麝香保心丸：治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究(新)課件

麝香保心丸：

治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究

TherapeuticAngiogenesisand

theSystemsBiologicResearchofSXBXPill1冠心病的治療，要解決血氧供需平衡，不是減少心肌耗氧，就是增加冠脈供血血管新生背景與概念血管新生的研究方法促進(jìn)治療性血管新生的方法麝香保心丸促血管新生研究提要2治療性血管新生研究背景Folkman在1970年代早期發(fā)現(xiàn)血管新生：腫瘤生長(zhǎng):血管生長(zhǎng)因子與血管新生相關(guān)1983年,Kumar等發(fā)現(xiàn)：心肌梗塞后有“血管生長(zhǎng)因子”1980年代中期，確定并純化了多種與血管新生有關(guān)的多肽1994年JeffIsner’s實(shí)驗(yàn)室倡導(dǎo)將血管生成用于心血管研究中。EllisUnger’s實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)應(yīng)用促血管生成的蛋白質(zhì)可以改善冠脈側(cè)支。JudahFolkman（1933-2008）美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院士，于70年代提出了腫瘤新生血管學(xué)說，該理論后被心血管領(lǐng)域應(yīng)用于促血管新生研究3血管新生(angiogenesis)

相當(dāng)于廢墟上重建在缺血區(qū)域現(xiàn)有血管基礎(chǔ)上通過芽生(sprouting)、分枝方式形成成熟的血管，由初級(jí)網(wǎng)狀血管結(jié)構(gòu)到復(fù)雜網(wǎng)狀血管結(jié)構(gòu)的過程。

血管內(nèi)皮細(xì)胞基底膜降解、細(xì)胞外基質(zhì)消化吸收。

內(nèi)皮細(xì)胞向血管生長(zhǎng)刺激物方向移行和增殖。

移行的血管內(nèi)皮細(xì)胞伸展，彼此相連形成血管芽孢。

血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖使中空的管腔延長(zhǎng)。5血管發(fā)生（Vasculogenesis）相當(dāng)于原材料新建血管增生——來源于中胚層前體的內(nèi)皮細(xì)胞原位分化、增殖形成初級(jí)毛細(xì)血管叢。血管重構(gòu)——初級(jí)毛細(xì)血管形成互相連接、分支眾多、成熟的血管結(jié)構(gòu)。6動(dòng)脈生成（Arteriogenesis）相當(dāng)于休閑動(dòng)脈的動(dòng)員原有的側(cè)支血管——正常心臟冠脈間存在的交通吻合血管，直徑20至200μm,呈薄壁樣管狀結(jié)構(gòu)，通常狀態(tài)下呈關(guān)閉狀態(tài)。開放不僅僅是一個(gè)被動(dòng)過程，開放后會(huì)出現(xiàn)一系列細(xì)胞生長(zhǎng)因子分泌、DNA合成和細(xì)胞增殖等血管主動(dòng)生長(zhǎng)過程。7治療性血管新生

（TherapeuticAngiogenesis）手術(shù)搭橋（冠脈旁路血管移植術(shù)） 藥物搭橋（藥物促進(jìn)的治療性血管新生）

通過藥物、基因治療或其他手段促進(jìn)冠狀動(dòng)脈的血管新生，以達(dá)到改善心肌缺血癥狀和患者預(yù)后的目的。8血管新生的研究方法和進(jìn)展10動(dòng)物急性心肌缺血模型兔、鼠選擇性冠狀動(dòng)脈結(jié)扎、栓塞造成動(dòng)物缺血模型，給予干預(yù)后觀察梗死周邊區(qū)血管新生情況。大鼠心梗模型的制備12血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)：因?yàn)槿四氺o脈(HUV)在某些方面具有與動(dòng)脈生物學(xué)特征相似的優(yōu)點(diǎn)，較之動(dòng)物血管內(nèi)皮更符合人體情況。增殖：MTT比色法遷移：Transwell小室體外成血管：體外血管生成試劑盒分泌：培養(yǎng)液內(nèi)NO、VEGF人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)14血管生長(zhǎng)因子/抑制因子

干預(yù)因素對(duì)組織生長(zhǎng)因子/抑制因子的影響生長(zhǎng)因子：VEGF、bFGF，TGF、促血管生成素-1（Ang-1）抑制因子：血管新生抑制素、內(nèi)皮細(xì)胞抑制素、組織金屬蛋白酶抑制劑、血栓反應(yīng)素-1，2(thrombospodin-1&2，TSP-1&2)、血小板因子-4(PF-4)等缺血心肌中的VEGF染色顆粒15促進(jìn)治療性血管新生的方法促血管生長(zhǎng)因子的應(yīng)用干細(xì)胞移植藥物干預(yù)16外源性輸注生長(zhǎng)因子目前，研究最廣泛的血管生成生長(zhǎng)因子家族為VEGF和FGF。給急性心肌梗死動(dòng)物冠脈內(nèi)注射bFGF，心肌梗死的面積顯著縮小，缺血或梗塞心肌內(nèi)毛細(xì)血管及小動(dòng)脈數(shù)目增加。VEGF是一種內(nèi)皮細(xì)胞特異性有絲分裂原和活體血管新生誘導(dǎo)物。VEGF因其對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞作用的特異性而廣泛應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)性肢體及心肌缺血的研究。17導(dǎo)入生長(zhǎng)因子基因近來病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染已作為一種血管形成生長(zhǎng)因子釋放的方法應(yīng)用于慢性缺血?jiǎng)游锬Ｐ汀?/p>

VEGF基因，PDGF基因?qū)⒑琕EGFcDNA的真核表達(dá)載體pVS121吸附在球囊上，并定位轉(zhuǎn)移至梗塞冠狀動(dòng)脈近心端。轉(zhuǎn)染VEGF基因后心肌血管密度明顯增加，有效促進(jìn)了血管新生。18

骨髓干／祖細(xì)胞移植成人EPC和造血干細(xì)胞發(fā)生于共同的干細(xì)胞，都來源于造血器官骨髓。有希望促進(jìn)血管新生并改善心功能，為缺血性心臟病提供了一種新的治療選擇。用PCR法對(duì)人工血管內(nèi)側(cè)再內(nèi)皮化細(xì)胞的基因進(jìn)行分析，證實(shí)移植的骨髓細(xì)胞能參與內(nèi)皮的形成。20胞外基質(zhì)的研究在血管新生過程中，內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管腔形成不但與促進(jìn)/拮抗血管生成因子有關(guān)，而且也受基質(zhì)降解蛋白酶和細(xì)胞間基質(zhì)的調(diào)節(jié)。胞外基質(zhì)的重建可能產(chǎn)生促或抗血管生成效應(yīng)。蛋白酶類重塑胞外基質(zhì)可以促進(jìn)細(xì)胞遷移，這是血管新生的重要條件。

胞外基質(zhì)分子和胞外基質(zhì)重塑事件在血管新生調(diào)節(jié)中扮演了一個(gè)關(guān)鍵角色。21Nature/Vol428/3April2004/664-8

145例HSC移植入正?；蛘邠p傷的成年小鼠心臟的實(shí)驗(yàn)研究，沒有發(fā)現(xiàn)由干細(xì)胞轉(zhuǎn)分化而來的心肌，并且干細(xì)胞移植組相對(duì)于假移植組心肌細(xì)胞數(shù)量沒有明顯的增加，為心肌修復(fù)的臨床研究提出了質(zhì)疑。心臟功能上的改善可能是由于移植對(duì)左心室重塑的影響或者是產(chǎn)生了新生血管，而不是心肌再生。過去兩年來，開展了一些使用骨髓祖細(xì)胞進(jìn)行心臟修復(fù)臨床試驗(yàn)。在目前研究中，HSC不能轉(zhuǎn)化形成新的心肌，動(dòng)搖了這些試驗(yàn)的理論基礎(chǔ)。

造血干細(xì)胞（HSC）治療的不足23干細(xì)胞治療心肌梗死患者的臨床試驗(yàn)

StudynCellType/TreatmentModeofDelivery

EndPoint

P

Janssensetal67BMMNCsIntracoronaryLVejectionfraction0.36BOOST60BMMNCsIntracoronaryLVejectionfraction0.0026ASTAMI100BMMNCsIntracoronaryLVejectionfraction0.05*REPAIR-AMI204BMMNCsIntracoronaryLVejectionfraction0.021Zohlnhoeferetal114G-CSFSubcutaneousInfarctsize0.79STEMMI62G-CSFSubcutaneousLVsystolicwallthickening1.00BMMNCs骨髓單核細(xì)胞;G-CSF,粒細(xì)胞集落刺激因子;*LVejectionfractionwashigherinthecontrolgroup.Circulation.2006;114:353-358.

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作為一項(xiàng)新生事物，干細(xì)胞移植可能是治療缺血性心臟病令人激動(dòng)的新選擇。尤其是那些有大面積心肌梗死患者，因其預(yù)后不佳，更有可能從細(xì)胞移植治療中獲益。但迄今為止，臨床試驗(yàn)結(jié)果相互矛盾，仍然處于實(shí)驗(yàn)性治療階段。26促進(jìn)血管新生中醫(yī)藥如何？

中醫(yī)藥益氣活血、祛瘀生新等許多治療法則以及臨床的有效性，也為中醫(yī)藥血管新生的研究提供了理論和臨床依據(jù)。27血管新生研究的中醫(yī)藥理論基礎(chǔ)“活血生肌”、“袪瘀生新”創(chuàng)傷愈合不良、潰瘍不愈、心肌缺血側(cè)枝代償不足等。戴瑞鴻…，冠心病心肌缺血的治療性血管生成與中醫(yī)藥中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志.2000,20(3).-163-16428中西醫(yī)結(jié)合治療冠心病的特色“血”“脈”兩條途徑，整體治療，體現(xiàn)中醫(yī)藥特色活血化瘀復(fù)方丹參滴丸丹參片益氣活血芳香溫通麝香保心丸血脈降低血粘度抗血小板抗凝溶栓血管擴(kuò)張內(nèi)皮保護(hù)血管新生中西醫(yī)結(jié)合治療心腦血管疾病3031起效時(shí)間：

麝香保心丸和硝酸甘油相似，最快30秒，一般在3～5分鐘之內(nèi)心電圖有效率：

麝香保心丸和硝酸甘油無顯著性差異副反應(yīng)：

麝香保心丸的副反應(yīng)明顯低于硝酸甘油。麝香保心丸與硝酸酯類療效對(duì)比32保護(hù)血管內(nèi)皮，抑制動(dòng)脈粥樣硬化麝香保心丸能提高內(nèi)源性一氧化氮合酶(eNOS)基因的表達(dá)，增強(qiáng)血管一氧化氮合酶(NOS)活力，以及抗炎、減少脂質(zhì)浸潤(rùn)等途徑保護(hù)血管內(nèi)皮臨床可見長(zhǎng)期治療后血管內(nèi)皮功能改善，動(dòng)脈粥樣硬化程度減輕——與緩釋單硝酸異山梨酯（DRIM）比較反應(yīng)性充血肱動(dòng)脈內(nèi)徑明顯增加麝香保心丸組頸動(dòng)脈IMT顯著變薄33麝香保心丸的促血管新生作用對(duì)血管生長(zhǎng)因子的影響雞胚絨毛尿囊膜（CAM）試驗(yàn)大鼠缺血?jiǎng)游锬Ｐ团R床研究（心肌核素顯像)對(duì)腫瘤及斑塊血管新生的影響對(duì)骨髓干細(xì)胞的動(dòng)員對(duì)生長(zhǎng)因子受體的影響（正在進(jìn)行）尸檢回顧性分析（正在進(jìn)行）34體外細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)麝香保心丸促進(jìn)培養(yǎng)的牛腎上腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和形成管腔結(jié)構(gòu)（生理鹽水對(duì)照組細(xì)胞）（麝香保心丸組細(xì)胞）麝香保心丸促進(jìn)血管新生作用的證據(jù)汪珊珊，李勇等。麝香保心丸對(duì)雞胚絨毛尿囊膜及培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的促血管生成作用，《中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志》2003,23(2)

35麝香保心丸的促血管新生作用的證據(jù)體外組織學(xué)實(shí)驗(yàn)：麝香保心丸能促進(jìn)雞胚絨毛尿囊膜的血管生成作用（加有生理鹽水的CAM）（加有麝香保心丸的CAM）汪珊珊，李勇等。麝香保心丸對(duì)雞胚絨毛尿囊膜及培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的促血管生成作用，《中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志》2003,23(2)36增加心肌梗塞大鼠心肌VEGF含量（免疫組化染色）資料來源:麝香保心丸對(duì)實(shí)驗(yàn)性心肌梗塞大鼠心臟的促血管生成作用《中成藥》2002；24（6）：446-449（生理鹽水組）

（麝香保心丸組）促進(jìn)缺血心肌血管生長(zhǎng)因子表達(dá)371、2.小、大劑量麝香保心丸3.貝復(fù)濟(jì)與肝素聯(lián)用組4.模型組5.假手術(shù)組6.正常組7.卡托普利組在體研究：大鼠心肌梗死模型梗死邊緣區(qū)

1234567麝小麝大bFGFMFNK38麝香保心丸對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞的影響A為L(zhǎng)SCM激發(fā)綠色為結(jié)合FITC-UEA-I的EPCs；B為L(zhǎng)SCM激發(fā)紅色的為攝取DiI-Ac-LDL的EPCs；C為L(zhǎng)SCM激發(fā)呈現(xiàn)橙色為FITC-UEA-I和攝取DiI-Ac-LDL的EPCs（C為正在鑒定的分化祖細(xì)胞）梁春、吳宗貴等，中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，June2009,Vol.29,No.639麝香保心丸對(duì)分化祖細(xì)胞的影響與對(duì)照組比較，麝香保心丸1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml組可以增加EPCs增殖、遷移、粘附、及體外血管形成能力。40中藥促血管新生作用的可能機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)麝香保心丸培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞釋放VEGF和bFGF

增加，VEGF與bFGF

的mRNA表達(dá)增高。麝香保心丸使血管生長(zhǎng)抑制因子的減少。麝香保心丸提高內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPCs）遷徙、粘附和血管形成能力。41雙向調(diào)節(jié)—

對(duì)斑塊血管新生的抑制在同一動(dòng)物雙模型（同時(shí)有心肌缺血和動(dòng)脈粥樣斑塊）發(fā)現(xiàn)：麝香保心丸促進(jìn)缺血心肌血管新生麝香保心丸抑制斑塊血管新生42對(duì)斑塊內(nèi)新生血管的影響

對(duì)照組斑塊麝香保心丸組斑塊CD34免疫組化染色CD34免疫組化染色

250倍

CD34抗原是跨膜細(xì)胞糖蛋白，主要表達(dá)于人或鼠的造血干細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞中，有學(xué)者認(rèn)為CD34為細(xì)胞間黏附及信號(hào)傳導(dǎo)提供了條件，促使內(nèi)皮細(xì)胞分裂、新生的細(xì)胞在CD34的參與下向血管外遷移黏附，構(gòu)建成新生血管的骨架。43斑塊內(nèi)MMP-3陽(yáng)性面積比較，能抑制基質(zhì)降解

對(duì)照組斑塊麝香保心丸組斑塊MMP-3免疫組化染色MMP-3免疫組化染色

放大250倍

斑塊內(nèi)新生血管情況44斑塊內(nèi)的血管新生研究證實(shí)：具有促進(jìn)治療性血管新生作用的中成藥麝香保心丸，能特異性地抑制斑塊內(nèi)的血管生長(zhǎng)，改變斑塊內(nèi)的基質(zhì)變化，抑制基質(zhì)降解，從而有利于斑塊的穩(wěn)定。中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志2008.05.28;45麝香保心丸對(duì)裸鼠人LoVo結(jié)腸癌的影響麝香保心丸對(duì)腫瘤組織血管生成因子（VFGF、bFGF）的影響組別n肝轉(zhuǎn)移數(shù)瘤重（g）抑瘤率（％）模型組10100.67±0.100小劑量組10100.59±0.0811.4中劑量組1090.51±0.11*23.6大劑量組1090.49±0.08*27.1麝香保心丸對(duì)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的影響藥學(xué)實(shí)踐雜志2007，25（5）：29546結(jié)論臨床常用的冠心病治療藥物中，麝香保心丸等有明確的促血管新生作用。中藥促血管新生的機(jī)理復(fù)雜，可能涉及血管生長(zhǎng)因子及其受體，以及血管抑制因子等多方面。對(duì)同時(shí)伴有的心梗范圍受限、心室重構(gòu)的改善和心功能的改善，血管新生可能是參予機(jī)理之一。雙向調(diào)節(jié)：抑制斑塊內(nèi)血管新生和基質(zhì)降解，穩(wěn)定斑塊；降低腫瘤微血管密度，減少腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。47麝香保心丸的血管新生研究2002年，發(fā)現(xiàn)麝香保心丸對(duì)心肌梗塞大鼠的促血管新生2003年，發(fā)現(xiàn)麝香保心丸促進(jìn)CAM血管新生及血管內(nèi)皮細(xì)胞管腔結(jié)構(gòu)形成2004年，麝香保心丸促進(jìn)血管新生研究結(jié)果發(fā)表于美國(guó)lifescience雜志2006年，麝香保心丸促進(jìn)血管新生系列研究榮獲中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)2007年，發(fā)現(xiàn)麝香保心丸的雙向血管新生調(diào)節(jié)2008年，發(fā)現(xiàn)麝香保心丸對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞的動(dòng)員作用48治療各種類型的心絞痛——Meta分析（25項(xiàng)）49麝香保心丸治療后增加心肌灌注

總有效率70.6%羅海明，戴瑞鴻等。麝香保心丸改善心肌缺血作用的核心臟影像學(xué)研究，《中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志》1996,16(6):325-5心肌影像學(xué)實(shí)驗(yàn)——SPECT5010例病人（CAG或OMI），麝香保心丸長(zhǎng)期治療后對(duì)心肌灌注/代謝的改善服藥前PET心肌掃描6月時(shí)PET心肌掃描PET評(píng)價(jià)麝香保心丸對(duì)冠心病心肌血流的影響51心肌影像學(xué)實(shí)驗(yàn)——PET10例受試者共取得180個(gè)心肌節(jié)段作靜息－負(fù)荷和麝香保心丸治療前－后自身對(duì)照分析

相對(duì)冠脈血流儲(chǔ)備分?jǐn)?shù)治療前后無顯著差異，但治療后似有可提高相對(duì)儲(chǔ)備分?jǐn)?shù)的趨勢(shì)。(P＝0.077)相對(duì)血流密度分?jǐn)?shù)相對(duì)血流密度分?jǐn)?shù)52臨床研究表1－1強(qiáng)化治療組與常規(guī)治療組給藥方案組別藥物用法與用量隨訪中位時(shí)間強(qiáng)化治療組（抗血小板，調(diào)脂，抗缺血等）＋麝香保心丸2丸／次，3次／日；胸痛時(shí)1－2丸含服27月常規(guī)治療組（抗血小板，調(diào)脂，抗缺血等）胸痛時(shí)1－2丸含服27月每丸22.5mg，每日含服<3次。兩組在治療期間均不得使用其他抗缺血中藥。藥物由試驗(yàn)藥品由上海和黃藥業(yè)提供，生產(chǎn)批號(hào)G040603－G060603。上海市科委基金：中藥現(xiàn)代化專項(xiàng)課題04DZ19856資助53治療穩(wěn)定性心絞痛－減少危險(xiǎn)事件

主要臨床事件：心梗、心絞痛住院或急診、卒中、心衰、心血管原因住院或急診*54治療穩(wěn)定性心絞痛－減少危險(xiǎn)事件

總臨床事件：主要臨床事件＋其他原因住院或急診*55長(zhǎng)期服用治療穩(wěn)定性心絞痛*56麝香保心丸合并用藥情況

入組時(shí)6個(gè)月隨訪研究結(jié)束時(shí)對(duì)照組麝香保心丸組對(duì)照組麝香保心丸組對(duì)照組麝香保心丸組抗血小板類777674757876ACEI/ARB類555250494645β受體阻斷劑403938363538他汀類464842433335鈣離子拮抗劑373933343031硝酸酯類2930*2417*2721利尿劑566697洋地黃類323264200名冠心病穩(wěn)定性心絞痛患者：硝酸酯類藥物在治療6個(gè)月時(shí)明顯減少。

57麝香保心丸治療性血管新生作用小結(jié)麝香保心丸具有明確的促血管新生的作用，且臨床應(yīng)用能取得良好的收益

促進(jìn)治療性血管新生通過對(duì)機(jī)體自身的生長(zhǎng)因子及受體調(diào)節(jié)，促進(jìn)缺血心肌血管新生治療性血管新生的雙向調(diào)節(jié)機(jī)制麝香保心丸促進(jìn)缺血心肌血管新生的同時(shí)，通過保護(hù)內(nèi)皮、抑制炎癥、改善缺氧等因素，抑制斑塊內(nèi)血管新生對(duì)冠心病的遠(yuǎn)期預(yù)后有改善作用，合并應(yīng)用化學(xué)藥物安全58麝香保心丸的系統(tǒng)生物學(xué)研究59系統(tǒng)生物學(xué)破解中藥黑匣需要知道中藥復(fù)方的物質(zhì)組成；這些物質(zhì)組成在藥物中是否穩(wěn)定可控；進(jìn)入人體的代謝情況如何；進(jìn)入人體的多種物質(zhì)成分在機(jī)體中發(fā)揮什么樣的生物效應(yīng)。對(duì)疾病的轉(zhuǎn)歸有何影響中藥復(fù)方“理論上”要解決的問題

系統(tǒng)研究中藥復(fù)方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、配伍規(guī)律、廣泛的藥理及其作用機(jī)理，為打破長(zhǎng)久以來困擾中醫(yī)藥研究的“黑匣”問題提供了契機(jī)。60化學(xué)物質(zhì)組學(xué)明確了28個(gè)藥物入血成分

代謝組學(xué)麝香保心丸調(diào)節(jié)心梗時(shí)炎癥反應(yīng)、能量代謝、心肌肥大的代謝過程麝香保心丸對(duì)心梗相關(guān)功能基因/差異基因的影響

基因組學(xué)血管新生關(guān)鍵促進(jìn)因子/抑制因子研究

蛋白組學(xué)冠心病治療相關(guān)受體調(diào)控研究麝香保心丸增效減毒機(jī)理研究測(cè)定了蟾酥等藥物組分的體內(nèi)代謝中藥干預(yù)系統(tǒng)機(jī)體應(yīng)答系統(tǒng)麝香保心丸系統(tǒng)生物學(xué)研究

專項(xiàng)名稱：“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)麝香保心丸現(xiàn)代科學(xué)研究與技術(shù)創(chuàng)新申報(bào)專題編號(hào)：2008ZX0920261分離并鑒定95個(gè)化合物現(xiàn)代分離技術(shù)與LC-MS快速分離鑒定鑒定入血成分30個(gè)血清藥物化學(xué)化學(xué)物質(zhì)組學(xué)研究Chromatography：2010,11(4):417-430BiomedicalChromatography：2011,7(3):824-831復(fù)方化學(xué)成分研究體內(nèi)化學(xué)成分研究麝香保心丸化學(xué)物質(zhì)組學(xué)研究1-hydroxyl-cinobufaginnicotinamideadenine62抑制心室擴(kuò)大，心肌重構(gòu)減弱危險(xiǎn)因素內(nèi)皮保護(hù)括冠狀動(dòng)脈促血管新生抑制血栓形成縮小心梗面積增強(qiáng)心肌收縮心肌損傷保護(hù)促生物利用度Ca+胞內(nèi)濃度PAF膠原蛋白TXA2

PGI2NOICAM-1

VCAM-1抗凝血酶活性心律耗氧量纖溶酶活性纖維蛋白原TFAATNF，IL血管收縮血壓升高EC增殖胰島素活性Ca+胞內(nèi)濃度血管內(nèi)皮細(xì)胞分化VEGFBcl-2/BaxAngⅡ心肌營(yíng)養(yǎng)成分脂肪代謝NO，SOD脂質(zhì)過氧化中性粒細(xì)胞進(jìn)潤(rùn)麝香麝香酮麝香-1甲醇提取肉桂肉桂酸桂皮醛蘇合香冰片龍腦蟾酥bufalin牛黃人參Rg1Rb1Re牛黃酸膽酸鵝去氧膽酸熊去氧膽酸麝香保心丸中的組效關(guān)系研究體現(xiàn)了君臣佐使配伍，減毒增效，整合調(diào)節(jié)特點(diǎn)63麝香保心丸機(jī)制研究

-------基因組學(xué)研究

進(jìn)一步篩選得到34個(gè)共性差異基因。其中14個(gè)基因在麝香保心丸組和心肌缺血組中呈現(xiàn)表達(dá)量相反的結(jié)果。可見麝香保心丸對(duì)這14個(gè)基因的作用明顯（逆向表達(dá)）。這些基因主要與心肌能量代謝相關(guān)。64麝香保心丸差異基因涉及的信號(hào)通路分析

麝香保心丸作用后的差異基因涉及能量代謝、整聯(lián)蛋白、催化活性、氧化應(yīng)激、肌動(dòng)蛋白、激肽原酶激活、胰島素生長(zhǎng)因子，而這些靶點(diǎn)多為心血管疾病中的重要分子機(jī)制。

651.Tpm1基因（原肌球蛋白家族，可以阻止心臟突發(fā)死亡）

重點(diǎn)差異基因Real-timePCR分析麝香保心丸組陽(yáng)性藥組模型組中，Tpm1基因表達(dá)明顯增加，麝香保心丸干預(yù)后其表達(dá)恢復(fù)正常，使Tpm1對(duì)心肌收縮的調(diào)節(jié)恢復(fù)正常，保護(hù)心臟收縮功能；結(jié)合病理形態(tài)可知麝香保心丸對(duì)心臟的恢復(fù)及保護(hù)作用更強(qiáng)。66Fndc1和Fn1基因

（纖維連接蛋白家族，與心臟組織纖維化呈正相關(guān)）

麝香保心丸干預(yù)后，F(xiàn)ndc1基因表達(dá)顯著下調(diào)，纖維化減輕，推測(cè)麝香保心丸具有抑制缺血心肌纖維化的作用。

麝香保心丸干預(yù)后Fn1基因表達(dá)上調(diào)至正常水平麝香保心丸對(duì)心肌缺血后纖維化過程具有抑制或逆轉(zhuǎn)的作用。Fndc1結(jié)果Fn1結(jié)果67血液代謝組學(xué)評(píng)價(jià)-心梗后治療術(shù)后5h術(shù)后15d3-15d動(dòng)態(tài)變化體內(nèi)調(diào)控途徑：a：減少類固醇生成，抑制心肌細(xì)胞的肥大，促進(jìn)心肌功能的恢復(fù)b：調(diào)控糖酵解過程，恢復(fù)能量代謝所需能量的正常供應(yīng)c：抑制花生四烯酸代謝通路，減輕心肌梗死后的炎癥反應(yīng)麝香保心丸代謝組學(xué)評(píng)價(jià)68麝香保心丸組模型組正常組從圖中可以看出盡管麝香保心丸組沒有回調(diào)至正常狀態(tài)，但仍然和模型組有明顯改變，并且向正常組偏移?？梢钥闯鲼晗惚Ｐ耐杞M對(duì)心肌梗死有預(yù)保護(hù)作用。麝香保心丸代謝組學(xué)評(píng)價(jià)血液代謝組學(xué)評(píng)價(jià)-心梗預(yù)保護(hù)麝香保心丸組69尿液代謝組學(xué)評(píng)價(jià)術(shù)后15d3-15d動(dòng)態(tài)變化麝香保心丸對(duì)心肌梗死大鼠體內(nèi)異常代謝物的回調(diào)作用明顯MolBioSyst：2011,7(3):824-831麝香保心丸代謝組學(xué)評(píng)價(jià)70IF=4.015麝香保心丸主要通過調(diào)控能量代謝