微生物學(xué)-第七章課件

第七章微生物的生長(zhǎng)繁殖掌握研究微生物生長(zhǎng)的方法及生長(zhǎng)曲線在廢水微生物處理中的應(yīng)用；一、微生物生長(zhǎng)繁殖的概念二、微生物的分離和純種培養(yǎng)三、研究微生物生長(zhǎng)的方法四、細(xì)菌生長(zhǎng)曲線在污（廢）水微生物處理中的應(yīng)用五、微生物生長(zhǎng)量的測(cè)定方法微生物的生長(zhǎng)繁殖的概念

微生物生長(zhǎng)是細(xì)胞物質(zhì)有規(guī)律地、不可逆增加，導(dǎo)致細(xì)胞體積擴(kuò)大的生物學(xué)過程，這是個(gè)體生長(zhǎng)的定義。繁殖是微生物生長(zhǎng)到一定階段，由于細(xì)胞結(jié)構(gòu)的復(fù)制與重建并通過特定方式產(chǎn)生新的生命個(gè)體，即引起生命個(gè)體數(shù)量增加的生物學(xué)過程。在一定時(shí)間和條件下細(xì)胞數(shù)量的增加，這是微生物群體生長(zhǎng)的定義。世代時(shí)間：細(xì)菌兩次細(xì)胞分裂之間的時(shí)間。第一節(jié)微生物的分離和純培養(yǎng)用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)

不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征，可以成為對(duì)該微生物進(jìn)行分類、鑒定的重要依據(jù)。大多數(shù)細(xì)菌、酵母菌，以及許多真菌和單細(xì)胞藻類能在固體培養(yǎng)基上形成孤立的菌落，采用適宜的平板分離法很容易得到純培養(yǎng)。所謂平板，是指熔化的固體培養(yǎng)基倒入無菌平皿中，冷卻凝固后，成為盛有固體培養(yǎng)基的平皿。固體培養(yǎng)方法可將單個(gè)微生物分離和固定在固體培養(yǎng)基表面或里面。二、純培養(yǎng)的分離方法純培養(yǎng)分離的目的：得到純培養(yǎng)物，是研究和利用微生物的第一步。最常用的分離、培養(yǎng)微生物的固體培養(yǎng)基是瓊脂固體培養(yǎng)基平板。Koch建立的平板分離微生物純培養(yǎng)的技術(shù)簡(jiǎn)便易行，100多年來一直是各種菌種分離的最常用手段。稀釋倒平板法(pourplatemethod) 涂布平板法(spreadplatemethod) 平板劃線分離法(streakplatemethod)選擇培養(yǎng)基分離法單細(xì)胞挑取法待分離的材料用無菌水作一系列的稀釋，取不同稀釋液少許，與已熔化并冷卻至45℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后，傾入滅過菌的培養(yǎng)皿中，待瓊脂凝固后，制成可能含菌的瓊脂平板，保溫培養(yǎng)一定時(shí)間，可能出現(xiàn)在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中的單個(gè)菌落，這個(gè)菌落可能就是由一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞繁殖形成的。隨后挑取該單個(gè)菌落，或重復(fù)以上操作數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)?！猛緩V泛的分析方法稀釋倒平板法

在微生物學(xué)研究中更常用的純種分離方法是涂布平板法。其做法是先將已熔化的培養(yǎng)基倒人無菌平皿，制成無菌平板，冷卻凝固后，將一定量的某一稀釋度的樣品懸液滴加在平板表面，再用無菌玻璃涂棒將菌液均勻分散至整個(gè)平板表面，經(jīng)培養(yǎng)后挑取單個(gè)菌落。

涂布平板法用接種環(huán)以無菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

——方法簡(jiǎn)單，多用于分離細(xì)菌平板劃線分離法MixedculturePureculturePureculture光滑型菌落粗糙型菌落粘液型菌落

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1ml9ml土豆培養(yǎng)基牛肉膏培養(yǎng)基高氏培養(yǎng)基該法是從待分離的材料中挑取一個(gè)細(xì)胞來培養(yǎng)，從而獲得純培養(yǎng)的方法。方法：將顯微鏡挑取器裝在顯微鏡上，將一滴待分離的菌液滴入載玻片上，用安裝在顯微鏡挑取器上的毛細(xì)吸管對(duì)準(zhǔn)某個(gè)單獨(dú)的細(xì)胞挑取，在接種到培養(yǎng)基上，得到純培養(yǎng)?！窒抻诟叨葘I(yè)化的科學(xué)研究單細(xì)胞挑取法

二、細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線growthcurve活菌數(shù)的對(duì)數(shù)培養(yǎng)時(shí)間遲緩期衰亡期穩(wěn)定期（靜止期）對(duì)數(shù)期（指數(shù)期）細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖周期細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖可分為4個(gè)時(shí)期：１．停滯期（遲滯期或適應(yīng)期）：２．對(duì)數(shù)期（指數(shù)期）：３．靜止期：

４．衰亡期：縮短延滯期的方法：接種對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌種，采用最適菌齡加大接種量用與培養(yǎng)菌種相同組成分的培養(yǎng)基指數(shù)期(對(duì)數(shù)期)(exponentialphase)活菌數(shù)和總菌數(shù)接近；酶系活躍，代謝旺盛，對(duì)不良環(huán)境抵抗力強(qiáng)；生長(zhǎng)速率最大，細(xì)菌數(shù)量以幾何級(jí)數(shù)速率增長(zhǎng)（2n）；細(xì)胞的化學(xué)組成及形態(tài)，生理特性比較一致；該期的細(xì)菌生產(chǎn)中多被用做種子和科學(xué)試驗(yàn)材料。指數(shù)期生長(zhǎng)的數(shù)學(xué)模型繁殖代數(shù)n=3.322(lgx2-lgx1)生長(zhǎng)速率常數(shù)R=3.322(lgx2-lgx1)/(t2-t1)代時(shí)G=(t2-t1)/3.322(lgx2-lgx1)x2x1t2t1培養(yǎng)時(shí)間Lg細(xì)胞數(shù)/ml穩(wěn)定期(靜止期)出現(xiàn)原因：營(yíng)養(yǎng)的消耗；營(yíng)養(yǎng)物比例失調(diào)；有害代謝產(chǎn)物積累；pH值等理化條件不適。活菌數(shù)保持相對(duì)穩(wěn)定，總菌數(shù)達(dá)最高水平；細(xì)菌代謝物積累達(dá)到最高峰；芽孢桿菌這時(shí)開始形成芽孢；這是發(fā)酵生產(chǎn)收獲時(shí)期。穩(wěn)定期的特點(diǎn)衰亡期(declinephase/deathphase)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗殆盡，微生物開始利用自身貯存物質(zhì)進(jìn)行內(nèi)源呼吸；細(xì)菌死亡數(shù)大于增殖數(shù)，活菌數(shù)明顯減少，群體衰落；細(xì)胞出現(xiàn)多形態(tài)、大小不等的畸形，變成衰退型；細(xì)胞死亡,出現(xiàn)自溶現(xiàn)象。

是在微生物的整個(gè)培養(yǎng)期間，通過一定的方式使微生物能以恒定的比生長(zhǎng)速率生長(zhǎng)并能持續(xù)生長(zhǎng)下去的一種培養(yǎng)方法。三、連續(xù)培養(yǎng)(continouscultureofmicroorganisms)優(yōu)點(diǎn)：縮短發(fā)酵周期；便于自動(dòng)控制；產(chǎn)物質(zhì)量均一缺點(diǎn)：菌種易退化；易染雜菌1、恒濁連續(xù)培養(yǎng)：通過不斷調(diào)節(jié)流速使培養(yǎng)液中的細(xì)菌的濃度恒定,以濁度為控制指標(biāo)——開用光電控制系統(tǒng)控制培養(yǎng)液流量來實(shí)現(xiàn)。2、恒化連續(xù)培養(yǎng)：維持進(jìn)水中的營(yíng)養(yǎng)成分恒定（其中對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)有限制作用的成分要保持低濃度水平），以恒定流速進(jìn)水，以相同流速流出代謝產(chǎn)物，使細(xì)菌處于最高生長(zhǎng)速率。四、細(xì)菌生長(zhǎng)曲線在污廢水微生物處理中的應(yīng)用廢水活性污泥處理系統(tǒng)中的活性污泥微生物與細(xì)菌的生長(zhǎng)規(guī)律極為相似，因此，細(xì)菌生長(zhǎng)曲線被廣泛用于活性污泥法系統(tǒng)控制中。

在廢水生物處理設(shè)計(jì)時(shí)，按廢水的水質(zhì)情況（主要是有機(jī)物濃度），可利用不同生長(zhǎng)階段的微生物處理廢水。

常規(guī)活性污泥法利用生長(zhǎng)下降階段的微生物，包括減速期、靜止期的微生物；原因：對(duì)數(shù)期微生物生長(zhǎng)快，消耗的營(yíng)養(yǎng)物多，出水殘留的有機(jī)物也高，難以滿足排放要求；且代謝旺盛期微生物難以形成菌膠團(tuán)，沉淀性差。而靜止期微生物絮凝沉淀性能好，泥水分離效果好。細(xì)菌生長(zhǎng)不同階段在污水處理中的應(yīng)用高負(fù)荷活性污泥法利用生長(zhǎng)上升階段（對(duì)數(shù)期）和生長(zhǎng)下降階段（減速期）的微生物如AB法的應(yīng)用，A級(jí)采用對(duì)數(shù)期提高降解速率，B級(jí)采用減速期保證處理水效果。用延時(shí)曝氣法處理低濃度的有機(jī)廢水時(shí)，利用衰亡期的微生物。

對(duì)低濃度、難降解的有機(jī)廢水處理，采用衰亡期滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的低要求，延長(zhǎng)生物反應(yīng)時(shí)間達(dá)到較好的處理效果。直接測(cè)定法計(jì)數(shù)法：直接計(jì)數(shù)法和間接計(jì)數(shù)法稱重量法；菌體內(nèi)重要組成測(cè)定法：含N量法：N×6.25=PrDNA/RNA法葉綠素法第三節(jié)微生物生長(zhǎng)量的測(cè)定方法間接測(cè)定法—生理指標(biāo)法

直接計(jì)數(shù)

這類方法是利用特定的細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積樣品中微生物的數(shù)量。此法的缺點(diǎn)不能區(qū)分死菌與活菌。

每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)

＝每小格平均細(xì)菌數(shù)×（涂布面積÷視野面積）×l00×稀釋倍數(shù)（以樣品為0.01ml為例）計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)室各種型號(hào)的全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀

間接計(jì)數(shù)

此法又稱活菌計(jì)數(shù)法，其原理是每個(gè)活細(xì)菌在適宜的培養(yǎng)基和良好的生長(zhǎng)條件下可以通過生長(zhǎng)形成菌落。

每毫升原菌液活菌數(shù)＝

同一稀釋度三個(gè)以上重復(fù)平皿菌落平均數(shù)×稀釋倍數(shù)×5（以樣品為0.2ml為例）此法的原理是根據(jù)每個(gè)細(xì)胞有一定的重量而設(shè)計(jì)的。它可以用于單細(xì)胞、多細(xì)胞以及絲狀體微生物生長(zhǎng)的測(cè)定。微生物干重

DNA含量蛋白質(zhì)總量

重量法干重法:測(cè)定單位體積培養(yǎng)物中細(xì)胞的干重，用來表示菌體的生長(zhǎng)量。方法：取定容培養(yǎng)物，用離心或過濾將菌體分離洗凈、烘干、稱重，可求得單位體積菌液中的細(xì)胞干重。DNA含量測(cè)定法核酸DNA是微生物的重要遺傳物質(zhì)，每個(gè)細(xì)菌的DNA含量相當(dāng)恒定，平均為8.4×10-5ng。利用DNA與DABA-2HCl（3,5二氨基苯甲酸-鹽酸）能顯示特殊熒光反應(yīng)的原理，測(cè)定一定體積培養(yǎng)物菌液的熒光反應(yīng)強(qiáng)度，可求得菌液的DNA含量，據(jù)此計(jì)算出細(xì)菌的數(shù)量。蛋白質(zhì)總量（含氮量測(cè)定法）原理：在蛋白質(zhì)中，氮的含量比較穩(wěn)定。因此，測(cè)定菌體含氮量可反應(yīng)菌體的量。測(cè)定方法為：分離菌體，用凱氏微量定氮法測(cè)定菌體中的總氮量。例如：細(xì)菌蛋白質(zhì)總量＝細(xì)菌的含氮量÷（6.5%～13%）細(xì)胞總量＝蛋白質(zhì)總量÷(50%～80%(或65%))≈蛋白質(zhì)總量×1.54間接測(cè)定法—生理指標(biāo)法

生理指標(biāo)法：微生物的新陳代謝作用會(huì)消耗或產(chǎn)生一定量的物質(zhì)，用這些物質(zhì)來表示微生物生長(zhǎng)量的方法。生理指標(biāo)包括微生物的呼吸強(qiáng)度、耗氧量、酶活性、生物熱等。這是根據(jù)微生物在生長(zhǎng)過程中伴隨出現(xiàn)的這些指標(biāo)，樣品中微生物數(shù)量多或生長(zhǎng)旺盛，這些指標(biāo)愈明顯，因此可以借助特定的儀器如瓦氏呼吸儀、微量量熱計(jì)等設(shè)備來測(cè)定相應(yīng)的指標(biāo)。本章授課內(nèi)容到此結(jié)束第二節(jié)微生物的生長(zhǎng)因子一、溫度二、pH三、氧化還原電位四、溶解氧五、太陽輻射六、水的活度與滲透壓七、表面張力一、溫度細(xì)菌最低溫度oC最適溫度oC最高溫度oC嗜冷菌-５～０５～1020～30嗜中溫菌5～1025～4045～50嗜熱菌3050～6070～80嗜超熱菌55oC以上70～105110～113根據(jù)一般微生物對(duì)溫度的最適生長(zhǎng)需求，將微生物分為四大類：嗜冷微生物（低溫微生物）的嗜冷機(jī)理酶系在低溫下仍能起催化作用；細(xì)胞膜含較多的不飽合脂肪酸在低溫下仍具有通透性。生長(zhǎng)速度溫度停止生長(zhǎng)致死最低最高最適低溫對(duì)普通微生物的影響：代謝降低；生長(zhǎng)繁殖停滯；仍然存活；常在低溫下對(duì)菌種和食品保藏嗜熱微生物的嗜熱機(jī)制：細(xì)胞內(nèi)的酶具強(qiáng)抗熱性；產(chǎn)生的多胺，熱亞胺和高溫精胺物質(zhì)對(duì)蛋白質(zhì)等組織結(jié)構(gòu)具有保護(hù)作用；核酸也具有熱穩(wěn)定性的保護(hù)結(jié)構(gòu)；細(xì)胞膜含有較多的飽和脂肪酸和直鏈脂肪酸，使膜具有穩(wěn)定性。二、pH微生物最低pH最適pH最高pH細(xì)菌3～56.5～7.58～10酵母菌2～34.5～5.57～8霉菌1～34.5～5.57～8微生物的生命活動(dòng)、物質(zhì)代謝與pH密切相關(guān)。不同的微生物要求不同pH，見下表：pH對(duì)微生物的影響影響細(xì)胞膜透性與穩(wěn)定性；影響物質(zhì)溶解度；影響細(xì)胞表面電荷分布；因此影響微生物生長(zhǎng)、繁殖、發(fā)育；各類微生物能夠生長(zhǎng)的pH值較寬，但細(xì)胞內(nèi)部pH值卻接近中性；微生物的活動(dòng)也能改變環(huán)境中的pH值。根據(jù)微生物生長(zhǎng)的最適pH，可以將微生物分為：嗜酸性微生物嗜堿性微生物耐酸及耐堿微生物三、氧化還原電位（Eh）

在自然環(huán)境中，氧化還原電位的上限是＋820mV,此時(shí)環(huán)境中存在高濃度氧（O2）,無利用O2的系統(tǒng)存在；下限是-400mV，是充滿氫（H2）的環(huán)境。不同的微生物對(duì)氧化還原電位的要求不同：一般好氧微生物要求Eh為+300mV~+400mV；兼性厭氧微生物在Eh為+100mV以上時(shí)進(jìn)行好氧呼吸，在為+100mV以下時(shí)進(jìn)行無氧呼吸；專性厭氧微生物在Eh為-200mV~-250mV。

氧化還原電位的影響因素：1．氧分壓：氧分壓高，氧化還原電位高；氧分壓低，氧化還原電位低。2．pH：pH低時(shí)，氧化還原電位低；pH高時(shí)，氧化還原電位高。3．還原劑：當(dāng)環(huán)境中有還原劑（如維生素、硫而乙醇鈉、谷胱甘肽、硫化氫及金屬鐵）時(shí)，可使氧化還原電位維持在低水平。四、溶解氧根據(jù)氧與微生物生長(zhǎng)的關(guān)系，可將微生物分為：微生物類型適合生長(zhǎng)的氧分壓好氧微生物專性好氧微生物0.2×101KPa微量好氧微生物(0.003—0.2)×101KPa兼性厭氧微生物有氧或無氧厭氧微生物專性厭氧微生物小于0.005×101KPa耐氧厭氧微生物0.02×101KPa以下O2+e-O2-H2O2+O2-O2+OH-+OH·2O2-+2H+H2O2+O22H2O22H2O+O2氧對(duì)一切生物都會(huì)使其產(chǎn)生有毒害作用的代謝產(chǎn)物，如超氧基化合物O2-與H2O2，這兩種代謝產(chǎn)物互相作用還會(huì)產(chǎn)生毒性很強(qiáng)的自由基，自由基是一種強(qiáng)氧化基，它與生物大分子互相作用，從而對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損傷或突變作用，直至死亡。氧之所以對(duì)專性厭氧微生物以外的其它四種類型微生物不產(chǎn)生致死作用，是因?yàn)樗鼈兙哂谐趸锲缁福⊿OD）可催化O2-生成H2O2，然后在H2O2酶作用下分解生成H2O和O2。超氧化物歧化酶（SOD）功能：使好氧菌免受超氧化物陰離子自由基的毒害過氧化氫酶(Catalase)五、太陽輻射太陽輻射由三部分組成：短波紫外輻射、可見光（380nm~760nm）和長(zhǎng)波紅外輻射。太陽輻射中具有正面生物學(xué)效應(yīng)的輻射是波長(zhǎng)短于1000nm的紅外輻射和可見光輻射，短波紫外輻射一般具有負(fù)面生物學(xué)效應(yīng)。第三節(jié)其他不利環(huán)境因子對(duì)微生物的影響一、紫外輻射和電離輻射對(duì)微生物的影響二、超聲波對(duì)微生物的影響三、重金屬對(duì)微生物的影響四、極端溫度對(duì)微生物的影響五、極端pH對(duì)微生物的影響六、干燥對(duì)微生物的影響七、若干有機(jī)物對(duì)微生物的影響八、抗生素對(duì)微生物的影響一、紫外輻射和電離輻射對(duì)微生物的影響紫外輻射的波長(zhǎng)為200~390nm，以波長(zhǎng)260nm的紫外輻射殺菌力最強(qiáng)。紫外輻射對(duì)微生物的致死作用是由于微生物細(xì)胞中的核酸、嘌呤、嘧啶及蛋白質(zhì)對(duì)紫外輻射有特別強(qiáng)的吸收能力。紫外輻射能引起DNA鏈上兩個(gè)鄰近的胸腺嘧啶分子形成胸腺嘧啶二聚體（T=T），致使DNA不能復(fù)制，導(dǎo)致微生物死亡。光復(fù)活與暗復(fù)活：光復(fù)活：把經(jīng)紫外輻射照射的微生物立刻暴露于藍(lán)色可見光下部分受損細(xì)胞可恢復(fù)活力。光復(fù)活現(xiàn)象最早由AKelner（1949年）在Streptomycesgriseus（灰色鏈霉菌）中發(fā)現(xiàn)的。后來在許多微生物中都得到證實(shí)。暗復(fù)活：微生物細(xì)胞在黑暗條件下進(jìn)行的DNA鏈修復(fù)，此修復(fù)作用與光全然無關(guān)。由于微生物的DNA具有修復(fù)作用，所以只有當(dāng)某一劑量的紫外輻射對(duì)DNA的損傷力大大超過修復(fù)酶對(duì)DNA損傷的修復(fù)力時(shí)，才導(dǎo)致微生物的死亡。紫外線在科研、生產(chǎn)、醫(yī)學(xué)和日常生活中的應(yīng)用一、空氣消毒；二、表面消毒；三、誘變育種。電離輻射對(duì)微生物的影響

X—射線和γ—射線是波長(zhǎng)極短的高能電磁波，具有很強(qiáng)的穿透力，能使被照射物體產(chǎn)生電離作用。

X—射線和γ—射線對(duì)微生物的影響表現(xiàn)為：低劑量照射有促進(jìn)微生物生長(zhǎng)的作用，或引起微生物發(fā)生變異；高劑量照射對(duì)微生物有致死作用。利用X—射線和γ—射線誘導(dǎo)微生物變異，篩選優(yōu)良菌種。二、超聲波對(duì)微生物的影響超聲波是頻率超過20000Hz、不能引起人耳聽覺的聲波。超聲波對(duì)微生物具有強(qiáng)烈的破壞作用。三、重金屬對(duì)微生物的影響重金屬Hg、Ag、Cu、Pb及其化合物能與酶的—SH基結(jié)合，使酶失去活性；或與菌體蛋白結(jié)合，使之變性或沉淀。因而可有效的殺菌和防腐。高溫滅菌多數(shù)細(xì)菌，酵母菌和霉菌的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和病毒在50-65℃10min可以致死；一般噬菌體65－80℃致死；放線菌霉菌的孢子比營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞抗熱性強(qiáng)，76－80℃10min可以殺死；細(xì)菌芽孢，在100℃下５－20min才能致死；嗜熱脂肪芽孢桿菌可在80oＣ條件下生活，在120℃，12min才能；同種微生物老齡菌比幼菌耐熱。四、極端溫度對(duì)微生物的影響超高溫（微生物最高生長(zhǎng)溫度以上的溫度）可使微生物細(xì)胞的蛋白質(zhì)凝固變性、破壞細(xì)胞質(zhì)膜的結(jié)構(gòu)，對(duì)微生物有致死作用。利用超高溫對(duì)微生物有致死作用，可采取高溫殺菌。其殺菌效果與微生物的種類、數(shù)量、生理狀態(tài)、芽孢有無、菌體含水量及pH值有關(guān)。五、極端pH對(duì)微生物的影響

過高或過低的pH對(duì)微生物生長(zhǎng)繁殖都不利，表現(xiàn)在：（1）過低的pH會(huì)引起微生物表面電荷的改變；（2）極端的pH可影響培養(yǎng)基中有機(jī)化合物的離子化作用，間接影響微生物。（3）極端的pH使微生物細(xì)胞內(nèi)的酶活性降低，影響細(xì)胞內(nèi)正常生化反應(yīng)的進(jìn)行。（4）極端的pH降低微生物對(duì)高溫的抵抗力。六、干燥對(duì)微生物的影響

干燥使微生物細(xì)胞的代謝處于停滯狀態(tài)。在干燥的條件下，細(xì)菌的芽孢、藻類和真菌的孢子及原生動(dòng)物的胞可一直呈休眠狀態(tài)長(zhǎng)期存活?？衫酶稍飦肀２鼐N。七、若干有機(jī)物對(duì)微生物的影響一、醇以體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇?xì)⒕ψ顝?qiáng)。二、甲醛質(zhì)量濃度為370－400g/L的甲醛水溶液（即福爾馬林）是常用的殺菌劑。三、表面活性劑包括酚、新潔爾樂（季胺鹽）、合成洗滌劑、染料等。八、抗生素對(duì)微生物的影響抗生素是微生物在代謝過程中產(chǎn)生的能殺死或抑制其它微生物生長(zhǎng)的化學(xué)物質(zhì)。如青霉素、氯霉素、金霉素、土霉素、四環(huán)素等?？股赜袕V譜抗生素和狹譜抗生素之分。抗生素對(duì)微生物的影響表現(xiàn)在：（1）抑制微生物細(xì)胞壁的合成；（2）破壞微生物的細(xì)胞質(zhì)膜；（3）抑制蛋白質(zhì)的合成；（4）干擾核酸的合成。英國(guó)科學(xué)家A.Fleming爵士發(fā)現(xiàn)青霉素第四節(jié)微生物與微生物之間的關(guān)系一、競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系二、原始合作關(guān)系三、共生關(guān)系四、偏害關(guān)系五、捕食關(guān)系六、寄生關(guān)系一、競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系物種1物種2時(shí)間數(shù)量競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系是指不同的微生物種群在同一環(huán)境中，對(duì)食物等營(yíng)養(yǎng)、溶解氧、空間和其它共同要求的物質(zhì)互相競(jìng)爭(zhēng)，通過產(chǎn)生某些代謝產(chǎn)物或改變環(huán)境條件，能抑制其它微生物的生長(zhǎng)繁殖，或毒害殺死其它微生物，互相受到不利的影響。二、原始合作關(guān)系原始合作關(guān)系（或互生關(guān)系）是指兩種可以單獨(dú)生活的生物共存于同一環(huán)境中，相互提供營(yíng)養(yǎng)及其它生活條件，雙方互為有利，當(dāng)兩者分開時(shí)各自可單獨(dú)生存?；ドP(guān)系在自然界中普遍存在。三、共生關(guān)系物種1物種2時(shí)間數(shù)量共生關(guān)系是指兩種不能單獨(dú)生活的微生物共同生活于同一環(huán)境中，各自執(zhí)行優(yōu)勢(shì)的勝利功能，在營(yíng)養(yǎng)上互為有利，組成共生體，生理上相互分工，組織上形成了新的結(jié)構(gòu)，彼此分離各自就不能很好地生活。如地衣是藻類與真菌形成的共生體。地衣組成：真菌（子囊菌，擔(dān)子菌）單細(xì)胞藻類（綠藻，藍(lán)藻）共生組成一種植物體；結(jié)構(gòu)：有些種地衣真菌無規(guī)律地纏繞藻類細(xì)胞，另一些種地衣真菌與藻類形成一定層排列。當(dāng)?shù)匾路敝沉私馇闀r(shí)，表面生出珠狀粉芽。其中含有少量藻細(xì)胞和真菌絲，粉芽脫離母體。生理：地衣中的真菌和藻類已形成特殊形態(tài)的整體，在生理上相互依存，真菌營(yíng)異養(yǎng)生活，藻類制造養(yǎng)料，真菌提供水分、無機(jī)鹽供藻類光合作用。四、偏害關(guān)系偏害關(guān)系（或拮抗關(guān)系）是指共存于同一環(huán)境中兩種微生物，甲方對(duì)乙方有害，乙方對(duì)甲方無任何影響。偏害關(guān)系可分為非特異性偏害和特異性偏害。五、捕食關(guān)系捕食關(guān)系即一種微生物以另一種微生物為食，如原生動(dòng)物以水體和土壤中的細(xì)菌，放線菌，真菌的孢子及單細(xì)胞藻類為食。時(shí)間數(shù)量物種1物種2六、寄生關(guān)系時(shí)間數(shù)量寄主寄生菌寄生關(guān)系是指一種生物需要在另一種生物體內(nèi)生活，從中攝取營(yíng)養(yǎng)才能生長(zhǎng)繁殖。前者為寄生菌，后者為寄主。寄生的結(jié)果一般引起寄主損傷或死亡。第五節(jié)菌種的退化、復(fù)壯與保藏一、菌種的退化和復(fù)壯二、菌種的保藏一、菌種的退化和復(fù)壯微生物由于負(fù)變（變異）而導(dǎo)致菌種退化。可采取相應(yīng)的措施使退化菌株復(fù)壯。

純種分離通過寄主復(fù)壯聯(lián)合復(fù)壯二、菌種的保藏菌種保藏的方法有：一、傳代培養(yǎng)保藏二、冷凍保藏三、干燥保藏法四、沙土管