尿液分析儀分析項目測定標準操作規(guī)程

尿常規(guī)項目標準操作干化學(xué)法（一） 標本的采集及保存尿常規(guī)檢驗通常以新鮮晨尿為宜，但門診患者可以隨機留尿。尿液標本采集應(yīng)使用潔凈帶蓋的一次性容器，避免經(jīng)血、白帶、精液、糞便混入。標本留取后要及時送檢。對于不能立即檢查的標本，在冰箱內(nèi)一般可保存6-8小時。要根據(jù)檢驗項目的需要，選擇不同的防腐及保存方法。（二） 校準1校準試紙條：與儀器配套的試紙條2校準方法：一共2條校準試紙條，只作為日常校準用，一般只用一條，另一條為備（三） 檢測項目1葡萄糖1.1原理采用葡萄糖氧化酶法原理。在有氧條件下，葡萄糖被葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖醛酸和過氧化氫，后者在過氧化物酶的催化下釋放出初生態(tài)氧，使色原鄰甲聯(lián)苯胺（或碘化鉀）呈現(xiàn)不同的顏色變化，其顏色深淺與尿液中葡萄糖含量有關(guān)。本法檢測范圍為微量（土）纟勺5.6mm/L;弱陽性（+）纟勺13.8mmol/L,陽性（++）約27.5mmol/L,強陽性（+++）約55.5mmol/L,最強陽性（++++）約111mmol/L.1.2注意事項維生素C能干擾低濃度的尿液葡萄糖測定，使結(jié)果呈假陰性?？蓪⒛蛞褐蠓袛?shù)分鐘以排出維生素C的干擾。酮體能降低葡萄糖檢測的敏感度或使檢測呈假陰性。干化學(xué)葡萄糖氧化酶法對尿液葡萄糖監(jiān)測的靈敏度和特異性有所不同，僅是一般的定量過篩試驗。因此，對于糖尿病患者最好采用葡萄糖定量試驗。1.3參考值正常人腎糖閾為9-10mmol/L,一般情況下血糖濃度比較恒定，空腹是為4.44-6.00mmol/L，進餐后8.88-9.99mmol/。精神小球濾過的葡萄糖幾乎全部由腎小管重吸收，僅有極其微量的葡萄糖隨尿液排出，一般定性試驗為陰性。1.4臨床意義生理性糖尿生理性糖尿包括飲食性糖尿、應(yīng)急性糖尿和妊娠性糖尿，呈一過性，當去除生理因素后即可恢復(fù)。病理性糖尿病理性糖尿分原發(fā)真性糖尿和繼發(fā)性高血糖性糖尿，前者如糖尿病、腎性糖尿病；后者如甲狀腺功能抗進、垂體功能亢進、嗜鉻細胞瘤、胰島 a細胞瘤、庫欣綜合癥、胰腺疾病、嚴重肝功能衰竭。2膽紅素2.1原理采用重氮反應(yīng)法原理，在強酸介質(zhì)中，膽紅素與重氮化的雙氯苯胺偶聯(lián)，形成紫紅色的重氮色素，其顏色深淺與尿中膽紅素濃度有關(guān)。本法檢測范圍為弱陽性（+）約8.6umol/L;陽性（++）約17.1;強陽性（+++）約51.3。2.2注意事項尿液標本宜新鮮，避免陽光直射而使膽紅素轉(zhuǎn)變成膽綠素導(dǎo)致檢測結(jié)果呈假陽性。2.2.2高濃度維生素C和亞硝酸鹽可抑制偶氮反應(yīng)，導(dǎo)致膽紅素檢測結(jié)果假陰性，吡啶、吲哚酸在低pH值條件下可導(dǎo)致假陽性反應(yīng)。水楊酸鹽、阿司匹林也可使本試驗結(jié)果2.3參考值陰性2.3臨床意義尿膽紅素陽性見于阻塞性黃疸、肝細胞性黃疸、病毒性（或中毒性）肝炎、肝硬化以及其他肝病。3酮體原理在堿性條件下，亞基鐵氰化鈉與尿液中乙酰乙酸作用，產(chǎn)生紫色放映，其顏色深淺與酮體含量有關(guān)。本法檢測范圍為微量（土）約0.9mmol/;弱陽性（+）約1.7mmol/L,陽性（++）約8.6mmol/L,強陽性（+++）約17.2mmol/L，最強陽性（++++）約111mmol/L.3.2注意事項3.2.1本法只檢測尿液中的乙酰乙酸，不與丙酮或或 B-羥丁酸反應(yīng)，故與傳統(tǒng)的化學(xué)法結(jié)果略有差異。檢測敏感度為 0.5-1.0mmol/L。不同病因引起的酮癥，其酮體成分有所不同。在糖尿病酮癥酸中毒早期患者中，主要酮體形式是 B-羥丁酸，乙酰乙酸很少或缺乏。因此，干化學(xué)分析可出現(xiàn)假陰性結(jié)果或?qū)偼w量的估計不足。相反，在糖尿病酮癥酸中毒癥狀緩解之后，乙酰乙酸含量反而比初始急性期增高。乙酰乙酸受熱易分解成丙酮，故尿液標本宜及時送檢。尿液含量有大量色素或大量左旋多巴代謝產(chǎn)物時，可導(dǎo)致假陽性結(jié)果。參考值陰性臨床意義尿酮體陽性見于糖尿病酮癥酸中毒、饑餓、劇烈運動、營養(yǎng)不良等。相對密度4.1原理高分子電解質(zhì)共聚體的解離常數(shù)（pKa）隨尿液離子濃度而變化，離子濃度越高，其酸性基團（H+）解離越多，H+可與酸堿指示劑反應(yīng)，通過溴麝香酚藍的顏色改變，顯示尿液的相對密度值。尿液中離子濃度較低時，呈藍綠色，離子濃度升高則轉(zhuǎn)向黃綠色。4.2注意事項電解質(zhì)共聚體有多甲乙烯酸馬來酐和甲氧乙烯順丁烯二酸兩種，后者更為常用。本法檢測范圍從1.005開始，每隔0.005遞增，至1.030止，低于前者或超過后者，報告“W1.005”或“》1.030”。干化學(xué)分析測定尿液相對密度不受葡萄糖含量的影響，但對尿中蛋白質(zhì)較敏感。尿中蛋白質(zhì)含量每增加1%，則尿液相對密度增加0.003。另外，X線造影劑可使含防腐劑的尿液相對密度增加到1.050。423本法受尿液pH值得影響較大，pH>6.5時，應(yīng)在測定結(jié)果上增加0.005作為因尿液pH值影響的補償。干化學(xué)分析尿液相對密度檢測范圍為1.005-1.030，新生兒尿液相對密度在1.002-1.004之間。由于本法檢測結(jié)果的數(shù)據(jù)間隔較大，對尿液相對密度過高或過低的標本檢測不夠敏感，因此，僅限于篩選試驗。本法的參比方法為折射儀法。參考值正常人尿液相對密度主要受尿液中所含氯化鈉和尿素的影響。通常飲食條件下，尿液相對密度波動在1.015-1.025之間。臨床意義病理狀態(tài)下，尿液相對密度隨尿液中所含的溶質(zhì)成分而改變。因此，尿液相對密度檢測時了解腎臟濃縮功能的一項簡易指標。尿液相對密度增高見于急性腎炎、糖尿病、蛋白質(zhì)、高熱等。尿液相對密度降低見于慢性腎炎、尿崩癥、原發(fā)性醛固酮增多癥及腎功能不全多尿期。慢性尿崩癥時，由于尿量極大，尿液外觀如水，相對密度極地，幾乎等于 1。尿液相對密度連續(xù)測定較一次測定更有價值，慢性腎功能不全患者可呈現(xiàn)持續(xù)性低相對密度尿。PH值5.1原理將甲基紅(PH4.6-6.2)和溴麝香酚藍(PH6.0-7.6)適量配合，組成復(fù)合型指示劑，呈色范圍為pH4.5-9.0(橘黃色-藍色)，其顏色變化與尿液pH值相關(guān)。本法檢測范圍限于pH4.5-9，每隔0.5單位遞增。5.2注意事項尿液pH值主要取決于尿中磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉的相對含量，并因飲食情況而異。每當進食后，由于胃黏膜分泌大量鹽酸以助消化，此時尿液pH值顯一過性增高。夜間人睡后，由于呼吸變慢呈輕微的酸中毒，故尿中pH值發(fā)生變化。標本不宜久置，以免細菌分解尿液成分，使pH值發(fā)生改變?？衫媚蛞簆H值測定，對尿蛋白、尿相對密度等易受pH值影響的干化學(xué)分析加以監(jiān)控。參考值4.6-7.4．進食肉類或蛋白質(zhì)多者呈弱酸性，進食植物性食物多者呈堿性。臨床意義酸性尿見于尿路結(jié)核、代謝性酸中毒、糖尿病酮癥酸中毒和服用氯化銨、氯化鈣、稀鹽酸機體內(nèi)蛋白質(zhì)分解增加、痛風(fēng)等。酸堿尿見于劇烈嘔吐、堿中毒、腎功能不全、原發(fā)性醛固酮增多癥、腎小管性酸中毒、尿路感染及服用堿性藥物等情況。另外，尿液pH值變化與尿結(jié)石的形成關(guān)系密切，應(yīng)用尿液pH值測定監(jiān)測腎結(jié)石患者的尿液酸堿度變化可以指導(dǎo)臨床用藥。如尿酸和胱氨酸結(jié)石在酸性條件下容易形成，而磷酸鈣結(jié)石在堿性條件下容易形成。蛋白質(zhì)6.1原理根據(jù)PH指示劑蛋白質(zhì)誤差原理而設(shè)計。尿液中蛋白質(zhì)陽離子基團（白蛋白）與指示劑四溴酚藍（或四氯粉絲溴酚酞）陰離子基團結(jié)合，導(dǎo)致指示劑進一步電離，從而產(chǎn)生顏色變化，其顏色變化與尿液蛋白質(zhì)含量有關(guān)。本法檢測范圍為弱陽性（+）約0.3g/L;陽性（++）約1.0g/L強陽性（+++）約3.0g/L;最強陽性（++++）約10.0g/L6.2注意事項6.2.1干化學(xué)分析檢測尿蛋白有3類不同的方法，除指示劑蛋白質(zhì)誤差外，還有Urine-TP和Micral-Test法。前者類似考馬斯亮藍法，能同時檢測白蛋白、球蛋白及本-周蛋白;后者雖采用層析擴散和免疫技術(shù)，也只能檢測白蛋白。6.2.2本法檢測球蛋白的敏感性僅為白蛋白的1/100~1/50，而璜基水楊酸法對白蛋白和球蛋白的敏感性基本一致。因此，NCCLS推薦璜基水楊酸法最為干化學(xué)分析的參比方法。但必須注意，璜基水楊酸法易受尿中存在的某些鹽類結(jié)晶的干擾。干化學(xué)分析及其他化學(xué)檢測尿蛋白由于試劑組成不同，其檢測敏感度也有較大差異。四溴酚藍法為150-300mg/l,與加熱乙酸法相當，但低于璜基水楊酸法（50~100mg/l）,而四氯酚四溴酚酞法為60mg/l。干化學(xué)分析均不能檢出本-周蛋白。6.2..4尿液pH值變化對檢測結(jié)果影響較大，特別是服用奎寧、奎尼丁和嘧啶等藥物者的強堿性尿液會出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。此外，阿斯匹林、青霉素、慶大霉素、氯丙嗪、灰黃霉素、干擾素、利福平、磺胺類、潑尼松、非激素消炎劑、造影劑等均可導(dǎo)致假陽性反應(yīng)。6.2.5尿液標本如含有其他分泌物或較多細胞成分也可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。6.3參考值正常人終尿蛋白質(zhì)含量很少，用干化學(xué)法分析檢測為陰性。6.4臨床意義正常人血漿內(nèi)分子量〉69000卩的蛋白質(zhì)極少從腎小球濾過，v15000＜卩的蛋白質(zhì)可自由的從腎小球濾過，但95%-96%被腎小管重吸收，故尿中蛋白質(zhì)含量很少。生理性蛋白尿生理性蛋白尿又稱功能性蛋白尿，指泌尿系統(tǒng)并無器質(zhì)性變化，尿液中暫時出現(xiàn)蛋白尿。由于劇烈運動、長時間直立、高溫、和受寒冷等因素，引起腎血管痙攣或充血，導(dǎo)致腎小球通透性增加而致。此種蛋白尿多為一過性。病理性蛋白尿病理性蛋白尿是指器質(zhì)性病變導(dǎo)致尿液中持續(xù)出現(xiàn)蛋白質(zhì)?？煞譃槟I小球性蛋白尿、腎小管性蛋白尿、混合蛋白尿和溢出性蛋白尿。腎小球性蛋白尿：因炎癥等因素導(dǎo)致腎小球毛細血管通透性增加，血漿蛋白大量濾出，超過腎小管沖吸收能力引起蛋白尿。見于原發(fā)性與繼發(fā)性腎小球疾病，如腎淀粉樣變、糖尿病腎病、急、慢性腎炎、腎病綜合征等。腎小管性蛋白尿：因炎癥或中毒引起腎近曲小管對低分子蛋白質(zhì)的重吸收障礙，導(dǎo)致尿中出現(xiàn)蛋白質(zhì)。見于間質(zhì)性腎炎、腎盂腎炎、中毒性腎病及腎移植后的排斥反應(yīng)等?；旌闲缘鞍啄颍耗I臟病變同時累及腎小球和腎小管，使蛋白質(zhì)濾出增加且重吸收減少引起蛋白尿。見于慢性腎炎、慢性腎功能不全、狼瘡性腎炎、多發(fā)性骨髓瘤、糖尿病腎病等。溢出性蛋白尿：腎臟正常，腎外疾病導(dǎo)致循環(huán)中低分子量的蛋白質(zhì)增多，使腎小球濾出增多，超出腎小管重吸收能力引起的蛋白質(zhì)。見于多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥、急性血管內(nèi)溶血及單核細胞白血病。尿膽原原理根據(jù)偶氮結(jié)合法原理，尿膽原在強酸條件下和重氮鹽偶聯(lián)形成胭脂紅色素，其顏色深淺與尿膽原含量有關(guān)。注意事項本法的敏感度為4mg/L.正常人每天尿膽原排出量波動較大，夜間和上午較少，午后2點-4點時達最高峰，并與尿液pH值成正比。尿液標本宜新鮮，避免陽光照射使尿膽原氧化成尿膽素呈假陽性反應(yīng)。磺胺類藥物對本法有干擾，尿中含有甲醛可是結(jié)果呈假陰性反應(yīng)。參考值尿膽原主要來自膽紅素的分解。生理情況下腸道細菌分解形成的膽素原族化合物，絕大部分隨糞便排出，約有10%-20%進入腸肝循環(huán)，其中僅有極少部分進入體循環(huán)后，隨尿排出。故正常尿液中只含有少量尿膽原（3-16卩mol/L）。臨床意義尿膽原濃度增高見于溶血性及肝細胞性黃疸。阻塞性黃疸患者尿膽原試驗呈陰性。亞硝酸鹽原理反應(yīng)依賴于尿中革蘭氏陽性細菌把硝酸鹽還原成亞硝酸鹽，亞硝酸鹽與對氨基苯砷酸反應(yīng)生成重氮化合物，重氮化合物再與萘基乙二胺二鹽酸結(jié)合呈現(xiàn)桃紅色。注意事項本法僅可見出硝酸鹽還原酶陽性的細菌，敏感度為0.6-1.0mg/L亞硝酸鹽，檢出率約80%。但尿液中在膀胱內(nèi)儲留時間不足4小時或飲食中缺乏硝酸鹽時，盡管尿液中存在還原酶陽性菌，檢測結(jié)果仍然可為陰性。822含維生素C或相對密度高的尿液可呈假陰性。含色素尿檢測結(jié)果可呈假陽性。8.2.3本法陰性不能排除硝酸鹽還原酶陰性的其他細菌感染。但陽性結(jié)果則肯定是尿路感染，應(yīng)進一步作細菌培養(yǎng)和藥敏試驗，以便確定有效的抗生素治療。參考值陰性臨床意義尿液亞硝酸鹽陽性見于腸肝均可細菌應(yīng)起的尿路感染如膀胱炎、腎盂腎炎等。紅細胞原理紅細胞內(nèi)含有亞鐵血紅素基團，具有過氧化物酶活性，可催化過氧化氫釋放初生態(tài)氧，使色原鄰甲聯(lián)苯胺呈藍色反應(yīng)，其顏色深淺與血紅蛋白含量有關(guān)。本法檢測范圍為弱陽性（+）5-10個紅細胞/卩l(xiāng);陽性（++）50個紅細胞/卩1；強陽性（+++）250個紅細胞/卩I。注意事項本法既可測定完整紅細胞內(nèi)的血紅蛋白，又可測定破碎紅細胞釋放的游離血紅蛋白。因此，檢測結(jié)果與鏡檢可不一致，應(yīng)綜合分析判斷。試劑組成，其檢測敏感度也不相同。四甲基聯(lián)苯胺-二異丙苯-二氫過氧化酶檢測敏感度為0.15-0.62mg/L蛋白質(zhì)，相當于5-15個完整紅細胞/卩I。四甲基聯(lián)苯胺-2，5-二甲基-2，5-二氫過氧化乙烷檢測敏感度為5個紅細胞/卩I或10個紅細胞/卩I的血紅蛋白。尿液中含有易熱酶時可致假陽性結(jié)果，因此須將尿液煮沸在進行檢測。9.2.4尿液中含有大量維生素C時，可出現(xiàn)假陰性反應(yīng)。蛋白尿、相對密度高的尿液及亞硝酸鹽均可導(dǎo)致假陽性結(jié)果。9.2.5本法與紅細胞鏡檢不完全相關(guān)，但當檢測結(jié)果少于 10個紅細胞/卩I時，可以省去顯微鏡檢查。參考值陰性臨床意義檢測結(jié)果陽性具有兩種含義，即血尿和血紅蛋白尿。血尿：見于腎結(jié)石、腎小球腎炎、腎結(jié)核、腎盂腎炎、膀胱炎、腫瘤、創(chuàng)傷、化學(xué)或藥物中毒、劇烈運動。血紅蛋白尿：見于輸血反應(yīng)、溶血性貧血、嚴重?zé)齻?、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿。白細胞原理采用粒細胞酯酶反應(yīng)原理。尿中粒細胞特異性質(zhì)沒能水解吲哚酚酯，并與重氮鹽偶聯(lián)形成紫色縮合物，其顏色深淺與粒細胞數(shù)量有關(guān)。注意事項中性粒細胞內(nèi)含有特異性酯酶，而淋巴細胞、單核細胞、無此酶。因此，尿中以淋巴細胞為主時的腎移植排異反應(yīng)患者，可出現(xiàn)假陽性結(jié)果。不同試劑組成，其檢測敏感度和檢出范圍也不同。如萘酚AS-D氧化乙酸、重氮鹽法和吡咯氨基酸酯、重氮鹽法的檢測范圍為微量（±）約15個白細胞/卩I;弱陽性（+）70個白細胞/卩I;陽性（++）125個白細胞/卩I;強陽性（+++）500個白細胞/卩I。而吲哚酚羧基酚酯、重氮鹽法檢測范圍如下：弱陽性（+）25個白細胞/卩I;陽性（++）100個白細胞/卩I;強陽性（+++）500個白細胞/卩I.萘酚AS-D氧化乙酸、2-氯4苯甲酰胺-5甲基、苯基氯化重氮苯法檢測范圍為：弱陽性（+）25個白細胞/卩I;陽性（++）75個白細胞/卩I;強陽性（+++）500個白細胞/卩I。使用甲醛、呋喃可致假陽性反應(yīng)，使用慶大霉素、先鋒霉素 V可致假陰性反應(yīng)。蛋白尿、糖尿、高相對密度尿均可導(dǎo)致假陰性反應(yīng)或使陽性結(jié)果減弱。參考值正常人尿液通常為陰性。測定結(jié)果為±時其臨床意義有時可疑，但措辭出現(xiàn)±結(jié)果提示可能有問題。陽性結(jié)果偶見于一些被陰道分泌物污染的隨機尿標本。臨床意義尿液白細胞陽性見于尿路感染如尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎以及腎結(jié)核、腎腫瘤病發(fā)感染等。維生素C原理維生素C(即抗壞血酸)具有1,2-烯二醇還原性基團，在酸性條件下能將2,6-二氯定靛酚還原成2，6-二氯二對酚胺，顏色由粉紅色轉(zhuǎn)變成無色，其顏色變化與維生素C含量有關(guān)。本法檢測范圍為弱陽性(+)0.56mmol/L(100mg/L)；陽性(++)40mmo