食品安全地方標(biāo)準(zhǔn) 面制食品中十二烷基苯磺酸鈉的測定

PAGE4面制食品中十二烷基苯磺酸鈉的測定高效液相色譜-熒光檢測器法范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了面制食品中線性十二烷基苯磺酸鈉的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于蒸、烤、油炸類面制食品中線性十二烷基苯磺酸鈉的測定。本標(biāo)準(zhǔn)檢出限為5mg/kg（以干燥品計）。規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3術(shù)語與定義下列術(shù)語與定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)3.1面制食品以小麥粉為主要原料，經(jīng)成型或蒸、烤、油炸而制成的食品。4原理線性十二烷基苯磺酸鈉分子中存在共扼體系，在熒光激發(fā)光譜掃描下存在特征發(fā)射峰。在一定濃度范圍內(nèi)，其熒光強度與線性十二烷基苯磺酸鈉的濃度成正比。干燥、粉碎后的試樣，經(jīng)超聲、恒溫水浴振蕩提取、沉淀蛋白、過濾得到的測試液經(jīng)高效液相色譜儀-熒光檢測器測定，最佳激發(fā)波長為230nm，發(fā)射波長為290nm。根據(jù)保留時間定性，根據(jù)峰面積定量。5試劑與材料方法所用試劑，除另有規(guī)定外，均為分析純，實驗用水符合GB/T6682規(guī)定的一級水要求。5.1甲醇：色譜純5.2冰乙酸：分析純5.3線性十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：純度＞99%（分子式：C18H29NaO3S，CASNo.：2211-98-5）5.4乙酸鋅溶液（1mol/L）：取21.9g乙酸鋅（Zn（CH3C0O）2·2H2O），加3mL冰乙酸（5.2），用水溶解后稀釋至100mL。5.5亞鐵氰化鉀溶液（10.6%）：取10.6g亞鐵氰化鉀（K4Fe（CN）6·3H2O），加水稀釋至100mL。5.650%乙醇溶液（v/v）：無水乙醇與水以體積比1:1混合。5.7乙酸銨溶液（100mmol/L）：取乙酸銨（CH3COONH4）7.708g，加水稀釋至1000mL，用冰乙酸（5.2）調(diào)節(jié)pH至3.4。5.8標(biāo)準(zhǔn)儲備液：稱取線性十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)0.01g（準(zhǔn)確至0.0001g），用50%乙醇溶液（5.6）配制成100μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。5.9標(biāo)準(zhǔn)系列溶液：取標(biāo)準(zhǔn)儲備液（5.8）適量，分別用50%乙醇溶液（5.6）稀釋為0.2μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液，臨用現(xiàn)配。6儀器所有玻璃儀器必須經(jīng)洗液、酸泡后再用水沖洗干凈，嚴禁使用各種洗滌產(chǎn)品清洗。6.1高效液相色譜儀：配熒光檢測器。6.2分析天平：感量0.001g。6.3分析天平：感量0.0001g。6.4恒溫水浴振蕩器：0～100℃。6.5超聲波清洗器。6.6電熱恒溫干燥箱。6.7微孔濾膜：有機相0.45μm。6.8酸度計。7試樣制備蒸、烤類試樣：取適量，切成薄片，置電熱恒溫干燥箱中，80℃烘干，研細備用。油炸類試樣：取適量，除去金黃色外皮，切成薄片，置電熱恒溫干燥箱中，80℃烘干，研細備用。8分析步驟8.1供試液的制備稱取試樣細粉0.5g（準(zhǔn)確至0.001g），置50mL刻度離心管中，加50%乙醇溶液（5.6）適量，再加乙酸鋅溶液（5.4）1.0mL和亞鐵氰化鉀溶液（5.5）1.0mL，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）10min，取出，置恒溫水浴振蕩器中，于50℃恒溫震蕩45min，取出，放冷。加50%乙醇溶液（5.6）定容至刻度，混勻。過0.45μm有機濾膜，供HPLC測定分析。8.2液相色譜參考條件色譜柱：Synergipolar-RP250×4.6mm，4μm?；蚱渌刃V柱；流動相：甲醇+乙酸銨溶液（5.7）=75+25（v/v）；流速：1.0mL/min；柱溫：室溫；進樣量：10μL；Gain（增益）：1；激發(fā)波長：EX=230nm；發(fā)射波長：EM=290nm。8.3測定8.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：將標(biāo)準(zhǔn)系列溶液0.2μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL分別進樣10μL，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。8.3.2試樣測定取制備好的試樣溶液10μL，進行液相色譜分析，根據(jù)保留時間定性，根據(jù)峰面積外標(biāo)法定量。8.3.3色譜圖色譜圖參見附錄A9結(jié)果計算試樣中線性十二烷基苯磺酸鈉的含量按式（1）進行計算：……………………（1）式中：——試料中線性十二烷基苯磺酸鈉的含量（以干燥品計），單位為毫克每千克（mg/kg）；——測定試料溶液中線性十二烷基苯磺酸鈉的含量，單位為微克每毫升（μg/mL）；——試料溶液定容體積，單位為毫升（mL）；——試料質(zhì)量（干燥品），單位為克（g）；以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測XX果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。10精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測XX果的絕對差值不得超過算數(shù)平均值的10%。_________________________________

附錄A（資料性附錄）A.1線性十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖（5μg/mL）