2023屆安徽省滁州市高三最后一卷生物試卷含解析

2023學(xué)年高考生物模擬試卷請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認(rèn)真閱讀答題紙上的《注意事項》，按規(guī)定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．蜜蜂中的蜂王和工蜂都由受精卵發(fā)育形成，屬于卵式生殖；雄蜂由卵細(xì)胞發(fā)育形成，屬于孤雌生殖。一個基因型為AaBb（A、a基因位于1號染色體上，B、b基因位于2號染色體上）的蜂王與基因型為ab的雄蜂交配，生出了一只基因型為AA而缺少B、b基因的雄蜂。僅考慮染色體數(shù)目變異，下列可產(chǎn)生該基因型為AA的雄蜂的組合是（）①1號染色體在減數(shù)第一次分裂時未分離②1號染色體在減數(shù)第二次分裂時未分離③2號染色體在減數(shù)第一次分裂時未分離④2號染色體在減數(shù)第二次分裂時正常分離A．①③ B．①④ C．②④ D．②③2．科研人員對一個被污染湖泊中某種魚類的出生率（Ⅰ）和死亡率（Ⅱ）進(jìn)行了研究，得到如下曲線。由圖可知，該種魚的數(shù)量達(dá)到最大的時刻是（）A．a(chǎn) B．b C．c D．d3．如圖①②表示細(xì)胞厭氧呼吸的兩個階段，甲乙丙丁表示代謝產(chǎn)物，下列分析正確的是（）A．乳酸發(fā)酵時，②階段可表示丙酮酸被乳酸脫氫酶還原為乳酸B．乙醇發(fā)酵時，甲、丙、丁可能分別代表乙醛、CO2、乙醇C．①階段能產(chǎn)生[H]，②階段不能產(chǎn)生ATPD．①階段為糖酵解，②階段為檸檬酸循環(huán)4．下列關(guān)于生物學(xué)實驗的敘述，正確的是（）A．龍膽紫溶液染色后，洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞的質(zhì)壁分離現(xiàn)象更明顯B．醋酸洋紅染液配置時需使用乙酸，溶液呈酸性，所以為酸性染料C．蘇丹Ⅳ為脂溶性物質(zhì)，可直接進(jìn)入細(xì)胞，將花生子葉脂肪染成紅色D．經(jīng)鹽酸水解處理的洋蔥表皮細(xì)胞，其線粒體易被健那綠染色5．某研究小組為了研究一定濃度的IAA和GA1對黃瓜幼苗生長的影響，進(jìn)行了相關(guān)實驗。實驗設(shè)置（其中CK處理的為對照組）和結(jié)果如下表所示。下列敘述錯誤的是（）不同處理對黃瓜幼苗生長的影響處理胚軸長（cm）根體積（cm1）根干重（g）根鮮重（g）CK1．72672．22672．22112．2486GA11．42222．27112．22512．2871IAA1．54672．25512．22472．2855GA1+IAA1．95112．24112．22442．2691A．實驗處理的對象是種子，處理前可將其浸泡一段時間B．根據(jù)一般實驗設(shè)計的要求，表中對照組應(yīng)該加入等量的配制其他三組溶液所用的溶劑C．從根體積、根干重和鮮重這些指標(biāo)可以看出，GA1比IAA更能促進(jìn)根的生長D．GA1和IAA在促進(jìn)黃瓜幼苗根系生長方面表現(xiàn)為協(xié)同作用6．細(xì)胞吸收某些離子，最終使其在細(xì)胞內(nèi)的濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于細(xì)胞外濃度的現(xiàn)象稱為積累，積累率以某離子在細(xì)胞內(nèi)的濃度（ci）與其胞外濃度（co）的比值即[ci/co]來表示。下表為玉米根細(xì)胞對部分離子的吸收情況，相關(guān)分析錯誤的是（）離子co/mol·L-1ci/mol·L-1ci/coK+0.141601142.86Na+0.510.61.18NO3-0.1338292.31SO42-0.611422.95A．根細(xì)胞積累的上述元素均為大量元素B．根細(xì)胞對礦質(zhì)離子的吸收具有選擇性C．根細(xì)胞吸收K+和NO3-的方式為主動運(yùn)輸D．根細(xì)胞吸收離子的量與細(xì)胞外液中離子的量不成比例二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）在玻璃溫室中，研究小組分別用三種單色光對某種綠葉蔬菜進(jìn)行補(bǔ)充光源（補(bǔ)光）試驗，結(jié)果如圖所示。補(bǔ)光的光強(qiáng)度為150μmol·m-2·s一1，補(bǔ)光時間為上午7：00—10：00，溫度適宜，請回答下列問題：(1)某同學(xué)通過對實驗結(jié)果分析得出只要對溫室中植物進(jìn)行補(bǔ)光就可以提高光合作用的結(jié)論，該結(jié)論正確嗎？_______，理由是___________________________________________。(2)光飽和點(diǎn)是光合速率達(dá)到最大值時所需的最低光照強(qiáng)度。若680nm補(bǔ)光后植株的光合色素增加，則光飽和點(diǎn)將_______（填“上升”“不變”或“下降”），原因是___________________。(3)若450nm補(bǔ)光組在9：00時突然停止補(bǔ)光瞬間，C3化合物的含量會_______（填“減少”“不變”或“增加”）。680nm補(bǔ)光組在10：00時若要增加光合速率可以采取的措施是__________________。8．（10分）下圖為基因工程操作步驟示意圖。請回答下列問題：（1）從基因文庫中提取的目的基因通過_____________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。與細(xì)胞內(nèi)同類酶相比，該技術(shù)所利用的DNA聚合酶所具有的特點(diǎn)是____________。（2）在過程①中，需______________酶將已切開的載體DNA與目的基因結(jié)合成基因表達(dá)載體。載體DNA上必須要有標(biāo)記基因，標(biāo)記基因的作用是_______________________。過程②中若選用的受體細(xì)胞為大腸桿菌，一般需用Ca2+進(jìn)行處理，其目的是_______________________。（3）若將病毒外殼蛋白基因?qū)虢湍妇虿溉閯游锛?xì)胞中，使之表達(dá)出病毒外殼蛋白（抗原），經(jīng)純化后而制得的疫苗可用于生產(chǎn)基因工程疫苗，接種基因工程疫苗比接種滅活減毒的病毒疫苗更安全，從疫苗的結(jié)構(gòu)組成來看，其原因是_______________________________________________。9．（10分）熒光原位雜交可用熒光標(biāo)記的特異DNA片段為探針，與染色體上對應(yīng)的DNA片段結(jié)合，從而將特定的基因在染色體上定位。請回答下列問題:(1)DNA熒光探針的制備過程如圖1所示，DNA酶Ⅰ隨機(jī)切開了核苷酸之間的_________鍵從而產(chǎn)生切口，隨后在DNA聚合酶Ⅰ作用下，以熒光標(biāo)記的_________________為原料，合成熒光標(biāo)記的DNA探針。(2)圖2表示探針與待測基因結(jié)合的原理。先將探針與染色體共同煮沸，使DNA雙鏈中___鍵斷裂，形成單鏈。隨后在降溫復(fù)性過程中，探針的堿基按照____________原則，與染色體上的特定基因序列形成較穩(wěn)定的雜交分子。圖中兩條姐妹染色單體中最多可有_____條熒光標(biāo)記的DNA片段。(3)A、B、C分別代表不同來源的一個染色體組，已知AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標(biāo)記。若植物甲(AABB)與植物乙(AACC)雜交，則其F1有絲分裂中期的細(xì)胞中可觀察到________個熒光點(diǎn)；在減數(shù)第一次分裂形成的兩個子細(xì)胞中分別可觀察到______個熒光點(diǎn)。10．（10分）癌細(xì)胞表面蛋白“PDL-1”與T細(xì)胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細(xì)胞活性并啟動其凋亡，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進(jìn)行克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點(diǎn)見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細(xì)胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設(shè)計含有不同的限制酶切點(diǎn)的α和β序列為引物，通過____________________技術(shù)擴(kuò)增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)粒”載體進(jìn)行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建表達(dá)載體。該表達(dá)載體的組成，除了目的基因、標(biāo)記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴(kuò)增重組DNA。（4）將擴(kuò)增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達(dá)外源基因的原代293T細(xì)胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，檢測細(xì)胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，則可裂解293T細(xì)胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，其目的是_________________________。11．（15分）轉(zhuǎn)染是指利用一定手段使外源基因進(jìn)入細(xì)胞中并穩(wěn)定表達(dá)的過程。腺病毒載體常用于外源基因的轉(zhuǎn)染，這在基因治療、疫苗研發(fā)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的可視化監(jiān)控方面有著廣闊的應(yīng)用前景?；卮鹣铝袉栴}。（l）腺病毒營____活，用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上具有____識別和結(jié)合的部位，是外源基因在受體細(xì)胞中啟動表達(dá)的關(guān)鍵。（2）構(gòu)建腺病毒載體時，先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割，可獲得相同的____，再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的___。（3）通過腺病毒載體將藍(lán)色熒光基因轉(zhuǎn)染山羊耳緣成纖維細(xì)胞，利用藍(lán)色熒光直觀監(jiān)控細(xì)胞的體外培養(yǎng)過程。首先將山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或_______處理得到單個成纖維細(xì)胞，培養(yǎng)至貼滿瓶壁時，細(xì)胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為________。這時，重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行_______培養(yǎng)。培養(yǎng)時使用的合成培養(yǎng)基，通常需加入___等一些天然成分，以滿足細(xì)胞對營養(yǎng)物質(zhì)的全面需求。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

雄蜂由卵細(xì)胞發(fā)育形成，故基因型為AA而缺少B、b基因的雄蜂由基因型為AA的卵細(xì)胞發(fā)育而成?！驹斀狻繐?jù)上分析可知，基因型為AA的雄蜂是由基因型為AA的卵細(xì)胞發(fā)育而成。母本的基因型為AaBb，卵細(xì)胞中出現(xiàn)兩個A基因的原因：1號染色體的兩條姐妹染色單體在減數(shù)第二次分裂時未分離，兩個A基因進(jìn)入卵細(xì)胞。缺少B、b基因的可能原因：一是2號染色體在減數(shù)第一次分裂時未分離，形成了不含2號染色體的次級卵母細(xì)胞，最終產(chǎn)生的卵細(xì)胞中不含B、b基因；二是減數(shù)第一次分裂正常，減數(shù)第二次分裂時兩個b基因或B基因進(jìn)入極體，產(chǎn)生了不含2號染色體的卵細(xì)胞。綜上所述，②③正確。故選D。【點(diǎn)睛】本題主要考查減數(shù)分裂，考查學(xué)生的理解能力和獲取信息的能力。2、C【解析】

由圖可知，湖泊被污染后，該種魚類的出生率下降，死亡率上升；種群的增長率＝出生率?死亡率。【詳解】由于種群的增長率＝出生率?死亡率，增長率＞0時，種群數(shù)量一直在增長，當(dāng)增長率＝0時（c點(diǎn)），種群數(shù)量達(dá)到最大，增長率＜0時，種群數(shù)量減少，C正確。故選C?！军c(diǎn)睛】本題主要考查了學(xué)生對知識的分析和理解能力。種群密度是種群最基本的數(shù)量特征；出生率和死亡率對種群數(shù)量起著決定性作用。3、C【解析】

根據(jù)細(xì)胞呼吸是否有氧氣參與，我們把細(xì)胞呼吸分為需氧呼吸和厭氧呼吸，需氧呼吸是細(xì)胞呼吸主要方式，包括糖酵解、檸檬酸循環(huán)、電子傳遞鏈。厭氧呼吸是在無氧的條件下發(fā)生的，在細(xì)胞溶膠中進(jìn)行。第一階段與需氧呼吸一樣，為糖酵解（C6H1206+2NAD++2ADP+2Pi→2丙酮酸+2NADH+2H++2ATP）。第二階段中，丙酮酸在不同的酶的催化作用下，形成不同的產(chǎn)物。最常見的產(chǎn)物是乙醇或乳酸。乙醇發(fā)酵中乙醇的來源和乳酸發(fā)酵一樣，來自丙酮酸。乙醇發(fā)酵的第二階段的反應(yīng)式為2丙酮酸+2NADH+2H+→2CH3CH2OH+2CO2?！驹斀狻緼、乳酸發(fā)酵時，②階段可表示丙酮酸被還原氫還原為乳酸，A錯誤；B、①②表示細(xì)胞厭氧呼吸的兩個階段，①表示厭氧呼吸第一階段，②表示厭氧呼吸第二階段，因此甲、乙、丙可能分別代表丙酮酸、NADH+H+（[H]）、ATP，甲、乙、丁可能分別代表丙酮酸、NADH+H+（[H]）、CH3CH2OH及CO2，因此甲、丙、丁可能分別代表丙酮酸、ATP、CH3CH2OH及CO2，B錯誤；C、①階段為葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸的過程，能產(chǎn)生[H]，②階段為2丙酮酸+2NADH+2H+→2CH3CH2OH+2CO2，不能產(chǎn)生ATP，C正確；D、檸檬酸循環(huán)為需氧呼吸第二階段，乙醇發(fā)酵沒有檸檬酸循環(huán)，②階段為丙酮酸的還原，D錯誤。故選C。4、C【解析】

染色質(zhì)（體）容易被堿性染料染成深色。在“觀察植物細(xì)胞有絲分裂”（即“觀察根尖分生區(qū)組織細(xì)胞”）實驗時，需要使用龍膽紫溶液或醋酸洋紅溶液等堿性染色劑。通常情況下，這些染色劑是以龍膽紫或洋紅溶解于醋酸溶液中配制而來的，配制后的染液其pH值約小于7，呈酸性。然而，實驗過程中卻把它們稱之為堿性料，之所以說是堿性染料,其實說的是這類染料的助色基團(tuán)，在染料的命名上是根據(jù)助色基團(tuán)的酸堿性來命名的。由此可見，酸性（堿性）染色劑的界定，并非由染料溶液的pH值決定的,而是根據(jù)染料物質(zhì)中助色基團(tuán)電離后所帶的電荷來決定。一般來說，助色基團(tuán)帶正電荷的染色劑為堿性染色劑；反之則為酸性染色劑。【詳解】A、龍膽紫溶液染色后，洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞已死亡，不能發(fā)生質(zhì)壁分離，A錯誤；B、染料的酸堿性并不是由溶液的酸堿性決定，醋酸洋紅為堿性染料，B錯誤；C、蘇丹Ⅳ為脂溶性物質(zhì)，與磷脂相似相溶，可直接進(jìn)入細(xì)胞，將花生子葉脂肪染成紅色，C正確；D、線粒體易被健那綠染色，無需鹽酸處理，D錯誤。故選C。5、D【解析】

對照實驗：在探究某種條件對研究對象的影響時，對研究對象進(jìn)行的除了該條件不同以外，其他條件都相同的實驗。根據(jù)變量設(shè)置一組對照實驗，使實驗結(jié)果具有說服力；一般來說，對實驗變量進(jìn)行處理的，就是實驗組，沒有處理是的就是對照組?！驹斀狻緼、由于種子本身會產(chǎn)生激素，為了排除內(nèi)源激素對實驗結(jié)果的影響，因此處理前可將其浸泡一段時間，A正確；B、CK處理的為對照組，根據(jù)實驗設(shè)計的無關(guān)變量一致原則和單一變量原則，對照組應(yīng)該加入等量的配制其他三組溶液所用的溶劑，B正確；C、與CK相比，根體積、根干重和鮮重方面用GA1比IAA處理促進(jìn)效果更明顯，故僅從上述指標(biāo)觀測GA1比IAA更能促進(jìn)根的生長，C正確；D、據(jù)表格數(shù)據(jù)分析，GA1和IAA同時使用時，根體積、根干重和鮮重均比兩種物質(zhì)單獨(dú)使用時有所下降，故GA1和IAA在促進(jìn)黃瓜幼苗根系生長方面表現(xiàn)無協(xié)同關(guān)系，D錯誤。故選D。【點(diǎn)睛】解答此題需要明確實驗設(shè)計的變量原則與對照關(guān)系，能結(jié)合圖表數(shù)據(jù)分析各項。6、A【解析】

細(xì)胞根據(jù)生命活動的需求從外界環(huán)境中通過主動運(yùn)輸吸收礦質(zhì)離子，按照生物體中元素的含量分為大量元素和微量元素。微量元素有Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo等，大量元素有C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg等?！驹斀狻勘砀裰锈c離子不是大量元素，A錯誤；細(xì)胞膜上載體種類決定了植物吸收的離子種類，不同細(xì)胞膜上運(yùn)輸離子的載體數(shù)量不同，因此細(xì)胞對離子的吸收具有選擇性，根據(jù)表格中積累率可說明同一植物對不同離子的吸收量不同，B正確；分析表可以看出K＋和NO3－進(jìn)入細(xì)胞是逆濃度梯度，是主動運(yùn)輸，C正確；從表中可以看出，根細(xì)胞吸收離子的量與細(xì)胞外液中離子的量不成比例，D正確。

故選A?！军c(diǎn)睛】本題考查物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的方式的知識點(diǎn)，考查學(xué)生獲取信息和分析問題的能力，題目難度適中。二、綜合題：本大題共4小題7、不正確給植株補(bǔ)充580nm光源與白光對照組相比，該植株的CO2吸收速率降低上升因為光合色素增加，植物吸收、傳遞轉(zhuǎn)換光能增多，所以可以利用更大的光照強(qiáng)度增加提高CO2濃度（開棚通風(fēng)等提高CO2濃度的措施都可以）【解析】

據(jù)圖分析：與對照組相比，給植株補(bǔ)充580nm光源時植株吸收二氧化碳的速率降低，說明此光源對該植株的生長有抑制作用，給植株補(bǔ)充450nm和680nm光源時植株吸收二氧化碳的速率升高，說明此光源對該植株的生長有促進(jìn)作用。本題考查光合作用?？疾閳D表分析能力，解答本題的關(guān)鍵是明確該實驗為補(bǔ)光實驗，上午7：00?10：00自然光照逐漸增強(qiáng)，植物利用的光為自然光和所補(bǔ)的光?！驹斀狻浚?）據(jù)圖分析可知，給植株補(bǔ)充580mm光源與白光對照組相比，該植株的二氧化碳吸收速率降低，所以對溫室中植物進(jìn)行補(bǔ)光就可以提高光合作用的結(jié)論是錯誤的。

（2）若680nm補(bǔ)光后植株的光合色素增加，則植物吸收、傳遞、轉(zhuǎn)換光能增多，所以可以利用更大的光照強(qiáng)度，所以光飽和點(diǎn)會上升。

（3）450nm補(bǔ)光組在9：00時突然停止補(bǔ)光瞬間，光反應(yīng)減弱，[H]和ATP

的生成減少，三碳化合物的還原減慢，短時間內(nèi)三碳化合物的來路不變，最終導(dǎo)致三碳化合物的含量增加。680nm補(bǔ)光組在10：00時，提高二氧化碳濃度，CO2吸收速率最大，可以提高光合速率?！军c(diǎn)睛】本題考查影響光合作用的環(huán)境因素的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識圖能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識綜合分析問題的能力。8、PCR耐高溫DNA連接鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來（或篩選出含目的基因的受體細(xì)胞）使大腸桿菌處于容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的感受態(tài)基因工程疫苗僅具有病毒外殼蛋白，不具有遺傳物質(zhì)，不會出現(xiàn)病毒增殖和感染【解析】

基因工程的基本步驟：1、目的基因的獲??；2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建；3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；4、目的基因的檢測與鑒定。【詳解】（1）通常使用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。在PCR技術(shù)中應(yīng)用的關(guān)鍵酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶，其特點(diǎn)是耐高溫。（2）DNA連接酶能將已切開的載體DNA與目的基因連接起來形成磷酸二酯鍵；標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來；由于未處理的大腸桿菌吸收周圍環(huán)境DNA分子的能力較弱，所以常用Ca2+處理大腸桿菌，使大腸桿菌處于容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的感受態(tài)。（3）基因工程疫苗不含有遺傳物質(zhì)，可以引發(fā)機(jī)體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)形成抗體和記憶細(xì)胞，但由于其不增殖和感染人體，比常規(guī)疫苗安全性更高?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的操作步驟和應(yīng)用的相關(guān)知識，旨在考查考生的理解能力。9、磷酸二酯脫氧核苷酸氫堿基互補(bǔ)配對462和4【解析】

基因探針是用放射性同位素、熒光分子等標(biāo)記的DNA分子作為探針，原理是DNA分子雜交。DNA分子是一個獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu)，是由兩條平行的脫氧核苷酸長鏈盤旋而成，外側(cè)由脫氧核糖和磷酸交替連接構(gòu)成基本骨架，內(nèi)側(cè)是堿基對（A-T；C-G）通過氫鍵連接。【詳解】（1）根據(jù)題意和圖示分析可知：DNA酶Ⅰ隨機(jī)切開了核苷酸之間的磷酸二酯鍵從而產(chǎn)生切口，形成一段一段的DNA分子片段。在DNA聚合酶Ⅰ作用下，以熒光標(biāo)記的四種脫氧核苷酸為原料，合成熒光標(biāo)記的DNA探針。（2）DNA分子是雙鏈結(jié)構(gòu)，通過氫鍵連接．將探針與染色體共同煮沸，使DNA雙鏈中氫鍵斷裂，形成單鏈，隨后在降溫復(fù)性過程中，探針的堿基按照A-T、C-G的堿基互補(bǔ)配對原則，與染色體上的特定基因序列形成較穩(wěn)定的雜交分子，圖中兩條姐妹染色單體中含有2個DNA分子共有4條鏈，所以最多可有4條熒光標(biāo)記的DNA片段。（3）由于AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標(biāo)記，若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則其F1，有絲分裂中期的細(xì)胞（AABC）中可觀察到6個熒光點(diǎn)，在減數(shù)第一次分裂形成的兩個子細(xì)胞中分別可觀察到含A和含AB的2和4個熒光點(diǎn)?！军c(diǎn)睛】對F1進(jìn)行熒光探針標(biāo)記結(jié)果的分析是本題的難點(diǎn)，正確答題的關(guān)鍵在于能根據(jù)F1染色體組成（AABC），推斷F1有絲分裂中期細(xì)胞的染色體組成、減數(shù)第一次分裂形成的兩個子細(xì)胞的染色體組成，根據(jù)其中含A和B的組數(shù)，做出正確判斷。10、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理，所以用該cDNA進(jìn)行PCR技術(shù)擴(kuò)增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進(jìn)行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建基因表達(dá)載體?；虮磉_(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，可以檢測細(xì)胞膜表面是否具有PD-1基因表達(dá)的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)，即從裂解293T細(xì)胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL