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瘦肉精的分離提純及分析CHEMISTRY
瘦肉精目錄什么是瘦肉精1瘦肉精的作用及危害2樣品處理方法4檢測方法及儀器5CompanyLogo在中國,通常所說的“瘦肉精”則是指鹽酸克倫羅。它曾經(jīng)作為藥物用于治療支氣管哮喘,后由于其副作用太大而遭禁用。其它這樣類似藥物還有沙丁胺醇(Salbutamol)和特布他林(Terbutaline)等,同樣能起到“瘦肉”作用、卻對人體健康危害過大,因而造成安全隱患。它們也因而在全球遭到禁用。什么是瘦肉精CompanyLogo肥豬飼喂瘦肉精后,逐漸發(fā)生四肢震顫無力,心肌肥大心力衰竭等毒副作用。屠宰后,肉色鮮紅,脂肪層極薄,往往是皮貼著瘦肉,瘦肉豐滿。“瘦肉精”能使豬提高生長速度,增加瘦肉率,豬毛色紅潤光亮,收腹,賣相好;瘦肉精的作用
2
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1
CompanyLogo豬食用后在代謝過程中促進蛋白質(zhì)合成,加速脂肪的轉(zhuǎn)化和分解,提高了豬肉的瘦肉率,因此稱為瘦肉精。它用量大、使用的時間長、代謝慢,所以在屠宰前到上市,在豬體內(nèi)的殘留量都很大。這個殘留量通過食物進入人體,就使人體漸漸地中毒,積蓄中毒。如果一次攝入量過大,就會產(chǎn)生異常生理反應(yīng)的中毒現(xiàn)象,因此而被禁用。瘦肉精的作用CompanyLogo1.急性中毒有心悸,面頸、四肢肌肉顫動,有手抖甚至不能站立,頭暈,乏力。2.原有交感神經(jīng)功能亢進的患者,如有高血壓、冠心病、甲狀腺功能亢進者上述癥狀更易發(fā)生。3.與糖皮質(zhì)激素合用可引起低血鉀,從而導(dǎo)致心律失常。瘦肉精的危害三二
一
CompanyLogo一檢測方法瘦肉精的檢測方法二
三四
五感官識別法生物傳感技術(shù)色譜檢測技術(shù)酶聯(lián)免疫法化學(xué)分析法CompanyLogo感官識別法優(yōu)缺點不能夠定性和定量的測定瘦肉精的含量,并且無法準(zhǔn)確測量含量的多少。可以快速、簡單、定性對動物性食品中有無瘦肉精作出初步判定,但主觀性較強,可為消費者購買放心肉提供一定的參考。CompanyLogo化學(xué)分析法1.紫外可見分光度計
在243nm與296nm的波長出能得到最大的吸收2.酸堿法(pH試紙)
正常新鮮肉用試紙測試其酸堿度多呈中性或弱堿性,宰后1h后,用pH試紙測得pH值為6.2—6.3,當(dāng)在自然條件下冷卻6h以上時pH值為5.6—6.0,而含有鹽酸克倫特羅的豬肉則偏酸性,pH值明顯小于正常范圍,所以酸堿度法也能測?;瘜W(xué)分析法CompanyLogo化學(xué)分析法優(yōu)缺點雜質(zhì)干擾、靈敏度低、重現(xiàn)性差等缺點,只能作為初篩鹽酸克倫特羅的方法;不需要昂貴的儀器與試劑,也無復(fù)雜的樣品前處理,操作簡單,CompanyLogo酶聯(lián)免疫法酶聯(lián)免疫法酶標(biāo)克倫特羅結(jié)合物、標(biāo)準(zhǔn)溶液或者樣液結(jié)合的酶標(biāo)克倫特羅的結(jié)合物(無色底物)藍色物質(zhì)
黃色物質(zhì)終止劑
酶底物吸附在固相載體表面的克倫特羅特異性抗體酶標(biāo)檢測儀
洗滌
結(jié)合酶的催化CompanyLogo優(yōu)缺點操作簡便、準(zhǔn)確、投資小、成本低、速度快、儀器設(shè)備簡單,適合對活體動物做大批量樣品的快速分析,但不能實現(xiàn)現(xiàn)場檢測。
酶聯(lián)免疫法CompanyLogo色譜檢測技術(shù)色譜檢測技術(shù)色譜技術(shù)包括高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)、氣相色譜-傅里葉紅外聯(lián)用法(GC-FTIR)及薄層色譜法(TLC)等。目前,應(yīng)用最多的是高效液相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。為了更準(zhǔn)確的檢測出瘦肉精,在這里我們主要介紹氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。CompanyLogo液相色譜—質(zhì)譜/質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)本標(biāo)準(zhǔn)適用于動物源性食品肌肉和內(nèi)臟中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測。試樣中的藥物殘留采用pH5.2的乙酸銨緩沖液提取,同時加入β-鹽酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酯酶進行酶解后,提取液經(jīng)C18和SCX雙SPE柱凈化,液相色譜—質(zhì)譜進行測定,內(nèi)標(biāo)法定量CompanyLogo高效液相色譜法(HPLC)HPLC適合測定熱不穩(wěn)定和強極性的β-激動劑及其代謝產(chǎn)物,而且,HPLC可以與柱前提取、純化及柱后熒光衍生化反應(yīng)和質(zhì)譜(MS)等系統(tǒng)聯(lián)用,容易實現(xiàn)分析過程的自動化。黃士新等(1995)應(yīng)用紫外檢測器,在λ=243nm,色譜柱:shimpackCLC-ODS150×6.0mn,流速:1mL/min,柱溫:室溫30℃的條件下檢測豬肝臟和豬肉中的CLB殘留,最低檢測限可達2ng/g[4]。國外有人應(yīng)用HPLC(二極管陣列檢測器)測定動物性食品中CLB殘留,測得最低檢測限為1.26ng/g,回收率達98.9%[5]。目前,我國已將HPLC法作為檢測CLB殘留的半確證性方法,最低檢測限范圍為1~15ng/g,其優(yōu)點是專屬性好、選擇性強、檢測精確度較高,而且假陽性率低;缺點是樣品處理時間長,檢測過程煩瑣、難于操作,需貴重儀器,在實際應(yīng)用中受到一定的限制。CompanyLogo生物傳感技術(shù)生物傳感器是一門有多種學(xué)科互相滲透成長起來的新興學(xué)科,已引起世界各國的重視。其原理為待測物與分子識別元件特異性的結(jié)合后,所產(chǎn)生的復(fù)合物(或光、熱等)通過信號轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢暂敵龅碾娦盘枴⒐庑盘柕?,從而達到分析檢測的目的。用它檢測鹽酸克倫特羅的原理與酶聯(lián)免疫法幾乎相同,只是將酶與底物反應(yīng)的化
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