無菌藥品生產(chǎn)與質量控制

無菌藥品生產(chǎn)管理與質量控制

2014年10月20目錄無菌保證與無菌生產(chǎn)濕熱滅菌工藝的管理除菌過濾工藝制藥用水的管理GMP檢查中存在的問題無菌保證與無菌生產(chǎn)一、自然界常見的微生物二、微生物分布特點1、微生物無處不在。2、氣源性微生物革蘭氏陽性菌較多：它們可形成芽孢，難以殺滅。因此，需要潔凈的環(huán)境?？梢酝ㄟ^氧化（消毒）方法除去。3、水源性的則革蘭氏陰性菌多，不會形成孢子，但會形成細菌內(nèi)毒素，耐熱性差。通過加熱，讓其凝固，從而除掉。（1）、細菌內(nèi)毒素和熱原的概念：熱原的污染是注射用原料及制劑生產(chǎn)普遍存在的問題，污染可能來源于原料、水、試劑、車間環(huán)境、設備等。含有熱原的藥品進入人體后，會使人體發(fā)冷、寒戰(zhàn)、體溫升高、出汗、惡心嘔吐等不良反應。嚴重著出現(xiàn)昏迷、虛脫甚至生命危險。引起熱原反應的主要是革蘭氏陰性菌細胞壁中降解的脂多糖，也稱細菌內(nèi)毒素。（2）、污染熱原的途徑：溶劑（注射用水）。從原輔料中帶入（胰島素，葡萄糖等）。從容器、用具、管道和裝置帶入。制備過程中的污染（操作時間長，裝備不密封，人員操作不當）。（3）內(nèi)毒素控制的方法：來源控制，控制物料、器具存放過程中的條件，減少微生物滋生。通過清洗、滅菌降低微生物負荷，減少內(nèi)毒素生成。通過干熱去除或者其他手段對已存在的內(nèi)毒素進行破壞和去除。（4）、內(nèi)毒素的去除方法：加熱法。酸堿法（玻璃容器）。蒸餾法（注射用水）?；钚蕴课健３瑸V（中藥注射劑）。離子交換法（緩沖液）。4、芽孢：當目些細菌遇到不良生存環(huán)境時，為保護自身，在細胞內(nèi)形成一個壁厚而堅硬的休眠體，該休眠體及稱芽孢或者孢子。由于其對不良環(huán)境的耐受性遠高于生長態(tài)細胞，常被用于挑戰(zhàn)性滅菌工藝，以確認被滅菌物品無菌的可靠性。芽孢的特點：80℃以下長期存活；100℃以下有相當高的存活率；100℃以上死亡過程符合一級動力學方程5、空氣中的微生物污染：（1）、空氣中的微生物為革蘭氏陽性菌，他們有可能形成芽孢使其耐熱性增大；嚴重的是，一旦被塵埃包裹，耐熱性比單獨存在狀態(tài)上升一個數(shù)量級。（2）、為防止空氣中耐熱菌污染生產(chǎn)系統(tǒng)，需要將已清潔/已滅菌的容器具等置于局部單向流之下。無菌藥品進化空調系統(tǒng)的設置及潔凈區(qū)環(huán)境的建立和維持，是的有效控制微粒的同時，也在很大程度上自然的消除了塵埃粒子包藏芽孢，造成難以滅菌的風險。6、工藝用用水微生物物的污染（1）、水水是注射劑劑的主要原原料，水還還是用于清清潔與產(chǎn)品品相接觸的的容器、密密封材料、、藥液過濾濾器和其他他配液設備備等的清潔潔劑，因此此，必須有有效的控制制水系統(tǒng)的的微生物污污染水平，，并同時控控制細菌內(nèi)內(nèi)毒素的水水平。（2）水源源性的微生生物多數(shù)為為革蘭氏陰陰性菌，不不會形成芽芽孢，不耐耐熱。外壁壁的主要成成分為脂多多糖（細菌菌內(nèi)毒素的的主要成分分），其代代謝產(chǎn)物及及細胞的尸尸體均屬細細菌內(nèi)毒素素的污染源源，即使通通過滅菌的的方式將革革蘭氏陰性性菌殺滅，，但不能消消除細菌內(nèi)內(nèi)毒素對無無菌藥品質質量的影響響。三、無菌保保證工藝1、無菌的的標準及概概念：每批批產(chǎn)品中，，污染品的的概率不得得超過百萬萬分之一（（即產(chǎn)品的的無菌保證證值為6））.2、無菌保保證工藝：：使產(chǎn)品達達到規(guī)定的的無菌保證證水平的工工藝過程。。分為兩類類:最終滅滅菌工藝和和非最終滅滅菌工藝。。（1）、非非最終滅菌菌工藝：指指在無菌環(huán)環(huán)境下通過過無菌操作作生產(chǎn)無菌菌產(chǎn)品的方方法。具體體就是將組組成藥品的的原料和包包裝材料分分別滅菌或或經(jīng)除菌處處理，在無無菌條件下下降其組裝裝成成品的的工藝。（2）、最最終滅菌工工藝：將完完成最終密密封的產(chǎn)品品進行滅菌菌，以殺滅滅產(chǎn)品種微微生物的的的工藝。由由此生產(chǎn)的的無菌制劑劑稱為最終終滅菌。無無菌藥品。。（SAL＜10-6）3、滅菌的的基本原理理：使細胞胞內(nèi)的蛋白白質或核酸酸發(fā)生不可可逆的凝固固或破壞，，使微生物物死亡。符符合一級動動力學方程程,即：lgN=lgN0-ktN產(chǎn)產(chǎn)品內(nèi)內(nèi)微生物的的殘留數(shù)N0滅菌開始時時產(chǎn)品內(nèi)的的微生物數(shù)數(shù)t累累計計滅菌時間間k常常數(shù)數(shù)，與微生生物的耐熱熱性、滅菌菌溫度有關關4、微生物物的耐熱參參數(shù)微生物的耐耐熱參數(shù)，，簡稱D值值，是指在在特定滅菌菌條件下，，使微生物物數(shù)量下降降一個對數(shù)數(shù)單位或殺殺滅90%所用的時時間（分鐘鐘）。5、滅菌率率：表示不不同滅菌溫溫度所對應應的滅菌效效果的重要要函數(shù)。滅菌溫度為為T℃時的的滅菌效果果，與121℃下同同樣滅菌時時間的滅菌菌效果用下下面公式表表示滅菌率L=10（T-121）/Z;右圖給出濕濕熱滅菌，，以121℃為標準準滅菌時間間，Z=10℃時滅滅菌率。所所以，，121℃℃滅菌1min對微微生物的殺殺滅效果，，相當于110℃滅滅菌12.5min的殺滅效效果，100℃則需需要125min。。6、標準滅滅菌時間：：標準滅菌菌時間，即即F0值是指在121℃下下的滅菌時時間，他的的意義在于于將不同滅滅菌溫度下下的滅菌工工藝，按照照滅菌效果果等效的原原則，換算算為121℃下滅菌菌所需要的的時間。即即：F0=L*tF0標準滅菌時時間L特特定滅滅菌溫度下下的滅菌率率t滅滅菌時時間例：110℃滅菌30minF0值計計算：110℃的滅滅菌率為0.08，，F(xiàn)0=0.08*30=2.4min，即110℃滅滅菌30min相當當于121℃滅菌2.4min。F0值是衡衡量、區(qū)分分無菌保證證工藝屬于于最終滅菌菌工藝還是是非最終滅滅菌工藝。。7、無菌保保證水平：：公式SAL=F0/D-lgN0藥典規(guī)定，，最終滅菌菌工藝生產(chǎn)產(chǎn)的藥品SAL<=10-6，殘存微生物物的概率越越低，無菌菌保證的風風險越低。。所以,無菌菌保證水平平必須有足足夠的F0值，控制產(chǎn)產(chǎn)品滅菌前前的微生物物。例：假定滅滅菌開始時時產(chǎn)品中的的污染微生生物總數(shù)（（N0）為100cfu/瓶，耐熱熱參數(shù)（D）為1min，要要達到無菌菌保證水平平不小于6的標準，，滅菌F0=SAL+lgNO*D=(6+lg100)*1=8min.同樣的產(chǎn)品品，在110℃下滅滅菌，則滅滅菌時間為為：t=F0/L110=8/0.08=100min。8、殘存概概率滅菌法法與過度殺殺滅法：（1）、殘存概率法法，滅菌過程8≤F0≤12min，適用于熱穩(wěn)定定不好的產(chǎn)產(chǎn)品，需要要通過控制制工藝過程的微生生物污染和和滅菌工藝藝參數(shù)，而而不能僅依依賴于最終終滅菌過程程殺死污染染微生物，，使無菌保保證值不小小于6.（2）、過過度殺滅法：生物負負荷及其D值均可能能不同，將將其殺滅到到106后，在使其其存活概率率下降6個個對數(shù)單位位，其F0值≥12min，適用于于熱穩(wěn)定性性很好的產(chǎn)產(chǎn)品，即使使不考慮產(chǎn)產(chǎn)品滅菌前前的污染情情況，也能能夠保證無無菌保證水水平≤10-6.（3）、滅菌方法的的選擇：1）滅菌條條件121℃，15min濕濕熱滅菌。。2）滅菌F0值≥8min，，SAL≤≤10-6的濕熱熱滅菌。3）采用微微生物截留留過濾器的的除菌過濾濾工藝。4）采用無無菌原料和和預先滅菌菌的包裝材材料進行無無菌配制和和灌裝工藝藝。滅菌工藝決決策樹濕熱滅菌工工藝一、蒸汽：：在一定溫溫度下，不不同加熱介介質（滅菌菌蒸汽）的的熱能有很很大的差別別。過熱水水、飽和蒸蒸汽和蒸汽汽-空氣混混合物含有有不同的熱熱能。1、濕熱滅滅菌采用的的蒸汽包括括工業(yè)蒸汽汽和純蒸汽汽，二者使使用的場合合不同。工業(yè)蒸汽一一般不與藥藥液過濾器器、灌裝機機部件類被被滅菌品直直接接觸，，只用于轉轉移能量的的目的。它它可用于脈脈動真空滅滅菌器的夾夾套加熱。。一般較常常見的情況況是工業(yè)蒸蒸汽用于小小容量注射射劑（安瓿瓿瓶）的最最終滅菌，，然而，應應當意識到到，少數(shù)安安瓿瓶可能能存在密封封性缺陷，，微量的工工業(yè)蒸汽有有可能進入入這類有缺缺陷的安瓿瓿瓶，且在在撿漏整很很難發(fā)現(xiàn)，，會帶來一一定的風險險。純蒸汽：由由于灌裝部部件、過濾濾器等直接接與產(chǎn)品接接觸，滅菌菌腔室內(nèi)的的蒸汽應采采用純蒸汽汽。2、濕熱滅滅菌器常見濕熱滅滅菌器包括括脈動真空空滅菌器（（或稱預真真空滅菌器器）、蒸汽汽-空氣混混合物滅菌菌器和過熱熱水滅菌器器等。脈動真空滅滅菌器脈動真空式式蒸汽滅菌菌器是藥品品生產(chǎn)中所所采用的最最典型的高高壓蒸汽滅滅菌器，通通常由滅滅菌腔體、、密封門、、控制系統(tǒng)統(tǒng)、管路系系統(tǒng)等組成成，并連接接壓縮空氣氣、蒸汽/純蒸汽、、真空泵等等。在滅滅菌階段開開始之前通通過真空泵泵或其他系系統(tǒng)將空氣氣從腔室移移除，然后后通入飽和和蒸汽，反反復進行真真空、通通入蒸汽，，將空氣氣徹底置換換后進行滅滅菌。滅滅菌器設有有真空系統(tǒng)統(tǒng)和空氣過過濾系統(tǒng)。滅菌程序由由計算機控控制完成，，腔體內(nèi)內(nèi)冷空氣排排除比較徹徹底；具具有滅菌周周期短、效效率高等等特點。脈動動真真空空式式蒸蒸汽汽滅滅菌菌器器對對物物品品包包裝裝、、放放置置要要求求較較寬寬，，且且真真空空狀狀態(tài)態(tài)下下物物品品不不易易氧氧化化損損壞壞的的特特點點，，常常用用于于對對空空氣氣難難以以去去除除的的多多孔孔/堅硬硬裝裝載載進進行行滅滅菌菌，，尤尤其其適適用用于于可可以以包包藏藏或或夾夾帶帶空空氣氣的的裝裝載載物物，，比比如如軟軟管管、、過過濾濾器器和和灌灌裝裝機機部部件件。。3、、脈脈動動真真空空滅滅菌菌柜柜滅滅菌原原理理4、、濕濕熱熱滅滅菌菌的的特特點點：：蒸汽汽有有利利于于蛋蛋白白質質的的變變性性和和酶酶的的失失活活，，從從而而殺殺死死細細胞胞。。蒸汽汽熱熱穿穿透透性性強強。。滅菌菌效效率率高高：：溫溫度度相相對對較較低低，，滅滅菌菌時時間間相相對對較較短短。。滅菌菌過過程程不不產(chǎn)產(chǎn)生生任任何何化化學學物物理理污污染染：：釋釋放放熱熱量量，，凝凝結結成成水水。。滅菌菌過過程程控控制制參參數(shù)數(shù)少少（（時時間間、、溫溫度度及及壓壓力力）），，運運行行穩(wěn)穩(wěn)定定，，方方便便管管理理。5、、濕濕熱熱滅滅菌菌過過程程需需注注意意的的事事項項（1））、、應應當當定定期期對對滅滅菌菌柜柜腔腔室室做做檢檢漏漏測測試試（（滅滅菌菌過過程程需需抽抽真真空空））。。（2））、、除除以以密密封封的的產(chǎn)產(chǎn)品品外外，，被被滅滅菌菌物物體體應應當當用用合合適適的的材材料料適適當當包包扎扎，，所所用用材材料料及及包包扎扎方方式式應應當當有有：：a、、有有利利于于空空氣氣排排放放b、、蒸蒸汽汽能能夠夠穿穿透透c、、滅滅菌菌后后能能夠夠防防止止二二次次污污染染二、、濕熱熱滅菌菌的的驗驗證證1、、滅滅菌菌工工藝藝驗驗證證包包括括：：1））滅滅菌菌設設備備的的安安裝裝確確認認。。2））滅滅菌菌設設備備的的運運行行確確認認。。3））滅滅菌菌工工藝藝驗驗證證。。4））對對設設備備溫溫度度儀儀表表和和驗驗證證用用儀儀器器進進行行校校驗驗。。5））空空載載熱熱分分布布-找找到到滅滅菌菌過過程程中中滅滅菌菌設設備備的的最最冷冷點點。。6））不不同同裝裝載載形形式式、、不不同同裝裝量量規(guī)規(guī)格格產(chǎn)產(chǎn)品品的的熱熱穿穿透透試試驗驗，，及及產(chǎn)產(chǎn)品品的的F0值值。。a、、最最大大和和最最小小裝裝載載條條件件下下的的熱熱穿穿透透試試驗驗，，其其目目的的是是獲獲取取不不同同未未知知的的產(chǎn)產(chǎn)品品在在滅滅菌菌過過程程中中實實際際達達到到的的溫溫度度和和F0值值，，從從而而了了解解不不同同位位置置的的產(chǎn)產(chǎn)品品之之間間，，以以及及與與日日常常生生產(chǎn)產(chǎn)運運行行時時滅滅菌菌設設備備記記錄錄的的溫溫度度和和F0值值之之間間的的差差異異。。b、應至至少進行行最大和和最小裝裝載條件件下的熱熱穿透試試驗。有有多種裝裝量規(guī)格格的產(chǎn)品品時，應應至少分分別進行行最小和和最大裝裝量規(guī)格格產(chǎn)品的的熱穿透透試驗。。7）微生生物挑戰(zhàn)戰(zhàn)性試驗驗。a、通過過微生物物挑戰(zhàn)性性試驗應應能證明明擬定的的滅菌工工藝參數(shù)數(shù)允許的的最差滅滅菌條件件下，通通過該滅滅菌工藝藝能將符符合的預預定的滅滅菌前污污染微生生物數(shù)量量和耐熱熱性限度度的產(chǎn)品品中的微微生物殺殺滅至存存活概率率不得超超過百萬萬分之一一。b、對于于最終滅滅菌F0值小于于12min的的滅菌工工藝（即即殘存概概率滅菌菌工藝）），應進進行微生生物挑戰(zhàn)戰(zhàn)性試驗驗。除菌過濾濾工藝一、除菌菌過濾的的原理：：利用孔孔徑0.22μm的攔截截去除直直徑在0.3μm處呈正正態(tài)分布布的細菌菌。1、達到到除菌過過濾的條條件：具具有適當當孔徑的的除菌過過濾器，，應始終終能去除除被加工工產(chǎn)品中中的所有有微生物物，獲得得無菌的的藥液，，這類孔孔徑經(jīng)常常為0.2μm或者更更小。2、截留留：足夠夠小的能能夠進入入過濾矩矩陣整的的顆?；蚧蛭⑸镂锿ㄟ^吸吸附螯合合作用被被捕獲。。影響參數(shù)數(shù)：a、過濾濾器的表表面化學學性質b、溶液液的性質質c、顆粒?；蛘呶⑽⑸飀、過濾濾條件舉例：0.02μm病毒去除除0.2/0.22μm除菌過濾濾0.45μm微生物負負載的減減少大于3μm顆粒去除除3、除菌菌過濾器器在細菌菌保留方方面的定定義:在在工藝條條件下，，每平方方厘米的的有效過過濾面積積中，能能夠保留留107cfu個個缺陷假假單胞菌菌的過濾濾器。4、除菌菌過濾器器的設置置兩只串聯(lián)聯(lián)過濾器器第一只只為截留留藥液中中的細菌菌的負載載，第二二只接近近灌裝點點，滿足足無菌保保證要求求。因分分險高的的原因，，第二只只過濾器器完整性性測試合合格，產(chǎn)產(chǎn)品及可可放行。?？聪旅婷鎯蓚€圖：5、除菌菌過濾的的法規(guī)要要求：《藥品生產(chǎn)產(chǎn)質量管管理規(guī)范范》2010修訂版：：附錄1：無菌藥藥品第十章生生產(chǎn)產(chǎn)管理第五十七七條應應盡盡可能縮縮短包裝裝材料、、容器和和設備的的清洗、、干燥和和滅菌的的間隔時時間以及及滅菌至至使用的的間隔時時間。應應建立規(guī)規(guī)定貯存存條件下下的時限限控制標標準。第五十八八條應應盡盡可能縮縮短藥液液從開始始配制到到滅菌（（或除菌菌過濾））的間隔隔時間。。應建立立各產(chǎn)品品規(guī)定貯貯存條件件下的時時限控制制標準。。6、除菌菌過濾注注意事項：雙手佩戴戴滅菌手手套，進進行消毒毒后，才才允許在在層流下下操作；；始終應在在設備/器具受受氣流保保護的開開口面下下方操作作；可能條件件下，使使用鑷子子或其他他器具（（最好使使用小工工具和儀儀器，避避免破壞壞層流））；按照以下下步驟安安裝過濾濾器；滅菌后，，在A級區(qū)、、層流下下將過濾濾器與容容器口相相連；先將傳輸輸（處理理）過程程中物件件的接觸觸點消毒毒，然后后再放入入在層流流中；準備安裝裝密封（（打開密密封的包包裝）；；從容器連連接處拿拿起滅菌菌紙；過濾器底底座放好好密封圈圈（打開開無菌包包裝，取取出密封封圈）；；過濾器放放置于密密封圈上上方-用安全夾夾關閉（（三爪夾夾）；；制藥用水水系統(tǒng)的的管理一、法規(guī)規(guī)對制藥藥用水的的要求：：《藥品生產(chǎn)產(chǎn)質量管管理規(guī)范范》2010修訂版：：第九十六六條制制藥用用水應適適合其用用途，并并符合《中華人民民共和國國藥典》的質量標標準及相相關要求求。制藥藥用水至至少應采采用飲用用水。第九十七七條水水處理理設備及及其輸送送系統(tǒng)的的設計、、安裝、、運行和和維護應應確保制制藥用水水達到設設定的質質量標準準。水處處理設備備的運行行不得超出出其設計計能力。第九十八八條純純化水水、注射射用水儲儲罐和輸輸送管道道所用材材料應無無毒、耐耐腐蝕；；儲罐的的通氣口口應安裝裝不脫落落纖維的的疏水性除除菌濾器器；管道的的設計和和安裝應應避免死死角、盲盲管。第九十九九條純純化水水、注射射用水的的制備、、貯存和和分配應應能防止止微生物物的滋生生。純化水可可采用循循環(huán)，注注射用水水可采用用70℃以上保溫溫循環(huán)。。第一百條條應應對制藥藥用水及及原水的的水質進進行定期期監(jiān)測，，并有相相應的記記錄。第一百零零一條應應按照操操作規(guī)程程對純化化水、注注射用用水管道道進行清清洗消毒毒，并并有相關關記錄。。發(fā)現(xiàn)制藥藥用水微微生物污污染達到到警戒限限度、糾糾偏限度度時應按按操作規(guī)規(guī)程處理理。二、制藥藥用水系系統(tǒng)介紹紹：1、制藥用用水的分分類：（1）、純化化水（2）、注射射用水（3）、滅菌菌注射用用水2、水系統(tǒng)統(tǒng)的處理理流程：：（1）沙濾（（6）超濾/蒸餾（2）活性炭炭吸附（（7）儲罐（3）軟化（（8）分配管管理（4）去離子子（（9）消毒（5）反滲透透（RO）3、反滲透透的原理理：在一一定的壓壓力下，，H2O分子可以以通過RO膜（小至至納米級級），而而原水中中的無機機鹽、金金屬離子子、有機機物、膠膠體、細細菌、病病毒等雜雜質無法法通過RO膜，從而而將純水水和濃縮縮水分開開。4、水的儲儲存和分分配系統(tǒng)統(tǒng)。（1）、消毒毒/滅菌：a、巴氏消消毒：大大于80℃處理1小時，適適用于活活性炭過過濾器、、軟化器器和儲存存循環(huán)管管路。b、臭氧消消毒：主主要用于于純化水水管道的的消毒。。c、紫外線線消毒：：200nm-300nm紫外線有有較強的的殺菌能能力，單單獨滅菌菌的滅菌菌效果甚甚微，長長與熱消消毒法和和化學消消毒法配配合使用用。（2）、儲罐罐a、安裝疏水水性除菌菌過濾器器。蒸汽加熱熱或者電電伴熱濾濾殼（防防凝水））定期做完完整性測測試b、加裝適當當數(shù)量的的噴淋球球。c、不可使用用邊側壁壁狀水位位測量裝裝置。（3）泵及閥閥門a、316L材質，最最好采用用變頻泵泵，以實實現(xiàn)回水水流速的的要求（（1.2m/s以上）。b、可選用蝶蝶閥及隔隔膜閥，，不可使使用球閥閥。（4）管道符合3D原則，即即主管道道外壁到到閥門中中心線的的長度小小于3主管道的的直徑。。WHO建議1.5D或者更小小。GMP檢查中常常見的問問題1、防止昆昆蟲進入入的方面面法規(guī)要求求：廠房房、設施施的設計計和安裝裝應當能能夠有效效防止昆昆蟲或其其他動物物進入。。應有相相應的規(guī)規(guī)程，過過程和結結果應有有記錄。。問題：（1）、防止止其他昆昆蟲和其其他動物物進入的的設施不足足。（2）、缺乏乏控制記記錄。（3）、滅蠅蠅燈安裝裝位置過過高。（4）、滅蠅燈安安裝在廠廠房的入入口正面面內(nèi)側，，容易吸吸引外部部昆蟲蟲進入。（5）、黏鼠板板的更換使使用記錄與與文件不符符。2、制藥用水水方面（1）、注射用用水的回水端沒有有安裝電導導率儀。（2）、電導率率儀文件規(guī)規(guī)定排水值值為1.3μs/cm，現(xiàn)場實際際儀表中設設定值為1.2μs/cm。（3）、純化水水及注射用用水檢測未未對微生物物限度制定定警戒限和和糾偏限。。（4）、TOC檢測項目公公司制定的的糾偏限為為大于等于于118ppb，但崗位在在線控制值值為大于等等于300ppb。（5）、純化水水及注射用用