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唐氏征產(chǎn)前篩查騰程孕期胎兒軟件操作規(guī)程本文檔提示醫(yī)院從孕婦初次到醫(yī)院抽血篩查直至最后孕婦妊娠結(jié)局,孕婦、檢驗(yàn)科、產(chǎn)科涉及其它相關(guān)部門需要注意的一些步驟、過(guò)程以及其他注意事項(xiàng)。各醫(yī)院可以結(jié)合自身流程融入這些步驟。孕婦告知書:在孕婦進(jìn)行唐氏征產(chǎn)前篩查之前,醫(yī)院有義務(wù)告知孕婦“什么是篩查”,“產(chǎn)前篩查是做什么的”“篩查報(bào)告的結(jié)果和意義”,需要提到存在假陽(yáng)性和假陰性的可能。在孕婦知情并簽字同意后才能進(jìn)行篩查。告知書的內(nèi)容可以參考另一文檔。通常情況下,孕婦告知書可以和孕婦資料收集同時(shí)進(jìn)行。需要注意的是孕中期唐氏篩查的最佳時(shí)間是孕15周0天到18周0天,本軟件可以篩查的孕周時(shí)間是 14周0天到21周6天。由于唐氏篩查是為隨后可能需要的診斷測(cè)試服務(wù),而目前很多地方做產(chǎn)前診斷需要排很長(zhǎng)時(shí)間的隊(duì),這很可能耽誤后續(xù)措施實(shí)施的最佳時(shí)間。醫(yī)院可以根據(jù)這個(gè)情況,適當(dāng)縮短可以篩查的時(shí)間范圍,并在孕婦告知書里注明這個(gè)原因。孕婦資料收集:知情書經(jīng)孕婦本人簽字后,孕婦還需如實(shí)提供一些篩查必須數(shù)據(jù),并提供一些篩查相關(guān)數(shù)據(jù)。篩查必須數(shù)據(jù)包括:姓名、出生日期、末次月經(jīng)信息、 B超信息、體重、糖尿病史、人種、吸煙史。相關(guān)數(shù)據(jù)包括夫婦的遺傳病史和孕婦的孕產(chǎn)史。其中篩查必須數(shù)據(jù)一定要準(zhǔn)確錄入唐氏軟件,如果孕婦在唐篩之前還沒(méi)有做過(guò) B超,醫(yī)生可以建議孕婦在唐篩的同時(shí)做第一次 B超。其它一些便于醫(yī)院統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)可以根據(jù)需要決定是否錄入唐氏軟件,包括住院號(hào)、門診號(hào)、有效聯(lián)絡(luò)方式等,軟件可以提供大部分信息導(dǎo)出的文件,可用 Excel打開(kāi)。另外,為了表明醫(yī)院盡到告知義務(wù),如果孕婦不原意做唐篩,最好也讓她簽字“不篩查”,醫(yī)院也留一份底。檢驗(yàn)申請(qǐng)單 :醫(yī)生開(kāi)具檢驗(yàn)申請(qǐng)單,并附上孕婦告知書和孕婦資料。采樣:檢驗(yàn)科醫(yī)生根據(jù)檢驗(yàn)申請(qǐng)單采集孕婦靜脈全血樣本,并在檢驗(yàn)申請(qǐng)單中注明采樣日期。采集全血樣本不少于5ml。唐氏篩查的采血無(wú)需空腹,同時(shí)也不宜吃太刺激油膩的食物。根據(jù)對(duì)一些大型醫(yī)院操作流程的觀察,我們發(fā)現(xiàn):如果是每天都做唐氏篩查樣本,全血可在 4℃冰箱內(nèi)保存一天。如靜置半小時(shí)到兩小時(shí)后離心,分離吸出血清后,血清可在 4℃冰箱內(nèi)保存 6天。在吸去上樣的血清后,還需要吸取 1ml左右的血清保存于 -70℃冰箱,具體保存時(shí)間根據(jù)各地不同規(guī)范在 1-3年之間。如果發(fā)現(xiàn)全血有肉眼可見(jiàn)脂肪或者溶血現(xiàn)象,請(qǐng)參照貝克曼試劑盒上相關(guān)操作處理。軟件信息輸入 :操作醫(yī)生需要在騰程孕期胎兒唐氏征產(chǎn)前篩查軟件中準(zhǔn)確輸入孕婦用于篩查的信息。滿足儀器操作要求,保證儀器數(shù)據(jù)質(zhì)量 :用于測(cè)試的儀器必須滿足儀器所有要求。貝克曼公司的免疫系列分析儀器必須嚴(yán)格按照貝克曼庫(kù)爾特公司提出的儀器使用規(guī)章,儀器保養(yǎng)程序要求,保證儀器的良好性能。儀器性能的維護(hù), 詳見(jiàn)設(shè)備裝機(jī)時(shí)隨機(jī)配備的儀器操作手冊(cè) (詳見(jiàn)儀器操作手冊(cè)第 8章)。同時(shí)必須嚴(yán)格按照(hCGuE3和AFP:B個(gè)項(xiàng)目的試劑說(shuō)明書來(lái)使用試劑,并按照相關(guān)定標(biāo)、質(zhì)控要求,保證試劑的穩(wěn)定性,從而確保檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)可靠。 (詳見(jiàn)儀器操作手冊(cè)第六、第七章和試劑說(shuō)明書 )。這里特別需要指出的是質(zhì)控的一些問(wèn)題:目前國(guó)內(nèi)沒(méi)有關(guān)于唐氏篩查的統(tǒng)一質(zhì)控規(guī)定,只有按照三個(gè)單項(xiàng)來(lái)操作。由于唐氏篩查風(fēng)險(xiǎn)計(jì)算的敏感性,需要執(zhí)行較為嚴(yán)格的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),CVS要控制在+/-5%。同時(shí)在開(kāi)展唐氏篩查之前,要在一到兩周時(shí)間內(nèi)預(yù)先做高中低三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)各 20-30個(gè)的質(zhì)控品來(lái)確定靶值,不能以質(zhì)控品盒上的值作為靶值。需要注意的是,每次質(zhì)控時(shí),質(zhì)控品從冰箱取出后放置于常溫下的時(shí)間最好相當(dāng),保證質(zhì)控結(jié)果的穩(wěn)定。軟件操作要求 ;儀器測(cè)試結(jié)果可以直接傳輸?shù)津v程孕期胎兒唐氏征產(chǎn)前篩查軟件中并顯示在“唐氏篩查”界面。當(dāng)然也可以手動(dòng)錄入,通過(guò)綜合計(jì)算唐氏征的影響因素后可得到該孕婦的唐氏風(fēng)險(xiǎn)度。軟件的操作和使用必須嚴(yán)格按照用戶手冊(cè)使用。AFP、HCG、uE3三聯(lián)檢測(cè)的結(jié)果運(yùn)算 :正常孕婦和唐氏征兒孕婦三指標(biāo)血液濃度的分布經(jīng)過(guò)大樣本調(diào)查, 求得正常孕婦在孕中期(第14~21周)各周的 AFP,hCG和uE3的血清濃度。各孕婦的血液濃度測(cè)定結(jié)果會(huì)有所不同。若以該孕周正常孕婦的中位值為基準(zhǔn)作分母,各孕婦實(shí)際測(cè)定值作分子,其比值---中位值的倍數(shù)(MultiplesofMedian,簡(jiǎn)稱MoM必然呈現(xiàn)關(guān)于1的兩側(cè)對(duì)稱的正態(tài)分布。以MoM的對(duì)數(shù)值作橫坐標(biāo),以相應(yīng)的頻率(該濃度的孕婦例數(shù))作縱坐標(biāo),即可繪制成一條分布曲線,即正常孕婦的相應(yīng)分布曲線。計(jì)算MoM實(shí)際是將妊娠各周的三個(gè)指標(biāo)運(yùn)算進(jìn)行了歸一化。九、計(jì)算各指標(biāo)測(cè)值的唐氏兒發(fā)生的似真率 (Likelihoodratio,簡(jiǎn)稱LR)孕婦的唐氏風(fēng)險(xiǎn)是由兩部分組成,孕婦年齡風(fēng)險(xiǎn)和三個(gè)篩查指標(biāo)得到擬真率。孕婦的每個(gè)測(cè)試結(jié)果都會(huì)除以該孕周的中位數(shù),得到 MoM?,然后在根據(jù)一些諸如體重、人種、是否多胎、是否糖尿病等因素進(jìn)行矯正, (矯正也可理解為對(duì)中位數(shù)進(jìn)行矯正然后再把測(cè)試結(jié)果除以矯正后的中位數(shù),當(dāng)然結(jié)果是一樣的 )得到的是矯正后的中位數(shù)。這三個(gè)矯正后的中位數(shù)就是帶入統(tǒng)計(jì)分布中的數(shù)據(jù),得到一個(gè)三個(gè)指標(biāo)的擬真率。擬真率的范圍也在1的兩邊,例如一個(gè)很明顯的唐氏高危指標(biāo)指標(biāo) AFP0.5MoM,hCG2.0MoM,uE30.5MoM具三個(gè)指標(biāo)的擬真率大約為27,乘以一個(gè)1/1000左右的年齡(對(duì)照前面年齡風(fēng)險(xiǎn)表格大約為 29歲的年齡 ),最終的懷有唐氏兒的風(fēng)險(xiǎn)在 1/35左右,肯定是篩查高風(fēng)險(xiǎn)范圍內(nèi)。例如一個(gè)很明顯的唐氏低危指標(biāo)AFP1.0MoMhCG1.0MoMu£1.0MoM其三個(gè)指標(biāo)的擬真率大約為 1/8,乘以一個(gè) 1/250左右的年齡 (對(duì)照前面年齡風(fēng)險(xiǎn)表格大約為 37歲的年齡 ),最終的懷有唐氏兒的風(fēng)險(xiǎn)在 1/2000左右,肯定是篩查低風(fēng)險(xiǎn)范圍內(nèi)。十、篩查程序:十一、發(fā)報(bào)告前復(fù)核要求 :報(bào)告單交付孕婦前必須復(fù)核,建議復(fù)核內(nèi)容包括測(cè)試結(jié)果和孕婦個(gè)人信息,如有問(wèn)題及時(shí)糾正,完全正確后核對(duì)者簽名。如果孕婦在拿到報(bào)告后對(duì)孕周有疑義,醫(yī)生應(yīng)該在和孕婦溝通的情況的同時(shí),計(jì)算另一孕周的結(jié)果,最后發(fā)哪張報(bào)告由醫(yī)生根據(jù) 2個(gè)孕周的可信程度判定。若篩查結(jié)果為唐氏風(fēng)險(xiǎn)度高人群應(yīng)及時(shí)召回,進(jìn)行遺傳咨詢。十二、 數(shù)據(jù)回訪以及高風(fēng)險(xiǎn)度報(bào)告的處理 :臨床醫(yī)生對(duì)唐氏和 18三體高風(fēng)險(xiǎn)的孕婦必須建議羊水穿刺,開(kāi)放性脊柱裂則通過(guò)后面的 B超(彩超)做進(jìn)一步的觀察。醫(yī)院需要對(duì)在本院做唐氏篩查的孕婦的最終妊娠結(jié)局進(jìn)行跟蹤,如果是本院羊水穿刺或出生的,則與產(chǎn)科溝通得到結(jié)果,如果去了別的醫(yī)院,則希望通過(guò)電話回訪的手段,得到結(jié)果。結(jié)果可以錄入軟件,也可以單獨(dú)記錄真陽(yáng)性和假陰性。由于目前唐氏篩查開(kāi)展的醫(yī)院比較廣泛,而能夠進(jìn)行產(chǎn)前診斷的醫(yī)院比較少,希望那些只能開(kāi)展產(chǎn)前篩查的醫(yī)院能有一家固定轉(zhuǎn)診的產(chǎn)前診斷中心,同時(shí)與診斷中心保持一定的聯(lián)系和溝通。十三、假陰性情況的處理 :假陰性情況極為少見(jiàn),但并不代表不會(huì)發(fā)生。如果出現(xiàn)假陰性,醫(yī)院首先要檢查該孕婦篩查時(shí),自身流程是否有問(wèn)題。醫(yī)院需要保留篩查過(guò)程中的文件包括告知書、孕婦信息采集、檢驗(yàn)申請(qǐng)單、篩查結(jié)果、當(dāng)次篩查的質(zhì)控,保存的樣本等。 -70℃保存時(shí)間根據(jù)各地規(guī)范需超過(guò)該孕婦的嬰兒出生時(shí)間 1-3年。同時(shí)請(qǐng)把該樣本的分析結(jié)果發(fā)送給軟件供應(yīng)商。以上十三項(xiàng)注意 事項(xiàng)必須嚴(yán)格遵守,不遵守此操作規(guī)范的部門或個(gè)人將承擔(dān)所有后果及責(zé)任。貝克曼ACCESS2化學(xué)發(fā)光儀產(chǎn)篩項(xiàng)目操作規(guī)程一.激活項(xiàng)目:對(duì)于新開(kāi)展的項(xiàng)目,首先要“激活項(xiàng)目” :主屏幕——F8設(shè)置——F2測(cè)試——把要激活的項(xiàng)目打勾——退出二.裝載消耗品裝載試劑: 主屏幕——F3消耗品——F1裝載試劑——掃描試劑條碼——打開(kāi)試劑倉(cāng)蓋后放入試劑盒——F1完成卸載試劑:主屏幕一一F3消耗品一一F2卸載試劑一一打開(kāi)試劑倉(cāng)蓋后取出試劑盒一一 F1完成裝載反應(yīng)管:主屏幕一一F3消耗品一一F4裝載RV———打開(kāi)反應(yīng)管倉(cāng)蓋一一放入整包的RV———關(guān)上黑色倉(cāng)蓋,往下壓一一打開(kāi)黑色倉(cāng)蓋,取出支架一一關(guān)上倉(cāng)蓋一一 F1完成更換廢物袋:主屏幕一一F3消耗品一一F6卸換廢物袋一一取出廢物袋,換上新的袋子一卸F1完成更換發(fā)光底物:主屏幕一一F3消耗品一一F5更換發(fā)光底物一一掃描底物的條碼信息一一換上新的試劑盒卸卸 F1完成三.定標(biāo)定標(biāo)液信息輸入:主屏幕一一F5定標(biāo)一一F5定標(biāo)液設(shè)置一一F1添加定標(biāo)液一一逐條掃描定標(biāo)液條碼卸卸 F1完成定標(biāo)步驟:主屏幕一一F1樣本管理一一輸入架子號(hào)一一F3測(cè)試請(qǐng)求一一F6請(qǐng)求定標(biāo)一一選取所需定標(biāo)液主主 F1完成主主F1裝載架子主主放入架子主主等待樣本架掃描確認(rèn)后,點(diǎn)擊“運(yùn)行”查看定標(biāo)結(jié)果:主屏幕一一F5定標(biāo)一一選取要查看的項(xiàng)目一一F2查看結(jié)果四.樣本編程單個(gè)樣本編程:主屏幕一一F1樣本管理一一輸入架子號(hào)一一F3測(cè)試請(qǐng)求一一輸入相應(yīng)的標(biāo)本號(hào)主主選取要做的項(xiàng)目主主 F1裝載樣本架主主放入架子主主等待樣本架掃描確認(rèn)后,點(diǎn)擊“運(yùn)行”批量樣本編程:測(cè)屏幕一一51主本管理一一輸入架子號(hào)一一F3測(cè)試請(qǐng)求一一輸入相應(yīng)的標(biāo)本號(hào)一一選取要做的項(xiàng)目一一光標(biāo)移到下一個(gè)位置一一F8主多選項(xiàng)一一F1啟動(dòng)批量生成自動(dòng)生成樣本 ID號(hào):主屏幕主主 F1樣本管理主主輸入架子號(hào)主主 F3測(cè)試請(qǐng)求主主輸入相應(yīng)的標(biāo)本號(hào)一一選取要做的項(xiàng)目一一光標(biāo)移到下一個(gè)位置一一 F8主多選項(xiàng)一一F2啟動(dòng)自動(dòng)ID生成結(jié)果查詢主屏幕一一F2結(jié)果查詢清除標(biāo)本機(jī)上架子清除:主屏幕一一F1樣本管理一一選取需要取出的架子一一F6處理一一掃描完成后一一取出架子一一F1清除(F2不清除,僅移到機(jī)外)機(jī)外架子清除:主屏幕一一F1標(biāo)本管理一一選取需要取出的架子一一F7清除七.日清洗:主屏幕一一F1樣本管理一一輸入架子號(hào)一一F4保養(yǎng)請(qǐng)求一一選取“日清潔”——F1完成一一按要求放入清洗液后,按F1裝載樣本架一一放入架子一一等待樣本架掃描確認(rèn)后,點(diǎn)擊“運(yùn)行”特殊清洗:—屏幕一一F1樣本管理一一輸入架子號(hào)一一F4—養(yǎng)請(qǐng)求一一選取“特殊清潔”一一F1完成一一按要求放入清洗液后,F(xiàn)1裝載樣本架一一放入架子一一等待樣本架確認(rèn)后,點(diǎn)擊“運(yùn)行”系統(tǒng)檢測(cè):主屏幕一一F1樣本管理一一輸入架子號(hào)一一F4保養(yǎng)請(qǐng)求一一選取“系統(tǒng)檢測(cè)”——F1完成一一按要求放入檢測(cè)液后,F(xiàn)1裝載樣本架一一放入架子一一等待樣本架確認(rèn)后,點(diǎn)擊“運(yùn)行”地貧血常規(guī)篩查檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(1)標(biāo)本用EDTA-K0.2ul抗凝靜脈血1ml。門診血標(biāo)本檢測(cè)用SYSMEXS-800I和SYSMEXXT-4000I,病房血標(biāo)本檢測(cè)用SYSMEXXE-2100血球分析儀。(2)試劑及儀器SYSMEXXS-800近分類血球分析儀及配套試劑,質(zhì)控用SYSMEX(裝全血質(zhì)控品,SYSMEXT-4000I五分類血分析儀及配套試劑,質(zhì)控用SYSMEX裝全血質(zhì)控品。SYSMEXE-2100I五分類血分析儀及配套試劑,質(zhì)控用SYSMEX裝全血質(zhì)控品。(3)操作1)門診:a)收到血常規(guī)標(biāo)本后,查看核對(duì)檢驗(yàn)項(xiàng)目,姓名和條碼號(hào),立即編號(hào)。b)血標(biāo)本在XS-800I和XT-4000I上檢測(cè)。c)對(duì)于中間細(xì)胞比較多的應(yīng)當(dāng)手工涂片染色分類,對(duì)于血小板等圖形不好或結(jié)果異常較大的應(yīng)手工復(fù)查。d)結(jié)果核對(duì)后,在半小時(shí)內(nèi)報(bào)告。2)病房:a)采集血常規(guī)標(biāo)本后,立即編號(hào),試管加蓋后放于專用試管架上放入儀器進(jìn)樣區(qū)域。b)血標(biāo)本在SYSMEXXE-2100止機(jī)檢測(cè)。c)對(duì)于分類圖形不好的結(jié)果應(yīng)當(dāng)手工涂片染色分類,對(duì)于血小板等結(jié)果圖形不好或結(jié)果異常較大的應(yīng)手工復(fù)查。(復(fù)查條件)結(jié)果核對(duì)后,簽發(fā)報(bào)告單。(4)結(jié)果分析地貧篩查陽(yáng)性結(jié)果判斷:MCV<82fl,MCH<27pg地貧血常規(guī)篩查陽(yáng)性,需要做血紅蛋白電泳進(jìn)一步確認(rèn)。SYSMEXXT-4000i血液分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程.分析參數(shù)和方法學(xué)名稱SysmexXT-4000i提供40項(xiàng)可報(bào)告參數(shù)的結(jié)果,各檢測(cè)參數(shù)和方法見(jiàn)表 1。表1.SysmexXT-4000i各檢測(cè)參數(shù)和方法參數(shù)首字母縮寫檢測(cè)方法白細(xì)胞WBC:流式細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞RBC鞘流DC檢測(cè)方法血紅蛋白HGB;SLS血紅蛋白檢測(cè)法紅細(xì)胞比積HCTrRBCK積脈沖高度檢測(cè)法平均紅細(xì)胞體積MCV由RBCf口HCTB出平均紅細(xì)胞血紅蛋白量MCHr由RBCf口HGB#出平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度MCHC由HE口HGB#出
血小板PLT1相流DC檢測(cè)方法中性粒細(xì)胞百分比NEUT%流式細(xì)胞計(jì)數(shù)淋巴細(xì)胞百分比LYMPH%單核細(xì)胞百分比MONO%嗜酸性粒細(xì)胞百分比EO%嗜堿性粒細(xì)胞百分比BASO%中性粒細(xì)胞數(shù)NEUT#淋巴細(xì)胞數(shù)LYMPH#單核細(xì)胞數(shù)MONO#嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)EO#嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)BASO#紅細(xì)胞分布寬度-標(biāo)準(zhǔn)差 一RDW-SD:根據(jù)紅細(xì)胞直方圖算出紅細(xì)胞分布寬度-變異系數(shù)RDW-CV根據(jù)紅細(xì)胞直方圖算出血小板分布寬度PDW根據(jù)血小板直方圖算出平均血小板體積MPVr根據(jù)血小板直方圖和plt算出1大血小板比率P-LCR根據(jù)血小板直方圖算出血小板壓積PCT根據(jù)血小板直方圖算出網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比 1RET%流式細(xì)胞計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)RET#幼稚網(wǎng)織紅細(xì)胞比率IRF低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率 1LFR中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率一MFR高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率HFR光學(xué)血小板計(jì)數(shù)PLT-O網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量RET-He未成熟粒細(xì)胞百分比IG%未成熟粒細(xì)胞數(shù)IG#白細(xì)胞數(shù)一體液WBCBF流式細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞數(shù)-體液RBC-BF單個(gè)核細(xì)胞比例-體液M*單個(gè)核細(xì)胞數(shù)-體液Mh#多個(gè)核細(xì)胞比例一體液PMI%單個(gè)核細(xì)胞數(shù)-體液PMM.試劑稀釋液(CELLPAQK白細(xì)胞分類溶血素(STROMATOLYSER-4DL白細(xì)胞分類染液(STROMATOLYSER-4DS血紅蛋白溶血素(SULFOLYSER清潔齊1J(CELLCLEA)N網(wǎng)織紅細(xì)胞稀釋液(RETSEARCH-IIDilution).操作步驟開(kāi)機(jī):按以下順序打開(kāi)電源:1)打印機(jī),2)信息處理裝置(IPU),3)主機(jī)(信息處理裝置程序的登錄屏幕出現(xiàn)以后) 。開(kāi)啟信息處理裝置( IPU)。WindowsVista(操作系統(tǒng))啟動(dòng)。以“XT'用戶自動(dòng)登錄到WindowsVista系統(tǒng)。顯示XT-4000i應(yīng)用程序登錄對(duì)話框。輸入用戶名及密碼,然后點(diǎn)擊“確定”。主機(jī)電源打開(kāi)后,按以下順序執(zhí)行操作:自檢、主機(jī)控制程序下載、機(jī)械部件和液流部件初始化、流動(dòng)池清洗、等待溫度穩(wěn)定和本底檢查。本底檢查通過(guò)后即可進(jìn)入檢測(cè)。開(kāi)機(jī)后先做質(zhì)控,質(zhì)控通過(guò)后進(jìn)行樣本檢測(cè)。以進(jìn)樣架模式進(jìn)行樣本分析確保儀器處于準(zhǔn)備就緒狀態(tài)。READYLE廊點(diǎn)亮。雙擊菜單屏幕上的“控制器”圖標(biāo)。顯示控制器菜單。雙擊控制器菜單上的“進(jìn)樣器標(biāo)本號(hào)”圖標(biāo),或點(diǎn)擊工具欄的“進(jìn)樣器”按鈕。輸入標(biāo)本 ID編號(hào),或使用條碼掃描自動(dòng)讀 ID號(hào)。核查第一個(gè)管架編號(hào)和標(biāo)本管位置號(hào)。 如果需要更改, 點(diǎn)擊需要更改的項(xiàng)目然后輸入數(shù)值。檢查隨選設(shè)置。如果需要更改設(shè)置,點(diǎn)擊相應(yīng)的“ Discrete”進(jìn)行設(shè)置。將標(biāo)本管放入標(biāo)本架, 然后將標(biāo)本架放在進(jìn)樣器右側(cè)的架槽中。 可以一次性裝載多達(dá)5個(gè)標(biāo)本架在進(jìn)樣器中放置標(biāo)本架后,點(diǎn)擊進(jìn)樣器標(biāo)本編號(hào)對(duì)話框中的“啟動(dòng)進(jìn)樣器”核查管架編號(hào) /試管位置確認(rèn)對(duì)話框中的管架編號(hào)和試管位置號(hào)。然后點(diǎn)擊“確定”當(dāng)所有的標(biāo)本管已移至進(jìn)樣器左側(cè)的架槽時(shí), READYLED(亮。將標(biāo)本架放置于進(jìn)樣器右側(cè)架槽的分析通道的最右側(cè)的位置。 按START啟動(dòng))開(kāi)關(guān)開(kāi)始分析。標(biāo)本檢測(cè): 為了驗(yàn)證手動(dòng)與自動(dòng)模式, 每日隨機(jī)取 2份新鮮血標(biāo)本進(jìn)行 close與open模式結(jié)果比對(duì),以close為靶值(close-open)/close來(lái)計(jì)算偏移(CV%符合比對(duì)要求,以上檢測(cè)通過(guò)后進(jìn)行病人樣本檢測(cè)。操作中注意個(gè)人安全, 如標(biāo)本需打開(kāi)蓋子, 應(yīng)戴好防護(hù)鏡口罩或在有機(jī)玻璃擋板后打開(kāi)。每日保養(yǎng):正常開(kāi)機(jī)、壓縮機(jī)防逆流瓶液體檢查、背景檢測(cè)通過(guò)、溫度報(bào)警、工作時(shí)間( h)、使用情況、關(guān)機(jī)正常記錄在 XT-4000i使用維護(hù)記錄。關(guān)機(jī)程序:雙擊菜單屏幕上的“控制器”圖標(biāo)。顯示控制器菜單。雙擊控制器菜單的“關(guān)機(jī)”圖標(biāo)。顯示關(guān)機(jī)對(duì)話框。將CELLCLEAN在手動(dòng)取樣針上;然后在該狀態(tài)按START啟動(dòng))開(kāi)關(guān)。READIED閃爍,并且蜂鳴器發(fā)出響聲,表示正在吸入中。此時(shí),不可移開(kāi) CELLCLEAN器。當(dāng)READYLED!滅,并且蜂鳴聲停止時(shí),取出CELLCLEAN開(kāi)始執(zhí)行主機(jī)關(guān)機(jī)程序。主機(jī)關(guān)機(jī)程序結(jié)束后,關(guān)機(jī)對(duì)話框關(guān)閉,關(guān)機(jī)對(duì)話框中將出現(xiàn)“請(qǐng)關(guān)閉儀器電源”信息。月保養(yǎng)或需要時(shí)進(jìn)行的維護(hù)(根據(jù)操作說(shuō)明書部分由維護(hù)工程師完成)清洗標(biāo)本旋轉(zhuǎn)閥。清洗手動(dòng)沖洗杯。清洗標(biāo)本旋轉(zhuǎn)閥托盤。清洗穿刺進(jìn)樣器托盤洗RBC僉測(cè)器孔。去除光檢測(cè)器盒中流動(dòng)池內(nèi)的空泡。清洗光檢測(cè)器盒中的流動(dòng)池。.質(zhì)控質(zhì)控品:Sysmex(高、中、低值3個(gè)水平)儲(chǔ)存條件:2c?8c(每日須復(fù)核一次冰箱溫度)。使用期限:質(zhì)控開(kāi)瓶后 20天。質(zhì)控頻率:每天開(kāi)機(jī)后在標(biāo)本檢測(cè)前進(jìn)行一次質(zhì)控品的分析(每種質(zhì)控品均做) 。質(zhì)控頻度驗(yàn)證每年一次,由崗位操作員完成。質(zhì)控操作: 從冰箱中取出質(zhì)控品,使用前檢查有效期及狀況 (如極度溶血或失效,應(yīng)及時(shí)更換),在室溫環(huán)境下(18?30C)靜置25分鐘。保持瓶子直立狀態(tài)在雙掌中輕輕滾動(dòng)10次,將其顛倒再滾動(dòng) 10次,再將質(zhì)控品上下顛倒 10次混勻至紅細(xì)胞完全混合,在質(zhì)控模式下進(jìn)行檢測(cè)。失控時(shí)應(yīng)采取的措施:質(zhì)控結(jié)果超出期望值時(shí),需查找原因,檢查質(zhì)控品是否在有效期內(nèi), 過(guò)期或近過(guò)期需更換新的質(zhì)控品 ,檢查試劑情況,是否需更換。再檢查儀器的各項(xiàng)參數(shù)是否在控,如各項(xiàng)檢查操作后質(zhì)控仍失控則聯(lián)系工程師,責(zé)任人需通知組長(zhǎng)。與此同時(shí)聯(lián)系急癥病人相關(guān)醫(yī)生,如為急診標(biāo)本及時(shí)送往門急診化驗(yàn)室檢測(cè)。直至質(zhì)控通過(guò),開(kāi)始做標(biāo)本。每次失控必須分析原因, 記錄處理過(guò)程并簽名。 失控記錄夾入指定的文件夾內(nèi)保存,保存期為二年。更換批號(hào)后靶值設(shè)定:取開(kāi)始20次QCg果,計(jì)算均值,為靶值,靶值應(yīng)落在廠商提供的范圍內(nèi),以累計(jì)6個(gè)月CV啕值(或近兩個(gè)月CV%!大值),通過(guò)均值乘以CV%=1SD,質(zhì)控范圍設(shè)定為 2.7SD。由組長(zhǎng)或組長(zhǎng)指定人員負(fù)責(zé)計(jì)算。 定期打印質(zhì)控曲線, 曲線上注明使用質(zhì)控品的批號(hào)和效期 .所有室內(nèi)質(zhì)控打印及記錄夾入指定的文件夾內(nèi)保存, 保存期為二年。西比亞毛細(xì)管血紅蛋白電泳操作規(guī)程項(xiàng)目名稱——血紅蛋白毛細(xì)管電泳(CAPILLARYSHEMOGLOUBIN(E)檢驗(yàn)方法名稱――流動(dòng)液體毛細(xì)管高壓液相電泳。方法學(xué)原理CAPILLARY系統(tǒng)運(yùn)用毛細(xì)管中液相電泳的原理,帶電分子在具有特殊 PHffl的堿性緩沖液中通過(guò)其電泳遷移率而被分離開(kāi),這個(gè)分離也要依賴于電解質(zhì)的 PH和電滲流。CAPILLARYS(統(tǒng)可同時(shí)進(jìn)行7個(gè)標(biāo)本的血紅蛋白量化分析,標(biāo)本的溶血稀釋和注入通過(guò)在毛細(xì)管陽(yáng)極末端吸入完成, 接著在高電壓下蛋白質(zhì)進(jìn)行分離, 并在毛細(xì)管的陰極端于415nm吸光率下直接檢測(cè)血紅蛋白。四.方法學(xué)溯源自1930年由Tiselius發(fā)現(xiàn)了移界電泳( movingboundaryeectrophoresis),而后,這種技術(shù)的各種局限性已逐漸被區(qū)帶電泳( zoneelecrrophoresis)所克服,CAPILLARY系統(tǒng)已經(jīng)發(fā)展到將該項(xiàng)技術(shù)完全自動(dòng)化,并具有快速分離和良好的分辯性。目前該方法已被大多數(shù)人認(rèn)為是介于傳統(tǒng)的區(qū)帶電泳和液相色譜之間的技術(shù)方法。五.儀器型號(hào):SEBIACAPILLARYS(PN1220IEPN1222分析和計(jì)算參數(shù):處理量: 80-100個(gè)樣本/小時(shí)所需樣本量: 100ul檢驗(yàn)時(shí)間: 20分鐘重復(fù)性:有良好的重復(fù)性電泳參數(shù):電壓 3.5-9000V電流3.5-200mA功率0-90W六.準(zhǔn)備蒸餾水或去離子水在SEBIACAPILLARYS勺全自動(dòng)系統(tǒng)中進(jìn)行毛細(xì)管電泳時(shí)沖洗毛細(xì)管用。建議在使用前先用0.45 的過(guò)濾器將蒸儲(chǔ)水或去離子水過(guò)濾一次。為了防止微生物的繁殖,請(qǐng)每天更換蒸儲(chǔ)水或去離子水。如需要長(zhǎng)期保存,可加入3.5^/dl的ProClin300。注意:當(dāng)充填水罐時(shí),建議先用大量的蒸餾水或去離子水沖洗罐。緩沖液(含堿性緩沖液 PH9.4)若緩沖液是儲(chǔ)藏在 2至8℃,建議在使用前將試劑放置于室溫下, 一旦緩沖液瓶打開(kāi)并安置在CAPILLARY系統(tǒng)上時(shí),緩沖液可彳^持穩(wěn)定狀態(tài)最多 2個(gè)月。濃縮的沖洗液必須用蒸儲(chǔ)水或去離子水稀釋成 700ml。在做血紅蛋白電泳之前和之后沖洗毛細(xì)管。分別將一個(gè)過(guò)濾器轉(zhuǎn)動(dòng)固定到緩沖液、 沖洗液、蒸餾水或去離子水瓶的管子末端的連接器上, 用蒸餾水或去離子水沖洗連接器和管子。 使用過(guò)的過(guò)濾器必須用清水沖洗過(guò)后才能丟棄。樣本的采集和保存使用抗凝血的新鮮標(biāo)本來(lái)進(jìn)行分析,采血應(yīng)按照臨床實(shí)驗(yàn)檢測(cè)要求進(jìn)行。將紅細(xì)胞在2?8c下靜置沉淀數(shù)小時(shí)或?qū)⒀獦?biāo)本離心5000轉(zhuǎn)/分,5分鐘。小心盡可能地棄去血漿。不要使用覆蓋在紅細(xì)胞上厚度超過(guò)3mmfc漿的標(biāo)本,若試管中的血漿厚度超過(guò)3mm等會(huì)影響到分析結(jié)果。注意:X標(biāo)本置于冰箱內(nèi)(2?8C)可保存一周。若需要長(zhǎng)時(shí)間保存,則依照以下程序在采集8小時(shí)內(nèi)清洗紅細(xì)胞, 并將標(biāo)本冷凍在 -80℃環(huán)境中,可保持穩(wěn)定最長(zhǎng) 3個(gè)月時(shí)間。具體程序:抗凝血離心 5000轉(zhuǎn)/分,5分鐘,棄去血漿,用 10倍體積的生理鹽水洗滌紅細(xì)胞兩次(每次洗滌后均要離心處理),冰凍前去除紅細(xì)胞上層多余的生理鹽水并震蕩混勻。X血紅蛋白(Hb)在2?8c下可發(fā)生降解反應(yīng)。當(dāng)在2?8c下保存超過(guò)7天,在電泳圖譜將會(huì)出現(xiàn)一個(gè)比HbA更陽(yáng)極端的被稱之為HbA3的額外片段,在靠近HbS帶附近會(huì)出現(xiàn)一個(gè)微弱的片段,并且如果出現(xiàn) HbC則在HbA2更陽(yáng)極端可出現(xiàn)不會(huì)干擾到 A2的一個(gè)片段。當(dāng)保存超過(guò) 10天,可在紅細(xì)胞中觀察到聚集的粘狀物,在分析前必須棄去這些粘狀物。操作步驟開(kāi)機(jī),啟動(dòng)CAPILLARY吼器和電腦。啟動(dòng)“PHORESY球件,輸入用戶名和密碼后,按確定(電腦自動(dòng)向其加載和交換信息,并運(yùn)行自檢, 初始化程序。 )聯(lián)機(jī)成功, 進(jìn)入待工作狀態(tài), 顯示“READ”Y??砷_(kāi)始電泳操作。在儀器提示,按其要求填寫試劑有效期、代碼(沖洗液的有關(guān)信息在 70ml濃縮試劑瓶標(biāo)簽上可以查到),并調(diào)整圖象中液位高度。CAPILLARY系統(tǒng)具有試劑自動(dòng)監(jiān)控功能, 當(dāng)需要更換某種試劑時(shí), 系統(tǒng)將有信息提示。 更換試劑時(shí)要注意罐和接口的色碼相符。請(qǐng)仔細(xì)閱讀CAPILLARYSZ器操作手冊(cè)。選擇好“HEMOGLOBIN(E歷析程序,然后將CAPILLARYSHEMOGLOBIN(E)沖液瓶放置在儀器上。標(biāo)本架有 8個(gè)標(biāo)本試管位置, 在每個(gè)標(biāo)本架上放好 7個(gè)打開(kāi)了的不含血漿的標(biāo)本管,若待分析的標(biāo)本管少于 7個(gè),則用含有蒸餾水或去離子水的管補(bǔ)足。 放好管的標(biāo)本架上的每個(gè)試管的條形碼必須能被看到。在標(biāo)本架8號(hào)位上的試管中加入4mlCAPILLARYSHEMOGLOB1性)溶血液,避免產(chǎn)生氣泡。在每個(gè)標(biāo)本架上放一排新的稀釋杯。若忘記放稀釋杯,系統(tǒng)將會(huì)有信息提示。將準(zhǔn)備好的標(biāo)本架從儀器中部的敞口處滑入 CAPILLARY系統(tǒng)中,可連續(xù)送入13個(gè)標(biāo)本架。使用NO.0標(biāo)本架來(lái)進(jìn)行質(zhì)控血標(biāo)本的分析。設(shè)置儀器開(kāi)始運(yùn)轉(zhuǎn)。自動(dòng)化步驟的描述:條形碼閱讀器對(duì)每個(gè)標(biāo)本管及標(biāo)本架進(jìn)行閱讀。標(biāo)本在溶血液中稀釋, 每完成一個(gè)標(biāo)本的溶血稀釋, 都會(huì)對(duì)稀釋針進(jìn)行清洗。沖洗毛細(xì)管。稀釋好的標(biāo)本被注入到毛細(xì)管中。在恒定的電壓下電泳 8分鐘,帕爾貼軟件控制溫度。血紅蛋白在415mm吸光率下直接檢測(cè),同時(shí)在系統(tǒng)屏幕上顯示出電泳剖象。注:上述描述的這些自動(dòng)步驟適用于第一次傳入的標(biāo)本架。從分析程序開(kāi)始大約20分鐘后可出現(xiàn)電泳圖譜。接下來(lái)分析的標(biāo)本架,在上一個(gè)標(biāo)本架進(jìn)行分析的同時(shí)都會(huì)進(jìn)行頭兩個(gè)步驟(條形碼閱讀和標(biāo)本稀釋) 。結(jié)果分析在程序分析的最后, 每個(gè)血紅蛋白片段的相對(duì)值自動(dòng)顯示出來(lái), 并對(duì)剖象進(jìn)行分析。可自動(dòng)識(shí)別血紅蛋白A(HbA片段,同時(shí)在回顧窗口的中間對(duì)其進(jìn)行調(diào)整??芍庇^的在視覺(jué)上對(duì)電泳圖譜的異常圖像進(jìn)行評(píng)估。CAPILLARYS系統(tǒng)可忽略降解產(chǎn)物而計(jì)算出每個(gè)血紅蛋白片段的濃度。圖譜可自動(dòng)校正HbA片段以便分析解釋:當(dāng)缺乏HbA(黃色警示),將通過(guò)之前相同毛細(xì)管電泳獲得的電泳剖象中 HbA的位置對(duì)其進(jìn)行修正。當(dāng)無(wú)法進(jìn)行調(diào)整進(jìn),將出現(xiàn)紅色的警示。當(dāng)血標(biāo)本中出現(xiàn)血紅蛋白C時(shí)可能會(huì)導(dǎo)致血紅蛋白A2低于參考值。當(dāng)每個(gè)分析循環(huán)結(jié)束,操作者必須啟動(dòng) CAPILLARY系統(tǒng)的“待命”或“關(guān)閉”程序,以便保存當(dāng)前狀態(tài)的毛細(xì)管電泳結(jié)果。十.關(guān)機(jī)電泳全部結(jié)束,在狀態(tài)窗口顯示“ READY下,執(zhí)行關(guān)機(jī)程序“SHUTDOWNINSTRUMEN”,儀器自行沖洗,排氣,復(fù)位等。T約15分鐘屏幕顯示 “Offline”,此時(shí)可關(guān)閉毛細(xì)管電泳儀電源, 然后關(guān)閉電腦。打開(kāi)電泳儀左蓋,取出全部試劑架。關(guān)閉儀器總電源開(kāi)關(guān),按每日保養(yǎng)要求對(duì)儀器進(jìn)行保養(yǎng)。用儀器防塵罩蓋好儀器。如果儀器如較長(zhǎng)期(超過(guò)一周)停用,請(qǐng)用蒸餾水代替試劑,使用特別關(guān)機(jī)程序。CapillarysfSpecialcyclesfShutdownwithrinsingofthehydraulicswithH2O儀器如須更址 ,運(yùn)輸,一定要進(jìn)行特殊打包運(yùn)輸關(guān)機(jī)程序處理。CapillarysfSpecialcyclesfshutdownandpreparationforshipment如果運(yùn)用特別關(guān)機(jī)或打包運(yùn)輸關(guān)機(jī)程序后再次開(kāi)機(jī),一定要在開(kāi)機(jī)輸入密碼后選擇First-washonly然后“確定” 。進(jìn)入待機(jī)狀態(tài)后,激活毛細(xì)管,然后可正常進(jìn)行工作。十一. 參考范圍HbA>96.8%HbF<0.5%(*)HbA22.2?3.2%之間十二. 臨床意義使用CAPILLARYSHEMOGLOBIN試劑可鑒別血紅蛋白病和地中海貧血等遺傳性疾病。十三.電泳陽(yáng)性結(jié)果處理:電泳陽(yáng)性標(biāo)本需要召回做地貧基因診斷。Bio-RadVARIANTII血紅蛋白分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序1.目的:VARIANTII(VII)血紅蛋白分析儀用于報(bào)告?zhèn)€體EDTA抗凝靜脈全血樣本的血紅蛋白F、A2的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用于個(gè)體篩查B地中海貧血。2.原理:VARIANT血紅蛋白測(cè)試系統(tǒng)是一臺(tái)全自動(dòng)化的、高吞吐量的血紅蛋白分析儀。它由兩個(gè)模塊構(gòu)成——VARIANT層析站(VCS和VARIANT取樣站(VSS。另外,該系統(tǒng)利用一臺(tái)個(gè)人計(jì)算機(jī)和臨床數(shù)據(jù)管理(CDM軟件來(lái)進(jìn)行系統(tǒng)控制。VARIANTII血紅蛋白分析儀應(yīng)用高效液相色譜法(HPLC對(duì)人全血血紅蛋白F、A2的自動(dòng)化和準(zhǔn)確的測(cè)定。標(biāo)本在 VARIANTII取樣站(VSS)自動(dòng)混合并稀釋,之后注入分析柱。VARIANTII層析站的雙泵將預(yù)先編程設(shè)置的由低到高離子濃度的緩沖液注入系統(tǒng),在這一過(guò)程中,血紅蛋白經(jīng)和柱中物質(zhì)離子反應(yīng)后達(dá)到分離。處理好的樣本自動(dòng)被注入分析通路,分離的血紅蛋白隨后在流經(jīng)光感測(cè)量計(jì)時(shí),測(cè)量其在 415nm光波吸收情況;由690nm進(jìn)行校正。VARIANTII臨床數(shù)據(jù)處理軟件(CDM)將每次分析過(guò)程中收集到的數(shù)據(jù)還原。中間要經(jīng)過(guò)兩個(gè)水平的計(jì)算,用來(lái)校正血紅蛋白的計(jì)算數(shù)值。然后 CDM丁印出分析結(jié)果和分析譜圖,F(xiàn)、A2的峰被標(biāo)注,該面積計(jì)算使用了指數(shù)模式的高斯對(duì)數(shù),這樣計(jì)算已經(jīng)排除了可變F、A2的影響。VARIAITII血紅蛋白分析儀可從全血管中自動(dòng)吸取標(biāo)本,隨后進(jìn)行稀釋和分析,每個(gè)樣本在3分鐘內(nèi)即可完成測(cè)定。3.儀器使用環(huán)境:1.無(wú)塵、換氣良好的環(huán)境。2.避免陽(yáng)光直接照射。3.室內(nèi)相對(duì)濕度 20~80%4.電源電壓變動(dòng)在220V±10V之內(nèi)5.有保護(hù)性接地4.安全條款:1.使用對(duì)人體有危險(xiǎn)或發(fā)生感染的樣品時(shí),請(qǐng)使用橡膠手套,不要直接接觸。如操作人員直接被污染時(shí),用大量的水沖洗、消毒,必要時(shí)應(yīng)及時(shí)看醫(yī)生。儀器
污染時(shí)應(yīng)隨時(shí)清洗干凈且消毒.儀器上面和周圍不要放置或使用易燃、易爆物品,避免引起火災(zāi)、爆炸.儀器的操作、保養(yǎng)按規(guī)定程序進(jìn)行。5.標(biāo)準(zhǔn)操作過(guò)程開(kāi)機(jī)程序:1)2)3)確認(rèn)試劑量充足,廢液桶倒空依次開(kāi)啟1)2)3)確認(rèn)試劑量充足,廢液桶倒空依次開(kāi)啟VSSVCS電腦電源(注意:必須按此順序開(kāi)啟電源)待VSSVCS自檢結(jié)束后,雙擊BlQFnCi啟動(dòng)VariantII 應(yīng)用程序4)雙擊左上側(cè)#1的二』,選擇ReturntoReady,儀器連接完成后,系統(tǒng)顯示‘Ready'在Maintain/Instrument 菜單中從ExecuteCommands^選擇'DoStartupactions'選項(xiàng),按下Start運(yùn)行一次Startup程序6)運(yùn)行Startup程序時(shí),觀察屏幕下方顯示的儀器壓力是否穩(wěn)定。關(guān)機(jī)程序Maintain/Instrument 菜單中從ExecuteCommands^選擇'Doshutdownactions'選項(xiàng),按下Start運(yùn)行shutdown程序shutdown完成后,選擇————|將儀器狀態(tài)轉(zhuǎn)換為Inactive3)關(guān)閉應(yīng)用程序軟件,關(guān)閉計(jì)算機(jī)、 VCSVSS電源開(kāi)關(guān)注:建議儀器在不使用時(shí)保持inactive狀態(tài),并且盡量避免在Running狀態(tài)突然關(guān)下列情況建議關(guān)機(jī):?當(dāng)更換系統(tǒng)零件時(shí)當(dāng)需要將系統(tǒng)移動(dòng)到新位置時(shí)當(dāng)實(shí)驗(yàn)室要斷電時(shí)常規(guī)樣本實(shí)驗(yàn)VariantII 常規(guī)樣本采用EDT刖凝真空采血管,采血量2ml。1)運(yùn)行前檢查記錄分析柱的批號(hào)和注入次數(shù)在SETUP/Test界面選擇Cartridges按紐,如果分析柱的注入次數(shù)超過(guò)250,需要更換新的分析柱。檢查緩沖液和洗液瓶的液面高度有無(wú)漏液現(xiàn)象-檢查泵頭連接塑料管道中有無(wú)液體(必要時(shí)進(jìn)行活塞 /密封圈清洗)-廢液桶的液面高度2)樣本順序1.Prime(引物)2.Blank(空白,去離子水)3.Blank,4.Calibrator(校準(zhǔn)物)5.Calibrator6.LowLevelControl (低值質(zhì)控品)7.HighLevelControl (圖包質(zhì)控品)8toN*病人樣本N+1質(zhì)控品,Level1(可不用)N+2質(zhì)控品,Level2(可不用)N+3STOP管*N指操作中最后病人的樣本號(hào)。3)工作表建立及開(kāi)始實(shí)驗(yàn)將儀器轉(zhuǎn)換到Ready狀態(tài),將排好樣本的樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣架上(注意樣品管的條形碼方向) ,在RUN/Worklist界面的下方點(diǎn)擊 Start/Stop按紐,顯示對(duì)話框點(diǎn)擊Start開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。使用工作表控制( WorklistControl)對(duì)話框,工作表可被暫停(Pause)和繼續(xù)(Continue),停止(Stop)。運(yùn)行時(shí)可從RUN/Graph屏幕中監(jiān)測(cè)當(dāng)前正在分析樣本的圖譜。剛開(kāi)始運(yùn)行時(shí)建議從屏幕下方監(jiān)測(cè)系統(tǒng)壓力穩(wěn)定,質(zhì)控通過(guò)后再離開(kāi)。4)樣品 ID號(hào)的解釋和編輯工作表中會(huì)顯示樣品ID號(hào)的類型之一:Prime(引物),Blank(空白),Blank(空白),Cal(校準(zhǔn)),Cal(校準(zhǔn)),CTRL(低質(zhì)控),CTRH%質(zhì)控),和Unknown*(病人樣本)。如樣品號(hào)需要編輯, 當(dāng)該樣品實(shí)驗(yàn)完成后, 可使用滾動(dòng)條到要編輯的樣品。 雙擊編輯區(qū)并輸入糾正。先前的內(nèi)容被覆蓋(此編輯操作只能執(zhí)行一次) 。5.4安裝新試劑和分析柱5.4.1更換試劑在緩沖液和稀釋液使用前應(yīng)使之達(dá)到室溫,液體與室溫溫差在 4°C以內(nèi),防止產(chǎn)生氣泡。1)當(dāng)屏幕左下角的3種試劑瓶顯示液面低時(shí),證實(shí)系統(tǒng)處于inactive或manual狀態(tài),從試劑瓶上松開(kāi)瓶帽并小心地將試劑管線垂直拿出試劑瓶。 不要在Running狀態(tài)換試劑。2)撤出空瓶并將其放在一邊。3)去除新試劑瓶的瓶帽。將帽擰緊在空瓶上并將空瓶合適地處理。4)將新瓶放在試劑瓶隔間。將試劑管線放入新瓶。擰緊試劑瓶帽。更換新的分析柱和過(guò)濾片每250人份需更換一個(gè)新的分析柱。1)打開(kāi)層析站的白門。找到位于層析站中央的分析柱電熱模塊。擰松蝶形螺釘,把蓋子打開(kāi)。2)從電熱模塊上取出分析柱筒座。逆時(shí)針?lè)较蛐_(kāi),取出舊的分析柱。3)把新分析柱的兩端的綠色保護(hù)套去掉。 把分析柱按流向的箭頭方向向上放置 。把分析柱用力推入筒座的下端直至穩(wěn)定地嵌入分析柱座中。 把筒座的另一端蓋上, 順時(shí)針?lè)较蛐o。4)把分析柱筒座放到電熱模塊上,注意應(yīng)把上端的管路放入槽中。把住上方管路,關(guān)閉電熱模塊的蓋子。按順時(shí)針鎖緊蝶形螺絲。松開(kāi)下方預(yù)過(guò)濾器的外殼。拿掉舊的預(yù)過(guò)濾片。 裝上新的預(yù)過(guò)濾片。 注意要旋緊 。試劑信息更新:1.整套試劑的信息更新選擇SETUP/Test界面有一個(gè)UpdateKit按鈕,在CDMUpdateKit界面顯示之后,把分析參數(shù)光盤插入合適的光驅(qū)驅(qū)動(dòng)器中。選擇合適的驅(qū)動(dòng)器( 光驅(qū))和文件名(*tss),然后點(diǎn)擊OK按鈕。所有的試劑(不包括質(zhì)控信息)和分析柱的信息將被載入。退出光盤。2.單獨(dú)更換分析柱1)在SETUP/Test界面選擇Cartridges按鈕。2)在“InUse”框中,將用完的分析柱的“Yes”改為“NO;3)上方新出現(xiàn)的空格中輸入新分析柱的批號(hào)。在“InUse”框中,選擇“Yes”;4)當(dāng)使用一個(gè)新分析柱時(shí),注射數(shù)是“0”。在使用過(guò)程中注射數(shù)將會(huì)增加。一旦注射計(jì)數(shù)達(dá)到為每個(gè)分析柱規(guī)定的預(yù)定限制 250時(shí),軟件會(huì)提醒使用者更換新分析柱。試劑復(fù)溶全血Primer的復(fù)溶:加入1ml蒸儲(chǔ)水,室溫靜置10分鐘后輕輕混勻后使用。溶好的全血Primer4CM保存21天。VariantII需復(fù)溶兩支。校正品的復(fù)溶:加入10ml冷的校正稀釋液/水平,室溫靜置10分鐘后輕輕混勻后使用。溶好的校正品4C可保存1周。質(zhì)控品的復(fù)溶:加入1ml蒸儲(chǔ)水/水平,室溫靜置10分鐘后輕輕混勻后分裝。20ul/支,-20CC可保存3個(gè)月。使用時(shí)取5ul用1mlwash液稀釋在紫蓋小樣品管中。分析柱的灌注所邛勺新挪怦旅州郵輪您柱)安裝后都要進(jìn)行其加熱器溫度調(diào)節(jié)和雙灌注,此后其他用彳需再調(diào)節(jié),在與磕彳Prime進(jìn)行灌注全血Prime蒸儲(chǔ)水蒸儲(chǔ)水校準(zhǔn)物校準(zhǔn)物STOP管2.將儀器轉(zhuǎn)換到Ready狀態(tài),將排好樣本的樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣架上(注意樣品管的條形碼方向),在RUN/Worklist界面的下方點(diǎn)擊Start/Stop按紐,顯示對(duì)話框點(diǎn)擊Start開(kāi)始灌注實(shí)驗(yàn)。3.運(yùn)行結(jié)束后,注意第二個(gè)校準(zhǔn)液管(6號(hào)管)的血紅蛋白HbA2的滯留時(shí)間。最佳時(shí)間是3.65分鐘。若HbA2的滯留時(shí)間測(cè)量值的變化幅度超過(guò)0.05分鐘,建議進(jìn)行溫度調(diào)節(jié)。選擇Setup/Test/Cartridge中的溫度設(shè)定(滯留時(shí)間提前則降溫,滯留時(shí)間延后則升溫)。5.4.6分析柱的校正和樣本實(shí)驗(yàn)按如下順序放置樣品:Prime( 引物)Blank( 空白,去離子水)Blank,Calibrator (校準(zhǔn)物)CalibratorLowLevelControl (低值質(zhì)控品)HighLevelControl (高值質(zhì)控品)8toN* 病人樣本N+1質(zhì)控品,Level1(可不用)N+2 質(zhì)控品,Level2( 可不用)N+3STOP管*N指操作中最后病人的樣本號(hào)。2.確認(rèn)儀器在Ready狀態(tài),將排好樣本的樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣架上(注意樣品管的條形碼方向) ,在RUN/Worklist界面的下方點(diǎn)擊 Start/Stop按紐,顯示對(duì)話框點(diǎn)擊Start開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。數(shù)據(jù)管理數(shù)據(jù)(Data)界面允許查看或打印保存在數(shù)據(jù)庫(kù)中的樣本信息。DATA/Select界面可設(shè)定查看條件,以選擇查看所有、特定日期或特定運(yùn)行內(nèi)的運(yùn)行和樣品信息。DATA/ViewRur#面允許顯示和打印當(dāng)前保存在數(shù)據(jù)庫(kù)中的任何滿足于 DATA/Select界面運(yùn)行設(shè)定條件的運(yùn)行。選才?Print按紐去打印當(dāng)前被選擇的運(yùn)行的報(bào)告摘要(只有 HbRA2%:無(wú)圖譜)。DATA/ViewSample界面顯示樣本在選擇的ViewRun界面下設(shè)定運(yùn)行的帶圖譜的樣本結(jié)果。選擇Print可打印選中的樣本的完整報(bào)告。4.質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的查詢DATA/QCData界面,選擇要觀看的QCdata(按照日期或運(yùn)行等方式),StartQuery。在查詢完成后,一個(gè) QCData界面被顯示在主屏上(包括 Levey-Jennings圖,平均值和變異系數(shù)等) 。從這個(gè)界面上使用者可通過(guò)點(diǎn)擊低或高質(zhì)控按紐來(lái)選擇質(zhì)控水平。數(shù)據(jù)庫(kù)的備份和恢復(fù)CDM數(shù)據(jù)庫(kù)容量.CDM1R據(jù)庫(kù)的最大容量是350MB當(dāng)數(shù)據(jù)庫(kù)達(dá)到最大容量時(shí),軟件將會(huì)提示:“Thereisnotsufficientdiskspacetobeginthisrun,thesystemwilldeletetheoldestrunsuntilsufficientdiskspaceexists ”(沒(méi)有足夠的磁盤空間開(kāi)始本次運(yùn)行。系統(tǒng)將會(huì)刪除最老的運(yùn)行直到充足的磁盤空間存在。 ).如果希望軟件刪除最早的運(yùn)行數(shù)據(jù),請(qǐng)選擇“OK,軟件將提示你哪些運(yùn)行數(shù)據(jù)將被刪除并返回Ready狀態(tài)。3.如果不希望軟件刪除最早的運(yùn)行數(shù)據(jù)并備份它們,選擇“ Cancel”。數(shù)據(jù)庫(kù)的備份注意:做完數(shù)據(jù)庫(kù)備份后,一定要重新做校正第一種備份方式將數(shù)據(jù)備份在光盤上,首先進(jìn)行光盤格式化在備份前可能需要對(duì)光盤進(jìn)行格式化,CD-R或CD-RW6盤(推薦使用CD-R1)如果計(jì)算機(jī)安裝的是HP的刻錄光驅(qū),請(qǐng)按照以下說(shuō)明操作-插入空白 CD-在“CreateaCD”窗口,選擇DirectCD—在下一個(gè)窗口,選擇CD類型(推薦使用CD-R),選擇OK一在Welcome窗口,Next,-在Driverinformation(驅(qū)動(dòng)器信息 )窗口,Next-在FormatDisc(格式化光盤 )窗口,Next-在NameyourDisc(為光盤命名 )窗口,為光盤命名, Finish-將顯示正在格式化( FormattingDisc),當(dāng)完成后,點(diǎn)擊 OK如果計(jì)算機(jī)安裝的是 Plextor的刻錄光驅(qū),請(qǐng)按照以下說(shuō)明操作-插入空白 CD-在“SelectaProject”窗口,選擇” MakeadataCD”-在下一個(gè)窗口,選擇” FormatCD”-為光盤命名-選擇“StartFormat”-將顯示正在格式化( FormattingDisc),當(dāng)完成后,點(diǎn)擊 OK將數(shù)據(jù)庫(kù)備份到光盤上1)首先確認(rèn)有一個(gè)空白的已經(jīng)被格式化的 CD-R或CD-RW6盤(推薦使用CD-R2)確認(rèn)儀器在 Inactive狀態(tài)(如果沒(méi)有第二臺(tái) VII儀器與電腦連接,左上角的 Instrument#2必需在Inactive狀態(tài))3)在Setup/Configuration窗口,選擇右上角的“BackupDatabase”按鈕選擇“Backupandclear”點(diǎn)擊OK推薦Backupandclear。CD陶口將會(huì)關(guān)閉,DBBackup?口將會(huì)出現(xiàn),通過(guò)下箭頭去選擇光驅(qū),不需要改變默認(rèn)的文件名,數(shù)據(jù)庫(kù)文件名將為 *zephyr.db(或類似的 )6)單擊OK將開(kāi)始備份,依據(jù)數(shù)據(jù)庫(kù)的大小不同而時(shí)間長(zhǎng)短不一,大概持續(xù) 15分鐘。7)備份完成后,需要重新做一次校正。第二種備份方式將數(shù)據(jù)庫(kù)備份到電腦硬盤上確認(rèn)儀器在 Inactive狀態(tài)(如果沒(méi)有第二臺(tái) VII儀器與電腦連接,左上角的 Instrument#2必需在Inactive狀態(tài))1)在Setup/Configuration窗口,選擇右上角的“BackupDatabase”按鈕選擇“Backupandclear”點(diǎn)擊OK推薦Backupandclear。CD陶口將會(huì)關(guān)閉,DBBackup?口將會(huì)出現(xiàn),通過(guò)下箭頭去選擇硬盤,不需要改TOC\o"1-5"\h\z變默認(rèn)的文件名,數(shù)據(jù)庫(kù)文件名將為 *zephyr.db(或類似的 )4)單擊OK將開(kāi)始備份,依據(jù)數(shù)據(jù)庫(kù)的大小不同而時(shí)間長(zhǎng)短不一,大概持續(xù) 15分鐘。5)備份完成后,需要重新做一次校正。6.儀器保養(yǎng) (詳細(xì)內(nèi)容請(qǐng)看儀器說(shuō)明書)每日保養(yǎng) :檢查每瓶試劑和廢液瓶的液面:必要時(shí)更換和倒空清潔樣品架實(shí)驗(yàn)后,用蒸餾水沖洗活塞 /密封圈清洗端口:在注射器中注入 10毫升蒸餾水,然后把注射器插入活塞 /密封圈清洗端口。緩慢壓下注射器的柱塞,直到注射器中的全部液體注入清洗端口。拔掉空注射器。每月保養(yǎng):1.外表面的清潔使用沾濕的布或海綿擦拭儀器的外表面。不要使用帶有腐蝕性的清潔劑。必要時(shí),可以使用稀釋的肥皂液清洗表面,然后使用濕布或海綿擦掉肥皂殘留。2.內(nèi)表面的清潔使用柔軟的一次性毛巾或織物擦掉內(nèi)表面上的液體。注意,應(yīng)該按照由下到上的順序擦拭。擰緊任何泄漏的接頭。3.清潔傳送帶在“MAINTAIN/Instrument”屏幕上選擇“ExecuteCommands框中選擇“Cleaningbelts”)來(lái)啟動(dòng)取樣站傳送帶。使用軟布或海綿沾水擦拭傳送帶。4.消毒加樣通路1)將分析柱換為假柱(灰色塑料柱)。2)從“Setup/Test”屏幕中選擇"V2_DEC。N1序TestReagentV2_DECONDefault3)在“Test”對(duì)話框中單擊“確定”按鈕。4)在樣品架的前5個(gè)位置放盛有5批氯酸鈉的5支樣品管,后5個(gè)位置上放盛有蒸儲(chǔ)水的5個(gè)樣品管。5)把“Stop”管放到第二個(gè)樣品架上,把兩個(gè)樣品架放到取樣站上。開(kāi)始工作單6)當(dāng)儀器的狀態(tài)返回到“Read,時(shí),拿掉塑料假柱,使用棉簽沾少許脫離子水再次擦拭分析柱座,然后重新安裝好分析柱。7)從“Setup/Test”屏幕中選擇“V2_F、A2'程序。8)重新做一次校正。.清潔條形碼讀取器應(yīng)每月對(duì)條形碼讀取器清潔一次。從取樣站上將前方的黑色罩門取下。使用一塊軟棉布輕輕擦拭條形碼讀取器的讀取屏。注意不要?jiǎng)潅x取屏。.清潔稀釋池應(yīng)每月對(duì)取樣站上的稀釋池進(jìn)行一次清洗。1)關(guān)閉VARIANTH取樣站(VSS的電源。2)拿掉黑色罩門。3)把針架向后推,使用棉簽沾少許蒸儲(chǔ)水擦拭稀釋池。向稀釋池中加一些蒸儲(chǔ)水,沖掉其中可能殘留的顆粒,然后使用棉簽擦拭并去掉殘存的顆粒。4)重新裝上黑色罩門。5)為取樣站通電,等待取樣器完成初始化和沖洗循環(huán)過(guò)程。6)在電腦上提示的CDMS信錯(cuò)誤、取樣器復(fù)位和架子復(fù)位,均單擊“確定”按鈕。7.清潔加樣針)在“MAINTAIN/Instrument”屏幕上選擇ReplaceNeedle。)等待加樣臂移動(dòng)完,將取樣站(VSS前方的黑色罩門拿掉。)用酒精棉簽擦拭加樣針。)在“MAINTAIN/Instrument”屏幕上選擇MoveNeedleHome)屏幕出現(xiàn)提示是否沖洗加樣針的信息,選擇Yes。6.3每季度保養(yǎng):比色池清洗維護(hù)1)訂購(gòu)專用的比色池清洗溶液及配套工具(注射器、清洗液和連接管) ;比色池清洗溶液及配套工具,訂貨號(hào)270-01972)用一個(gè)干凈的小燒杯,按照3份比色池清洗溶液+7份蒸儲(chǔ)水稀釋,總量20ml;3)VariantII在Ready狀態(tài),打開(kāi)層析站的門,將連接上部比色池的進(jìn)口接頭旋開(kāi)。4)將連接管與比色池的進(jìn)口連接;5)用注射器從進(jìn)口打入20ml稀釋好的清洗液,等待20min;必要時(shí)可重復(fù)一次用注射器打入至少 40ml蒸餾水來(lái)沖洗比色池,可重復(fù)一次。重新連接好比色池的進(jìn)口接頭。7.常見(jiàn)故障的解決辦法系統(tǒng)壓力低從MAINTAIN/Instrument界面,緩沖液 2設(shè)為 0%,流速為 2ml/min;按<StartPump救紐。監(jiān)測(cè)A泵壓力3到4分鐘,Stoppum冰關(guān)閉A泵。冉將緩沖液2設(shè)為100%流速為2ml/min;按<$12寸Pump救紐,監(jiān)測(cè)B泵壓力3到4分鐘,Stoppump來(lái)關(guān)閉B泵。確定是A泵還是B泵壓力不穩(wěn)定??赏ㄟ^(guò)手動(dòng)排氣泡來(lái)排除此故障。1)取50mL注射器并將其放入A或B泵下部的插口中。逆時(shí)針轉(zhuǎn)一圈半打開(kāi)插口。慢慢的回抽注射器抽出大約20mL的緩沖液。將插口順時(shí)針旋緊,從插口中取出注射器并趕出空氣。重新將注射器放回插口并逆時(shí)針轉(zhuǎn)一圈半打開(kāi)插口,同時(shí)用扳手將泵頂端的兩個(gè)螺絲旋松。緩慢的推注射器使試劑從頂端流出,大約要從注射器中推出10mL的溶液。不要使用注射器中最后幾毫升的溶液以免重新加入額外的氣泡。2)關(guān)閉泵插口并取出注射器。重新連接頂端的連接,用扳手?jǐn)Q緊,不要擰過(guò)緊。從MAINTAI郵面重復(fù)步驟1。監(jiān)測(cè)壓力輸出和監(jiān)測(cè)器記錄值5分鐘。在這5分鐘內(nèi),檢查泵連接以察看是否有漏液。3)假如壓力波動(dòng)超過(guò) 5%,重復(fù)上述步驟。假如壓力繼續(xù)波動(dòng),請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)服務(wù)部門尋求技術(shù)支持。系統(tǒng)壓力高-更換一個(gè)新的分析柱或新的過(guò)濾片-檢查廢液桶的管路是否被擠壓。7.3運(yùn)行中電源故障導(dǎo)致運(yùn)行中斷關(guān)閉取樣站和層析站的電源重啟電腦,等待自檢通過(guò)按“ Ctrl+Alt+Del”去登錄按“ Enter”鍵進(jìn)入 Windows打開(kāi)CDM^C件,將提示“Communicationerror”的信息,OK打開(kāi)VSS?口VCS等待3分鐘自檢通過(guò)在RUN/Worklist界面的下方點(diǎn)擊 Start/Stop按紐,如果運(yùn)行進(jìn)入“ Endofgradient”狀態(tài),等待該狀態(tài)完成并從下一個(gè)樣本(從Data/ViewRun界面查看)開(kāi)始一個(gè)新的運(yùn)行,否則可點(diǎn)擊 Continue重新開(kāi)始運(yùn)行。染色體分析系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序一.目的:染色體分析系統(tǒng)是外周血、羊水細(xì)胞、絨毛組織的染色體進(jìn)行閱讀的基本條件。二.使用范圍:外周血、羊水細(xì)胞和絨毛組織的染色體的閱讀。三.原理:外周血、羊水細(xì)胞、絨毛組織的閱讀條件要求極高。要求具有高清晰的分辨率。將干燥固定后的外周血染色體、羊水染色體、絨毛組織染色體在體外經(jīng)吉姆薩等試劑染色后, 制成的染色體標(biāo)本, 最后由染色體分析系統(tǒng)進(jìn)行分類、分析和結(jié)果保存。四、標(biāo)準(zhǔn)操作程序(一)開(kāi)始1、不可移動(dòng)相機(jī)方向 ,不可卸下物鏡 ,不可更改聚光鏡位置 ,如以下硬件方向及位置意外更改,系統(tǒng)必須重新校正 !2、開(kāi)啟顯微鏡電源 (白色電源),開(kāi)啟顯微鏡開(kāi)關(guān) (顯微鏡左下方的開(kāi)關(guān) ),開(kāi)啟電腦,L左鍵單擊桌面上 Metafer4捷徑。3、以下安全步驟必須在每次進(jìn)行掃描前執(zhí)行 !先轉(zhuǎn)換到一個(gè)空的物鏡位置, 把一個(gè)玻片架放到載物臺(tái)上 ,插入樣本玻片到第一個(gè)玻片位置, 在Metafer中,L左鍵單擊第一個(gè)玻片位置,左鍵單擊Stage-MovetoFocusPlane命令,手動(dòng)轉(zhuǎn)換到20x物鏡位置 (請(qǐng)不要使用自動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換功能轉(zhuǎn)換物鏡以防止物鏡與玻片發(fā)生碰撞 ),在軟件的實(shí)時(shí)窗口中進(jìn)行對(duì)焦, 左鍵單擊0幽認(rèn)。(二)MSearch-低倍尋找中期1、全自動(dòng)方法設(shè)定掃描左鍵單擊Setup,左鍵單擊在Frame旁邊的▲/▼按鈕選擇玻片架,左鍵單擊No下的玻片位置編號(hào)(或X-代表激活在該玻片架上的所有位置),輸入描設(shè)定:Name,Mode,Classifier,SearchWindow。自動(dòng)低倍尋找中期 +自動(dòng)高倍采圖 :Mode選MSearchTL;Classifier選LY-Auto;Sensitivity選6或以上;SearchWindow選WholeSlide。左鍵單擊 OK按鈕儲(chǔ)存設(shè)定 ,左鍵單擊 Search按鈕,在實(shí)時(shí)窗口中對(duì)焦樣本 .左鍵單擊 OK按鈕確認(rèn)對(duì)焦位置 。2、半自動(dòng)方法設(shè)定掃描左鍵單擊Setup,左鍵單擊在Frame旁邊的▲/▼按鈕選擇玻片架,左鍵單擊No下的玻片位置編號(hào)(或X-代表激活在該玻片架上的所有位置),輸入掃描設(shè)定:Name,Mode,Classifier,SearchWindow。自動(dòng)低倍尋找中期 +自動(dòng)高倍采圖 :Mode選MSearchTL;Classifier選LY;Sensitivity選6或以上;SearchWindow選WholeSlide。左鍵單擊 OK按鈕儲(chǔ)存設(shè)定 ;左鍵單擊 Search按鈕;在實(shí)時(shí)窗口中對(duì)焦樣本 ;左鍵單擊 OK按鈕確認(rèn)對(duì)焦位置。(三)、選擇要執(zhí)行高倍采集的細(xì)胞左鍵雙擊玻片位置打開(kāi)低倍掃描數(shù)據(jù) (如沒(méi)有轉(zhuǎn)換樣本的位置 ),或右鍵單擊玻片位置打開(kāi)低倍掃描數(shù)據(jù) (如已轉(zhuǎn)換樣本的位置 ),左鍵單擊 Gallery按鈕,左鍵單擊 MarkCell按鈕(綠色勾按鈕 ),左鍵單擊要執(zhí)行高倍采集的細(xì)胞 ,左鍵單擊 Close按鈕關(guān)閉Gallery。設(shè)定掃描:左鍵單擊Setup,左鍵單擊在Frame旁邊的▲/▼按鈕選擇玻片架左鍵單擊 No下的玻片位置編號(hào)X-代表激活在該玻片架上的所有位置),輸入掃描設(shè)定 :Mode,Classifier高倍采圖 :Mode選AutoCapt;Classifier選CaptMetaTL。左鍵單擊OK按鈕儲(chǔ)存設(shè)定,在玻片上手動(dòng)加上鏡油,L擊Search按鈕,在實(shí)時(shí)窗口中對(duì)焦樣本 ,左鍵單擊 OK按鈕確認(rèn)對(duì)焦位置。(四)使用 Ikaros手動(dòng)補(bǔ)拍中期細(xì)胞方法一(需開(kāi)啟Metafer)在Metafer中左鍵單擊玻片位置打開(kāi)低倍掃描數(shù)據(jù)(如沒(méi)有轉(zhuǎn)換樣本的位置),或R-玻片位置打開(kāi)低倍掃描數(shù)據(jù) (如已轉(zhuǎn)換樣本的位置 ),在Metafer中左鍵單擊 Ikaros按鈕打開(kāi)Ikaros,在Ikaros中選擇要補(bǔ)拍的中期圖像 ,右鍵單擊圖像編號(hào) ,左鍵單擊重定位當(dāng)前細(xì)胞命令 ,左鍵單擊圖像采集命令 ,按[F]激活對(duì)焦工具 ,在實(shí)時(shí)窗口中慢慢為中期細(xì)胞進(jìn)行對(duì)焦,按 [Enter]進(jìn)行采圖 。方法二(需開(kāi)啟MMCCiIkaros不需開(kāi)啟Metafer)開(kāi)啟 MMC, 開(kāi)啟Ikaros,在Ikaros打開(kāi)要重拍或補(bǔ)拍的中期細(xì)胞 把顯示在細(xì)胞下的MetaferRelative 坐標(biāo)分別輸入到MMCt的TargetXY位置,然后左鍵單擊Move進(jìn)行細(xì)胞重定位 (UseRelativeCoordinates?選項(xiàng)必須勾上 )。(五)使用 Ikaros進(jìn)行核型分析開(kāi)啟Ikaros,左鍵雙擊桌面上 Ikaros捷徑尋找事件:左鍵雙擊事件名域 ,在目錄中左鍵雙擊要打開(kāi)的事件名 .尋找中期圖像: 在中期圖像版面中左鍵雙擊圖像編號(hào)域 ,在目錄中左鍵雙擊要打開(kāi)的中期圖 。尋找核型圖像 ,在核型圖像版面中左鍵雙擊圖像編號(hào)域 ,在目錄中左鍵雙擊要打開(kāi)的核型圖。中期圖像處理 :左鍵單擊屏敝中期按鈕屏敝 ,連續(xù)左鍵單擊定義感興趣區(qū)域,右鍵單擊確認(rèn)感興趣區(qū)域, 左鍵單擊對(duì)象閾值按鈕 ,向右移動(dòng)鼠標(biāo) (減少閾值)或向左移動(dòng)鼠標(biāo) (增加閾值 ),右鍵單擊確認(rèn)閾值設(shè)定, 按[M放大中期 ,按[N]平均化信號(hào),按[F5]增強(qiáng)帶型。分隔染色體 :左鍵單擊分隔按鈕, 按[A]進(jìn)行自動(dòng)分隔功能,左鍵單擊在輕微觸撞的染色體上進(jìn)行分隔, 連續(xù)左鍵單擊畫分隔線, 左鍵單擊在重疊的 (90°)染色體上進(jìn)行分隔。左鍵雙擊在染色體簇上開(kāi)啟動(dòng)分離簇功能 .左鍵單擊在第一條染色體上涂第一條染色體的范圍 (按[+]放大工具 ;按[-]收小工具 ).右鍵單擊確認(rèn)范圍 .左鍵單擊在第二條染色體上涂第二條染色體的范圍 ...直至完成所有染色體 .再次右鍵單擊退出功能,左鍵單擊對(duì)象校對(duì)按鈕檢查是否完成所有分隔對(duì)象校對(duì) (在對(duì)象校對(duì)中也可進(jìn)行分隔功能 )。核型分析 :左鍵單擊右上角的核型表 ,左鍵單擊染色體選擇染色體, 左鍵單擊染色體類別編號(hào)可插入染色體, 左鍵單擊第一條染色體再左鍵單擊第二條染色體可交換位置, 左鍵單擊染色體旋轉(zhuǎn) 180°,同時(shí)按[Shift]+L擊染色體旋轉(zhuǎn) 90°,中健單擊染色體旋轉(zhuǎn) X°,左鍵雙擊染色體上下移動(dòng)染色體位置 ,向右移動(dòng)鼠標(biāo) (向上 )或向左TOC\o"1-5"\h\z移動(dòng)鼠標(biāo) (向下).右鍵單擊確認(rèn)位置 。插入表意:左鍵單擊插入表意按鈕,按 [A]插入所有表意 (按[刪除]刪除所有表意 ),或左鍵單擊在染色體類別上插入個(gè)別表意,右鍵單擊退出插入表意功能。病人資料 :右鍵單擊事件名域 ,左鍵單擊事件數(shù)據(jù)命令 ,輸入病人資料 ,左鍵單擊關(guān)閉按鈕儲(chǔ)存更改 .樣本接收 :左鍵單擊 MetaClient上的新增事件按鈕 ,輸入新建 6人事件名,選擇目錄及要執(zhí)行的行動(dòng) ,左鍵單擊 OK,打開(kāi)事件數(shù)據(jù)輸入病人資料 ,重復(fù)步驟 1-4輸入其他樣本 .打印當(dāng)天輸入的樣本接收單:左鍵單擊詳細(xì)頁(yè),在時(shí)期位置中選擇From-To,左鍵單擊在From旁的▼按鈕,然后左鍵單擊Today.按[Ctrl]+[A]鍵盤鍵選擇所有,左鍵單擊(打印機(jī)圖標(biāo)) 按鈕,在Report中選擇合適的報(bào)告格式 ,AF-receive=羊水樣本接收?qǐng)?bào)告 ,ALL-receive=所有樣本接收?qǐng)?bào)告 ,CB-receive=臍血樣本接收?qǐng)?bào)告,LY-receive= 外周血樣本接收?qǐng)?bào)告,左鍵單擊OK丁印.打印非當(dāng)天輸入的樣本接收單 :左鍵單擊詳細(xì)頁(yè) ,在時(shí)期位置中選擇 Any,在過(guò)濾位置中選擇送檢時(shí)間 ,在值位置中輸入要搜索的日期 (日期格式必須統(tǒng)一為:YYYY/MM/DD),按[Ctrl]+[A]鍵盤鍵選擇所有 ,左鍵單擊(打印機(jī)圖標(biāo))按鈕 ,在Report中選擇合適的報(bào)告格式 ,AF-receive=羊水樣本接收?qǐng)?bào)告 ,ALL-receive=所有樣本接收?qǐng)?bào)告 ,CB-receive=臍血樣本接收?qǐng)?bào)告 ,LY-receive=外周血樣本接收?qǐng)?bào)告 ,左鍵單擊OK丁印.打印樣本月結(jié)單 :左鍵單擊詳細(xì)頁(yè) ,在時(shí)期位置中選擇 Any,在過(guò)濾位置中選擇送檢時(shí)間 ,在值位置中輸入要搜索的日期 (日期格式必須統(tǒng)一為 :YYYY/MM*),按[Ctrl]+[A]鍵盤鍵選擇所有 ,左鍵單擊(打印機(jī)圖標(biāo)) 按鈕,在Report中選擇合適的報(bào)告格式 ,AF-result=羊水樣本結(jié)果報(bào)告 ,ALL-result=所有樣本結(jié)果報(bào)告 ,CB-result=臍血樣本結(jié)果報(bào)告,LY-result=外周血樣本結(jié)果報(bào)告,左鍵單擊OK丁印.統(tǒng)計(jì)核型/陽(yáng)性率:左鍵單擊統(tǒng)計(jì)統(tǒng)計(jì)統(tǒng)計(jì)統(tǒng)計(jì)頁(yè) ,在查詢位置中選擇要進(jìn)行的統(tǒng)計(jì),左鍵單擊執(zhí)行 ,在窗口位置中輸入要搜索的日期 (日期格式必須統(tǒng)一為YYYY/MM*),左鍵單擊 OK.關(guān)閉系統(tǒng) :關(guān)閉軟件 ,關(guān)閉電腦,關(guān)閉顯微鏡電源 .CX31/41/51光學(xué)顯微鏡標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的:CX31/41/51光學(xué)顯微鏡是外周血、羊水細(xì)胞、絨毛組織的染色體進(jìn)行讀片的基本條件。適用范圍:外周血、羊水細(xì)胞和絨毛組織的染色體讀片。原理:外周血、羊水細(xì)胞、絨毛組織的讀片條件要求極為高。要求具有高清晰的分辨率。將干燥固定后的外周血染色體、羊水染色體、絨毛組織染色體在體外經(jīng)吉姆薩等試劑染色后,制成的染色體標(biāo)本,最后通過(guò)顯微鏡進(jìn)行分析檢查。標(biāo)準(zhǔn)操作程序顯微鏡操作程序,打開(kāi)燈泡。將主開(kāi)關(guān)撥到“ I”(開(kāi)) 。沿箭頭方向,順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)光強(qiáng)調(diào)節(jié)鈕使照明更亮,逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)則使照明變暗。旋鈕周邊的數(shù)字表示參考電壓值。視場(chǎng)光闌使用視場(chǎng)光闌環(huán),根據(jù)物鏡放大倍率調(diào)節(jié)視場(chǎng)直徑,直到正好外切視場(chǎng)。當(dāng)視場(chǎng)光闌縮小到外切視場(chǎng)時(shí),能夠排除外來(lái)光線,改善視場(chǎng)中圖象的反差。使用100X物鏡時(shí),視場(chǎng)中可能會(huì)看不到視場(chǎng)光闌圖象。因此,應(yīng)該將光闌縮小到最小直徑。模型滑塊隨顯微鏡鏡架提供的模型滑塊能夠用于適應(yīng)可選的透射光檢偏器 (U-AN)。準(zhǔn)備好透射光起偏器(U-POT)和偏光聚光鏡(CH3-CDP)后,就可以進(jìn)行簡(jiǎn)易偏光觀察。調(diào)節(jié)粗調(diào)焦旋鈕張力: *使用粗調(diào)焦旋鈕張力調(diào)節(jié)環(huán)調(diào)節(jié)粗調(diào)焦旋鈕的張力。粗調(diào)焦旋鈕張力已經(jīng)預(yù)先調(diào)好,易于使用。但是如果必要,還可以使用粗調(diào)焦旋鈕張力調(diào)節(jié)環(huán),改變粗調(diào)焦旋鈕的張力。使用一個(gè)大的平頭改錐插入張力調(diào)節(jié)環(huán)周邊的任一凹槽,順時(shí)針 (沿箭頭方向 )轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)焦旋鈕張力調(diào)節(jié)環(huán),增加張力;反方向轉(zhuǎn)動(dòng)則減小張力。如果載物臺(tái)自行滑下,或者,使用微調(diào)焦旋鈕⑧聚焦后迅速離焦,就是張力太小了。在這種情況下,就要沿箭頭方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)焦旋鈕張力調(diào)節(jié)環(huán),增加張力。粗調(diào)焦限位桿這種裝置能夠確保物鏡不碰撞樣品,簡(jiǎn)化聚焦。使用粗調(diào)焦旋鈕聚焦樣品后,順時(shí)針 (箭頭方向 )撥動(dòng)這個(gè)粗調(diào)焦限位桿并鎖定;粗調(diào)焦的上限就固定在鎖定位置。使用微調(diào)焦旋鈕進(jìn)行聚焦不受粗調(diào)焦限位桿影響。因此,用粗調(diào)焦旋鈕降低載物臺(tái),改變樣品或滴加浸油 (請(qǐng)見(jiàn) 3—6節(jié))后,再將粗調(diào)焦旋鈕轉(zhuǎn)動(dòng)到限位位置,就很容易重新聚焦,然后再使用微調(diào)焦旋鈕進(jìn)行精細(xì)聚焦。如果不需要使用這種裝置時(shí),不要鎖定粗調(diào)焦限位桿。使用油鏡一定要使用所提供的Olympus浸油。使用其它浸油時(shí),有可能損傷聚光鏡上透鏡的表面。從最低倍物鏡到最高倍物鏡輪換聚焦樣品。將物鏡移進(jìn)光路前,把一滴與100X組合模塊同時(shí)提供的浸油滴在樣品的待觀察區(qū)域上。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器把油鏡移進(jìn)光路,然后用微調(diào)焦旋鈕聚焦。因?yàn)榻椭械娜魏螝馀荻紩?huì)影響圖象質(zhì)量,應(yīng)確保浸油中沒(méi)有氣泡。如要檢查氣泡,移去目鏡,完全打開(kāi)視場(chǎng)光闌和孔徑光闌,然后觀察觀察筒內(nèi)物鏡的外緣 (它看起來(lái)應(yīng)該圓而亮 )。如要除去氣泡,轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器,把油鏡重復(fù)移進(jìn)移出幾次。⑥如果聚光鏡標(biāo)志顯示數(shù)值孔徑<NA)為1.0或更大,這些數(shù)字只有在載玻片和聚光鏡的上表面之間有浸油時(shí)才能用。沒(méi)有浸油時(shí),數(shù)值孔徑值大約是 0.9。使用后,用紗布蘸少量乙醚 (70%)/酒精(30%)混合溶液,小心地擦拭物鏡的前透鏡,除去浸油。如果聚光鏡標(biāo)志顯示數(shù)值孔徑(NA)為1.0或更大,這些數(shù)字只有在載玻片和聚光鏡的上表面之間有浸油時(shí)才能用。沒(méi)有浸油時(shí), 數(shù)值孔徑值大約是0.9。使用后,用紗布蘸少量乙醚 (70%)/酒精(30%)混合溶液,小心地擦拭物鏡的前透鏡,除去浸油。 4.6.8使用浸油注意事項(xiàng):如果浸油進(jìn)入眼睛或接觸皮膚,要立即進(jìn)行如下處理。進(jìn)入眼睛;用清水沖洗 (15分鐘以上)。接觸皮膚:用水和肥皂沖洗。如果眼睛和皮膚的外觀有變化或者疼痛持續(xù),請(qǐng)立即到醫(yī)院檢查。支持性文件及程序:CX31/41倒置光學(xué)顯微鏡標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的:CX31/41倒置光學(xué)顯微鏡是羊水細(xì)胞、絨毛組織的染色體細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程進(jìn)行細(xì)胞生長(zhǎng)狀況觀察的基本條件。適用范圍:外周血、羊水細(xì)胞和絨毛組織的染色體細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程進(jìn)行細(xì)胞生長(zhǎng)狀況觀察。原理:羊水細(xì)胞、絨毛組織的染色體細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程進(jìn)行細(xì)胞生長(zhǎng)狀況觀察條件要求極為高,要求具有高清晰、高分辨率和較廣闊的視野。將接種后的羊水細(xì)胞、絨毛組織細(xì)胞在體外經(jīng)含二氧化碳的培養(yǎng)箱孵育后,形成細(xì)胞染色體分裂相期,需由倒置光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察、分析后,制成標(biāo)準(zhǔn)的染色體標(biāo)本,最后通過(guò)顯微鏡進(jìn)行分析檢查。標(biāo)準(zhǔn)操作程序使用調(diào)節(jié)裝置打開(kāi)電源:將顯微鏡鏡架側(cè)面板上的主開(kāi)關(guān)撥到“ I”。調(diào)節(jié)亮度:順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)光強(qiáng)調(diào)節(jié)鈕,提高電壓,使照明更亮。逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)則降低電壓,使照明變暗。在低電壓狀態(tài)下使用燈泡能夠延長(zhǎng)燈泡使用壽命。調(diào)節(jié)粗調(diào)焦旋鈕張力。一定要使用粗調(diào)焦旋鈕張力調(diào)節(jié)環(huán),調(diào)節(jié)粗調(diào)焦旋鈕的張力。請(qǐng)使用手指或平頭改錐轉(zhuǎn)動(dòng)張力調(diào)節(jié)環(huán)。沿箭頭方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)焦旋鈕張力調(diào)節(jié)環(huán),增加張力;反方向轉(zhuǎn)動(dòng)則減小張力。如果物鏡轉(zhuǎn)換器自行滑下,或者,使用微調(diào)焦旋鈕聚焦后迅速離焦,就是張力太小了。在這種情況下,就要沿箭頭方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)焦旋鈕張力調(diào)節(jié)環(huán),增加張力。觀察步驟概述將主開(kāi)關(guān)撥到“ I”,轉(zhuǎn)動(dòng)亮度調(diào)節(jié)旋鈕,調(diào)節(jié)到合適亮度。使用U-TR30-2三日觀察筒時(shí),推進(jìn)光路選擇鈕,選擇 100%22目觀察筒光路。將樣品放到載物臺(tái)上。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器,讓10X物鏡進(jìn)入光路并對(duì)樣品聚焦。一定要讓物鏡轉(zhuǎn)換器停到能聽(tīng)見(jiàn)喀嚓聲的位置。調(diào)節(jié)目鏡瞳間距。調(diào)節(jié)目鏡屈光度。將所需物鏡轉(zhuǎn)進(jìn)光路,對(duì)樣品聚焦。使用帶校正環(huán)的40X物鏡時(shí),請(qǐng)根據(jù)培養(yǎng)皿底部的厚度設(shè)置校正環(huán)上的刻度進(jìn)行相襯觀察。明場(chǎng)中觀察未染色樣品時(shí),關(guān)小孔徑光闌。相襯觀察中,打開(kāi)孔徑光闌。將所需濾色片移進(jìn)光路。明場(chǎng)觀察中,使用LBD濾色片。相襯觀察中,根據(jù)需要,使用IF550綠色濾色片。顯微照相中,建議使用45HA吸熱濾色片。載物臺(tái)放置樣品:將樣品放到載物臺(tái)中央。對(duì)于 CKX41>微鏡,在載物臺(tái)上使用標(biāo)準(zhǔn)載物臺(tái)中心板,可以直接放置一個(gè) 35mitt培養(yǎng)皿。對(duì)于CKX3濕微鏡,將所提供的35mm?養(yǎng)皿固定器放到載物臺(tái)上,然后將一個(gè)35mms養(yǎng)皿裝在中央的開(kāi)口上。如果要移動(dòng)培養(yǎng)皿,請(qǐng)整體滑動(dòng)固定器。使用96位或24位微量滴定盤時(shí),請(qǐng)拉長(zhǎng)樣品架,直接夾住微量滴定盤。如果要使用其它類型的微量滴定盤, 請(qǐng)將所提供的下列固定器之一與機(jī)械式載物臺(tái)組合使用。Terasaki固定器(AB4488):用于Terasaki滴定盤、35mm?養(yǎng)皿固定器或65mmi培養(yǎng)皿。載波片固定器(AB4489):用于載波片和54mn?養(yǎng)皿。血液細(xì)胞測(cè)試板固定器IX2-BCTP(選貝件):用于血液細(xì)胞測(cè)試板,或用于細(xì)菌和嗜曙紅細(xì)胞的記數(shù)板的固定,但是要求帶有安裝部位,尺寸符合mm或者用于60mm培養(yǎng)皿。轉(zhuǎn)動(dòng)X軸旋鈕和 Y軸旋鈕,就可以將樣品移動(dòng)到所需位置。 (行程:X軸方向120mlTI。;Y軸方向78mm)移動(dòng)樣品:轉(zhuǎn)動(dòng)機(jī)械式載物臺(tái)的 X軸旋鈕和Y軸旋鈕,或者直接用手移動(dòng)樣品。改變物鏡時(shí)要小心。在使用短工作距離物鏡樣品后改變物鏡時(shí),新選用的物鏡可能會(huì)與載物臺(tái)中心板或培養(yǎng)皿架沖突。在使用CKX41顯微鏡時(shí),IX-CP50載物臺(tái)中心板有著廣泛的無(wú)沖突使用范圍觀察筒調(diào)節(jié)瞳間距通過(guò)目鏡觀察時(shí),調(diào)節(jié)雙目鏡簡(jiǎn)直到左右視場(chǎng)完全吻合。調(diào)節(jié)到兩個(gè)指示點(diǎn), 保持水平。 如果要使兩個(gè)指示點(diǎn)的連線保持水平, 調(diào)節(jié)時(shí),使兩個(gè)指示點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)樞紐上的水平線的延線。如果瞳間距不是 50、60、70牙口 75,調(diào)節(jié)時(shí),使兩個(gè)指示點(diǎn)的連線平行于樞紐上的水平線。記下你的瞳間距,以便再用。使用U-CBI30-2或U-CTR30-2觀察筒時(shí),步驟與CKX31顯微鏡完全一樣。使用U-B130-2、U-TR30-2、CKX-TBI或U-TBI3觀察筒時(shí),指示點(diǎn)只有一個(gè)。通過(guò)目鏡觀察時(shí), 調(diào)節(jié)雙目鏡筒直到左右視場(chǎng)完全吻合。 指示點(diǎn)“.”的位置表明瞳間距。記下你的瞳間距,以便再用。調(diào)節(jié)屈光度:使用左眼通過(guò)左目鏡觀察,轉(zhuǎn)動(dòng)粗、微調(diào)焦旋鈕對(duì)樣品聚焦。使用右眼通過(guò)右目鏡觀察,只轉(zhuǎn)動(dòng)屈光度校正環(huán),對(duì)樣品聚焦。使用右眼通過(guò)右目鏡觀察,轉(zhuǎn)動(dòng)粗、微調(diào)焦旋鈕對(duì)樣品聚焦。使用左眼通過(guò)左目鏡觀察,只轉(zhuǎn)動(dòng)屈光度校正環(huán),對(duì)樣品聚焦。將取景目鏡插入U(xiǎn)-n(30-2三目觀察筒的右目鏡筒。使用右眼通過(guò)右目鏡觀察,轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡上端的環(huán),直到雙十字線在視場(chǎng)中清晰可見(jiàn)。使用右眼通過(guò)右目鏡觀察,轉(zhuǎn)動(dòng)粗、微調(diào)焦旋鈕對(duì)樣品和雙十字線同時(shí)聚焦。使用左眼通過(guò)左目鏡觀察,只轉(zhuǎn)動(dòng)屈光度校正環(huán),改變物鏡時(shí)要小心。在使用短工作距離物鏡樣品后改變物鏡時(shí),新選用的物鏡可能會(huì)與載物臺(tái)。對(duì)樣品聚焦。目鏡測(cè)微尺可以插入WH10X-H域WH10X)目鏡。使用24毫米(直徑)X1.5毫米 (厚度 )目鏡測(cè)微尺。 從目鏡上擰下測(cè)微尺架, 把測(cè)微尺放入架中。讓測(cè)微尺有刻度的一面向下進(jìn)入測(cè)微尺架。把測(cè)微尺架再擰進(jìn)原來(lái)位置。U-CTR30-2三目觀察筒沒(méi)有光路選擇鈕, 它的光強(qiáng)分配比固定為 50%用于雙筒目鏡, 50%用于視頻觀察濕微照相。 使用CKX-TBI和U-TBl3觀察筒時(shí),可以把觀察鏡筒的高度和傾角調(diào)節(jié)到最舒適的觀察位置。用兩手抓住雙筒部分,把它升高到或降低到所需位置。?CKX-TB30至I/60':?U-TB13:5至J35工不要試圖強(qiáng)制讓雙筒目鏡越過(guò)上面或下面的停止限位, 用力過(guò)大就會(huì)破壞限位裝置??捎媚跨R只能是WHB10XE者是只適合于U-TB13的CXK-TBI和WH10X如果使用其它任何目鏡,都會(huì)使視場(chǎng)周邊照明不足。使用PMlRPM20tPM3O微照相系統(tǒng)時(shí),請(qǐng)使用45HA吸熱濾色片。請(qǐng)注意攝象機(jī)的尺寸和重量,選用適合于本系統(tǒng)的攝
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