、手消毒劑、記號(hào)筆用物準(zhǔn)備：碘伏、含9ml中和劑試管、無菌注射器、酒精燈、手消107手消毒：按六步洗手法搓揉至干燥手消毒：按六步洗手法搓揉至干燥108消毒試管口：將試管放在酒精燈上旋轉(zhuǎn)進(jìn)行消毒，此為重要步驟。消毒試管口：將試管放在酒精燈上旋轉(zhuǎn)進(jìn)行消毒，此為重要步驟。109無菌法取注射器無菌法取注射器110用無菌注射器抽取使用中的消毒劑1ml用無菌注射器抽取使用中的消毒劑1ml111將抽取的消毒劑注入含9ml中和劑的試管內(nèi)，注意不接觸試管口將抽取的消毒劑注入含9ml中和劑的試管內(nèi)，注意不接觸試管口112再次用酒精燈消毒試管口再次用酒精燈消毒試管口113將消毒劑與中和劑振蕩充分混勻?qū)⑾緞┡c中和劑振蕩充分混勻114用記號(hào)筆在試管壁編寫號(hào)碼，送檢用記號(hào)筆在試管壁編寫號(hào)碼，送檢115備注：中和劑的選擇：1、醇類與酚類消毒劑用普通營(yíng)養(yǎng)肉湯中和。2、含氯消毒劑、含碘消毒劑和過氧化物消毒劑用含0.1%硫代硫酸鈉中和劑。3、氯與定、季銨鹽類消毒劑用含0.3%吐溫-80和0.3卵磷脂的中和劑。4、醛類消毒劑用含0.3%甘氨酸中和劑。5、含有表面活性劑的各種復(fù)方消毒劑可在中和劑中加入吐溫-80到0.3%，也可使用經(jīng)該消毒劑消毒效果監(jiān)測(cè)的中和劑鑒定試驗(yàn)確定的中和劑。備注：中和劑的選擇：116六、潔凈手術(shù)室空氣沉降菌采樣臨床微生物標(biāo)本采集方法課件117一、采樣前準(zhǔn)備1、當(dāng)日術(shù)畢，按常規(guī)對(duì)手術(shù)間所有物表及地面進(jìn)行濕式清潔和擦拭。2、檢查凈化空調(diào)系統(tǒng)運(yùn)作是否正常，當(dāng)日完成手術(shù)間清潔后，調(diào)節(jié)空調(diào)系統(tǒng)處于待機(jī)狀態(tài)，次晨打開系統(tǒng)運(yùn)行30min。自凈后采樣。一、采樣前準(zhǔn)備118二、采用平板沉降法1、采樣時(shí)間:在凈化空調(diào)開啟30min進(jìn)行采樣，采樣時(shí)潔凈手術(shù)室大門應(yīng)保持關(guān)閉，以維持手術(shù)室正壓狀態(tài)和潔凈度。2、采樣護(hù)士準(zhǔn)備：在采樣前應(yīng)洗手（或手消毒）戴口罩，帽子，穿無菌衣。操作時(shí)應(yīng)輕穩(wěn)，避免污染培養(yǎng)皿。二、采用平板沉降法1193、采樣方法：把瓊脂平板放在室內(nèi)各采樣點(diǎn)，采樣時(shí)把平板蓋打開扣放于平板少許邊沿上，同時(shí)培養(yǎng)皿下墊滅菌療巾，暴露30min后，蓋上平板蓋，并作好手術(shù)間標(biāo)志及平板上注明手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)，固定培養(yǎng)皿，放指定容器內(nèi)。防再次污染。3、采樣方法：1204、采樣順序：采樣時(shí)平板應(yīng)從科室最靠?jī)?nèi)的房間放置，依次向外布放，每個(gè)手術(shù)間也是從最靠里的位置放置平板，最后放置最靠門的采樣點(diǎn)。采樣點(diǎn)分布均勻，收取平板順序相反。4、采樣順序：1215、布點(diǎn)要求：百級(jí)手術(shù)間，手術(shù)區(qū)（手術(shù)臺(tái)兩側(cè)0.9m以內(nèi)，兩端0.4m內(nèi)）呈對(duì)角線，東南西北中5點(diǎn)，周邊區(qū)（距墻1m，每邊2個(gè)）8點(diǎn)，共需13個(gè)培養(yǎng)皿；千級(jí)手術(shù)間，手術(shù)區(qū)（手術(shù)臺(tái)兩側(cè)0.6m以內(nèi)，兩端0.4m以內(nèi)）呈單角線3點(diǎn)，周邊區(qū)（距1機(jī)，長(zhǎng)邊2個(gè)，短邊1個(gè)）6點(diǎn)，共需9個(gè)培養(yǎng)皿；萬級(jí)手術(shù)間:手術(shù)區(qū)（手術(shù)臺(tái)4邊，0.4m以內(nèi)）呈對(duì)角線3點(diǎn)，周邊區(qū)（距離1m每邊1個(gè)）4點(diǎn)，共需7個(gè)培養(yǎng)皿。檢測(cè)時(shí)可做一次空白對(duì)照和模擬操作。模擬操作將一個(gè)對(duì)照皿打開后立即封蓋，兩個(gè)對(duì)照結(jié)果必須為陰性，整個(gè)操作過程應(yīng)符合無菌要求。5、布點(diǎn)要求：1226、采樣高度：潔凈手術(shù)間的手術(shù)區(qū)采樣高度為0.8-1.2m,周邊區(qū)在地面或0.8m采樣，與《醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范》要求高度相符。6、采樣高度：1237、培養(yǎng)條件：采樣后的培養(yǎng)基按要求送至化驗(yàn)室（細(xì)菌定）在37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)，24h觀察結(jié)果。7、培養(yǎng)條件：1248、判斷結(jié)果：（1）百級(jí)潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)小于0.2cfu/30min,周邊區(qū)小于0.4cfu/30min（2）千級(jí)潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)小于0.75cfu/30min,周邊區(qū)小于1.5cfu/30min。（3）萬級(jí)潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)小于2cfu/30min,周邊小于4cfu/30min.（4）普通手術(shù)間小于5cfu/30min.8、判斷結(jié)果：125百級(jí)手術(shù)間百級(jí)手術(shù)間126千級(jí)手術(shù)間千級(jí)手術(shù)間127萬級(jí)手術(shù)間萬級(jí)手術(shù)間128十萬級(jí)手術(shù)間十萬級(jí)手術(shù)間129注意事項(xiàng)：1、平皿的取送與放置方法：拿取平皿時(shí)，大在下，小在上，采樣時(shí)要大在上，小在下，大的斜蓋在小的平皿上，不能兩個(gè)平皿同時(shí)向上。2、在化驗(yàn)單上注明平皿暴露時(shí)間。注意事項(xiàng)：130七、非潔凈環(huán)境空氣沉降菌采樣臨床微生物標(biāo)本采集方法課件131待測(cè)房間準(zhǔn)備，靜止至少10min待測(cè)房間準(zhǔn)備，靜止至少10min132物品準(zhǔn)備物品準(zhǔn)備133根據(jù)待測(cè)房間面積大小，按GB15982要求放置培養(yǎng)皿田根據(jù)待測(cè)房間面積大小，按GB15982要求放置培養(yǎng)皿田134暴露時(shí)間產(chǎn)房.導(dǎo)管房.新生兒.重癥監(jiān)護(hù)室.器官移植房.血液病病區(qū).燒傷病房:15min普通病房:5min暴露時(shí)間135從里到外逐個(gè)打開培養(yǎng)皿蓋，扣放于平皿旁（注：手、頭等嚴(yán)禁從培養(yǎng)基上方越過）從里到外逐個(gè)打開培養(yǎng)皿蓋，扣放于平皿旁（注：手、頭等嚴(yán)禁從培136暴露規(guī)定時(shí)間后，按打開反方向蓋上平皿蓋，及時(shí)送檢暴露規(guī)定時(shí)間后，按打開反方向蓋上平皿蓋，及時(shí)送檢137八、物體表面采樣醫(yī)院物體表面采樣的對(duì)象：一切與醫(yī)療活動(dòng)相關(guān)的物體表面均可以作為采樣的對(duì)象：治療臺(tái)、治療車、器械車、器械臺(tái)、麻醉機(jī)、新生兒暖箱、診療儀器、床頭柜、床尾桌、監(jiān)護(hù)儀按鈕、血壓器袖帶、聽診器、床欄、遙控器、門把手、電腦鍵盤、鼠標(biāo)、電話機(jī)、病歷夾等。八、物體表面采樣醫(yī)院物體表面采樣的對(duì)象：138采樣時(shí)間