實(shí)驗(yàn)五血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定_第1頁(yè)
實(shí)驗(yàn)五血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定_第2頁(yè)
實(shí)驗(yàn)五血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定_第3頁(yè)
實(shí)驗(yàn)五血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定_第4頁(yè)
實(shí)驗(yàn)五血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定_第5頁(yè)
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關(guān)于實(shí)驗(yàn)五血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定第一頁(yè)，共九頁(yè)，2022年，8月28日一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆昭灞彼岚被D(zhuǎn)移酶活性測(cè)定的基本原理。了解血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的測(cè)定方法及臨床意義。第二頁(yè)，共九頁(yè)，2022年，8月28日510nm光吸收法測(cè)定相對(duì)血清ALT活力二、實(shí)驗(yàn)原理丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)催化丙氨酸與α-酮戊二酸生成丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸可與2,4-二硝基苯肼在酸性溶液中反應(yīng)形成相應(yīng)的2,4-二硝基苯腙，呈黃色，后者在堿性條件下呈紅棕色。（1）丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+谷氨酸ALT

（2）丙酮酸+2,4-二硝基苯肼丙酮酸2,4-二硝基苯肼(黃色)丙酮酸2,4-二硝基苯肼（3）苯腙硝醌化合物NaOH（黃色）（紅棕色）第三頁(yè)，共九頁(yè)，2022年，8月28日三、實(shí)驗(yàn)器材材料：人血清試劑：谷丙轉(zhuǎn)氨酶測(cè)定試劑盒用具：分光光度計(jì)，微量移液槍，試管，試管架，恒溫水浴鍋第四頁(yè)，共九頁(yè)，2022年，8月28日（1）取3支試管，按下表加入試劑:試劑試劑空白管標(biāo)準(zhǔn)管樣品管基質(zhì)液(uL)200200200標(biāo)準(zhǔn)液(uL)–50.0–血清樣品(uL)––50.0蒸餾水(uL)50.0––混合37℃水浴放置30min顯色劑(uL)20020020037℃水浴放置20min稀釋NaOH(uL)200020002000四、實(shí)驗(yàn)步驟冷卻至室溫后，510nm處比色比色方法：以空白管調(diào)零，讀取標(biāo)準(zhǔn)管及樣品管光密度值。第五頁(yè)，共九頁(yè)，2022年，8月28日（2）計(jì)算：依據(jù)朗伯-比爾定律：A=KLC標(biāo)準(zhǔn)管谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力：57U/L

樣品管谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力（U/L）＝樣品管光密度值

標(biāo)準(zhǔn)管光密度值×57U樣=A樣A標(biāo)×U標(biāo)第六頁(yè)，共九頁(yè)，2022年，8月28日參考值谷丙轉(zhuǎn)氨酶血清參考值：0~50U/L

第七頁(yè)，共九頁(yè)，2022年，8月28日正確使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色液應(yīng)占比色皿的2/3。每次測(cè)定時(shí)都需用試劑空白溶液調(diào)零，不能用蒸餾水代替微量移液槍的

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